鞘内注射罗哌卡因对大鼠脊髓的神经毒性

目的 评价鞘内注射罗哌卡因对大鼠脊髓的神经毒性.方法 取鞘内置管成功的雄性SD大鼠60只,体重180～220 g,随机分为6组(n=10),分别鞘内注射0.75%布比卡因17 μl(A1组)、0.75%罗哌卡因20μl(A2组)、1%罗哌卡因15μl(A3组)、0.75%布比卡因34μl(B1组)、0.75%罗哌卡因40μl(B2组)和1%罗哌卡因30μl(B3组).注药后记录出现双后肢瘫痪时间和运动功能恢复情况.注药后6 h取腰膨大处脊髓,采用免疫组织化学法计数fos蛋白阳性细胞,测定fos蛋白表达;采用RT-PCR技术测定c-fos mRNA表达;透射电镜观察脊髓超微结构.结果 与A1组比较,A3组和B1组出现双后肢瘫痪时间缩短,B1组fos蛋白阳性细胞计数和fos蛋白表达升高(P<0.01);与A2组比较,A3组和B2组出现双后肢瘫痪时间缩短,B2组fos蛋白阳性细胞计数和fos蛋白表达升高(P<0.01);与A3组、B1组和B2组比较,B3组出现双后肢瘫痪时间缩短,双后肢运动功能恢复率降低,fos蛋白阳性细胞计数、fos蛋白表达和c-fos mRNA表达均升高(P<0.01),脊髓损伤加重.结论 鞘内注射0.75%罗哌卡因和小剂量1%罗哌卡因对大鼠无脊髓神经毒性;鞘内注射大剂量1%罗哌卡因对大鼠可产生脊髓神经毒性,但比大剂量0.75%布比卡因脊髓神经毒性小.     

鞘内注射罗哌卡因与布比卡因对大鼠的脊髓神经毒性

目的 评价鞘内注射罗哌卡因与布比卡因对大鼠的脊髓神经毒性.方法 清洁级雌性SD大鼠,体重240～330 g,取鞘内置管成功的大鼠54只,随机分为3组(n=18):NS组鞘内注射生理盐水30μl;Bu组和RO组分别鞘内注射2%布比卡因20μl和2.7%罗哌卡因20μl,随后注射10μl生理盐水冲洗导管.于鞘内注药前、注药后10、20、30、60和120 min时(T1～6)行双后肢运动阻滞评分;于鞘内注药后第4天取腰段脊髓组织,观察病理学结果并行损伤评分.结果 与NS组比较,BU组T2～5时、RO组T2～4时大鼠双后肢运动阻滞评分升高,两组脊髓组织损伤评分升高(P＜0.05),脊髓组织病理学损伤较重;与T2时比较,Bu组和RO组其余各时点双后肢运动阻滞评分降低(P＜0.05),两组T2时差异无统计学意义(P＞0.05);与BU组比较,RO组脊髓组织损伤评分升高(P＜0.05),脊髓组织病理学损伤较重.结论 鞘内注射2.7%罗哌卡因对大鼠的脊髓神经毒性强于2%布比卡因.     

鞘内注射不同浓度多塞平对大鼠的神经毒性

目的 评价鞘内注射不同浓度多塞平对大鼠的神经毒性.方法 鞘内置管成功的成年雄性Wistar大鼠24只,体重250～300 g,采用随机数字表法,将大鼠随机分为4组(n=6).D10组、D20组和D40组分别鞘内注射10、20和40 mmol/L多塞平0.2 μl/g,N组鞘内注射等容量生理盐水.于鞘内注射后6h时取大鼠腰膨大脊髓背角和脊神经后根,透射电镜下观察超微结构;采用ELISA法测定脊髓髓鞘碱性蛋白(MBP)含量.结果 N组大鼠脊髓背角、脊神经后根超微结构正常;随多塞平浓度增加,脊髓神经元染色质边集、核膜局部凹陷,胶质细胞核固缩,线粒体空泡样变性等细胞凋亡与坏死改变;脊神经后根神经纤维出现线粒体髓样变及空泡样改变.脊髓MBP含量随多塞平浓度增加而降低(P＜0.05).结论 大鼠鞘内注射多塞平可产生脊髓和外周神经毒性,且呈浓度依赖性.     

不同浓度丁卡因或罗哌卡因对大鼠臂丛神经的毒性

目的 探讨不同浓度丁卡因和罗哌卡因对大鼠臂从神经的毒性.方法 成年雄性SD大鼠48只,体重410 ～ 430 g,采用随机数字表法,将其随机分为8组(n=6):生理盐水组(NS组)、0.25％、0.50％、1.00％丁卡因组(T1-3组)、0.25％、0.50％、1.00％、2.00％罗哌卡因组(R1-4组).随机选取一侧腋鞘,NS组注射生理盐水1.0 ml,T1-3组分别注射0.25％、0.50％、1.00％丁卡因0.5 ml,R1-3组分别注射0.25％、0.50％、1.00％罗哌卡因1.0 ml,R4组注射2.00％罗哌卡因0.5 ml.另一侧腋鞘作为对照.于注药后5d时检测臂从神经复合动作电位及其传导速度(NCV),并采用光镜和透射电镜观察臂从神经的病理学结果.结果 与对照侧和NS组比较,T2-3组和R3-4组臂丛神经复合动作电位降低,NCV减慢(P＜0.05);T1组、T2组和T3组臂从神经复合动作电位位依次降低,NCV依次减慢(P＜0.05);与R1-3组比较,R4组臂丛神经复合动作电位降低,NCV减慢(P＜0.05).病理学改变:T2组、T3组和R4组神经束膜明显水肿,髓鞘板层分离、断裂、重度脱髓鞘,轴突萎缩;R3组为“脱髓鞘”现象,髓鞘板层分离、断裂、重度脱髓鞘,轴突萎缩.结论 0.50％、1.00％丁卡因和1.00％、2.00％罗哌卡因可导致大鼠臂从神经产生病理性损伤,且损伤程度与其浓度有关.     

间断鞘内注射不同浓度罗哌卡因对大鼠脊髓及神经根早期超微结构的影响

目的观察鞘内间断注射不同浓度罗哌卡因对大鼠脊髓、神经根早期超微结构的影响。方法雄性SD大鼠24只,按改良Yaksh法置入导管至脊髓腰段鞘内8 cm。随机分为4组(n=6):N 组(对照组)经导管注入0.9%氯化钠40μl,每1.5 h一次,共3次。R1、R2、R3注药方式同N组,分别注入0.5%、0.75%、1%罗哌卡因40μl。各组在注药后6 h取腰膨大处1mm3脊髓及神经根,电镜下观察其早期超微结构变化。结果N、R1、R2组脊髓、神经根早期超微结构基本正常。R3组大多数神经元细胞固缩,大多数粗面内质网扩张,线粒体及内质网结构模糊,有少数神经元细胞完全变性;部分有髓神经纤维变性,板层结构疏松;雪旺氏细胞固缩。与R3组比较,N、R1、R2组神经元胞质空泡形成或变性评分、灰质内空泡评分、髓鞘丢失断裂评分、内、外轴膜清晰度评分及神经根空泡变性评分均降低(P<0.05),而灰质内出血评分差异无统计学意义(P>0.05)。N、R1、R2组间以上评分比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论0.5、0.7%罗哌卡因间断鞘内注射对大鼠脊髓、神经根超微结构无明显影响,1%罗哌卡因则可造成脊髓损害。     

罗哌卡因致大鼠脊髓神经毒性时Bax和Bcl-2表达的变化

目的 评价罗哌卡因致大鼠脊髓神经毒性时Bax和Bcl-2表达的变化,以探讨罗哌卡因脊髓神经毒性的机制.方法 清洁级雄性SD大鼠,体重260～300 g,按改良Yaksh法鞘内置入脊髓微导管,取鞘内置管成功的大鼠54只,随机分为3组(n=18):生理盐水组(NS组)、0.5%罗哌卡因组(R1组)和1%罗哌卡因组(R2组).R1组和R2组于置管后第7天经脊髓微导管分别注射0.5%、1%罗哌卡因0.12μl/g,注药速率10 μl/15 s,每隔1.5小时给药1次,给药期24 h,共注药16次,NS组注射等容量生理盐水.于最后1次鞘内注射罗哌卡因或生理盐水后,每隔10分钟行双下肢运动阻滞评分1次,共5次(T1-5),以评价运动阻滞效果;于鞘内注射罗哌卡因或生理盐水后6、12和24 h(T6-8)时随机取6只大鼠,处死后取脊髓,光镜和电镜下观察病理学结构,并测定脊髓组织Bax和Bcl-2的表达水平.结果 与NS组比较,R1组T1,2时、R2组,T1-3时大鼠双下肢运动阻滞评分升高,R1组脊髓组织Bax、Bcl-2表达均上调(P<0.05),Bcl-2/Bax比值差异无统计学意义(P>0.05),R2组脊髓组织Bax表达上调(P<0.05),Bcl-2表达差异无统计学意义(P>0.05),Bcl-2/Bax比值降低(P<0.05).R1组超微结构改变主要为线粒体和内质网轻度肿胀,而神经细胞未发生凋亡;R2组脊髓神经细胞出现了核固缩等早期凋亡改变.结论 罗哌卡因的脊髓神经毒性可能与激活神经细胞线粒体凋亡途径有关.     

不同浓度罗哌卡因对幼兔脊髓和脊神经的毒性作用

目的 探讨不同浓度罗哌卡因对幼兔脊髓和脊神经的毒性作用.方法 日本大耳白幼兔120只,随机分为5组(n=24):0.9%生理盐水阴性对照组(S组)、2%丁卡因阳性对照组(T组)和0.25%、0.5%、0.75%罗哌卡因组(R1～3组).行L6,7穿刺后,各组于20 s内鞘内注人生理盐水、2%丁卡因或不同浓度罗哌卡因各0.2 ml.分别于鞘内给药后3、6 h、7 d时各取8只动物,行运动阻滞程度评估后处死,其中6只动物切取L5,6段脊髓,HE染色后光镜下观察脊髓病理学结果;TUNEL法检测细胞凋亡情况,计算细胞凋亡指数(AI);免疫组化法测定Bax蛋白和Bcl-2蛋白的表达水平.另2只动物切取L5,6段脊髓后角组织及神经根,透射电镜下观察脊髓和脊神经超微结构.结果 R3组可见神经胶质细胞核轻度固缩,T组脊髓出现典型凋亡细胞,其余各组脊髓和脊神经超微结构基本正常.与T组比较,R1～3>组运动阻滞显效时间延长(P<0.05);与R1组比较,R2,3组运动阻滞显效时间缩短(P<0.05). R<1～3>组与S组AI、Bax蛋白和Bcl-2蛋白表达水平差异无统计学意义(P>0.05);与T组比较,其余各组AI降低,Bax蛋白和Bcl-2蛋白表达下调(P<0.05).结论 0.25%～0.75%罗哌卡因对幼兔脊髓和脊神经无毒性作用;Bax蛋白和Bcl-2蛋白表达上调可能参与了脊髓和脊神经毒性作用的发生.     

鞘内注射右旋美托咪啶对大鼠罗哌卡因蛛网膜下腔阻滞效果的影响

目的 探讨鞘内注射右旋美托咪啶对大鼠罗哌卡因蛛网膜下腔阻滞效果的影响.方法 清洁级雄性SD大鼠,体重250～300 g,取鞘内置管成功的大鼠36只,随机分为6组(n=6),C组:鞘内注射生理盐水20 μl;D组:鞘内注射右旋美托咪啶3 μg/kg 20 μl;R组:鞘内注射0.5%罗哌卡因20 μl;DR1组:鞘内注射右旋美托咪啶1 μg/kg+0.5%罗哌卡因20 μl;DR2组鞘内注射右旋美托咪啶2 μg/kg+0.5%罗哌卡因20 μl;DR3组鞘内注射右旋美托咪啶3 μg/kg+0.5%罗哌卡因20 μl.于鞘内注药前(基础状态)和鞘内注药后5、30、60、120和240 min时计算最大抗伤害效应百分比(MPE),测定机械缩足阈值(PWT),并进行倾斜板实验.于鞘内注药后第2周,取脊髓组织进行病理学观察,计算神经元异常率,行脊髓病理学评分和损伤分级.结果 与R组比较,DR1组鞘内注药后30、60 min时PWT升高,DR3组鞘内注药后120 min时PWT降低(P<0.05),DR2组各时点差异无统计学意义(P>0.05),DR1组鞘内注药后5～240 min时、DR2组鞘内注药后5和240 min时、DR3组鞘内注药后5 min时MPE升高,DR1组鞘内注药后30、60 min时下滑角度降低(P<0.05);DR2组与DR3组各时点上述指标差异无统计学意义(P>0.05);与C组比较,DR3组神经元异常率、脊髓病理学评分和损伤分级升高(P<0.05),其余各组差异无统计学意义(P>0.05).结论 右旋美托咪啶可增强0.5%罗哌卡因蛛网膜下腔阻滞的效果,且具有封顶效应.     

鞘内注射不同剂量右美托咪啶对大鼠的抗伤害效应和脊髓神经毒性

目的 评价鞘内注射右美托咪啶对大鼠的抗伤害效应和脊髓神经毒性.方法 雄性SD大鼠60只,体重180～220 g,采用随机数字表法,将其随机分为5组(n=12):对照组(C组)不做任何处理;生理盐水组(N组)鞘内注射生理盐水10 μl;不同剂量右美托咪啶组分别鞘内注射右美托咪啶0.75μg/kg组(D1组)、1.50μg/kg组(D2组)、3.00 μg/kg组(D3组),均用生理盐水稀释至10 μl.于鞘内给药前和给药后30 min时测定机械缩足阈值(PWMT),于鞘内给药前和给药后60min时测定辐射热甩尾潜伏期(TFL),计算最大抗伤害效应(MPE)百分比.于给药后7、24和48 h时,取L4-6脊髓节段,观察病理学结果,并采用免疫组化法测定c-Fos蛋白表达水平.结果 与C组和N组比较,D1组、D2组和D3组给药后30min时PWMT升高,给药后60min时TFL和MPE百分比升高(P＜0.05);与D1组和D2组比较,D3组给药后30 min时PWMT升高,给药后60min时TFL和MPE百分比升高(P＜0.05);D1组和D2组PWMT、TFL和MPE百分比差异无统计学意义(P＞0.05).与C组和N组比较,D1组和D2组给药后各时点脊髓背角c-Fos蛋白表达差异无统计学意义(P＞0.05),D3组给药后7和24 h时脊髓背角c-Fos蛋白表达上调(P＜0.05),给药后48h时脊髓背角c-Fos蛋白表达差异无统计学意义(P＞0.05);与D1组和D2组比较,D3组给药后24 h时脊髓背角c-Fos蛋白表达上调(P＜0.05).D3组给药后24 h时可见脊髓轻度损伤.结论 鞘内注射右美托咪啶对大鼠可产生抗伤害效应.鞘内注射3.00μg/kg右美托咪啶抗伤害效应最强,但可产生短暂的脊髓神经毒性.

Abstract：

Objective To investigate the analgesic efficacy and spinal neurotoxicity of intrathecal (IT) different doses of dexmedetomidine in rats. Methods Sixty male SD rats weighing 180-220 g were randomly divided into 5 groups ( n = 12 each): groupnormal control (group C); group IT normal saline (group N); different doses of dexmedetomidine groups received IT dexmedetomidine 0.75, 1.50 and 3.00 μg/kg respectively (groups D1.3). Paw withdrawal threshold to mechanical stimulation (PWMT)with yon Frey filaments and tail flick latency (TFL) to a thermal nociceptive stimulus were measured before (To, baseline) and at 30 or60 rin after IT dexmedetomidine or normal saline administration (T1, T2 ) and the percentage of the maximum possible effect ( MPE ) was calculated. Lumbar segment of the spinal cord ( L4-6 ) was removed for microscopic examination and determination of c-Fos expression (by immuno-histochemistry) at 7, 24 and 48 h after IT dexmedetomidine or normal saline administration. Results PWMT, TFL and the percentage of MPE were significantly increased after IT dexmedetomidine as compared with the baseline values at T0 in groups D1-3 ( P ＜ 0.05). PWMT was significantly higher at T1 and TFL and the percentage of MPE were higher at T2 in groups D1-3 than in groups C and N,and in group D3 than in groups D1,2 ( P ＜ 0.05). At 7,24 h after IT dexmedetomidine c-Fos protein expression was significantly higher in group D3 than in groups C and N( P ＜ 0.05). There was no significant difference in c-Fos expression at 48 h after IT dexmedetomidine between group D3 and groups C and N ( P ＞ 0.05 ). At 24 h after IT dexmedetomidine c-Fos protein expression was significantly higher in group D3 than in other 4 groups( P ＜ 0.05). Slight spinal cord injury was observed at 24 h after IT dexmedetomidine in group D3. Conclusion IT dexmedetomidine has antinociceptive effect. High dose dexmedetomidine IT can produce transient reversible toxicity to the spinal cord.     

腹式子宫切除术后甲磺酸罗哌卡因与盐酸罗哌卡因硬膜外病人自控镇痛的比较

目的比较腹式子宫切除术后甲磺酸罗哌卡因与盐酸罗哌卡因硬膜外病人自控镇痛(PCEA)的效果。方法44例腹式子宫切除术病人随机分为两组(n=22):对照组应用0.75%盐酸罗哌卡因连续硬膜外麻醉,术后应用0.2%盐酸罗哌卡因作PCEA;试验组应用0.894%甲磺酸罗哌卡因连续硬膜外麻醉,术后应用0.237%甲磺酸罗哌卡因作PCEA。采用视觉模拟评分法(VAS)评价病人静卧时与咳嗽时的疼痛程度,以修正的Bromage评分法评价病人运动阻滞程度,记录镇痛质量、PCEA 情况和不良反应发生情况。结果两组病人术后VAS评分、镇痛质量、运动阻滞程度及不良反应的发生率比较差异无统计学意义(P>0.05),试验组镇痛泵有效按压次数少于对照组(P<0.05),除PCEA开始-4 h外,试验组病人其余时间段用药量均少于对照组(P<0.05)。结论0.237%甲磺酸罗哌卡因可用于腹式子宫切除术后PCEA,其镇痛效果和安全性与0.2%盐酸罗哌卡因相似。     

不同脂肪乳剂预先给药对罗哌卡因致老龄大鼠心血管毒性的影响

目的 评价不同脂肪乳剂预先给药对罗哌卡因致老龄大鼠心血管毒性的影响.方法 健康雄性SD大鼠24只,月龄18月,体重400～550 g,随机分为3组(n=8):生理盐水组(NS组)、长链脂肪乳剂组(LLE组)和中/长链脂肪乳剂组(MLE组).腹腔注射氯胺酮100 mg/ks麻醉,监测ECG、BP和HR,气管插管后行机械通气,潮气量2 ml/100 g,通气频率60次/min.静脉注射维库溴铵0.5 mg维持肌松.NS组、LLE组和MLE组分别经颈静脉输注0.9%氯化钠注射液、20%长链脂肪乳剂注射液和20%中/长链脂肪乳剂注射液,输注速率均为3 ml·ks~(-1)·min~(-1);5 min后均静脉输注0.75%盐酸罗哌卡因注射液10 mg·ks~(-1)·min~(-1),直至出现心跳停止.记录出现心律失常时、BP较基础值下降20%时和心跳停止时罗哌卡因的用量.结果 与NS组比较,LLE组和MLE组出现心律失常时、血压较基础值下降20%时和心跳停止时罗哌卡因的用量增加(P＜0.05);LLE组和MLE组出现心律失常时、BP较基础值下降20%时和心跳停止时罗哌卡因的用量比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 长链脂肪乳剂和中/长链脂肪乳剂预先给药可减轻罗哌卡因致老龄大鼠心血管毒性.     

罗哌卡因用于蛛网膜下腔阻滞的实验研究

目的：观察不同浓度不同剂量罗哌卡因注入犬的蛛网膜下腔后，脊髓，神经根早期超微结构及脊髓组织髓钙含量的变化。方法：杂种犬18只，雌雄兼有，体重10kg左右，随机分为三组，A组为对照组6只，生理盐水2ml，B组6只，0.5％罗哌卡因2ml(10mg)，C组6只，1％罗哌卡因2ml(20mg)，动物麻醉后对氯胺酮，芬太尼间断静脉注射射维持麻醉。于L3－4穿刺，注入生理盐水或罗哌卡因，于注药后3h，迅速处死动物后，取L1－2脊髓及神经根，每组随机取1mm3脊髓前角组织和神经根，固定于2．5％戊二醛磷酸缓冲液中行透射电镜观察脊髓及神经根超微结构的改变。并采用原子吸收分光光度法测脊髓组织钙含量。结果：（1）C组脊髓组织钙离子含量明显高于A，B两组。（2）A，B两组电镜标本正常，神经膜完整，脊髓标本显示线粒体，内质网完整。C组神经膜分层，部分断裂，脊髓组织线粒体肿胀，部分空泡变性，内质网肿胀。结论：1％浓度的罗哌卡因用于蛛网膜下腔可以造成脊髓缺血损伤，所以诮地蛛网膜下腔还需谨慎。     

鞘内注射医用臭氧对兔中枢神经的毒性

目的评价鞘内注射医用臭氧对兔神经行为学和脑、脊髓超微结构的影响，以探讨医用臭氧的神经毒性。方法新西兰大白兔30只，随机分为5组（n=6），穿刺对照组（s组）仅行小脑延髓池穿刺；纯氧对照组（02组）行小脑延髓池穿刺后注射医用纯氧2ml；不同浓度医用臭氧组（O2-O3 30组、O2-O3 50组、O2-O3 80组）行小脑延髓池穿刺后分别注射30、50、80mg／L医用臭氧2ml。分别于麻醉前和注射后24h测定双前足热刺激缩足潜伏期（PWHL）及机械刺激缩足反应阈值（PWMT），并进行运动功能（MF）评分及后肢趾外展（TA）评分。测定神经行为学的各项指标后处死兔，取大脑枕叶皮质和颈脊髓（C1～4）组织，透射电镜下观察超微结构。结果麻醉前及注射后24h时PWHL、PWMT、MF评分及TA评分组间及组内比较差异无统计学意义（P〉0．05）。不同浓度医用臭氧组大脑枕叶皮质及颈脊髓组织均有不同程度的病理损伤。结论鞘内注射医用臭氧30、50和80mg／L（2m1）对兔具有一定程度的神经毒性，且与浓度有关。