莪术油注射液对人卵巢癌SKOV3细胞体外生长的影响

目的 探讨莪术油注射液对人卵巢癌SKOV3细胞株体外生长的影响.方法 以不同的药物浓度作用人卵巢癌SKOV3细胞株后,采用MTT法检测对其抑制增殖作用,并通过倒置显微镜观察细胞形态学变化.结果 莪术油注射液可明显抑制SKOV3细胞的生长,其抑制率与药物浓度、作用时间呈量-效、时-效关系;倒置显微镜观察到细胞密度明显减少,胞体变长,细胞内颗粒感增强,细胞界限模糊,胞浆减少, 细胞脱落呈悬浮状,存活细胞减少,细胞核出现裂解,可见细胞碎片,随着莪术油作用浓度的增加上述现象更加明显.结论 莪术油注射液对人卵巢癌SKOV3细胞株具有明显抑制作用.     

紫草素对人卵巢癌细胞SKOV3细胞增殖和凋亡的影响

目的:研究紫草素对人卵巢癌SKOV3细胞的影响,并对其机制进行初步研究。方法:以不同浓度的紫草素干预人卵巢癌SKOV3细胞,采用MTT法观察紫草素对肿瘤细胞增殖的影响;流式细胞术检测经紫草素干预48 h后SKOV3细胞的凋亡情况和细胞周期,并以Western blot法测定Bax及Bcl-2蛋白表达。结果:紫草素(0.5,1.0,2.0,4.0,8.0,16.0μg/ml)经过24 h,48 h及72 h对肿瘤细胞增殖的抑制率分别为6.90%,12.11%,20.82%,30.20%,41.69%,56.81%;7.28%,12.16%,20.18%,40.81%,51.23%,70.51%;10.50%,15.90%,28.16%,46.86%,59.01%,78.58%,呈剂量依赖性和时间依赖性的关系。流式细胞术检测结果显示,人卵巢癌SKOV细胞经紫草素(3.0,6.0,12.0μg/ml)处理48 h后,其凋亡率分别为20.58%,35.10%及51.26%,G0/G1期细胞的比例分别62.10%,63.91%及83.86%。Western blotting检测结果显示,人卵巢癌SKOV细胞经紫草素(3.0,6.0,12.0μg/ml)处理48 h后,Bcl-2蛋白水平表达随紫草素浓度递增减少,而Bax蛋白水平随紫草素浓度递增而递增。结论:紫草素可抑制人卵巢癌细胞SKOV-3的体外增殖并诱导其凋亡,其机制可能为上调Bax表达和下调Bcl-2表达有关。     

黄芪多糖对急梗犬心的保护作用及其机制分析

生理、生化、形态的１７项检测指标均表明，黄芪多糖对急梗犬心有改善心肌收缩性能、缩小梗塞面积、减轻心肌损伤的作用。其机制可能与其抑制Ｎａ＾＋－Ｋ＾＋－ＡＴＰ酶活性和抗自由基损伤作用有关。     

黄芪多糖对黑色素瘤小鼠调节性T细胞的作用

目的: 探讨黄芪多糖对黑色素瘤小鼠调节性T细胞(Treg)免疫活性的影响。方法: 建立B16-F10荷瘤小鼠模型,C57BL/6小鼠随机分为正常组、模型组、环磷酰胺(CTX)组、黄芪多糖低剂量组(0.15 g·kg^-1)、黄芪多糖高剂量组(0.3 g·kg^-1)。造模后第2天开始ig给药,给药14 d后处死各组小鼠,取肿瘤称重计算抑瘤率,取脾脏制备单细胞悬液,采用流式细胞术检测小鼠脾脏中Treg的比例,通过实时定量PCR检测小鼠脾脏中转化生长因子-β (TGF-β)mRNA,白细胞介素-10(IL-10) mRNA的表达。结果: 黄芪多糖能够抑制荷瘤小鼠肿瘤的生长(P<0.05),降低脾脏中Treg的比例(P<0.01),降低脾脏中TGF-β mRNA, IL-10 mRNA(P<0.05)的表达。结论: 黄芪多糖可能通过降低荷瘤鼠脾脏中Treg数目,抑制TGF-β, IL-10分泌,从而实现其抑瘤作用。     

黄芪多糖对溃疡性结肠炎大鼠的作用及其机制研究

目的:探讨黄芪多糖对溃疡性结肠炎(Ulcerative colitis,UC)大鼠的作用及其机制。方法:选取雄性Wistar大鼠72只,采用随机数字表法分为空白组、模型组、黄芪多糖组、阳性对照组,每组18只,模型组、阳性对照组和黄芪多糖组采用三硝基苯磺酸灌肠建立大鼠UC模型,建模成功后,黄芪多糖组用黄芪多糖按200 mg/kg剂量灌肠,阳性对照组用硫唑嘌呤按60 mg/kg的剂量灌肠,模型组和空白组予以等量生理盐水,连续灌肠10天。对比各组大鼠结肠炎症评分,结肠上皮细胞中B淋巴细胞瘤-2 (B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、Bax蛋白的表达,结肠上皮凋亡细胞计数,血清D-乳酸、二胺氧化酶(Diamine oxidase,DAO)的水平。结果:与空白组比较,模型组大鼠的DAI评分、大体形态损伤评分、结肠损伤评分、Bax蛋白表达水平、血清D-乳酸、DAO水平、结肠上皮凋亡细胞计数均显著升高(P 0.05),结肠上皮细胞中Bcl-2表达显著降低(P 0.05);与模型组比较,黄芪多糖组和阳性对照组的DAI评分、大体形态损伤评分、结肠损伤评分、Bax蛋白表达水平、血清D-乳酸、DAO水平、结肠上皮凋亡细胞计数均显著降低(P 0.05),结肠上皮细胞中Bcl-2显著升高(P 0.05);与阳性对照组比较,黄芪多糖组DAI评分、大体形态损伤评分、结肠损伤评分、Bax蛋白表达水平、结肠上皮凋亡细胞计数均较高(P 0.05),结肠上皮细胞中Bcl-2、血清D-乳酸、DAO水平较低(P 0.05)。结论:黄芪多糖能显著减轻UC大鼠的炎性反应,且可能是通过上调Bcl-2,下调Bax蛋白表达,改善肠道屏障功能,达到治疗效果。     

苦参碱及顺铂对人卵巢癌裸鼠移植瘤的生长抑制作用

目的：研究苦参碱、顺铂（DDP）单独及联合应用对人卵巢癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用。方法：建立SKOV3细胞裸鼠移植瘤模型,随机分为4组,苦参碱组予苦参碱腹腔注射治疗;DDP组予DDP注射治疗;联合用药组予苦参碱和DDP注射治疗;对照组予生理盐水腹腔注射治疗。连续治疗3周后观察疗效并记录各组裸鼠及其皮下移植瘤生长情况,绘制肿瘤生长曲线,计算肿瘤体积和肿瘤生长抑制率。结果：移植人卵巢癌SKOV3细胞株的裸鼠均能成瘤,成瘤率100％,苦参碱对移植瘤有明显的抑瘤作用,抑瘤率迭57．56％。苦参碱组、DDP组、联合用药组治疗后的肿瘤体积及抑瘤率分别与对照组比较,差异均有非常显著性意义（P〈0．01）,与苦参碱组、DDP组比较,联合用药组肿瘤的体积明显减小（P〈0．05）,抑瘤率明显增高（P〈0．05）。结论：苦参碱对移植瘤有明显的抑瘤作用,苦参咸及顺铂联合应用对移植肿瘤生长抑制作用更强,二者具有协同抗癌作用。     

木犀草素对人卵巢癌SKOV3细胞增殖与凋亡的影响

目的观察木犀草素(Luteolin)对人卵巢癌SKOV3细胞增殖与凋亡的影响,并通过转录组学探讨其分子机制。方法体外培养人卵巢癌细胞,设立空白对照组、Luteolin组(10、20、40μmol·L^-1),给予药物干预48 h。CCK-8法检测细胞增殖抑制率;EdU实验检测细胞增殖能力;流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡率;Hochest33342染色观察细胞的形态学变化;转录组测序分析空白对照组与40μmol·L^-1Luteolin组干预48 h的差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs);根据转录组测序结果,采用实时荧光定量PCR法检测各组细胞中CDKN1A、CDC20、GADD45A、ATF4、DDIT3、HSPA1A、HSPA2、HSPA8、HSPB1 mRNA的表达。结果与空白对照组比较,Luteolin组细胞增殖抑制率均显著升高(P<0.05),呈明显的浓度依赖性;Luteolin组EdU阳性细胞率均显著降低(P<0.05);Luteolin组G0/G1期细胞比例均显著降低(P<0.05),S期细胞比例均显著升高(P<0.05),呈明显的浓度依赖性;Luteolin组细胞凋亡率均显著升高(P<0.05),呈明显的浓度依赖性;Luteolin组Hochest33342染色存在细胞凋亡现象;通过转录组测序分析,筛选获得1476个DEGs,挖掘到包括CDKN1A、CDC20、GADD45A、ATF4、DDIT3、HSPA1A、HSPA2、HSPA8、HSPB1调控细胞增殖与凋亡的DEGs;与空白对照组比较,Luteolin组的CDKN1A、GADD45A、ATF4、DDIT3 mRNA表达水平上调(P<0.05),CDC20、HSPA1A、HSPA2、HSPA8、HSPB1 mRNA表达水平下调(P<0.05)。结论 Luteolin可抑制SKOV3细胞的增殖及诱导其凋亡,其机制可能涉及CDKN1A、CDC20、GADD45A、ATF4、DDIT3、HSPA1A、HSPA2、HSPA8、HSPB1多基因的调控。     

黄芪多糖对人子宫内膜癌裸鼠皮下移植瘤Wnt基因转导通路的影响

目的观察黄芪多糖对人子宫内膜癌裸鼠皮下移植瘤Wnt基因转导通路中相关因子β-连环蛋白(β-catenin)和E-钙黏蛋白(E-cadherin)表达的影响。方法将30只SPF级雌性裸小鼠(BALB/c)随机分为对照组、模型组、黄芪多糖组,每组10只。模型组和黄芪多糖组均经右侧肩胛背部皮下注射人子宫内膜癌细胞系Ishikawa肿瘤细胞悬液制作人子宫内膜癌裸鼠皮下移植瘤模型。造模4周后,黄芪多糖组给予黄芪多糖肌肉注射,对照组、模型组注射等量生理盐水,均连续14 d。实验结束后处死各组小鼠,摘取瘤体,计算抑瘤率;采用免疫组化法检测子宫内膜癌组织中β-catenin、E-cadherin蛋白表达情况,RT-PCR法检测β-catenin、E-cadherin mRNA表达情况。结果黄芪多糖组瘤体积、瘤质量均明显低于模型组(P均0.05),抑瘤率明显高于模型组(P0.05);模型组β-catenin蛋白和β-catenin mRNA表达水平均明显高于正常组(P均0.05),黄芪多糖组均明显低于模型组(P均0.05);模型组Ecadherin蛋白和E-cadherin mRNA表达水平均明显低于对照组(P均0.05),黄芪多糖组均明显高于模型组(P均0.05)。结论黄芪多糖可促进E-cadherin蛋白和基因表达,抑制β-catenin蛋白和基因表达,通过调控Wnt基因转导通路而发挥抗肿瘤作用。     

黄芪发酵产物对小鼠急性肺损伤的近红外荧光活体成像研究

目的:研究黄芪发酵产物(HF)拮抗脂多糖诱导的小鼠急性肺损伤(ALI)的干预效果,初步探讨其作用机制,并为其开发利用提供参考依据。方法:60只BALB/c小鼠按体质量随机分成空白对照组、模型组、舒普深组(0.3 g/kg)及HF低、中、高剂量组(12.5、25、50 g/kg),每组10只,根据文献方法采用吸入脂多糖法复制小鼠ALI模型,各组处理4周后,采用近红外荧光系统对小鼠活体成像进行观察,ELISA法检测小鼠血清TNF-α、IL-6、IL-1水平,Western blot法检测肺组织TLR4的表达,并进行肺部病理学观察。结果:模型组近红外荧光活体成像荧光信号最强,各给药组呈现不同程度的减弱的荧光信号。与模型组比较,舒普深组、HF中剂量组、HF高剂量组小鼠体质量不同程度的增加(P <0.05,P <0.01);HF中剂量组的TNF-α、IL-6的水平降低(P <0.05);HF高剂量组的TNF-α、IL-1、IL-6的水平降低(P <0.01,P <0.05);HF高剂量组TLR4表达水平降低(P <0.05)。病理学研究表明,HF能够降低脂多糖...     

红毛五加多糖对荷人喉癌裸鼠抗癌作用的研究

目的采用人喉癌裸鼠移植模型及电镜观察，研究红毛五加多糖的抗肿瘤药理作用和可能机制。方法建立人喉癌裸鼠移植模型，观测红毛五加多糖（AGP）与对照组的抑癌率；电镜观察AGP引发的癌细胞超微结构改变。结果AGP对裸鼠移植人喉具有明显的抑制作用，平均抑瘤率为47．21％，对荷癌裸鼠体重增长无明显抑制作用，透射电镜观察发现AGP可诱导大量肿瘤细胞凋亡和少量直接坏死。结论AGP对人喉癌有明显的抑制作用，诱导癌细胞凋亡是其主要作用机制，对实验动物的生长无明显影响。     

莪术油注射液对人卵巢癌SKOV3细胞胀亡及Bcl-2表达的影响

目的观察莪术油注射液对人卵巢癌SKOV3细胞胀亡指数及Bcl-2表达的影响,探讨莪术油注射液致人卵巢癌SKOV3细胞胀亡的机制。方法以不同浓度莪术油注射液作用人卵巢癌SKOV3细胞后,通过荧光显微镜观察细胞核变化、透射电镜计算细胞胀亡指数、琼脂糖凝胶电泳观察细胞DNA断裂情况、免疫组化观察细胞Bcl-2基因的表达。结果人卵巢癌SKOV3细胞经莪术油注射液作用48 h后,荧光显微镜观察到胀亡细胞出现细胞肿胀,体积增大,胞膜面积缩小,核染色质分散扩大;细胞胀亡指数随浓度的增加而增大,呈量效关系;电泳观察DNA呈弥漫型;Bcl-2基因表达下调。结论莪术油注射液可使人卵巢癌SKOV3细胞随浓度的增加而胀亡指数增大,并可下调Bcl-2基因表达,提示下调Bcl-2基因表达可能是莪术油注射液致SKOV3细胞胀亡的作用机制之一。     

黄芪多糖对小鼠树突状细胞前体的体内诱导研究

目的探讨黄芪多糖(astragalus polysaccharide,APS)在体内是否具有诱导小鼠髓源性树突状细胞(dendritic cell,DC)分化和成熟作用,以阐释APS药理作用机制。方法分别设对照组及APS100、200mg/kg剂量组,腹腔注射,体内诱导小鼠髓源性DC前体和未成熟DC,称量脾重,ELISA检测血清中GM-CSF表达量,倒置显微镜观察细胞生长状态,电镜检测细胞形态,流式细胞仪检测CD11c、MHC-Ⅱ类分子及协同刺激分子CD80、CD86表达水平。结果APS注射7d后,APS100、200mg/kg组小鼠脾脏重量均较对照组有明显增加(P<0.01),骨髓细胞体外分离并经rmGM-CSF、rmIL-4诱导培养后,流式细胞检测结果显示:APS100、200mg/kg组CD11c、MHC-Ⅱ类分子表达水平高于对照组(P<0.05),但CD80、CD86表达量较对照组无明显差异;血清中GM-CSF表达量,结果与对照组无明显差异。结论APS能诱导小鼠髓源性DC前体分化为DC,并可能有促进DC成熟的作用,但此作用并非通过刺激机体GM-CSF细胞因子的分泌而发挥作用。     

高糖对小鼠足细胞黏附功能的影响及黄芪多糖的干预作用

目的观察高糖对体外培养足细胞的黏附功能及黏附分子的影响,以及中药组分黄芪多糖改善这种损伤的效果。方法采用永生化小鼠足细胞株,通过温度选择的培养方法诱导足细胞分化,分为正常糖对照组（NG）（5mmol/L）、甘露醇高渗对照组（MA）、高糖组（HG）（30μmol/L）、高糖＋黄芪多糖组（APS）（0.2g/L）,干预3、6、12、24h后收集细胞,分别用荧光定量法和物理离心法检测足细胞黏附功能;干预6、12h后,应用实时定量PCR法及Western印迹法分别检测足细胞α3、β1整合素mRNA和蛋白表达水平。结果作用6、12h后,HG组α3、β1整合素mRNA及蛋白表达水平较NG组下降,差异有统计学意义,而给予黄芪多糖后,其下降不明显。结论高糖可明显抑制足细胞的黏附功能,黄芪多糖对高糖诱导的足细胞损伤有改善作用。     

黄芪多糖治疗糖尿病肾病的临床观察及其对肾脏保护作用的研究

目的:观察黄芪多糖对治疗糖尿病肾病的临床功效,并研究其对肾脏的保护作用。方法:选取我院2008年6月-2010年6月糖尿病肾病患者63例,分为两组,治疗组(黄芪多糖冲剂)32例,对照组(苯那普利)31例,观察两组治疗前后的临床症状,血糖水平,尿蛋白,血尿素氮及肌酐等。结果:治疗组治疗糖尿病肾病总有效率为93.75%,明显高于对照组。结论:黄芪多糖冲剂能有效改善糖尿病肾病患者的临床症状,使恒压下降,降低24h尿蛋白,并且显著改善肾功能,对肾脏起到一定的保护作用。     

复方附苓丸水提物诱导人卵巢癌SKOV3细胞凋亡作用的研究

目的:观察复方附苓丸水提物对卵巢癌SKOV3细胞的凋亡作用。方法:以未加药组为阴性对照组,用MTT法测算不同浓度药物作用于SKOV3细胞的抑制率;Annexin V/PI双染色流式细胞术检测SKOV3细胞的凋亡率;RT-PCR法测定抑凋亡基因Bcl-2 mRNA的表达。结果:复方附苓丸水提物对人卵巢癌SKOV3细胞有明显抑制作用,能明显下调Bcl-2基因mRNA表达。结论:复方附苓丸抑制SKOV3细胞生长并能诱导其凋亡,其机制与下调Bcl-2抑凋亡基因相关。     

威灵仙多糖对人卵巢癌SKOV3细胞凋亡的影响

目的:探讨威灵仙多糖对人卵巢癌SKOV3细胞凋亡的影响及其分子机制。方法:不同浓度威灵仙多糖作用于SKOV3细胞48h后,荧光显微镜观察人卵巢癌SKOV3细胞凋亡情况,RT-PCR法检测Bcl-2、Fas基因表达量的变化。结果:威灵仙多糖能诱导SKOV3细胞凋亡,40mg/L时凋亡率为14.09%,实验组与对照组比较有显著性差异;并且上调Fas和降低Bcl-2表达。结论:威灵仙多糖能促进其细胞凋亡,其机制可能与激活Fas、抑制Bcl-2的基因表达有关。     

黄芪多糖对人乳腺癌MDA-MB-231裸鼠移植瘤生长及肿瘤相关凋亡蛋白的影响

目的:观察黄芪多糖(Astragalus polysaccharides,APS)对人乳腺癌MDA-MB-231裸鼠移植瘤的生长抑制作用及其对肿瘤细胞凋亡的影响,研究APS抑制三阴性乳腺癌MDA-MB-231生长、诱导其凋亡的作用及其分子机制。方法:通过将人乳腺癌细胞MDA-MB-231接种于BALB/c-nu雌性裸鼠右侧腋窝皮下建立人乳腺癌裸鼠移植瘤模型; 18只乳腺癌荷瘤裸鼠随机分为3组:模型组(每天予生理盐水),APS低、高剂量组(200,400 mg·kg~(-1)),每组6只;每天灌胃给药200μL,连续21 d。实验结束,观察比较APS低、高剂量组与模型组荷瘤鼠肿瘤质量、瘤体体积的变化,计算肿瘤抑制率;苏木精-伊红(HE)染色观察瘤体组织细胞形态学变化;原位末端标记法(TUNEL)检测乳腺癌肿瘤组织的凋亡;蛋白免疫印迹法检测肿瘤组织中B细胞淋巴瘤/白血病-2蛋白(Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bax)、半胱天冬氨酸蛋白酶(Caspase)等凋亡相关蛋白表达。结果:与模型组比较,APS低、高剂量组中的乳腺癌肿瘤体积、瘤重减小(P 0. 05,P 0. 01),其肿瘤抑制率分别为37. 9%,57. 57%; HE染色观察APS干预组肿瘤组织均呈现明显形态学改变,组织细胞出现凋亡状态; TUNEL染色显示APS组肿瘤组织细胞凋亡率增加;蛋白免疫印迹法发现,与模型组比较,APS低、高剂量组肿瘤组织中Bcl-2蛋白水平下降(P 0. 05,P 0. 01),Bax,Caspase-9,Caspase-7蛋白表达水平上调(P 0. 05,P 0. 01)。结论:APS能有效抑制MDA-MB-231乳腺癌裸鼠移植瘤生长,诱导人乳腺癌MDA-MB-231细胞发生凋亡,其作用机制与APS影响乳腺癌细胞中凋亡相关蛋白Bcl-2,Bax,Caspase-9,Caspase-7蛋白表达水平有关。     

黄芪多糖对非小细胞肺癌患者免疫功能的影响

目的探讨黄芪多糖对非小细胞肺癌患者免疫功能的影响。方法 84例非小细胞肺癌患者,随机分为对照组和观察组各42例,对照组用三维适形放疗;观察组在对照组放疗基础上加用黄芪多糖注射液治疗。结果两组治疗前CD4、CD8和CD4/CD8相比较,无显著差异(P0.05),两组治疗后CD4、CD8和CD4/CD8相比较,观察组优于对照组(P0.05)。两组生活质量比较,观察组优于对照组(P0.05)。结论黄芪多糖可有效改善患者免疫功能,提高生活质量。     

黄芪多糖减轻糖尿病性肌少症大鼠肌肉萎缩的作用机制研究

[目的]探究黄芪多糖通过作用于磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)-蛋白激酶B(AKT)-叉头框转录因子O亚族1(FOXO1)信号通路及相关炎症因子对糖尿病性肌少症大鼠肌肉萎缩的改善及治疗作用。[方法]一次性链脲佐菌素腹腔注射构造糖尿病动物模型,随机分为模型组、黄芪多糖组和二甲双胍组,另设置无干预正常组,分组给药3个月,实验结束后进行腓肠肌苏木精-伊红(HE)染色;蛋白质免疫印迹法(Western Blot)测定磷酸化蛋白激酶B(P-AKT)/AKT及FOXO1蛋白含量;实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)检测白细胞介素(IL-6)、抑癌基因TP53、热休克转录因子1(HSF1)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)水平;检测血清生化指标三酰甘油(TG)。[结果]与模型组相比,黄芪多糖组腓肠肌肌细胞明显改善,细胞体积变大、间隙变窄,炎性渗出显著减轻;另外,黄芪多糖组的糖尿病保护因子P-AKT/AKT、FOXO1蛋白含量明显上升;炎性因子IL-6、TP53、HSF1及MMP-9含量明显下降。在血脂方面,西药二甲双胍组TG下降更加明显。[结论]黄芪多糖可能通过PI3K-AKT-FOXO1信号通路,降低IL-6、TP53炎性因子水平,影响HSF1和MMP-9的活性,从而改善糖尿病性肌少症大鼠的肌肉萎缩。     

乌骨藤对裸鼠胶质瘤作用的实验研究

目的:观察乌骨藤对裸鼠皮下胶质瘤的抑制效应。方法:建立裸鼠胶质瘤移植模型,随机分为5组,每组10只,空白对照组(生理盐水组)、乌骨藤组、莪术组、猫爪草组和阳性对照组(替莫唑胺组)。观察裸鼠的生存状况,计算肿瘤体积,计算肿瘤抑制率。结果:给药治疗后,抑瘤率乌骨藤组38.3%、莪术组41.7%、猫爪草组34.2%,增殖率乌骨藤组58.4%、莪术组57.2%、猫爪草组60.7%,乌骨藤抗肿瘤效果介于莪术和猫爪草之间,但各组中药在抗胶质瘤方面无明显差异(P>0.05)。各组裸鼠体重组间比较,差异无显著性意义(P>0.01)。结论:乌骨藤对裸鼠皮下胶质瘤的有显著的抑制作用。