TRAIL与消化系统肿瘤

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TNF related apoptosis inducing ligand，TRAIL)是一个新发现的肿瘤坏死因子家族成员，是TNF家族中继TNF、FasL之后发现的第三个凋亡分子。TRAIL可大量快速诱导转化细胞、肿瘤细胞和病毒感染细胞发生凋亡，而正常细胞则可逃逸它的杀伤作用。     

肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体在前列腺癌治疗中的研究进展

肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TRAIL)是近年来研究发现的肿瘤坏死因子超家族新成员,其广泛存在于人体组织中,参与机体免疫调节、免疫自稳和免疫监视。TRAIL受体表达于多种细胞表面。研究表明,TRAIL能够诱导肿瘤细胞凋亡,对正常细胞无明显不不良反应,TRAIL良好的抗肿瘤活性和安全性得到了广泛的认识。前列腺癌的发生发展受细胞凋亡机制调控,TRAIL能诱导前列腺癌细胞凋亡,在前列腺癌的治疗中具有广阔前景。     

肿瘤坏死因子凋亡诱导配体诱导膀胱癌EJ细胞凋亡的研究

目的 探讨肿瘤坏死因子凋亡诱导配体(TRAIL)诱导膀胱癌细胞凋亡的效应。方法 10～100μg／L梯度浓度的TRAIL与培养的EJ细胞共孵育4～24h。采用Annexin V染色，DNA云梯实验和流式细胞技术检测诱导后EJ细胞凋亡发生的时期和程度。结果 TRAIL诱导4h即后可观察到早期细胞凋亡发生，8h后即可检测DNA片段化，24h后凋亡细胞最多达到66．29％。结论 TRAIL能够迅速诱导EJ细胞凋亡，可能成为膀胱癌治疗的新方法。     

大肠癌中肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体及其影响因子表达的研究

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）具有选择性诱导肿瘤细胞发生凋亡的作用。但随着研究深入，人们发现许多肿瘤对TRAIL并不敏感。我们通过研究TRAIL诱导细胞凋亡通路中3个关键性影响因子Survivin、NF-κB和Caspase-3在大肠癌中的表达来探寻提高TRAIL对肿瘤细胞敏感性的可能途径。     

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体受体对肝细胞肝癌的抑制作用

目的 研究肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体受体(TRAIL)对肝细胞肝癌的抑制作用。方法 构建绿色荧光蛋白融合TRAIL质粒,转染肝癌细胞株HepG2、SMMC7721细胞后,分别采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、Western blot检测 TRAIL的表达,采用流式细胞仪检测细胞周期、凋亡,噻唑蓝(MTT)法检测细胞存活率;体内实验建立裸鼠肝癌皮下模型,pIRES-EGFP-TRAIL直接瘤体注射,并观察TRAIL的抑癌作用。结果 真核表达质粒TRAIL体外转染肝癌细胞后,RT-PCR和 Western blot证实了肝癌细胞中有 TRAIL的表达,但对肝癌细胞的生长无显著性的抑制作用。体内直接瘤体注射 pIRES-EGFP-TRAIL 2周,RT-PCR证实瘤体有 TRAIL mRNA强表达,癌旁组织 TRAIL mRNA呈弱表达,正常肝无 TRAIL mRNA表达,但两组间肿瘤大小差异无显著性(P>0.05)。结论 肝细胞肝癌对TRAIL诱导的凋亡有耐药现象,提示HCC中存在抑制TRAIL诱导凋亡的因素,单一的TRAIL治疗HCC疗效有限。     

TRAIL及其受体与HCC治疗的研究进展

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)是肿瘤坏死因子家族的新型凋亡分子,能够与其受体(TRAILR)作用选择性的诱导细胞凋亡,成为肝细胞肝癌(HCC)治疗研究的热点。但是近几年来研究发现TRAIL治疗对正常肝细胞有一定的毒副作用且存在耐药性。如果能够克服这些难题,TRAIL有望成为治疗HCC的一线药物。研究发现TRAIL联合化学药物、蛋白激酶抑制剂,或构建含TRAIL基因的载体等方法能够避免TRAIL对正常肝脏的毒副作用及逆转耐受。本文就上述治疗方法的研究进展做一综述。     

去甲二氢愈创木酸联合肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体对胰腺癌细胞PCNA-1的抑制作用

目的 探讨脂氧合酶抑制剂去甲二氢愈创木酸(nordihydroguaiaretic acid,NDGA)联合肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(tumor necrosis factor-related apoptosis inducing ligand,TRAIL)对胰腺癌细胞的抑制作用.方法 MTT法测定NDGA、TRAIL及NDGA联合TRAIL作用于PCNA-1细胞后的细胞生存率,同时,用流式细胞技术测定细胞凋亡率,Western b1ot检测caspase-3的表达水平的变化.结果 各组给药组与对照组比较均能不同程度抑制PCNA-1细胞增值并诱导其凋亡作用,且caspase-3表达上调;NDGA与TRAIL联用明显增强诱导凋亡作用.结论 NDGA与TRAIL联用可明显增强PCNA-1细胞抑制效果和诱导凋亡作用,其诱导凋亡的机制可能与其上调caspase-3表达有关.     

端粒酶启动子肿瘤靶向基因抗大肠癌的研究

目的探讨端粒酶 (hTERT)启动子驱动的肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TNF relatedapoptosis inducingligand ,TRAIL)基因在大肠癌细胞DLD1的表达及肿瘤杀伤作用。方法通过腺病毒载体系统将hTERT启动子驱动的TRAIL基因转入大肠癌细胞DLD1,流式细胞仪检测GFP/TRAIL的表达和DLD1细胞凋亡率。结果端粒酶启动子驱动的GFP/TRAIL基因和CMV启动子驱动的GFP(绿色荧光蛋白 )基因在DLD1内的表达率分别达 4 1 6 3%和 5 4 0 7% ;GFP/TRAIL基因对DLD1细胞的生长抑制率和凋亡率分别达 93 5 0 %和 5 6 97% ,与PBS和Ad/hTERT LacZ的差异有显著性 (P <0 0 5 )。结论端粒酶启动子驱动的GFP/TRAIL融合基因在大肠癌细胞中能够有效地表达 ;TRAIL基因对大肠癌细胞DLD1有明显的抑制生长和促凋亡作用。     

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体及其受体在肝癌组织中的表达的研究

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 (tumornecrosisfactorrelatedapopto sis inducingligand,TRAIL)是近来发 现的TNF超家族成员,为II型跨膜蛋 白,与其受体(TRAILR)结合并启动细 胞内的信号传导,在体外强烈诱导多种 肿瘤细胞凋亡,而正常细胞对其不敏 感,TRAIL的这一特性引起了学者的 高度重视,认为有望找到一种新的肿瘤 治疗方法。本文通过研究TRAIL及其 受体在肝细胞癌(HCC)中的表达,探讨 TRAIL用于治疗HCC的潜在可能性。 1.材料和方法:(1)肝癌组织:50 例肝细胞肝癌组织选自同济医院肝脏 外科中心手术切除标本,全部标本…     

肿瘤坏死因子凋亡诱导配体诱导膀胱癌EJ细胞凋亡的研究

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)是能够较特异性诱导肿瘤细胞凋亡的肿瘤坏死因子超家族成员 ,由于对正常组织不表现毒性[1] ,在肿瘤治疗方面得到广泛研究。我们对TRAIL诱导膀胱癌细胞EJ凋亡的作用进行了研究 ,现报告如下。材料与方法　重组人TRAIL(rhTRAIL)由KamiyaBiomedical公司制备和纯化 ,浓度设置为 10 0、5 0、2 0和 10ng/ml。Annexin V FluosStainingKit试剂盒购自罗氏公司。人膀胱癌EJ细胞用含 10 %小牛血清 ,10 0U/ml青霉素和10 0 μg/ml链霉素的RPMI 16 4 0 37℃、5 0ml/LCO2 、饱和湿度下培养。细胞按 5× …     

TRAIL与肿瘤治疗研究进展(文献综述)

细胞凋亡即细胞程序化死亡在清除肿瘤细胞、自身反应性淋巴细胞和病毒感染细胞保持机体正常生理功能中起重要作用。而肿瘤坏死因子 (TNF)超家族成员在诱导肿瘤细胞凋亡中发挥着重要作用 ,其中 TRAIL(TNF- related apoptosis- inducing ligand)及其受体是近几年新发现的 TNF家族新成员 ,其在体内、体外均显示出良好的抗肿瘤效应且对正常组织细胞无毒性 ,因此有望为肿瘤治疗提供新的途径。     

蛋白酶体抑制剂和肿瘤相关坏死因子凋亡诱导配体协同诱导肝癌细胞凋亡的机制

肿瘤相关坏死因子凋亡诱导配体（TRAIL）是高选择性的化疗药物，然而并非所有肿瘤细胞对TRAIL均表现出显著敏感性。本研究旨在探讨TRAIL诱导肝癌细胞凋亡中存在的抵抗机制，及其与蛋白酶体抑制剂的协同作用。     

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体诱导前列腺癌细胞凋亡的研究

目的 研究肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)对前列腺癌细胞的凋亡诱导作用。方法 10μg/L-100μg/L的TRAIL处理培养的PC-3M细胞4～24h后，采用Annexin-V荧光染色、透射电镜、原位末端转移酶标记技术(TUNEL)检测肿瘤细胞凋亡；流式细胞术和MTT比色检测凋亡率、细胞生长抑制率与TRAIL的时间、浓度依赖关系。结果10μg/L～100μg/L TRAIL作用4～24h，肿瘤细胞出现典型的凋亡形态学改变，随着TRAIL浓度的增加或药物作用时间的延长，肿瘤细胞凋亡率也增加，为13．8％～79．6％，同时细胞生长抑制率出现明显增加，药物作用8h为7．5％～37．9％，12h为16．7％～87．9％，24h为39．7％～97．6％。结论 TRAIL能够迅速和显著地诱导PC-3M细胞凋亡，可能成为晚期前列腺癌治疗的新方法。     

肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体基因在糖尿病大鼠肾脏细胞凋亡中的作用

目的 探讨肿瘤坏死因子(TNF)相关的凋亡诱导配体(TRAIL)基因在糖尿病大鼠肾脏细胞凋亡中的表达及其作用。方法 应用链脲佐菌素建立糖尿病大鼠模型，采用原位末端标记法和流式细胞术检测4组(对照组、糖尿病4周组、8周组和12周组)大鼠肾脏细胞凋亡情况；免疫组化和流式细胞术检测肾脏TRAIL基因及其死亡受体DR4、DR5的蛋白表达。结果 与正常对照组相比．各糖尿病组较对照组肾小球、肾小管凋亡细胞数明显增多，TRAIL、DR4、DR5的表达亦显著增强。结论 在高糖环境的诱导下．TRAIL基因及其死亡受体出现的高表达，可能部分参与了糖尿病大鼠肾脏细胞凋亡。     

受体作用蛋白在肝癌细胞对肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体诱导凋亡耐受中的作用

目的 观察受体作用蛋白(RIP)基因的表达变化在肝癌细胞对肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)诱导凋亡耐受中的作用.方法 以肝癌细胞HepG2、Hep3B为研究对象,制备RIP siRNA的细胞模型,应用流式细胞仪分析两种细胞模型对TRAIL作用后细胞周期的变化,Western blot检测其在RIP基因沉默前后凋亡信号传导蛋白Caspase-8、Caspase-3、DFF-45的表达变化.结果 转染RIP siRNA后,细胞恢复了对TRAIL诱导凋亡的敏感性,当TRAIL浓度为100 μg/L时,HepG2及Hep3B转染组的细胞生存率为(60.02±5.23)％和(50.78±3.76)％,显著低于对照组的(96.44±5.43)％和(101.85±6.41)％(P＜0.01);细胞生存周期SubG1期为(76.89±6.68)％和(72.45±7.31)％,显著高于对照组的(0.78±0.07)％和(3.62±0.38)％(P＜0.01).转染组TRAIL单独作用,可以引起HepG2 siRNA及Hep3B siRNA凋亡传导通路上传导蛋白Caspase-8、Caspase-3的裂解.结论 肝癌细胞对TRAI诱导凋亡的耐受可能与其传导通路上RIP蛋白的表达相关,抑制其表达可以导致凋亡传导蛋白Caspase-8、Caspase-3的裂解,促使凋亡的发生,恢复肝癌细胞对TRAIL诱导凋亡的敏感性.     

肿瘤坏死因子凋亡诱导配体诱导结肠癌细胞凋亡的机制

目的探讨肿瘤坏死因子凋亡诱导配体(TRAIL)诱导结肠癌细胞发生凋亡的机制。方法流式细胞仪技术、酶联免疫吸附技术、荧光显色技术检测500μg／L TRAIL和／或Caspase抑制剂Z-VAD．fmk处理后,结肠癌细胞SW1116在不同时点(0、2、4、6、24 h)凋亡情况、Caspase-3酶活性及4 h线粒体△ψm、cardiolipin、细胞ROS变化。结果 TRAIL可引起结肠癌细胞凋亡,并于 4 h达凋亡高峰,凋亡指数为32．98％;并出现线粒体△ψm下降、cardiolipin丢失增加及Caspase-3酶活性增加,4 h达到最大峰值为(37．56±2．572)μmol／L·hr-1·mg-1蛋白。但TRAIL所诱导的细胞凋亡作用可被Caspase抑制剂Z-VAD．fmk所抑制。同时证实TRAIL所诱导的结肠癌细胞凋亡与细胞氧自由ROS的生成无关。结论 TRAIL通过Caspase依赖方式引起线粒体△ψm下降、cardi- olipin丢失增加导致线粒体内膜损伤,从而诱导细胞发生凋亡。     

线粒体途径在肿瘤坏死因子凋亡诱导配体诱导结肠癌细胞凋亡中的调节作用

目的探讨线粒体途径在肿瘤坏死因子凋亡诱导配体(TRAIL)诱导结肠癌细胞凋亡过程中的调节作用,为临床合理用药提供理论指导。方法采用流式细胞仪技术、荧光显色技术和Western印迹技术检测TRAIL处理结肠癌细胞SW1116后,在不同时间细胞凋亡情况、线粒体完整性改变(ΔΨm、cardiolipin情况)以及线粒体下游通路细胞色素C和Caspase-9的表达情况。结果TRAIL诱发结肠癌细胞凋亡,于4 h达凋亡高峰,凋亡指数为32．98%；在4 h出现线粒体ΔΨm下降和cardiolipin丢失增加,造成其内膜损伤；细胞色素C表达及Caspase-9酶活性随时间的延长而增加,24 h酶活性达到最大峰值为(48．12±2．21)μmol·L~(-1)·h~(-1)·mg~(-1)蛋白。TRAIL诱导的线粒体损伤可被Caspase抑制剂Z-VAD．fmk所抑制。结论线粒体途径参与TRAIL诱导结肠癌细胞的凋亡过程,以Caspase依赖方式引发线粒体ΔΨm和cardiolipin丢失,造成内膜损伤,导致细胞色素C释放和Caspase-9激活,诱发凋亡。     

甲胎蛋白与肝癌细胞耐受肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体的研究进展

甲胎蛋白(AFP)是肝癌细胞合成的特异性很高的蛋白质,在临床上被认为是诊断肝癌的金标准.肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)是近年来发现的极具潜力的新型抗肿瘤药物,目前已经通过美国食品和药物管理局二期临床试验.体外研究结果表明,几乎所有的肝细胞肝癌(HCC)细胞株均对TRAIL表现出不同的耐药性[1-2],使其在肝癌的治疗方面作用有限;越来越多的证据显示,肝癌细胞合成的具有高特异性的AFP在对抗TRAIL诱导凋亡途径中的机制中起重要作用,其具体机制尚不清楚.因此探讨AFP在对抗TRAIL诱导凋亡途径中的机制,将给肝癌的治疗带来曙光.现就AFP对TRAIL诱导凋亡途径中相关分子的作用及其产生的对抗凋亡的影响进行阐述.     

TRAIL与肿瘤治疗研究进展

细胞凋亡即细胞程序化死亡在清除肿瘤细胞、自身反应性淋巴细胞和病毒感染细胞保持机体正常生理功能中起重要作用。而肿瘤坏死因子（TNF）超家族成员在诱导肿瘤细胞凋亡中发挥着重要作用，其中TRAIL（TNF－related apoptosis-inducing ligand)及其受体是近几年新发现的TNF家族新成员，其在体内、体外均显示出良好的抗肿瘤效应且对正常组织细胞无毒性，因此有望为肿瘤治疗提供新的途径。     

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体治疗肝细胞癌的研究

目的探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)与其受体在肝细胞肝癌(hepatocellularcarcinoma,HCC)中的表达及意义,及利用TRAIL对HCC的治疗作用。方法采用免疫组化技术及原位杂交方法分别检测了100例肝癌组织,100例癌旁组织,40例正常肝组织中TRAIL及TRAILR的表达,并结合临床资料进行分析;采用不同浓度TRAIL处理肝癌细胞株HepG2、SMMC7721,观察经药物处理前后肿瘤细胞的凋亡发生率。结果TRAIL在正常肝组织中无表达,癌旁组织中的表达明显高于癌组织。86例肝癌组织不表达诱捕受体DcR1(86%),55例肝癌组织不表达诱捕受体DcR2(55%),40例正常肝组织两种诱捕受体均有表达。肝癌组织中死亡受体为高表达,诱捕受体为低表达,正常肝组织则相反,两者间有显著差异性(P<0.05)。肝癌组织中死亡受体的表达与肿瘤的分化呈正相关(P<0.01),与肿瘤分级呈负相关(P<0.05),与病人的性别、年龄、AFP水平、肿瘤的大小以及是否转移无关。经TRAIL(100ng/ml)处理24h,肝癌细胞凋亡发生率约10%,而Jurkat细胞凋亡率达70%以上,胆管癌细胞QBC939凋亡发生率约50%。结论HCC时,TRAILR普遍表达,但存在受体类型的表达差异,其中DcR1大多缺失,这为利用TRAIL治疗HCC提供了理论依据,然而,单一的TRAIL治疗只能有限的诱导肝癌细胞HepG2、SMMC7721发生凋亡,HCC对TRAIL诱导的凋亡存在耐药现象。