In vitro cytotoxicity of TCDD on SPC-A1 cells

Objective The toxicology of TCDD （2,3,7,8-tetrachlorodibenzo-p-dioxin） has been studied mainly with regard to the carcinogenicity of its metabolites, but its phototoxicity is not well understood. Although some studies have indicated the lethal phototoxicity of TCDD, this study was designed to investigate its effect on SPC-Al cells. Methods SPC-Al cells were cultured in 1640 medium and treated with 10 nmol/L, 0.1 μmol/L, 1 μmol/L TCDD for either 24 h or 96 h at each concentration. SPC-Al cells were co-cultured with TCDD at different concentrations. Then the cell morphology, DNA fragment electrophoresis, and cell cycle were analyzed by flow cytometry, and enzyme assays were used to observe the effect of TCDD on the morphology, growth rate, and enxyme change of SPC-A1 cells. Results With the increasing concentrations of TCDD and prolongation of culture time, the morphology of SPC-Alcells was changed from round shape to spindle, and the ability of SPC-Al cells to adhere to wall was decreased. With debris emitted around the cells, the morphologic changes included reduction in cell volume. Nuclear ehromatin condensation and PI were observed. With the increasing concentrations of TCDD, DNA ladder occurred. After treatment with TCDD, extraction of cancer cells exhibited typical DNA fragmentation, and flow eytometry analysis showed apoptosis in a dose-dependent manner. As the concentration of TCDD rose from 10 nmol/L to 1 μmol/L, the ratio of apoptotic cells increased from 10.76% to 21.82%. Conclusions TCDD has in vitro cytotoxicity on SPC-Al cells, and the cytotoxicity is positively related to its concentration and culture time. TCDD may inhibit the growth and proliferation of SPC-A lcells through the pathway of apoptosis introduction.     

2,3,7,8-四氯二苯二噁英诱导腭裂发生的差异蛋白筛选

目的:以蛋白质组学方法筛选2,3,7,8-四氯二苯二噁英(2,3,7,8-tetrachlorodibenzo-p-dioxin,TCDD)致先天性腭裂发生的差异表达蛋白.方法:以TCDD诱导建立胎鼠先天性腭裂模型,行腭部的大体解剖及组织学检查.取实验组和对照组胎鼠的腭组织,分别提取组织总蛋白.通过双向电泳和质谱分析,...     

Prdx1、Spy1、p27kip1蛋白在肝细胞肝癌中的表达及其相关性*

目的：探讨Prdx1、Spy1、p27kip1蛋白在肝细胞肝癌中的表达及相关性。方法：应用Western blot及免疫组化检测肝癌及相应的癌旁组织中Prdx1、Spy1、p27kip1的表达;免疫共沉淀分析Prdx1、Spy1的相互作用;Western blot分析Prdx1、Spy1相互结合对p27kip1蛋白表达的影响。结果：Prdx1、Spy1在肝癌组织及肝癌细胞中高表达,与p27kip1表达呈负相关;Prdx1、Spy1相互结合使p27kip1的表达水平下调,此作用与Prdx1的抗氧化物活性无关。结论：Prdx1、Spy1蛋白的表达与肝细胞肝癌的发生发展有关,两者的表达可能在肿瘤的恶性进展中起协同作用,而与p27kip1的表达呈拮抗作用。     

乳腺癌组织中BRCA1的蛋白表达与乳腺癌的相关性分析研究

目的乳腺癌易患基因1(breast cancer susceptibility gene 1,BRCA1)变异及其蛋白产物功能的改变与乳腺癌的发生密切相关,对调节细胞周期,修复DNA损伤,诱导细胞凋亡起重要作用。对BRCA1功能及蛋白产物的研究有利于阐明肿瘤的发生机制。文中分析BRCA1蛋白表达与乳腺癌临床分期组织学分级及临床病理参数的相关性。方法 80例乳腺癌手术标本的存档蜡块,用Envision免疫组化法检测BRCA1蛋白。分析BRCA1的表达和患者的年龄、肿物大小、淋巴结转移情况及雌激素受体(estrogen receptor,ER)、孕激素受体(progesterone receptor,PR)、Her-2、p53表达的关系。结果经多样本χ2检验,无淋巴结转移与淋巴结转移组之间的BRCA1蛋白表达有显著性差异(P=0.035),转移1～3个淋巴结、4～9个淋巴结、10个以上淋巴结3组之间的BRCA1蛋白表达有显著性差异(P=0.023)。BRCA1的表达与淋巴结转移呈正相关(r=0.414,P<0.05)。BRCA1蛋白在ER阴性组的表达率高于ER阳性组(P=0.002),在PR阴性组的表达高于PR阳性组,在HER-2阴性组的表达高于HER-2阳性组,且均有显著性差异(P<0.05)。BRCA1蛋白在p53阳性组的表达高于p53阴性组,有显著性差异(P<0.05)。BRCA1蛋白在≤45岁年龄组与>45岁年龄组的表达差异无统计学意义(P=0.629)。BRCA1蛋白在不同肿瘤大小组间的表达差异无统计学意义(P=0.953)。结论 BRCA1的表达与ER、PR、HER-2呈负相关,与组织学分级及p53表达呈正相关,与淋巴结转移呈正相关,与肿物大小及年龄无关。     

先天性肾积水患儿尿水通道蛋白-1、内皮素-1表达水平及临床意义

目的 分析先天性肾积水患儿尿水通道蛋白（AQP-1）及内皮素-1（ET-1）的表达水平,并探索其临床意义。方法 选取40例先天性肾积水患儿作为实验组,并根据肾积水严重程度分为轻、中、重度积水。另选无泌尿系疾患儿童40例作为对照组。收集实验组术前晨尿、术中肾盂尿和术后第7天晨尿,以及对照组晨尿。测定实验组及对照组尿液AQP-1及ET-1表达水平,并进行尿AQP-1、ET-1水平的组间比较,及实验组术前、术中、术后尿AQP-1水平的组内比较。结果 轻度肾积水患儿尿AQP-1水平与对照组比较,差异无统计学意义（P?>0.05）;中度、重度肾积水患儿尿AQP-1水平则低于对照组（P?<0.05）;实验组患儿术中尿AQP-1水平低于术前水平（P?<0.05）;术后尿AQP-1水平高于术前水平（P?<0.05）;先天性肾积水患儿尿ET-1阳性率高于对照组（P?<0.05）。结论 尿AQP-1及ET-1水平可作为先天性肾积水患儿的辅助诊断指标。尿AQP-1水平还可作为肾积水患儿术后恢复的监测指标。     

二啞英对小鼠异位子宫内膜影响的分子机制研究

【目的】 探讨四氯二苯并二 英(TCDD)对子宫内膜异位症小鼠模型的影响及其分子学机制? 【方法】 采用小鼠自体子宫内膜移植法建立小鼠子宫内膜异位症模型,分别给予TCDD 0?l?3?10 μg/kg剂量灌胃,每21 d 1次,于建模术后3?6?9周处死,鉴定异位病灶的形成,测量异位病灶体积?采用免疫组化法和RT-PCR法检测各组小鼠异位子宫内膜组织中芳香烃受体(AhR)和细胞色素P450 1A1(CYP1A1)表达水平?【结果】 ①染毒组小鼠异位病灶体积的增加与染毒剂量和时间具有明显的正相关性(r = 为0.727?0.553,均P < 0.05);②染毒组小鼠异位子宫内膜AhR蛋白较对照组增强(P < 0.05);且随染毒剂量增加和染毒时间延长,AhR蛋白表达相应增加(r分别为0.687?0.442,均P < 0.01);③随染毒剂量增加,CYP1A1蛋白表达相应增加(r = 0.640,P < 0.01),对照组未检测到CYP1A1蛋白表达;④染毒组小鼠异位子宫内膜AhR mRNA较对照组增强(P < 0.05)?随染毒剂量增加和暴露时间延长,AhR mRNA表达相应增加(r分别为0.565?0.635,P < 0.01);⑤随染毒剂量的增加,CYP1A1 mRNA表达明显增加(r = 0.659,P < 0.01),对照组小鼠异位子宫内膜病灶中未检测到CYP1A1mRNA?【结论】 TCDD可促进小鼠模型异位子宫内膜病灶的发展,其机制可能与AhR及其下游基因CYP1A1激活有关?AhR及CYP1A1的表达增强是二 英暴露的生化指标     

上皮性卵巢癌AIB1蛋白表达水平及其与凋亡相关性的初步研究

目的观察AIB1蛋白在上皮性卵巢癌中的表达,并探讨其与凋亡调节蛋白P53、Bcl-2表达之间的关系。方法应用免疫组化SP法检测24例正常卵巢、24例卵巢良性肿瘤、18例卵巢交界性肿瘤及69例上皮性卵巢癌中AIB1、P53、Bcl-2蛋白的表达,同时测定卵巢癌中雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)状态,分析AIB1的表达与P53蛋白、Bcl-2蛋白、ER、PR的表达间有无相关性。结果1AIB1在正常卵巢、卵巢良性肿瘤、卵巢交界性肿瘤、上皮性卵巢癌中阳性表达率分别为8.33%、25.00%、38.89%、65.22%,卵巢癌中AIB1蛋白的阳性表达率高于其他卵巢组织(P<0.05)。AIB1蛋白在卵巢癌中过表达的发生率为36.23%,低分化、临床晚期、淋巴结受累的病例较之中、高分化、临床早期、无淋巴结转移的病例AIB1蛋白的过表达发生率升高(P<0.05)。2相关性分析显示AIB1蛋白与P53、Bcl-2蛋白表达呈正相关(r=0.342,P=0.004;r=0.311,P=0.009),与ER、PR的表达无相关性。结论上皮性卵巢癌中,AIB1蛋白的表达率明显升高,与卵巢癌的恶性生物学行为关系密切。AIB1蛋白可能通过非激素依赖途径影响了凋亡调节蛋白如P53、Bcl-2的表达,从而参与了上皮性卵巢癌的发生发展过程。     

Peroxiredoxin 1与EMT相关蛋白在胰腺癌组织中的表达及其临床意义

目的：探讨过氧化物还原酶1( Prx1)与上皮细胞间质转化( EMT)相关蛋白在胰腺癌组织中的表达及其临床意义。方法采用免疫组化法分别检测 Prx1、E-钙黏素( E-cadherin)、波形蛋白( Vimentin)在66例胰腺癌组织和11例正常胰腺组织中的表达,并分析三者之间的关系及与临床病理因素间的关系。结果 Prx1、E-cadherin和Vimentin分别在66例胰腺癌组织中的阳性表达率为69．70%(46/66)、40．91%(27/66)、56．06%(37/66);Prx1、E-cadherin和Vim-entin分别在11例正常胰腺组织中的阳性表达率为18．18%(2/11)、90．90%(10/11)、18．18%(2/11)。 Prx1、E-cadherin和Vimentin在胰腺癌组织中的表达均与TNM分期、淋巴结转移和肿瘤分化程度显著相关(P<0．05),而与性别、年龄、肿瘤大小、病变部位均无关;Prx1与神经侵犯显著相关( P<0．05),而E-cadherin和Vimentin与神经侵犯无关。 Prx1的表达与Vimentin表达呈正相关(P<0．05),Prx1和Vimentin的表达均与 E-cadherin表达呈负相关( P<0．05)。结论Prx1与EMT相关蛋白在胰腺癌组织中的表达呈显著相关性,并与其侵袭转移能力相关,提示Prx1的高表达可能为预测胰腺癌患者预后不良的辅助指标之一。     

Bmi-1蛋白在乳腺癌中的表达及其与临床病理学行为的相关性

[目的]探讨Bmi-1蛋白在乳腺癌中的表达及其与临床病理学行为的相关性.[方法]选取62例乳腺癌和62例癌旁组织芯片,利用免疫组织化学方法检测Bmi-1蛋白在乳腺癌及癌旁组织中的表达水平.[结果]Bmi-1蛋白在62例乳腺癌中的阳性表达率为83.4%,与在癌旁组织中的12.9%相比较明显升高(P<0.01).在TNM分期中,T2和T3,T4期阳性表达率分别为87.1%和92.0%,与T1期33.3%相比较均明显提高(P<0.01).有淋巴结转移的乳腺癌中阳性表达率为92.2%,与无淋巴结转移的45.5%相比较差异有统计学意义(P<0.01).在临床分期1~2期和3~4期中阳性表达率分别为70.8%和92.1%,相比较差异有统计学意义(P<0.05).[结论]Bmi-1蛋白的高表达在乳腺癌的发生、发展过程中起重要作用,且与乳腺癌的T分期、临床分期和淋巴结转移相关.     

水通道蛋白1和肿瘤坏死因子受体相关蛋白1在人脑胶质瘤中的表达及相关性*

目的 研究水通道蛋白1（AQP1）和肿瘤坏死因子受体相关蛋白1（TRAP1）在脑胶质瘤中的表达及其之间的相关性。方法 选取66例人脑胶质瘤和15例正常脑组织标本,经Western blotting及逆转录聚合酶反应（RT-PCR）对其AQP1、TRAP1 mRNA及蛋白表达进行检测分析。结果 ①在人脑胶质瘤中AQP1、TRAP1 mRNA及蛋白表达水平较对照组上调（P?<0.05）;②在高级别胶质瘤（Ⅲ、Ⅳ级）中AQP1、TRAP1 mRNA及蛋白表达与低级别胶质瘤（Ⅰ、Ⅱ级）比较,前者表达水平上调（P?<0.05）;③AQP1、TRAP1 mRNA及蛋白在脑胶质瘤的表达无相关性（rs?=0.074和0.058,P?=0.065和0.080）。结论 AQP1和TRAP1表达与脑胶质瘤的肿瘤分期有关,恶性程度越高其表达量也越高,但两者与脑胶质瘤的病理进展无协同性。     

儿童肾积水肾脏动态增强MRI检查

目的：了解动态增强MRI技术评价儿童肾积水肾脏形态及功能的价值。方法：单侧先天性肾盂输尿管连接部狭窄(PUJO)所致肾积水男性患儿7例，均经B超、静脉尿路造影(IVU)及病理证实。观察并记录动态增强MRI注射对比剂Gd-DTPA前和注射后1min，3min，5min，10min，15min，30min，45min和60min肾实质和集合系统相对信号强度(RSI)。均以对侧正常肾脏作为对照。结果：平扫示积水肾脏皮、髓质分界不清，集合系统信号强度较低；动态扫描示积水肾实质和集合系统。RSI逐渐增大，正常肾脏则逐渐减小。结论：动态增强MRI可对儿童肾积水肾脏的功能和形态进行联合评估。     

PeroxiredoxinⅡ在卵巢上皮性肿瘤中的表达及其临床意义

目的探讨Peroxiredoxin Ⅱ在卵巢上皮性肿瘤组织中的表达及临床意义。方法用蛋白免疫印迹(westernblot)的方法检测71例新鲜卵巢组织及卵巢上皮肿瘤组织的Peroxiredoxin Ⅱ的表达情况,其中正常卵巢组织16例,良性卵巢肿瘤16例,卵巢癌39例。结果Peroxiredoxin Ⅱ在正常卵巢组织表达为(1.00±0.44),在良性卵巢上皮性肿瘤组织中表达为(0.83±0.50),在卵巢癌组织中表达为(0.60±0.23),卵巢癌与正常卵巢组织的表达差异有显著性(P<0.01);良性卵巢上皮性肿瘤组织与正常卵巢组织、癌组织比较差异均无统计学意义;且Peroxiredoxin Ⅱ在卵巢癌组织表达降低与其临床分期、病理类型、细胞分化及绝经等参数无关。结论Peroxiredoxin Ⅱ可能在卵巢上皮癌的发生中起抑制因子作用,而在其发展中无明显作用。     

Evaluation of renal function in children with moderate or severe hydronephrosis after operation

Objective To evaluate postoperative renal function in children with congenital moderate or severe hydronephrosis.Methods (99m) Tc- labeled diethylenetriaminepenta- acetic acid scintigraphy was performed in 50 children with unilateral moderate or severe hydronephrosis to d etermine postoperative renal function. We also analyzed the factors influencing renal function recovery. Results Average postoperative renal function in 50 cases was 40. 62%±10. 09%. Among th em, 32% of patients had nearly normal renal function and differentiated renal f unction reached up to 45%. Average preoperative and postoperative renal functio n in 25 cases was 23. 89%±11. 65% and 39. 33%±8. 59% respectively and the incr ease of renal function was about 15. 44%±11. 18% (P=0. 0003). Renal parenc hyma thickness was negatively correlated with postoperative renal function (r =-0. 62, P=0. 0009). The follow- up period was positively correlated with postoperative renal function (r=0. 58, P=0. 0026). The patients’age ha d no correlation with renal function recovery (r=-0. 05, P=0. 80). Reco very of renal function in hydronephrosis with extrarenal pelvis was greater than that in hydronephrosis with intrarenal pelvis (P=0. 016). Conclusions Postoperative renal function in children with moderate or severe hydronephrosis can recover to normal. Recovery of renal function was more obvious in hydroneph rosis with thinner renal parenchyma, longer follow- up period and extrarenal pel vis.     

过氧化物还原酶3在早孕妇女血清中的水平

目的 探讨过氧化物还原酶3（PRX3）在妊娠早期的抗氧化作用。方法 收集90例在门诊行人工流产的患者血清和流产后的绒毛组织,采用酶联免疫吸附测定法,检测PRX3的血清值,采用实时定量PCR和蛋白质印迹法,检测绒毛中PRX3的表达水平。结果 自妊娠8周以后开始,孕妇的血清PRX3值显著高于非孕女性（P<0.05）,绒毛组织中PRX3的表达随着孕周增长逐渐升高。结论 妊娠女性体内存在氧化应激状态,并且随着孕周的增长而加重。PRX3在绒毛组织中具有重要的抗氧化功能。     

Apoptosis of renal tubular cells in congenital hydronephrosis

目的　检测先天性肾积水肾脏细胞凋亡的发生 ,并探讨其临床意义。方法　应用电镜、DNA原位缺口末端标记法及DNA电泳检测 15例先天性肾积水患儿患肾细胞凋亡 ,其中轻、中、重度肾积水各 5例。结果　先天性肾积水肾脏有细胞凋亡发生 ,可见细胞核周边染色质凝集及凋亡小体。重度肾积水肾脏平均凋亡指数为 0 0 94 1± 0 0 17,中度肾积水为 0 0 32 5± 0 0 16 9,轻度肾积水为 0 0 0 2 1± 0 0 0 31,三者相比均有显著差异 ,并且随着肾积水程度的加重 ,凋亡细胞数增多。 1例中度肾积水和 5例重度肾积水肾组织电泳带型呈典型的“梯形结构”。结论　凋亡可能参与了先天性肾积水肾脏的损伤     

先天性巨大型肾积水的治疗探讨

目的探讨先天性巨大型肾积水的处理方法.方法对45例先天性巨大型肾积水IVU患侧不显影患者采取双J管内引流或经皮肾造瘘外引流,两个月后复查患肾功能,决定是否保肾.结果肾功能改善者29例,无明显改善者16例.前者行离断性肾盂成形术,后者行肾切除.结论对不能确定是否仍有肾功能的惠肾,先行引流后,视肾功能是否改善再决定是否保肾,是治疗先天性巨大型肾积水的合理选择.可避免不必要的肾切除.     

胎儿肾积水的近远期观察

目的　研究胎儿肾积水的不同程度及转归 ,指导临床工作 ,避免不必要的终止妊娠 ,及早对泌尿系统先天畸形进行治疗。方法　利用超声检查对 3 0例 48只集合系统存在分离的肾脏进行观察和随访。结果　按照积水消失时间、集合部分离宽度和积水出现时间分组。产前消失 :9例 14只肾 ,集合系统分离 3～ 14mm ;生产即日消失 :2例 4只肾 ,集合部分离 7～ 10mm ;产后一段时间内消失 :18例 2 8只肾 ,集合部分离 4～ 17mm。不可复 :1例 2只肾 ,集合部分离 8～11mm。分离宽度 <4mm ,3只肾 ,均在 3 7周出现 ,3 8周消失。 4～ 10mm :3 6只肾 ,产前 2 7周至产后 2 0个月消失 ,其中一只分离 8mm ,积水逐渐加重。 >10mm组 :9只肾 ,产前 2 1周至产后 18个月消失 ,其中一只分离 11mm ,积水逐渐加重。积水出现时间 <2 8周 :9只肾 ,分离宽度 3～ 11mm ;2 8～ 3 2周 :10只肾 ,分离宽度 6 5～ 17mm ;>3 2周 :2 9只肾 ,分离宽度 3～15mm。结论　胎儿肾积水多发生在孕晚期 ,分离宽度集中在 4～ 10mm ,且更多的是一个可复性的过程 ,分离 <4mm可以在产前消失 ,>4mm均应加强随访 ,分离宽度与预后好坏并不完全成正比。对分离程度大且持续存在 ,甚至不断发展的积水应警惕先天畸形的存在 ,及早诊断与治疗。