羟胺对慢性低氧高二氧化碳大鼠肺动脉高压的影响

目的: 探讨羟胺(HA)对慢性低氧(O₂)高二氧化碳(CO₂)大鼠肺动脉压的影响。方法: 24只清洁级雄性SD大鼠随机分为3组(每组8只):正常对照组(NC)、低O₂高CO₂+生理盐水组(NS)和低O₂高CO₂+HA组(HA),NS组和HA组置于常压低O₂高CO₂舱内(舱内O₂浓度维持在9%-11%,CO₂浓度为5%-6%),每天8 h,每周6 d,共4周。入舱前,HA组腹腔注射HA溶液(12.5 mg/kg)1 mL,NS组腹腔注射1 mL生理盐水。4周后,戊巴比妥钠(35 mg/kg)腹腔注射麻醉,以右心导管测定大鼠肺动脉平均压(mPAP),分离右心室(RV) 和左心室加室间隔(LV+ S),计算右心室重量与左心室加室间隔重量的比值 ,以光学显微镜观测肺血管结构变化,用分光光度计测定血浆中硫化氢(H₂S)的水平,用免疫组织化学方法及RT-PCR技术观察肺小动脉及支气管胱硫醚-γ-裂解酶(CSE)的表达。结果: (1)与NC组相比:NS组和HA组的mPAP、RV/(LV+S)、肺细小动脉管壁面积/管总面积比值(WA/TA) 和肺细小动脉中膜厚度(PAMT)明显升高(P<0.05);NS组的血浆中H₂S水平、肺小动脉及支气管CSE的含量和CSE mRNA的表达显著降低(P<0.05)。(2)与NS组相比:HA组的mPAP、RV/(LV+S)、肺小动脉管壁面积/管总面积比值(WA/TA) 和肺小动脉中膜厚度(PAMT)明显降低(P<0.05);血浆中H₂S水平、肺小动脉及支气管CSE的含量和CSE mRNA的表达显著升高(P<0.05)。结论: 羟胺通过提高血浆中H₂S的水平、肺小动脉及支气管CSE的含量和CSE mRNA的表达和改善肺部血管重构,降低慢性低O₂和高CO₂所致的大鼠肺动脉高压。     

The pathophysiological basis of chronic hypoxic pulmonary hypertension in the mouse: vasoconstrictor and structural mechanisms contribute equally

Chronic hypoxic pulmonary hypertension is characterized by a sustained increase in pulmonary arterial pressure due to abnormally elevated pulmonary vascular resistance. This increased vascular resistance was previously thought to be due largely to changes in the structure of the pulmonary vasculature, i.e. lumen narrowing due to wall hypertrophy and loss of vessels. Recently, this model has been challenged by the demonstration that hypoxic pulmonary hypertension in the rat is caused almost completely by sustained vasoconstriction. The contribution of this vasocontriction to hypoxic pulmonary hypertension has not been examined directly in other species. We exposed groups of mice to hypoxia (10% O(2)) or normoxia for 3 weeks, following which the lungs were removed post mortem, and vascular resistance was measured in an isolated, ventilated, perfused preparation. Mean pulmonary vascular resistance was significantly increased in hypoxic compared with control normoxic lungs. The rho kinase inhibitor Y27635 (10(-4)m) (Tocris Bioscience, Bristol, United Kingdom.) significantly reduced the mean (± SEM) hypoxia induced increase by 45.4 (10.8)%, implying that structural vascular changes acounted for the remainder of the hypoxic increase. Stereological quantification showed a significant reduction in the mean lumen diameter of the fully relaxed vessels in hypoxic lungs compared with normoxic control lungs; there was no intra-acinar vessel loss. Thus, in contrast to the rat, hypoxic pulmonary hypertension in the mouse is due to two mechanisms contributing equally: sustained vasoconstriction and structural lumen narrowing of intra-acinar vessels. These important species diferences must be considered when using genetically mutated mice to investigate the mechanisms underlying pulmonary hypertension.     

高镁饮食对大鼠缺氧性肺血管收缩反应和慢性缺氧性肺动脉高压的影响

本课题观察了高镁饮食对大鼠缺氧性肺血管收缩反应(HPV)和慢性缺氧性肺动脉高压的影响。大鼠进高镁饲料(每公斤普通饲料加镁1000mg)10周后,血浆镁浓度为2.58mEq/L,显著高于对照组大鼠的血浆镁浓度。慢性常压缺氧(吸入气含10%O_2,每天8小时,连续14天)后,与缺氧对照大鼠相比,进高镁饲料盼大鼠的平均肺动脉压(Ppa)和肺血管阻力(PVR)较低,肺血管对缺氧的反应性(△PVR%)较低,同时右心室肥大也较轻。血粘度和红细胞比积在慢性常压缺氧后均增高,但进高镁饲料大鼠的血粘度和红细胞比积与缺氧对照组大鼠无差别。结果表明,镁可以降低PVR和HPV,从而缓解由慢性缺氧引起的肺动脉高压和右心室肥大。     

低氧性肺动脉高压和慢性支气管炎、肺气肿并肺动脉高压动物模型的异同

目的 比较低氧性肺动脉高压与慢性支气管炎、肺气肿并肺动脉高压动物模型的异同,为研究慢性阻塞性肺疾病中肺动脉高压形成机制提供良好的实验模型.方法 24只雄性SD大鼠随机纳入10%低氧组(A组)、慢性支气管炎、肺气肿并肺动脉高压组(B组)及正常对照组(C组),8只/组.吸入10%氧2周制作A组,气管内注入脂多糖和每天烟熏混合刺激加18%低氧制作B组模型.各组测定血气分析、肺血流动力学并对肺泡灌洗液行白细胞计数、分类.肺组织HE染色或三联染色后观测气道炎症和肺血管重构的病理形态学改变.结果 (1)与C组比较,A、B组右心室收缩压、平均肺动脉压、右心室与左心室+室间隔重量比升高,腺泡内肌化型动脉增多、管壁增厚(P＜0.05).(2)BALF分析A组白细胞总数与C组差异无显著性(P＞0.05);B组白细胞总数及中性粒细胞增多(P＜0.05).(3) A组气道炎症以上皮细胞变性坏死、黏液杯状细胞增生为主,炎细胞浸润不明显.B组气道炎症符合慢性支气管炎、肺气肿改变,管壁呈现以淋巴细胞为主的多种炎细胞浸润.结论 B组同时体现了慢性气道炎症、肺气肿改变和肺血管重构的特征,更适合用于慢性阻塞性肺疾病中肺动脉高压形成机制的研究.     

ERK通路和三七总皂苷干预在低氧高二氧化碳性肺动脉高压中的作用

目的: 研究 ERK 信号通路在大鼠低氧高二氧化碳性肺动脉高压发生发展中的动态变化;探讨三七总皂苷(PNS)防治低氧高二氧化碳性肺动脉高压的机制。方法: 复制慢性低氧高二氧化碳性肺动脉高压大鼠模型;分为正常(N)组,低氧高二氧化碳性肺动脉高压3 d(H_3d)、1周(H_1w)、2周(H_2w)、4周(H_4w)组及PNS治疗(H_p)组,H_p组腹腔注射三七总皂甙注射液,余组注射等量生理盐水;光镜下比较各组大鼠肺细小动脉结构;Western 印迹法和免疫组织化学技术检测各组肺组织及肺血管 p-ERK、ERK 蛋白的表达。结果: (1) H_1w、H_2w、H_4w和H_p组的肺细小动脉管壁面积/管总面积(WA/TA) 均高于N组(均P<0.05), 但 H_3d 组较N 组增加不明显(P>0.05),H_p组 WA/TA 明显低于 H_4w 组(P<0.05)。 (2) 肺组织 p-ERK蛋白在 N 组表达不明显,在 H_3d 组表达即开始上升,在 H_1w、H_2w、H_4w 组均高水平表达 ( P<0.05)。 (3) 肺小动脉壁 p-ERK 蛋白在N组表达呈弱阳性或阴性,H_3d 组表达上升,在 H_1w、H_2w、H_4w 组表达水平逐渐升高( P<0.05)。(4) H_p组肺组织 p-ERK 蛋白、肺小动脉壁 p-ERK 蛋白表达较低氧高二氧化碳组降低(P＜0.05)。结论: ERK 信号通路可能介导了大鼠低氧高二氧化碳性肺动脉高压的形成。PNS 可能通过抑制p-ERK表达减轻这一过程。     

血栓素合酶和前列环素合酶基因表达与慢性低O2高CO2性肺动脉高压的关系

目的:研究血栓素合酶(TXS)和前列环素合酶(PGI₂-S)基因表达变化与慢性低氧高二氧化碳性肺动脉高压的关系。方法:将SD大鼠分为正常对照组,4周低O₂高CO₂组。观察两组大鼠肺动脉平均压(mPAP)、右心指数、肺细小动脉显微及超微结构改变,肺细小动脉血栓素合酶和前列环素合酶的基因表达变化。结果:低O₂高CO₂组mPAP、右心指数、血浆及肺匀浆TXB₂和6-keto-PGFl_α含量、肺动脉管壁TXSmRNA表达皆显著高于正常对照组(P<0.01),而肺动脉管壁PGI₂-SmRNA表达无明显变化;低O₂高CO₂组内弹力板扭曲,中膜平滑肌细胞增生,管腔明显狭窄。结论:血栓素合酶和前列环素合酶基因表达变化所导致的TXA₂和PGI₂平衡失调可能在慢性低氧高二氧化碳肺动脉高压形成中起重要作用.     

三七总皂甙对慢性低氧性肺动脉高压大鼠的防治作用

目的:探讨三七总皂甙(PNS)对慢性常压低氧性肺动脉高压大鼠的防治效果及其机制。方法: 将雄性SD大鼠随机分为:正常对照组(C组)、单纯低氧组(H组)、低氧+PNS组(HT组)。进行血流动力学、红细胞比积(Hct)、透射电镜和有关生化指标检测。结果:(1)H组平均肺动脉压(mPAP)、平均右室压(RVMP)和Hct显著高于C组而HT组显著低于H组;(2)H组血浆、肺匀浆一氧化氮(NO₂^-/NO₃^-)含量、一氧化氮合酶(NOS)活性及血浆总超氧化物歧化酶(T-SOD)、铜/锌超氧化物歧化酶(Cu/ZnSOD)活性显著低于C组, HT组显著高于H组,但HT组血浆、肺匀浆NO₂^-/NO₃^-、NOS仍显著低于C组;(3) HT组肺小动脉内皮细胞损伤显著轻于H组 。结论: 三七总皂甙可抑制大鼠慢性低氧性肺动脉高压的形成,其机制可能与其调节NO含量、抗氧自由基损伤、减轻细胞损伤和降低红细胞比积有关。     

尼群地平对急性低氧肺动脉高压的影响研究

本文报道实验性氧性肺动脉高压（猪）模型在低氧前后及低氧静脉注射小剂量尼群地平后，肺循环，体循环动力学，血管紧张素转换酶（ＡＣＥ），血管紧张素Ⅱ（ＡＴⅡ），血浆肾素活性（ＰＲＡ），血栓素Ａ２（ＴＸＡ２），前列环素（ＰＧＩ２）及血中乳酸含量的变化，结果显示：低氧后，肺动脉压及肮血管阻力增高，右心作功指数，ＰＲＡ，ＡＴⅡ，ＴＸＡ２升高，ＡＣＥ及ＰＧＩ２降低，ＴＸＡ２／ＰＧＩ２升高，静注尼群地平后，肺动脉     

牛磺酸对大鼠慢性缺氧性肺动脉高压的预防作用

目的：进一步研究牛磺酸对慢性缺氧性肺动脉高压的防治作用。方法：复制大鼠间断缺氧４周模型,采用透射电镜、放射免疫和生化技术研究牛磺酸对肺动脉高压的治疗效果。结果：缺氧４周大鼠肺动脉压力升高,右心肥大,血中ＥＴ－１、ＡＣＥ水平升高,ＮＯ－２／ＮＯ－３和ＳＯＤ水平降低;ＭＰＡＰ与ＥＴ－１呈正相关,与ＮＯ－２／ＮＯ－３呈负相关;牛磺酸可抑制缺氧大鼠ＥＴ－１和ＡＣＥ分泌,增加ＮＯ和ＳＯＤ水平,降低肺动脉压力;透射电镜观察表明牛磺酸能对抗缺氧大鼠的心肺组织损伤。结论：牛磺酸通过减轻缺氧所致细胞损伤,调节血管舒缩物质的平衡,对缺氧性肺高压有一定防治作用。     

不同食用油对大鼠肺血管反应性和慢性低氧性肺动脉高压的影响

本研究观察了豆油和猪油对大鼠肺血管反应性和慢性低氧性肺动脉高压的影响。大鼠进高脂饮食2月后,常压缺氧14天。缺氧时吸入气O_2浓度为10±0.5%,每天缺氧8小时。结果喂含15%豆油的高脂饮食的大鼠的平均肺动脉压<(?)pa,肺血管阻力(PVR)和肺血管对急性缺氧的反应性(△PVR%)均显著高于缺氧对照组,右心室肥大也较缺氧对照组严重。喂含15%猪油的高脂饮食或含7.5%豆油加7.5%猪油的高脂饮食的大鼠的Ppa,PVR,△PVR%以及右心室肥大程度与缺氧对照组大鼠无明显差别。血粘度和红细胞压积在慢性常压缺氧后均增高,但不同的高脂饮食对其影响不大。实验结果提示,富含豆油的高脂饮食增强大鼠的低氧性肺血管收缩反应,加重慢性低氧性肺动脉高压和右心室肥大。     

磷脂酶A2活性与慢性常压低氧性肺动脉高压关系的研究

目的:研究磷脂酶A₂(PLA₂)活性及其相关炎症介质在大鼠慢性常压低氧性肺动脉高压形成中的作用。方法:29只健康SD大鼠随机分为正常对照组、单纯低氧组和低氧加白藜芦醇苷(PD)组。右心导管法检测大鼠肺动脉压力(mPAP),观察右室/左室+室间隔比值(R/L+S)、血浆和肺匀浆中PLA₂、血栓素B₂(TXB₂)、6-酮-前列腺素F_1α(6-k-PGF_1α)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)水平的变化。结果:低氧3周后大鼠mPAP、R/L+S、血浆及肺匀浆中PLA₂活性、TXB₂、MDA含量显著升高;6-k-PGF_1α、SOD水平下降。用PD预处理后可减轻上述变化。结论:PLA₂通过相关炎症介质及与自由基的相互作用在慢性低氧性肺动脉高压的形成中起着重要的介导作用。     

慢性低氧性肺动脉高压大鼠肾上腺髓质素前体N端20肽的变化

目的：探讨慢性低氧性肺动脉高压和肺血管结构重建时肾上腺髓质素前体N端20肽（PAMP）的变化。方法:将18只雄性Wistar大鼠随机分为对照组和低氧组，每组各9只。常压低氧2周后，以右心导管法测定肺动脉平均压（mPAP），检测右心室与左心室加室间隔比值 ［RV/(LV+S)］，观测肺血管显微和超微结构的变化。并且以放免法测定血浆中PAMP含量，以免疫组化法检测肺组织中PAMP表达，以原位杂交检测肺组织中肾上腺髓质素（ADM） mRNA的表达。结果: 低氧组大鼠mPAP及RV/（LV+S）均明显高于对照组（均P<0.01）。光镜下，肺小血管肌化程度明显增强，肺中、小型肌型动脉相对中膜厚度明显增加。电镜下，肺腺泡内动脉内皮细胞增生、肿胀，内弹力层粗细不均，平滑肌细胞肥厚、向合成表型转化。并且低氧组大鼠血浆PAMP含量明显高于对照组（P<0.01），肺动脉PAMP表达和ADM mRNA表达均明显增强。结论：低氧后肺动脉PAMP表达和血浆PAMP含量的上调可能参与了慢性低氧性肺动脉高压和肺血管结构重建的形成。     

低O_2高CO_2性肺动脉高压时大鼠肺组织硫化氢体系的变化及川芎嗪的干预

目的:研究低O2高CO2性肺动脉高压时大鼠肺组织内硫化氢体系的变化及川芎嗪对其的干预作用。方法:将30只SD大鼠随机分为3组,每组10只。正常对照组(C组)、低O2高CO2组(HH组)、低O2高CO2+川芎嗪组(HH+LTZ组)。监测其血流动力学变化,光镜观察肺细小动脉管壁面积/管总面积比值(WA/TA),检测右心室/左心室+室间隔(RV/LV+SP)比值,原位缺口末端标记法(TUNEL法)观测肺细小动脉凋亡情况,并计算凋亡指数。敏感硫电极法测定血浆H2S含量及肺组织匀浆胱硫醚-γ-裂解酶(CSE)活性变化。RT-PCR法测定肺组织中CSE基因表达水平。结果:HH组的肺平均动脉压(mPAP)、WA/TA、RV/LV+SP明显高于C组,HH+LTZ组明显低于HH组(均P0.01);3组的平均颈动脉压(mCAP)无明显差异(P0.05)。TUNEL法测得HH组、HH+LTZ组的肺细小动脉凋亡指数(AI)显著低于C组(P0.01),HH+LTZ组肺细小动脉凋亡指数显著高于HH组(P0.05)。血浆硫化氢(H2S)含量、肺组织匀浆胱硫醚-γ-裂解酶(CSE)活性、肺组织CSE基因表达水平,HH组明显低于C组(P0.01),HH+LTZ组明显高于HH组(P0.01)。结论:川芎嗪可能通过上调CSE基因表达,增加CSE的活性,提高H2S水平,从而降低低O2高CO2性肺动脉高压。     

肾上腺髓质素缓解大鼠低氧性肺动脉高压

目的探讨肾上腺髓质素(ADM)对大鼠低氧性肺动脉高压的防治作用及机制。方法雄性Wistar大鼠18只,分为对照组、低氧组和低氧 ADM组,每组6只。持续皮下注射ADM1-50后,测定平均肺动脉压(mPAP)、右心室肥大指数RV/(LV S)、肺小动脉病理及形态计量学和体循环平均压(mSBP),放免法测定肺动脉血浆ADM水平,原位杂交测定肺动脉ADMR mRNA的表达。结果①低氧组大鼠mPAP,RV/(LV S),管壁厚度与血管外径比值(MT%)及管壁面积与血管面积比值(MA%)均显著升高(P<0.01);ADM组显著缓解以上变化(P<0.01)。②低氧组与低氧 ADM组肺动脉血浆ADM浓度均高于对照组,且低氧 ADM组较低氧组ADM浓度低(P<0.05)。③低氧组与低氧 ADM组的ADMR mRNA表达较对照组增强(P<0.01)。结论持续皮下注射ADM对慢性低氧所致的肺动脉高压及肺血管重塑有预防和部分逆转作用。     

慢性低氧性肺动脉高压大鼠肺组织P53表达增高

目的观察P53在低氧性肺动脉高压大鼠肺组织中的表达。方法采用减压低氧方法复制大鼠慢性低氧性肺动脉高压模型;取肺组织,常规SABC免疫组化法染色和Hoechst染色,观察P53表达的变化及细胞凋亡变化。结果P53在慢性肺动脉高压大鼠肺小动脉壁中有少量表达,其中低氧3周组>低氧2周组>正常组。Hoechst染色显示肺组织凋亡细胞增加,其变化趋势与P53的表达变化趋势相同。结论在慢性低氧性肺动脉高压形成过程中,肺小动脉壁发生了增殖和凋亡,程度随低氧时间的延长而增加,同时P53表达增多,提示P53参与了慢性低氧性肺动脉高压肺小血管重建的调控。     

慢性低氧性肺动脉高压大鼠肺内肺动脉中尾加压素Ⅱ的变化

本实验旨在研究尾加压素Ⅱ（uⅡ）在慢性低氧性肺动脉高压及肺血管结构重构形成中的变化。应用免疫组化技术对慢性低氧性肺动脉高压大鼠不同节段肺内动脉uⅡ蛋白表达进行定位及半定量分析。结果显示：低氧1周和2周组大鼠肺动脉平均压（mPAP）、右心室肥厚指标R／（L＋S）、肺动脉相对中膜面积（RMA）和相对中膜厚度（RMT）均明显高于对照组（P＜0.001）。低氧2周组大鼠各节段肺内动脉内皮细胞中uⅡ表达较对照组分别下降27.75%、32.50%、39.63%（P均＜0.01）。相关分析显示：与呼吸性细支气管伴行的肺动脉内皮细胞uⅡ表达与mPAP呈显著负相关；各节段肺动脉内皮细胞uⅡ表达分别与各级肺动脉RMA、RMT呈明显负相关（P均＜0.05）。研究表明：低氧性肺动脉高压及肺血管结构重构形成过程中，肺内动脉内皮细胞uⅡ表达呈现明显下调；推测uⅡ在慢性低氧性肺动脉高压形成机制中具有重要的病理生理意义。     

Recovery from hypoxic pulmonary hypertension in rats

To characterize the time frame of changes in pulmonary arterial pressure, right ventricular hypertrophy and morphology of small pulmonary arteries male Wistar rats were exposed to isobaric hypoxia (3 weeks, F1O2 0.1) and then let to recover on air for 1 or 5 weeks. Normoxic animals (group N) served as controls. Mean pulmonary arterial pressure (PAP), ratio of the weight of the right heart ventricle to the sum of the weights of the left ventricle and septum (RV/LV+S) and percentage of double laminated pulmonary vessels ( % DL) were measured at the end of hypoxic exposure (group H), after 1 or 5 weeks of recovery (groups 1R and 5R), and in controls kept in air (group N). Three weeks in hypoxia resulted in increase in PAP, RV/LV+S and % DL. After 1 week of recovery RV/LV+S normalized, PAP decreased, while % DL did not change. After 5 weeks in air PAP returned to control values and % DL diminished significantly but did not normalize. Our results suggest that recovery depends on the degree of HPH and that knowledge of the time-frame of recovery is important for future studies in our rat model.     

牛磺酸抗缺氧及防治肺动脉高压的研究及其细胞机制初探

目的通过动物模型观察牛磺酸对缺氧性肺动脉高压的治疗作用,同时观察其对体外培养牛肺动脉平滑肌细胞(PASMC)和内皮细胞(PAEC)增殖的影响。方法采用模拟高原5 000 m制作缺氧大鼠模型,缺氧2周。设平原(C组)及缺氧对照组(H组),观察牛磺酸治疗后(T组)的肺动脉压(mPAP)、血浆乳酸脱氢酶(LDH)活性、脂质过氧化产物丙二醛(MDA)、肺匀浆一氧化氮(NO)含量、右心室肥大指数的变化。体外培养PASMC和PAEC用3H-TdR掺入法比较牛磺酸对缺氧PASMC和PAEC增殖的影响。结果H组大鼠LDH活性升高为C的10.1倍(P<0.01);肺匀浆NO含量降低为C组的32%(P<0.01);血浆MDA含量显著升高为C组的1.64倍(P<0.01);mPAP显著增高,约为C组的2.74倍(P<0.01);右心室肥大指数是C组的1.56倍(P<0.01)。T组与H组相比较:LDH活性、血浆MDA、右心室肥大指数均显著降低(P<0.01);mPAP显著降低(P<0.05)。高浓度(10～20 mmol/L)的牛磺酸抑制缺氧内皮及平滑肌细胞的3H-TdR掺入,而低浓度的牛磺酸促进缺氧时PAEC的3H-TdR掺入(P<0.05),抑制缺氧时PASMC的3H-TdR掺入(P<0.05)。结论牛磺酸有抗缺氧及防治肺动脉高压的作用。缺氧抑制内皮细胞的增殖而促进平滑肌细胞的增殖,适当剂量的牛磺酸可以对抗缺氧对PAEC和PASMs的作用:减弱缺氧对PAEC的增殖抑制作用,抑制缺氧的促PASMC增殖作用,使之接近常氧水平。这可能是牛磺酸防治肺动脉高压的细胞机制。提示牛横酸对于高山病缺氧性肺血管收缩和血管结构改建的预防和治疗,可能具有广阔的应用前景。     

缺氧性肺动脉高压时一氧化氮合酶,左旋精氨酸及亚硝基左旋？…

研究一氧化氮在缺氧肺动脉高压发病中的作用。方法烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸－黄递酶和免疫组化ＡＢＣ方法检测原生型和诱型一氧化氮合酶在正常和缺氧在鼠肺内的表达和分布。