肝细胞肝癌雄激素受体的检测

本研究应用葡萄聚糖活性炭饱和分析法（ＤＣＣ法）检测了１０例正常肝组织，１２例原发性肝细胞肝癌（ＨＣＣ）组织及其中１０例相应癌旁肝组织的雄激素受体（ＡＲ）。结果１０例男性正常肝组织内均检出了低浓度、高新合力的ＡＲ，１２例ＨＣＣ中检出ＡＲ１１例，１０例癌周肝组织检出ＡＲ４例，其中８例癌组织中ＡＲ明显高于其相应癌周肝组织，２例低于其癌周肝组织。ＨＣＣ中ＡＲ含量与年龄、ＡＦＰ、ＨＢｓＡｇ、肿瘤大小及是否有     

126例肝癌性激素受体免疫组化检测

用免疫组化PAP法检测126例肝癌中雄激素受体（AR），雌激素受体（ER）及孕激素受体（PR），其中肝细胞型肝癌（HCC）120例，胆管细胞型肝癌6例，对照组非癌肝20例，测得肝癌AR、ER、PR阳性率分别为64.29%，35.72%，26.99%。测得非癌肝AR阳性5例，ER阳性4例，PR阳性4例，两组比较AR阳性有显意义（P<0.05)，ER、PR阳性无显差异（P>0.05)。肝癌组内AR阳性较ER、PR有显差异（P<0.05)。AR阳性率与HCC关系密切，但与胆管细胞型肝癌无密切关系。本实验从免疫组化角度支持肝癌是一种雄激素依赖性肿瘤的学说。     

雄激素受体在乳腺癌组织中的表达及临床意义

目的:研究雄激素受体(AR)在乳腺癌组织中的表达及临床意义。方法:用免疫组化EnVision二步法检测AR在121例乳腺癌组织中的表达,并结合临床病理资料进行分析。结果:AR在乳腺癌组织中的阳性表达率为73.6%(89/121);AR的表达与患者年龄、组织学分类呈负相关(r=-0.262,P=0.004;r=-0.355,P=0.000),与临床TNM分期及5年生存期有统计学意义(P<0.05),但与淋巴结转移无统计学意义。AR与ER蛋白表达呈正相关(r=0.251,P=0.006)。结论:AR表达与乳腺癌的生物学行为有关,可作为乳腺癌内分泌治疗的参考和预后判断指标。     

雄激素受体、雌激素受体在肝细胞型肝癌中的免疫电镜观察

目的：观察雄激素受体（AR）与雌激素受体（ER）在肝癌和非癌肝组织超微结构上的分布。探讨AR、ER在肝癌致癌过程中的作用。方法：用免疫胶体金染色法（IGS）标记13例肝细胞型肝癌与5例非癌肝组织细胞内雄激素受体（AR）及雌激素受体（ER）,并用免疫透射电镜观察。结果：发现胶体金颗粒主要分布于线粒体双层膜和脊膜;粗面内质网;结合及游离核蛋白体;核膜及核周间隙,异染色质及常染色质等部位。统计分析表明,肝癌细胞金颗粒明显多于非癌肝细胞内金颗粒（P＜0．05）。肝癌细胞胞质、胞核AR金颗粒明显多于ER金颗粒（P＜0．05）。而非癌肝细胞胞质、胞核AR、ER金颗粒数量无显著差别（P＞0．05）。结论：提示肝癌是一种雌激素依赖肿瘤,为抗性激素治疗肝癌提供了理论依据。     

肝细胞肝癌雄激素受体的检测

本研究应用葡聚糖活性炭饱和分析法（ＤＣＣ法）检测了１０例正常肝组织，１２例原发性肝细胞肝癌（ＨＣＣ）组织及其中１０例相应癌旁肝组织的雄激素受体（ＡＲ）。结果１０例男性正常肝组织内均检出了低浓度、高亲合力的ＡＲ，１２例ＨＣＣ中检出ＡＲ１１例，１０例癌周肝组织检出ＡＲ４例，其中８例癌组织中ＡＲ明显高于其相应癌周肝组织，２例低于其癌周肝组织。ＨＣＣ中ＡＲ含量与年龄、ＡＦＰ、ＨＢｓＡｇ、肿瘤大小及是否有肝硬化无明显相关性。     

大鼠心肌组织中雄激素受体的免疫组化研究

目的 观察增龄和性腺发育对雄性大鼠心肌组织中雄激素受体密度的影响。方法 采用免疫组织化学和图像分析法检查性成熟前、成年去性腺、成年和老龄雄性大鼠心肌组织中雄激素受体密度,观察增龄及性腺对雄性大鼠心肌组织中雄激素受体密度的影响。结果 去性腺成年组心肌组织中雄激素受体的免疫反应性最高,其次为老龄组,二者均高于性成熟前组和正常成年组,后２组无显著性差异。结论 性成熟前后性腺发育对雄鼠心肌组织中雄激素受体     

肝癌患者雄激素受体的测定及其与临床病理特征关 …

应用放射配体结合分析法（ＲＢＡ）测定３６例手术治疗的肝癌组织，癌周组织及外周血白细胞雄激素受体（ＡＲ）的含量，同时用放射免疫法（ＲＩＡ）测定肝癌患者及正常人血浆雄激素（睾酮Ｔ）的水平，结合临床病理资料进行统计分析，结果（１）癌组织与癌周组织相比，ＡＲ含量明显升高（Ｐ〈０．０１），且与肿瘤地径大小有关；（２）高分化的肝癌组织ＡＲ含量明显高于低分化者（Ｐ〈０．０１）；（３）肝癌患者血浆睾酮水平轻度增加     

雄激素受体在大鼠睾丸发育过程中的表达及雌激素对其表达的调节作用

目的 研究发育不同阶段及二甲磺酸乙烷（EDS）干预的雄性SD大鼠睾丸内雄激素受体（Androgen receptor,AR)的分布、发育模式及雄激素调控。方法 采用免疫组织化学ABC法,并应用图像分析测定AR的视物平均光密度,以其表示核内AR相对含量。结果 特异性AR免疫染色见于睾丸间质细胞、肌样细胞、支持细胞、精原细胞、血管壁平滑肌细胞及内皮细胞。间质细胞中AR相对含量随大鼠年龄而变化：21d龄居中,35d龄最高,90－120d龄最低,各组间均有显著性差异（P＜0．05或P＜0．01）。肌样细胞在3个年龄组大鼠均有很强的AR表达。应用EDS消除成年大鼠内源性睾酮后,睾丸内所有AR阳性细胞的免疫染色均显著减弱,外源性睾酮替代治疗后免疫染色程度可恢复至对照组水平。结论 雄激素可促进青春期大鼠间质细胞的功能与分化;肌样细胞在精子发生过程中有重要作用;睾丸内AR的表达受内源性睾酮的调控。     

单克隆抗体检测乳腺癌雌激素受体的初步研究

应用抗雌激素受体的单克隆抗体Ｈ＿（２２２）免疫组化ＡＢＣ法检测了３１例乳腺癌雌激素受体。结果３１例中２１例阳性（６７．７４％），ＥＲ染色的阳性反应均定位于细胞核内，胞浆中无阳性反应。ＥＲ阳性率与组织学分级有关（Ｐ＜０．０５），表明ＥＲ的含量可反映肿瘤的分化程度。同时将此法与抗雌二醇血清法及亲和酶标法进行了比较，发现后两种方法的符合率较低。因抗ＥＲ单克隆抗体检测ＥＲ的特异性高，背景染色清晰，结果易判断，今后应注重抗ＢＲ单克隆抗体的开发和应用。     

雄激素受体在前列腺增生和前列腺癌组织中的表达

目的：研究雄激素受体（AR）在良性前列腺增生（BPH）和前列腺癌（PCa）组织的表达，探讨雄激素受体与良性前列腺增生和前列腺癌的关系。方法：BPH，PCa和正常对照组各20例，AR采用免疫组织化学SP法检测，用半定量方法计算结果。结果：BPH组腺上皮和间质中AR表达阳性率显著高于对照组（P＝0．0012，P＝0．0276），同时腺上皮中AR强阳性率亦高于对照组（P＝0．008），BPH组中AR在腺上皮中的表达比间质中强（P＝0．0001）。PCa组AR表达明显低于正常前列腺对照组（P＝0．027）。阳性染色颗粒主要分布在前列腺腺上皮的细胞核中，结论：AR在BPH组织中的阳性表达率高于正常前列腺组织，而在PCa组织中的阳性表达率低于正常前列腺组织，AR主要在前列腺腺上皮的细胞核中表达。     

雄激素及其拮抗剂对MCF-7乳腺癌细胞株雄激素受体表达的影响

研究药理浓度的睾丸酮对ＭＣＦ－７乳腺癌细胞株雄激素受体表达的作用，以及雄激素拮抗剂氟他胺和羟基氟他胺对该作用的影响。方法应用荧光激活细胞分离器（ＦＡＣＳ）检测雄激素受体阳性的细胞。结果１０－９～１０－６ｍｏｌ／Ｌ的睾丸酮使ＭＣＦ－７乳腺癌细胞雄激素受体表达下调；１０－６ｍｏｌ／Ｌ的氟他胺能显著拮抗睾丸酮下调雄激素受体表达的作用（Ｐ＜０．０１）；羟基氟他胺更显著拮抗睾丸酮的作用，使雄激素受体表达显著增多，并呈剂量相关性（１０－８ｍｏｌ／Ｌ时Ｐ＜０．０５；１０－６ｍｏｌ／Ｌ时Ｐ＜０．００１）。结论ＭＣＦ－７乳腺癌细胞株中雄激素受体存在自动调节，氟他胺和羟基氟他胺上调雄激素受体的表达。     

抗hAR—N段McAb的制备及其在免疫组化检测中的应用

目的：自行研制抗人雄激素受体（ａｎｄｒｏｇｅｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒ,ＡＲ）单克隆抗体（ＭｃＡｂ）,以期达到可替代国外ＡＲ多克隆抗体。方法：采用人雄激素受体合成肽（ｈＡＲ－Ｎ）交联钥孔戚血蓝素（ＫＬＨ）为抗原,免疫ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠,经用Ｄｏｈｌｅｒ和Ｍｉｌｓｔｅｉｎ杂交瘤技术成功地获得４株能稳定分泌抗ｈＡＲ单克隆抗体（ＭｃＡｂ）杂交瘤细胞株５５,１４１,２０７,２５７。结果：对４５例前列腺癌组织石蜡切     

抗人IgG单克隆抗体制备和鉴定

以人ＩｇＧ为抗原，采用杂交瘤技术获得６株不同性质的抗人ＩｇＧ单克隆抗体（ＭｃＡｂ）（ＡＩ２、ＡＩ３、ＡＩ４、ＡＩ５、ＡＩ６、和ＡＩ）。ＡＩ２ＭｃＡｂ具有抗ＩｇＧ１亚类的特异性，可识别ＩｇＧγ链和Ｆ（ａｂ＇）２片段，作用位点可能在人ＩｇＧ１铰链区。ＡＩ３ＡＩ、ＭｃＡｂ分别为ＩｇＧ３、ＩｇＧ４亚类限制性ＭｃＡｂ，可能作用于ＩｇＧＣＨ１区。ＡＩ４ＭｃＡｂ可识别χ和λ型ＩｇＧ四个亚类以及Ｆ（ａｂ＇）２片段，不识别游离χ、λ链。ＡＩ５ＭｃＡｂ特异地抗ＩｇＧ１结合型χ，作用于ＩｇＧ独特型位点。ＡＩ６ＭｃＡｂ只抗λ型ＩｇＧ，可能作用于ＩｇＧＣＬ区。６种抗人ＩｇＧＭｃＡｂ除了ＡＩ５外，均能用于人血清中ＩｇＧ的检测。     

组合单克隆抗体提高人胃癌细胞系反应性的研究

目的：将胃癌单克隆抗体（ ＭｃＡｂ） 组合提高ＭｃＡｂ 与人胃癌细胞系的反应性，为肿瘤定位诊断及导向治疗提供有效的ＭｃＡｂ 组合。方法：采用ＥＬＩＳＡ、ＦＣＭ 观察了单一胃癌ＭｃＡｂ 及组合ＭｃＡｂ 与人胃癌细胞系的反应性。结果：经ＥＬＩＳＡ、ＦＣＭ 分析单一的ＭｃＡｂ３Ｇ９ 、ＢＢ４．３ 与胃癌细胞结合的膜荧光阳性率分别为７４－２ ％ 和５４－９ ％ 。平均膜荧光强度分别为５３－６ 和６５－８。两者组合后，在相同抗体浓度下，膜荧光阳性率为９７－４ ％ （ Ｐ＜０－０１）；平均膜荧光强度为１２５－５（ Ｐ＜ ０－０１） 。结论：合理采用组合的ＭｃＡｂ 可提高ＭｃＡｂ 与人胃癌细胞系的反应性，降低抗原表达的异质性，从而提高ＭｃＡｂ 的载体效应。     

抗肺癌单克隆抗体的研制

采用新鲜肺癌组织制成的细胞悬液及肺腺癌细胞株做为免疫原,免疫Balb/c小鼠。取脾细胞与经活体增殖的无支原体污染的高活力SP2/O骨髓瘤细胞融合,联合应用酶联免疫吸附和多组织切片免疫组化染色法进行筛选,得到两株分泌对肺癌具高特异性的单克隆抗体的杂交瘤细胞株。抗体与被检测的大多数人体正常组织无交叉反应,可初步用于肺癌病理鉴别诊断。     

前列腺癌中雄激素受体基因突变的研究

应用受体的放射配基结合分析（ＲＢＡ）和多聚酶链反应单链构象多态分析（ＰＣＲＳＳＣＰ）技术对未经治疗的１６例前列腺癌和２３例前列腺增生症组织中雄激素受体的表达水平和雄激素受体基因第８外显子突变情况作检测。结果显示，前列腺癌中雄激素受体的平均水平明显高于前列腺增生症，在２例前列腺癌和１例前列腺增生症标本中检出雄激素受体基因第８外显子突变，前列腺癌中雄激素受体的表达水平与雄素受体基因突变和前列腺癌临床分期具有相关性。结果表明，在前列腺癌中雄激素受体有过量表达，有必要对雄激素受体基因突变与前列腺癌和前列腺增生症的关系做进一步研究。     

抗人心肌肌凝蛋白轻链Ⅰ单克隆抗体的制备和鉴定

以人心肌肌凝蛋白轻链I免疫Balb/c小鼠,取其脾淋巴细胞与NS-1细胞融合,经过筛选、克隆化和再克隆已获得3-D_3、2-D_9、1-E_(10)和2-E_(10)等4个分泌特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞株。经免疫酶标和放免方法测定抗体工作滴度为1:1万。流动式荧光密度计检测NS-1、小鼠脾和杂交瘤细胞DNA的含量,结果表明杂交瘤细胞的DNA含量相当于NS-1和小鼠脾细胞DNA含量之和。杂文瘤细胞传代半年以上稳定地分泌特异性的单克隆抗体。用两个单抗进行了抗原双决定簇的放免測定,并制备了高效价的小鼠腹水。     

抗人Hb单克隆抗体的制备与鉴定

用超声波快速乳化人Ｈｂ，作为抗原免疫ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠，取其脾细胞与Ｓｐ２／０骨髓瘤细胞经离心ＰＥＧ法融合，微波ＥＬＩＳＡ筛选阳性克隆，获得三株分泌针对人Ｈｂ不同抗原位点的单克隆抗体杂交瘤细胞系。分别命名为Ｈｂ２６４、Ｈｂ２１０和Ｈｂ２３８。其中Ｈｂ２６４能特异识别人Ｈｂ的β链而不与动物Ｈｂ交叉反应；解离常数Ｋｂ为１．６×１０￣（－８）ｍｏｌ／Ｌ，ＩｇＧ＿（２ａ）。Ｈｂ２１０能结合人Ｈｂ的α链，可被猪Ｈｂ抑制，但亲合力低１００倍；Ｋｄ（人Ｈｂ）为２．８×１０￣（－８）ｍｏｌ／Ｌ；Ｋｄ（猪Ｈｂ）为３．０×１０￣（－４）ｍｏｌ／Ｌ；ＩｇＧ＿（２ｂ）。Ｈｂ２３８是两个脾细胞与一个Ｓｐ２／０细胞融合而成的三体瘤（ｔｒｉｏｍａ）；染色体１３２条；Ｈｂ２３８单克隆抗体可同人Ｈｂ的α和β链结合，Ｋｄ（人Ｈｂ）为８．９×１０￣（－５）ｍｏｌ／Ｌ；ＩｇＧ＿（２ａ）；经分析鉴定，Ｈｂ２３８是针对人Ｈｂα和β链的双特异性抗体。本方法对免疫学隐血检测、法医学鉴定和双特异抗体的研制有一定意义。     

前列腺组织雄激素受体的测定方法

建立雄激素受体测定的放射配基结合分析法测得人前列腺组织中胞浆胞核雄激素受体均可被约5x10~(-9)mol/L的双氢睾酮饱和,其最大结合客量(B(-max))及平衡解离常数(Kd)分别为:胞浆129.4x10(-15)mol/mg,0.88x10(-9)mol/L;胞核176.2x10~(-15)mol/mg,3.2x10~(-9)mol/L。人前列腺癌胞浆、胞核雄激素受体均高于正常前列腺(n=3)及前列腺肥大者(n=32)。用融裱法放射自显影证实雄激素受体主要分布在前列腺组织的腺区,尤其是在腺上皮细胞核内。     

雌雄激素受体在增生结节及肝癌的表达

对４２例肝癌及癌旁组织中雌激素受体（ＥＲ）和雄激素体（ＡＲ）的表达进行了观察。结果表明，ＥＲ和ＡＲ在癌旁组织、增生结节及肝癌３种组织中，ＥＲ的阳性表达分别为２５例、１２例及２４例，ＡＲ的阳性表达分别为２８例、８例及２３例；癌旁正常肝组织、肝硬化组织中的嗜酸性毛玻璃样肝细胞及嗜酸性细胞结节ＥＲ及ＡＲ染色较正常肝细胞染色深；ＥＲ及ＡＲ的阳性表达在不同组织分化程度和不同性别间无明显差异（Ｐ＞０．０５），不同组织的ＥＲ和ＡＲ阳性表达之间无明显差异（Ｐ＞０．０５）。提示嗜酸性毛玻璃样肝细胞为性质改变的肝细胞，嗜酸性细胞结节为肝癌的癌前期病变。