大黄素对重症急性胰腺炎大鼠腺泡细胞凋亡的影响

目的: 探讨大黄素对重症急性胰腺炎大鼠腺泡细胞凋亡的影响。方法: SD大鼠30只,随机分为对照组、胰腺炎组和大黄素组,5%牛磺胆酸钠1 ml/kg制作大鼠重症急性胰腺炎模型,大黄素组为模型制作完成时及3 h后腹腔内注射大黄素2.5mg/kg,观察12 h后各组大鼠血清淀粉酶、IL-6和腺泡细胞凋亡情况。结果: 大黄素组血清淀粉酶、IL-6值低于胰腺炎组(P<0.01),细胞凋亡指数增加(P<0.01),病理损害减轻。结论: 大黄素促进重症急性胰腺炎大鼠腺泡细胞凋亡,减少淀粉酶和IL-6释放,减轻胰腺病理损害。     

大黄素对重症急性胰腺炎急性期细胞因子及胰腺腺泡细胞凋亡的动态影响（摘要）

目的 :本研究通过动态观察大黄素对重症急性胰腺炎(ＳＡＰ)大鼠血清淀粉酶、ＴＮＦａ、ＩＬ - 6、胰腺组织学变化程度的作用 ;同时观察其对ＳＡＰ大鼠急性期胰腺腺泡细胞凋亡的动态影响 ,以进一步了解大黄素治疗ＳＡＰ的作用机理。方法 :用ｃｈｅｔｔｙ法制作大鼠ＳＡＰ模型 ,术后 0ｈ 2 4ｈ 30ｈ 36ｈ测定假手术组、ＳＡＰ组及大黄素治疗组血清淀粉酶、血清ＴＮＦａ.ＩＬ -6浓度及胰腺腺泡细胞凋亡指数 ,并取胰组织作病理学检查 ;同时应用ＴＵＮＥＬ技术 ,分析各组各时相大鼠胰腺腺泡细胞凋亡的变化。结果 :①血清淀粉酶浓度 :术后 0ｈ假手…     

大黄素对重症急性胰腺炎大鼠胰腺细胞凋亡的干预作用

目的 探讨大黄素对重症急性胰腺炎大鼠胰腺组织细胞凋亡的干预作用及机制。 方法 采用逆行胰胆管注射牛磺胆酸法进行造模,模型大鼠随机分入对照组、大黄素低剂量组、大黄素中剂量组和大黄素高剂量组;各组再随机编入3 h、6 h、12 h和24 h等4个时相点进行标本留置。检测血清淀粉酶、血清总钙和胰腺组织病理评分;应用DNA断裂的原位末端标记(TUNEL)法测定细胞凋亡并计算凋亡指数,免疫印迹法检测胰腺组织Notch-1、Hes-1和Hes-5蛋白表达情况。 结果 大黄素治疗组的血清淀粉酶均较模型对照组显著降低(P<0.01),血清总钙水平则均较模型对照组显著增高(P<0.05)。大黄素中剂量组和高剂量组胰腺病理评分均较模型对照组明显改善(P<0.01),高剂量组改善最显著。治疗各组的胰腺细胞凋亡指数在不同时间点均较模型对照组有不同程度升高,高剂量组效果最显著,低剂量组与模型对照组差异无统计学意义(P>0.05)。治疗各组的Notch-1蛋白表达量均较模型对照组增加,中剂量组和高剂量组效果相对显著(P<0.05)。大黄素高剂量组Hes-1蛋白表达量显著高于模型对照组(P<0.05)、低剂量组(P<0.05)和中剂量组(P<0.05)。大黄素中剂量组和高剂量组Hes-5蛋白表达量均显著高于模型对照组(P<0.05),且高剂量组蛋白表达量较低剂量组显著增加(P<0.05)。 结论 SAP时大黄素可以通过促进胰腺局部细胞凋亡而减轻胰腺炎反应,Notch-1/Hes信号通路是大黄素调控胰腺局部细胞凋亡的重要途径。      

丁酸钠对重症急性胰腺炎大鼠胰腺腺泡细胞凋亡的影响

目的探讨丁酸钠（NaB）对重症急性胰腺炎（SAP）大鼠胰腺腺泡细胞凋广的影响。方法30只SD大鼠分成对照组、SAP组及NaB治疗组,每组各10只．采用牛磺胆酸钠逆行胰胆管注射制作SAP动物模型,NaB治疗组为SAP制模5rain后通过股静脉注射NaB（5mg／kg）。检测血清淀粉酶、胰腺湿十重比值,利用Kusske方法对胰腺组织的病理学改变：水肿、出血、坏死、炎细胞浸润进行计分,TUNEL法检测胰腺腺泡细胞凋亡。结果SAP组血清淀粉酶与对照组比较明显升高,差异有高度统计学意义（P〈0．01）,NaB治疗组血清淀粉酶较SAP组明显下降,差异有统计学意义（P〈0．05）：SAP组胰腺组织湿,干重比值较对照组下降,差异有高度统计学意义（P〈0．01）,NaB治疗组胰腺组织湿／干重比值较SAP组明显下降,差异有统计学意义（P〈0．05）。SAP组胰腺损伤积分明显高于对照组,差异有高度统计学意义（P〈0．01）,NaB治疗组胰腺损伤积分明显低于SAP组,差异有统计学意义（P〈0．05）。SAP组胰腺腺泡细胞凋亡指数高于对照组,差异有高度统计学意义（P〈0．01）,NaB治疗组胰腺腺泡细胞凋亡指数显著高于SAP组．差异有统计学意义（P〈0．05）。结论NaB可以促进SAP大鼠胰腺腺泡细胞凋亡,减轻中性粒细胞活化,降低SAP严重程度。     

大黄素治疗重症急性胰腺炎肺损伤机制研究

目的 探讨大黄素（EMO）治疗重症急性胰腺炎肺损伤（SAPLI）的机制。方法 2014年6月-2015年12月选取SPF级健康雄性SD大鼠90只,采用随机数字表法将大鼠分为假手术组（SHAM组,n=30）、SAPLI组（n=30）、EMO组（n=30）。SAPLI组和EMO组大鼠胆胰管逆行注射4%牛磺胆酸钠建立SAPLI模型,SHAM组大鼠胆胰管逆行注射等体积0.9%氯化钠溶液。EMO组于造模后1 h腹腔注射EMO,SAPLI组及SHAM组注射等体积0.9%氯化钠溶液。治疗后24 h,SAPLI组死亡11只大鼠,EMO组死亡4只大鼠。检测肺湿重/干重及组织病理学评分、髓过氧化物酶（MPO）水平、血清肿瘤坏死因子α（TNF-α）水平、白介素（IL）-6水平、IL-10水平、调节性T细胞（Treg）表达率、叉头翼状螺旋转录因子（Foxp3）mRNA表达水平。结果 SAPLI组、EMO组大鼠肺湿重/干重、组织病理学评分高于SHAM组（P＜0.05）;EMO组大鼠肺湿重/干重、组织病理学评分低于SAPLI组（P＜0.05）。SAPLI组、EMO组大鼠MPO水平高于SHAM组（P＜0.05）;EMO组大鼠MPO水平低于SAPLI组（P＜0.05）。SAPLI组、EMO组大鼠TNF-α、IL-6水平均高于SHAM组,IL-10水平均低于SHAM组（P＜0.05）;EMO组大鼠TNF-α、IL-6水平均低于SAPLI组,IL-10水平高于SAPLI组（P＜0.05）。SAPLI组、EMO组大鼠Treg表达率、Foxp3 mRNA表达水平均高于SHAM组（P＜0.05）;EMO组大鼠Treg表达率、Foxp3 mRNA表达水平高于SAPLI组（P＜0.05）。结论 EMO具有治疗SAPLI的作用,其可能是通过增加Treg表达率及其功能活性,降低MPO、TNF-α、IL-6水平,升高IL-10水平,从而对肺组织起到保护作用。     

精氨酸对急性胰腺炎大鼠胰腺腺泡细胞凋亡的影响

目的:探讨左旋精氨酸与急性胰腺炎(AP)大鼠胰腺腺泡细胞凋亡的关系.方法: 以蛙皮素制造AP模型,观察不同剂量L-Arg治疗AP大鼠后,胰腺组织中一氧化氮合酶(NOS)活性、一氧化氮(NO)的含量、胰腺腺泡细胞凋亡及胰腺组织病理改变.结果: AP胰腺组织中NOS活性较正常胰腺组织中升高,而此时胰腺组织NO浓度反而降低,低剂量L-Arg(75, 150 mg/kg)使胰腺组织中NO浓度升高致接近正常组水平,促进了胰腺腺泡细胞凋亡,减轻胰腺病理损害;高L-Arg剂量(1200, 2400 mg/kg),胰腺组织中NO浓度升高超出正常组,胰腺腺泡细胞凋亡减少,胰腺病理损害加重.结论: L-Arg对AP的的双重作用与NO的生物活性有关.小剂量可通过诱导胰腺腺泡细胞凋亡, 而起保护作用, 大剂量则有害.     

重症急性胰腺炎急性期细胞因子及胰腺腺泡细胞凋亡的动态变化

目的 本研究通过重症急性胰腺炎（SAP）大鼠血清淀粉酶、TNFa、IL－6、胰腺腺泡细胞凋亡指数及胰腺组织学变化程度作用的动态观察，以进一步了解治疗SAP的作用机理。方法 用chetty法制做大鼠SAP模型，动态测定术后0h、24h、30h、36h各组血清TNFa、IL－6浓度，并取得胰组织做病理学检查；同时，应用TUNEL技术分析大鼠胰腺腺泡细胞凋亡的变化。结果 研究发现SAP组30、36h时血清TNFa、IL－6水平明显升高，腹水量明显增加，胰组织病变程度明显加重；胰腺腺泡细胞凋亡指数较SAP组胰腺腺泡细胞凋亡指数明显升高。结论 重症急性胰腺炎（SAP）胰酶及炎症介质的释放及胰腺腺泡细胞凋亡在其病情发展起一定的作用。     

大黄素对重症急性胰腺炎模型大鼠肺损伤的早期保护作用及其机制

[目的]探讨大黄素对大鼠重症急性胰腺炎（SAP）肺损伤的早期保护作用及其机制．[方法]将SD大鼠随机分为假手术组、SAP组及大黄素组,再将每组分为术后4,8,12h亚组,检测各组血浆淀粉酶、肺泡灌洗液磷脂酶A2（PLA2）,白细胞介素（IL）-18及IL-6水平,并对肺组织进行病理评分,采用RT—PCR法测定肺组织表面蛋白A（SP—A）mRNA表达,且与细胞因子水平进行相关性分析．[结果]大黄素组血浆淀粉酶、肺泡灌洗液PLA2水平及肺组织病理评分与同时间点SAP组相比较均明显降低（P〈0．05）;大黄素组肺泡灌洗液IL-1β,IL-6值与4h时SAP组相比较明显降低（P〈0．05）;大黄素组肺组织SP-AmRNA表达水平明显高于SAP组（P〈0．01）;肺组织SP—AmRNA表达在4,8h与IL-18,IL-6呈负相关（r=-0．587,P〈0．05）．[结论]大黄素通过抑制PLA2活性及降低炎性因子,减轻SAP模型早期肺炎症反应,提示大黄素有良好的肺组织保护作用,改善SAP所致的早期肺损伤．     

大黄素干预大鼠慢性胰腺炎胰腺纤维化进展的研究

目的研究大黄素对大鼠慢性胰腺炎模型胰腺纤维化的干预作用及可能机制。方法胰管内注射三硝基苯磺酸(TNBS)制备大鼠慢性胰腺炎模型,用不同剂量(20、40、80 mg/kg)的大黄素鼻饲干预,生理盐水作为对照。放射免疫法检测血清透明质酸(HA)和层粘连蛋白(LN)水平;观察大鼠胰腺组织的病理学变化,并应用 Van Gieson 染色分析胰腺胶原纤维含量;Western 印迹分析检测大鼠胰腺组织中的转化生长因子(TGF)-β_1蛋白含量。结果 (1)小剂量、中剂量、大剂量大黄素处理组血清透明质酸水平分别为87μg/L±22μg/L、78μg/L±25μg/L、62μg/L±19μg/L,均显著低于模型对照组(113μg/L±27μg/L,均 P<0.05);血清层粘连蛋白水平分别为67μg/L±14μg/L、57μg/L±12μg/L和44μg/L±10μg/L,均显著低于模型对照组(86μg/L±17μg/L,均 P<0.05);(2)大黄素处理组胰腺纤维化程度轻于模型组,且随大黄素剂量的增加纤维化程度呈减轻趋势,大剂量大黄素组纤维化减轻程度与模型对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05);(3)胰腺胶原纤维阳性染色所占面积,小剂量、中剂量、大剂量大黄素组分别为39%±7%、38%±4%、36%±5%,大剂量大黄素组纤维化程度轻于模型对照组(42%±6%),差异有统计学意义(P<0.05);(4)TGF-β_1蛋白表达量,小剂量、中剂量、大剂量大黄素组分别为44.3%±2.1%、39.2%±1.8%、28.8%±1.6%,与模型对照组(60.7%±1.7%)相比,大剂量大黄素组低于模型对照组(P<0.05);大剂量大黄素组与中、小剂量组比较,差异均有统计学意义(均 P<0.05)。结论大黄素具有抗大鼠慢性胰腺炎模型的胰腺纤维化作用,此作用与 TGF-β_1蛋白表达有关。     

TNF-α在大鼠重症急性胰腺炎并发肾损伤时的作用

目的探讨重症急性胰腺炎并发急性肾损伤时TNF-α，RNA表达变化及其机制。方法32只健康SD大鼠随机分为两组：假手术组（n=16）、胰腺炎组（n=16）。假手术组开腹仅翻动肠管；胰腺炎组经胆胰管逆行注射3％牛磺胆酸钠（0．05ml/kg）建立大鼠SAP模型。分别于制模后12、24h抽血测定血清淀粉酶活性，血清尿素氮、肌酐浓度和肾脏组织TNF-α mRNA表达变化，观察胰腺及肾脏病理形态学改变。结果胰腺炎组大鼠血清淀粉酶活性，血清尿素氮、肌酐浓度及肾组织TNF-α mRNA表达水平均较假手术组明显升高。胰腺及肾脏病理损害严重，腹水的生成和皂化斑的形成多；假手术组未见明显异常。结论SD大鼠SAP时肾组织TNF-α mRNA表达水平明显升高，提示肾脏组织TNF-α在SAP合并ARI的发病机制中可能具有重要作用。     

白介素在大鼠急性胰腺炎中的变化

目的 研究血清白介素6（IL－6）、白介素8（IL－8）水平在不同程度急性胰腺炎中的变化。方法 采用胰产砂及胰尾部实质内定点注射牛磺胆酸钠溶液的方法制造程度不同的大鼠急性胰腺炎（AP）模型,检测和分析血清IL－6和IL－8的水平。结果 坏死组血清IL－6、8明显增高,与对照组及水肿组有显著性差异。结论 在AP期间细胞因子参与机体的炎症反应,细胞因子的过度表达在重症急性胰腺炎的发病过程中起重要 的作用,检测血清IL－6、IL－8浓度的变化可作为判断AP严重程度的指标。     

血管内皮损伤在实验性重症急性胰腺炎发病中的作用

目的观察SAP大鼠血循环中的血管内皮功能损伤标志物ET-1、vWF,血小板最大聚集率及胰腺血流量的变化,探讨血管内皮功能损伤在SAP发病中的作用。方法72只SD大鼠随机分为假手术组（A组,n=36）和SAP模型组（B组,n=36）,SAP模型组采用5%的牛磺胆酸钠胰胆管逆行注射方法建立。LS-Ⅲ型组织血流仪检测胰腺的血流量,放免法检测血浆ET-1含量,ELISA法测定血浆vWF含量,全自动血小板聚集仪检测二磷酸腺苷、肾上腺素、胶原和花生四烯酸诱导的血小板最大聚集率,并在光镜及电镜下观察胰腺病理变化及超微结构。结果诱发SAP后B组大鼠各时间点胰组织血流量较A组显著下降（P〈0.01）,6、12和18hB组胰组织血流量呈逐渐下降趋势。B组术后各时间点血浆ET-1、vWF含量较A组明显升高（P〈0.01）。B组术后各时间点由二磷酸腺苷、肾上腺素、胶原和花生四烯酸诱导的血小板最大聚集率较A组显著升高（P〈0.01）。B组胰腺出血坏死严重,微血管见大量微血栓,内皮细胞内有大量空泡形成。结论大鼠SAP早期存在血管内皮的损伤,血小板激活及胰腺缺血,血管内皮的损伤、血小板激活及微血栓形成导致的胰腺缺血可能在SAP的发病中起重要作用。     

大黄素对急性胰腺炎大鼠中性粒细胞凋亡的影响

目的 探讨大黄素对不同类型急性胰腺炎(acute pancreatitis,AP)大鼠中性粒细胞(polymorphonu-clear neutrophil,PMN)凋亡的影响及其可能机制.方法 制作大鼠急性水肿型胰腺炎(acute edematous Pancreatitis,AEP)与急性坏死型胰腺炎(acute necrotic pancreatitis,ANP)模型,使用大黄素进行治疗.采用流式细胞仪检测,蛋白质免疫印迹法等技术,观察各型AP大鼠模型PMN凋亡率及天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶(caspase-3、capase-8)表达水平变化情况.结果 大黄素治疗组PMN凋亡率及PMN表达caspase-3、caspase-8水平较同型AP组明显增加(P均＜0.05);各AP组PMN凋亡率与capase-3、capase-8表达变化呈显著正相关(P＜0.05).结论 大黄素可能通过caspase途径来诱导AP中性细胞凋亡.     

N-乙酰半胱氨酸对重症急性胰腺炎肠屏障作用的实验研究

目的:探讨N-乙酰半胱氨酸(NAC)对重症急性胰腺炎(SAP)肠屏障的作用及机制。方法:54只清洁健康雄性SD大鼠,随机分成假手术(Sham)组、SAP组和NAC+SAP3组,每组18只。建模后6、12、24h分批处死,采集腹主动脉血测定二胺氧化酶(DAO)及淀粉酶(AMY)含量;取胰腺和末端回肠标本进行组织病理诊断;小肠组织匀浆测定丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)和超氧化物歧化酶(SOD)水平。结果:与Sham组比较,SAP组血AMY和DAO水平均明显增高(P<0.05),小肠组织中SOD和GSH水平明显降低(P<0.05),MDA水平明显增高(P<0.05)。与SAP组比较,NAC+SAP组其6 h时间点血清AMY、DAO水平与SAP组同时间点无明显变化(P>0.05),而12、24 h时间点较SAP组同时间点显著降低(P<0.05);其小肠组织中MDA、SOD和GSH水平在6 h时间点与SAP组同时间点无明显差异(P>0.05),12、24 h时间点SOD和GSH水平明显增高(P<0.05),MDA水平明显降低(P<0.05)。结论:NAC通过增强肠组织抗氧化能力、维护肠组织内氧化还原平衡,可以保护肠黏膜结构和功能的完整性,对预防SAP大鼠肠屏障损害具有重要意义。     

急性胰腺炎病情与肠屏障功能损害相关性的实验研究

目的:探讨急性胰腺炎病情与肠屏障功能(IBF)损害的相关性及干预治疗后肠屏障功能损伤程度的改善情况。方法:日本大耳白兔36只,随机分为对照组A,轻型胰腺炎组B,重型胰腺炎组C,重型胰腺炎干预组D,后3组采用胰管结扎联合胆汁注射的方法制成兔SAP模型。造模后3、6、12小时、第1、3、7天取血测定淀粉酶的含量及测血清肿瘤坏死因子及白介素6水平及其变化。实验第7天处死动物收集胰腺、肝脏、肺、小肠组织,观察其组织病理学并行胰腺,小肠病理评分,制备小肠组织匀浆测定TNF-α、IL-6、丙二醛水平。结果:B组、C组、D组实验前、后淀粉酶有显著差异;A组实验前、后淀粉酶差异无统计学意义。C组与B组、D组之间比较,淀粉酶、TNF-α、IL-6、小肠匀浆中TNF-α、IL-6、MDA差异有统计学意义(P<0.05)。B组、D组之间比较差异无统计学意义。胰腺、肺、肝,小肠的病理学改变以C组为甚,光镜下观察小肠黏膜损伤严重,D组比C组病理损害明显减轻,B组仅轻度损伤。结论:重型胰腺炎肠道黏膜损伤及IBF障碍较轻型胰腺炎明显,重型胰腺炎给予药物干预后肠道黏膜损伤程度及胰腺炎病情明显低于重型胰腺炎,说明早期治疗干预能改善IBF,有助于胰腺炎的治疗。     

早期呼吸机支持加床边血液滤过治疗急性重症胰腺炎合并急性肺损伤

目的　探讨早期呼吸机支持加床边血液滤过治疗急性重症胰腺炎合并急性肺损伤的效果。方法　对 17例急性重症胰腺炎合并急性肺损伤患者 2 4h内行呼吸机支持 ,并行床边静脉 静脉血液滤过 (CVVH )、肠外营养 (TPN)和控制感染 ,监测动脉血氧分压 (PaO2 )、氧合指数(PaO2 /FiO2 )、中心静脉压 (CVP)、血肌酐 (Cr)、血尿素氮 (BUN)和丙氨酸氨基转移酶 (ALT)。结果与对照组比较 ,治疗组PaO2 和PaO2 /FiO2 均有明显提高 (P <0 0 5) ,Cr和BUN有所下降 (P <0 0 5) ,乳酸值未见明显增高 ,肺顺应性 (Cst)稳定在 3 1～ 3 4ml/cmH2 O。结论　早期呼吸机支持加床边血液滤过对维护急性重症胰腺炎合并肺损伤患者的重要脏器功能具有重要意义。     

生长抑素对重症急性胰腺炎大鼠治疗作用的实验研究

目的:探讨生长抑素治疗重症急性胰腺炎(SAP)大鼠的作用及其机制。方法:建立SAP模型大鼠30只,随机分为:模型组、低剂量生长抑素组和高剂量生长抑素组,每组各10只。另外选择10只正常大鼠设为对照组。低剂量生长抑素组大鼠皮下注射生长抑素0.3μg/kg;高剂量生长抑素组大鼠皮下注射生长抑素1μg/kg。检测比较各组大鼠血清淀粉酶,胰湿/干比率及MDA、GSH-Px和SOD。结果:模型组大鼠血清淀粉酶活性、胰组织湿/干重比值均显著高于对照组(P<0.05);生长抑素各剂量组大鼠血清淀粉酶活性、胰组织湿/干重比值及MDA含量均显著低于模型组(P<0.05);生长抑素各剂量组大鼠的SOD及GSH-Px水平显著高于模型组(P<0.05)。结论:生长抑素对于重症急性胰腺炎大鼠有治疗作用,其机制之一可能与其能提高抗氧化作用有关。     

巯基物质对急性坏死性胰腺炎合并肺损伤保护作用的实验研究

目的 探讨巯基物质在急性坏死性胰腺炎(ANP)时对肺泡细胞的保护作用。方法将108只大鼠随机分为A组(生理盐水组)、B组(巯基物质处理组)、C组(假手术组)。检测各组大鼠胰腺组织内巯基、丙二醛含量；观察光镜下胰腺组织、电镜下肺组织形态学改变。结果B组胰腺组织巯基含量明显低于C组，高于A组。B组胰腺组织丙二醛含量均明显高于C组，低于A组。B组胰腺组织及肺组织病理改变较A组减轻，腹水量亦少于A组。结论ANP时巯基物质减少，丙二醛含量增加明显；外源性巯基物质可作为氧自由基清除剂保护胰腺细胞，同时保护肺泡细胞。