从再生障碍性贫血患者检出阵发性睡眠性血红蛋白尿症异常…

目的 探讨在再生障碍性贫血患者中检出阵发性睡眠性血红蛋白症异常细胞的发生率。方法：用荧光标记的抗ＣＤ５９抗体，以流式细胞仪检测缺失ＣＤ５９的异常细胞。结果：１０名正常人骨髓单个核细胞及外周血红细胞和中性粒细胞的ＣＤ５９标记率均〉９５％。２３例再障患者中红２／３标记率正常，另外１／３患者的标记率有不同程度的减低。     

再生障碍性贫血、阵发性睡眠性血红蛋白尿症和难治性贫血的临床分析

再生障碍性贫血 (再障 )、阵发性睡眠性血红蛋白尿症(ＰＮＨ)及骨髓增生异常综合征 (ＭＤＳ) ,临床表现有许多相似处 ,极易混淆。为探讨其间关系 ,我们回顾性分析 92例再障 ,8例ＰＮＨ和 2 4例难治性贫血 (ＭＤＳ ＲＡ)的临床和血液学特点。病例和方法1　病例　 1 996年 1月～ 2 0 0 0年 1 2月住我院确诊再障、ＰＮＨ和ＭＤＳ共 1 2 4例作回顾性分析。男 54例 ,女 70例 ,年龄 1 4～ 80岁 (中位数 39岁 )。其中 92例再障包括慢性再障 (ＣＡＡ)78例 ,重型再障 (ＳＡＡ) 1 4例 ,初治 50例 ,复治 42例 ,ＳＡＡ都为初治 ,8例ＰＮＨ和 2 4例ＭＤＳ…     

阵发性睡眠性血红蛋白尿症患者骨髓正常及异常造血细胞增殖及生存特性初探

目的：探讨阵发性睡眠性血红蛋白尿症（ＰＮＨ）患者正常及异常造血细胞的增殖及生存特性。方法：用ＣＤ５９单抗及羊抗鼠ＩｇＧ免疫磁珠将６例患者骨髓单个核细胞（ＢＭＭＮＣ）分选为ＣＤ５９＋及ＣＤ５９－两群，分别进行体外培养并与正常对照比较。结果：ＰＮＨ患者ＣＤ５９＋及ＣＤ５９－ＢＭＭＮＣ的体外增殖及生存能力均弱于正常ＢＭＭＮＣ；患者体内“正常”的ＣＤ５９＋ＢＭＭＮＣ生长能力反较异常的ＣＤ５９－细胞显著降低；患者ＣＤ５９＋细胞培养后出现ＣＤ５９抗原的丢失，正常对照则无此改变。结论：ＰＮＨ患者ＢＭＭＮＣ中ＣＤ５９－的异常造血细胞具有相对的生长优势，ＣＤ５９＋的ＢＭＭＮＣ并非真正“正常”，可能存在尚未明了的某种缺陷；ＰＮＨ发病机制复杂，异常细胞除可因ＰＩＧ－Ａ基因突变产生外，还可能因ＧＰＩ蛋白的丢失而产生。     

70例成人阵发性睡眠性血红蛋白尿症临床分析

目的:探讨我国PNH患者的临床特征.方法:对我院2000年1月至2009年12月期间诊治的70例PNH患者临床资料进行了回顾性分析,并总结其临床表现、实验室检查特点、并发症、生存率及预后影响因素.结果:70例PNH患者的中位发病年龄为37岁(18-73岁),其中男41例,女29例,临床表现包括乏力(87.1％),血红蛋白尿(44.3％),感染(22.9％),出血(37.1％)和腹痛(2.9％);56例患者(80％) FHb(游离血红蛋白)大于50mg/L,54例患者(77.1％)Hp(结合珠蛋白)小于0.5 g/L和49例患者(70.0％) LDH水平大于220 U/L.患者并发症包括:再发的腹痛(2.9％)、感染(30.0％)、血栓事件(8.6％)、进展为MDS/AML(5.7％)、结石(11.4％)及死亡(17.1％).经Kaplan-Meier法计算出的10年总体生存率为72.2％.单因素和多因素分析显示:血栓事件、进展为骨髓增生异常综合征和/或急性髓系白血病(MDS/AML)和再发的感染为影响生存的不良预后因素.结论:本研究详细描述了我国成人PNH患者临床特征及预后因素,有助于更深入的认识此疾病,尤其是对预后因素的研究有助于评估本病的治疗效果.     

阵发性睡眠性血红蛋白尿症实验室诊断

阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)是一种后天获得 的血细胞膜缺陷的克隆性疾病,临床上可表现血管内溶 血、栓塞、全血细胞减少等,有时可出现骨髓衰竭[1]。现 已证实,大多数PNH患者异常克隆与正常造血并存,使本 病的诊断和发病机制的研究受到限制。PNH患者红细胞 膜表面缺乏加速衰变因子(DAF,CD55)、反应性溶血的膜 抑制物(MIRL,CD59)和C8结合蛋白(或称同种限制因 子,HRF)等,使红细胞对补体敏感而溶血。上述3种蛋 白都经糖基化磷脂酰肌醇(GPl)连接在细胞膜上[2]。近 年来,由于各种检测技术的发展使得PNH发病机制的研 究、PNH…     

阵发性睡眠性血红蛋白尿症实验室诊断

阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)是一种后天获得的血细胞膜缺陷的克隆性疾病,临床上可表现血管内溶血、栓塞、全血细胞减少等,有时可出现骨髓衰竭。现已证实,大多数PNH患者异常克隆与正常造血并存,使本病的诊断和发病机制的研究受到限制。PNH患者红细胞膜表面缺乏加速衰变因子(DAF,CD55)、反应性溶血的膜抑制物(MIRL,CD59)和C8结合蛋白(或称同种限制因子,HRF)等,     

阵发性睡眠性血红蛋白尿症的临床进展

随着FLAER高灵敏度流式细胞仪诊断技术和补体c5单克隆抗体的应用,许多学者对阵发性睡眠性血红蛋白尿症（PNH）的认识发生了改变。这些新的研究成果表明,人源型抗c5单克隆抗体的治疗能改变PNH的自然痛史,能从根本上减少血栓栓塞、控制血管内溶血、减少或消除输血的需求,减少了疾病相关的死亡率。本文对PNH和骨髓衰竭症之间的关系、抗c5单克隆抗体治疗PNH的长期疗效、控制PNH血管内和血管外溶血的新治疗策略进行综述。     

自身免疫性溶血性贫血伴阵发性睡眠性血红蛋白尿症一例

患者,女性,30岁。因苍白、乏力、活动后心悸10d ,发热伴四肢肌肉、关节疼痛3d ,于2 0 0 3年1月1日住院。查体:体温38℃,重度贫血貌,浅表淋巴结不大,巩膜黄染。心肺未见异常,肝、脾肋缘下未触及。血常规:Hb 4 1g L ,WBC 19.7×10 9 L ,BPC 190×10 9 L ,Ret0 .15 0。尿常规:尿胆原33μmol L ,余未见异常。肝功能:ALT 72U L ,总胆红素36 .1μmol L ,间接胆红素32 μmol L。Coombs试验直接阳性,分型:IgG( )、IgA( )、IgM (- )、C3c(- )、C3d(- ) ,自身抗体( )。Ham试验( )、蔗糖溶血试验( )、冷凝集素试验(- )、尿Rous试验(- )。流…     

阵发性睡眠性血红蛋白尿症研究近况

阵发性睡眠性血红蛋白尿症研究近况杨仁池综述郝玉书审校阵发性睡眠性血红蛋白尿症（ＰＮＨ）是一种后天获得性血细胞膜缺陷的克隆性疾病，典型病例以慢性血管内溶血为特征。大多数ＰＮＨ患者异常克隆与残余正常造血并存，使本病的发病机制研究受到限制。已知ＰＮＨ患者红...     

CD59和阵发性睡眠性血红蛋白尿

ＣＤ５９是血细胞表面的一种糖基磷脂酰肌醇锚连蛋白，具有抑制补体激活的作用。阵发性睡眠性血红蛋白尿（ＰＮＨ）患者血细胞表面可存在ＣＤ５９等描连蛋白的缺陷，用流式细胞仪检测血细胞表面ＣＤ５９等锚连蛋白的表达有助于ＰＮＨ的诊断，随访和治疗。本文重点综述了流式细胞仪检测ＣＤ５９在ＰＮＨ诊断，治疗中的最新进展。     

再障和溶贫患者CD59抗原的表达及其意义

目的 探讨补体调节蛋白(CRP)-CD59在再生障碍性贫血(AA)以及溶血性贫血患者外周血血细胞中的变化,并分析其在这两类疾病中的临床意义。方法 用异硫氰酸酯(FITC)标记单抗CD59,应用流式细胞术分析21例再障患者、4例阵发性血红蛋白尿症(PNH)患者、5例非-PNH的溶血性贫血患者的红细胞和中性粒细胞膜CD59的表达情况。结果 正常人红细胞和中性粒细胞中CD59^ 细胞的平均比例分别为98．5％和99．3％,非-PNH患者分别为99．9％和99．6％,而PNH患者分别为78．9％和77．4％。结论 CD59对于PNH的诊断和鉴别诊断,特别是对症状不典型的PNH以及AA-PNH综合征的诊断具有重要意义。     

CD55/CD59缺陷检测及其在阵发性睡眠性血红蛋白尿诊断中的意义

目的：应用外周血红细胞CD55和CD59的检测并结合相关检验，建立有效的诊断和鉴别诊断阵发性睡眠性血红蛋白尿(PNH)的实验体系。方法：运用流式细胞术检测10例PNH患外周血红细胞和粒细胞的CD55和CD59，并分别对缺陷红细胞作激光散射分析(FS)及FS／CD55和FS／CD59双参数分析，结合溶血性贫血(溶贫)相关其他检验，作出PNH诊断。结果：5例PNH发作期患酸溶血试验呈阳性，CD55和CD59缺陷红细胞在流式细胞术检测中具有特征性的改变；5例PNH缓解期酸溶血试验等无明显改变，患外周血CD55和CD59缺陷红细胞的数量较少。运用流式细胞术分别作红细胞FS／CD55和FS／CD59双参数分析，发现CD59缺陷与红细胞FS具有相关性。正常红细胞与缺陷红细胞的FS分布存在明显差异。部分再生障碍性贫血患外周血也存在PNH样细胞，但FS／CD59检测结果与PNH患具有不同特征。结论：流式细胞术检测外周血红细胞CD55和CD59缺陷结合溶血性贫血的常规检验可对PNH作出较明确的诊断和鉴别诊断。     

CD59检测在阵发性睡眠性血红蛋白尿症诊断中的意义

目的　探讨CD5 9检测对阵发性睡眠性血红蛋白尿症 (paroxysmalnocturnalhemoglobinuria ,PNH)及再生障碍性贫血 (AA) PNH综合征的临床诊断意义。方法　用FITC标记的CD5 9单抗 ,以流式细胞仪检测 13例PNH、37例AA和 2 0例正常人外周血红细胞和粒细胞膜表面CD5 9的表达情况。结果　正常人红细胞和粒细胞CD5 9表达阳性率均 >98% ;13例PNH患者红细胞及粒细胞CD5 9表达阳性率均 <90 % ;37例再障患者中 2 4例表达正常 ,13例红细胞或粒细胞CD5 9表达阳性率均有不同程度的减低。结论　CD5 9检测是诊断PNH较直接而又特异、敏感的方法 ,特别是对表现不典型的PNH及AA PNH综合征的诊断具有重要意义     

红细胞CD55、CD59流式细胞术检测方法的若干影响因素探讨

目的探讨流式细胞仪测定红细胞表面CD55、CD59试验过程中影响检测的若干因素,建立此项目的标准操作程序。方法利用流式细胞仪对15例非血液病、11例阵发性血红蛋白尿症（PNH）的乙二胺四乙酸（EDTA）外周抗凝血进行红细胞CD55、CD59检测,观察单克隆抗体（mAb）用量、荧光素种类及反应时间对测定结果的影响。结果在未饱和抗原的情况下（〈9μL）,平均荧光强度（MFI）随抗体量的增加而升高。CD55-异硫氰酸荧光素（FITC）的阳性率和MFI均低于CD55-藻红蛋白（PE）,CD59的FITC和PE 2种荧光标记的阳性率间差异无统计学意义,但在MFI方面前者明显高于后者。反应时间对CD55-PE阳性率、CD59-FITC和CD55-PE的MFI有明显影响（P〈0.05）;3 h内2组CD59-FITC的阳性率无明显变化。结论抗体用量、荧光素种类及标记模式和温育时间对流式细胞仪检测红细胞CD55、CD59有明显的影响。本实验室在3个影响因素上分别选择12μL抗体标记1.6×105～2.8×105个红细胞、荧光素组合模式为CD59-FITC、CD55-PE双色标记和40 min的温育时间,这样既确保了反应充分又提高了结果的稳定性。     

用流式细胞仪检测CD_(59)表型对诊断阵发性睡眠性血红蛋白尿症的意义

目的：探讨根据免疫表型检出糖化肌醇磷脂（ＧＰＩ）缺陷细胞在阵发性睡眠性血红蛋白尿症（ＰＮＨ）诊断中的意义。方法：用ＦＩＴＣ标记的ＣＤ５９单抗，以流式细胞仪分析２９例ＰＮＨ患者外周血及骨髓中ＣＤ５９－细胞的百分率。结果：正常人外周血红细胞、中性粒细胞（ＰＭＮ）及骨髓单个核细胞（ＭＮＣ）中的ＣＤ５９－细胞均＜５％，而２８例ＰＮＨ红细胞的ＣＤ５９－细胞均＞１０％（１２．８％～９８．０％），２９例ＰＭＮ均＞１０％（１２．０％～９０．１％），１５例骨髓ＭＮＣ均＞１０％（１７．９％～７３．５％）。１０例表现不典型或Ｈａｍ试验阴性者经本法确诊为ＰＮＨ，７例疑为本病者经本法否定。结论：用流式细胞仪检测ＣＤ５９表型是目前诊断ＰＮＨ的较直接而又特异、敏感的方法。     

阵发性睡眠性血红蛋白尿症患者血细胞表面CD55和CD59的检测及临床意义

目的探讨红细胞和粒细胞膜CD55与CD59抗原表达在阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)诊断中的应用。方法采用流式细胞术结合直接免疫荧光法检测25例PNH、20例再生障碍性贫血(AA)、20例健康对照者外周血红细胞和粒细胞膜CD55和CD59抗原的表达,并同时做酸化血清溶血试验(Ham试验)、蔗糖溶血试验和尿含铁血黄素试验(尿Rous试验)。结果与AA组和健康对照组相比,PNH患者外周血红细胞、粒细胞膜CD55、CD59表达缺失率均明显增高(P<0.05);而AA组和健康对照组缺失率均小于5%,且两者之间差异没有统计学意义(P>0.05)。25例PNH患者中,9例Ham试验阴性,6例蔗糖溶血试验阴性,7例尿Rous试验阴性,这些患者的红细胞、粒细胞的CD55、CD59表达缺失率均大于5%。结论利用流式细胞术同时检测患者红细胞和粒细胞膜CD55与CD59抗原对PNH的诊断与鉴别诊断具有重要价值。     

用流式细胞术检测CD55及CD59表型对诊断阵发性睡眠性血红蛋白尿的意义

目的：探讨用流式细胞术检测免疫表型对诊断阵发性睡眠性血红蛋白尿(paroxysmal noctur—nal hemoglobinuria，PNH)的意义。方法：用荧光标记分化群(cluster of differentiation，CD)中的CD55、CD59的单克隆抗体，采用流式细胞术测定25名正常人、28例PHN患者外周中性粒细胞和红细胞膜抗原的表达。结果：PNH患者中性粒细胞CD55、CD59，红细胞CD59表达率较正常人明显降低，且与疾病的严重程度相关。结论：用流式细胞术检测CD55、CD59表型是目前诊断PNH的较直接而又特异、敏感的方法。     

贫血患者外周血CD55~-和CD59~-细胞检测结果及其意义

采用流式细胞仪检测外周血红细胞和中性粒细胞表达的Glycophosphatidylinositol(GPI)连接的补体调节蛋白CD5 5和CD5 9是目前大多数实验室用来作为诊断阵发性睡眠性血红蛋白尿症 (PNH)的首选实验[1] 。外周血中只要CD5 5、CD5 9阴性细胞占 3%以上流式细胞术即可检出 ,其灵敏度和特异性优于传统的酸溶血实验[2 ] 。我们的研究也证实 ,PNH病人的外周血中均有比例很高的CD5 5 - 和CD5 9- 红细胞和中性粒细胞出现。同时我们也发现在再生障碍性贫血和小细胞低色素性贫血的病人外周血中也有程度不同的CD5 5 - 和CD5 9- 细胞出现 ,现将结…     

PNH患者外周血及骨髓正常和异常造血干/祖细胞组成分析

目的　研究阵发性睡眠性血红蛋白尿症 (PNH)患者外周血及骨髓造血干 祖细胞的组成及含量。方法　用流式细胞仪测定 2 1例PNH患者外周血及骨髓造血干 祖细胞 (以CD3 4+为标志 )锚连蛋白CD59的表达 ,并将患者造血干 祖细胞总数与正常人进行比较。结果　PNH患者骨髓及外周血CD3 4+细胞总量均明显低于正常人 (P <0 .0 0 1) ,但在疾病缓解时总量与正常对照差异无显著性 (P >0 0 5 )。PNH患者外周血CD3 4+细胞主要以CD59+表型为主 [CD3 4+CD59+细胞占总CD3 4+细胞的 (81.4±16 1) % ],临床未缓解或骨髓中CD3 4+细胞以CD59- 表达为主的患者 ,其外周血CD3 4+细胞仍以CD59+表型为主。结论　PNH患者造血干 祖细胞含量明显减少 ,但在外周血中以正常表型为主     

再生障碍性贫血相关的恶性疾病及克隆改变

再生障碍性贫血（aplastic anemia,AA）是多种病因引起的造血障碍综合征,近年来生存率得到明显改善,生存时间明显延长。人们长期随访发现部分AA有向恶性疾病及克隆性疾病进展或＂转变＂的风险,发病机制可能包括造血干细胞自身缺陷、造血微环境影响、治疗干预等。