严重烫伤合并铜绿假单胞菌脓毒症影响家兔外周血中性粒细胞的蛋白质组学研究

目的 研究严重烫伤合并铜绿假单胞菌脓毒症家兔外周血中性粒细胞蛋白质组变化.方法 实验地点在卫生部肿瘤蛋白质组学重点实验室(湘雅医院内),实验动物为健康雄性成年中国本兔24只,随机分为四组(每组6只):对照组(A组)、严重烫伤组(B组)、严重烫伤并脓毒症2 h组(C组)和严重烫伤并脓毒症6 h组(D组).A组37℃温水假烫,B组烫伤(30%TBSA,Ⅲ度)后24h采颈动脉血分离中性粒细胞,C、D组烫伤(30%TBSA,Ⅲ度)后24 h经耳缘静脉注射对数生长期铜绿假单胞菌悬液(ATCC 27853,浓度6×109 cfu/ml,剂量1 ml/kg),再分别于2、6 h后采颈动脉血分离中性粒细胞.裂解细胞,提取总蛋白.利用双向凝胶电泳分离蛋白质,考马斯亮蓝染色,扫描图像,PDQuest软件分析图像并筛选组间差异蛋白质点(判断差异的标准为平均表达量相差超过3倍,由本课题组成员设定).再从凝胶上切割差异蛋白质点,胰酶消化,应用基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱分析,得到肽质量指纹图,利用Mascot软件搜索数据库、鉴定蛋白质.结果 A、B、C、D组平均蛋白质点数分别为(759±20)、(749±27)、(786±29)、(774±26)个,平均匹配率分别为93%、91%、89%、92%.C、D两组间蛋白质点表达量差异无统计学意义,B、C、D组与A组比较,筛选出21个差异蛋白质点,鉴定了其中9个,包括7种蛋白质.结论 家兔严重烫伤并铜绿假单胞菌脓毒症时外周血中性粒细胞蛋白质组发生变化,表达改变的有蛋白质二硫键异构酶、β-肌动蛋白、膜联蛋白Ⅰ、巯基特异性抗氧化蛋白等,功能涉及细胞内酶活性、细胞能动功能及变形性、炎症、代谢、抗氧化能力、细胞凋亡等,这些蛋白质与烧伤后铜绿假单胞菌脓毒症有关.     

烧伤创面发生铜绿假单胞菌感染108例分析

对我院1995—01～2005—12深度烧伤创面发生铜绿假单胞菌感染108例分析如下。     

重症铜绿假单胞菌脓毒症伴消化道穿孔患儿的皮肤护理

<正>绿脓杆菌在自然界广泛存在于空气、人体表面、呼吸道、消化道、水、土壤等,在潮湿环境中能长期生存,当人体抵抗力下降或长期使用大量抗生素及滥用抗生素者都容易被感染,所以绿脓杆菌属条件致病菌[1,2]。铜绿假单胞菌感染的病死率可达33%。现将我科1例重症绿脓杆菌感染患儿抢救成功的护理体会介绍如下。1病例介绍患儿,女,4个半月,体重8kg,患儿因"发热5d,皮疹2d"     

聚合酶链反应检测铜绿假单胞菌的研究现状

聚合酶链反应在病原微生物的检测中应用广泛。近年来已有文献报道其对铜绿假单胞菌的检测，本文就其检测铜绿假单胞菌的引物设计、检测步骤、评价与初步应用情况进行综述。     

铜绿假单胞菌耐药性研究

目的 分析225株铜绿假单胞菌的耐药状况,指导临床合理使用抗生素.方法 采用常规方法分离细菌,用康泰公司的鉴定系统进行细菌鉴定,采用法国梅里埃公司药敏板进行药敏分析.结果 225株铜绿假单胞菌对抗生素的敏感率以亚胺培南(93.3%)、哌拉西林/他唑巴坦(92.0%)和头孢吡肟(90.7%)最高.其次为阿米卡星(85.3%)、哌拉西林/舒巴坦(84.0%)、妥布霉素(81.3%)、庆大霉素(78.7%);而耐药率最高的是氨苄西林(100.0%)、复方新诺明(98.7%)和替卡西林(98.7%).结论 本院铜绿假单胞菌对常用抗生素耐药率高,仅对碳青酶烯类、β-内酰胺酶抑制剂复合物及第4代头孢类抗生素有较好的敏感性.     

307株铜绿假单胞菌耐药性研究

目的检测本院2007年1月-2009年9月铜绿假单胞菌（PA）耐药性的变化趋势,为临床上耐药PA感染的治疗提供参考。方法采用生物梅里埃公司的API系统进行菌种鉴定,用纸片扩散法（K-B）进行药物敏感性试验,用WHONET5．3进行统计学分析。结果3年间PA对14种抗生素的平均耐药率分别为28．1％、34．0％、35．5％,呈逐年上升的趋势,其中亚胺培南耐药菌株79株。结论及时准确的细菌鉴定及药敏试验,能尽早发现铜绿假单胞菌的院内感染情况,为临床治疗提供重要的实验室依据。     

铜绿假单胞菌的耐药性监测

目的：研究铜绿假单胞菌的耐药状况，以期为临床提供抗感染用药的依据。方法：采用常规方法分离、鉴定菌株，应用K－B法作药敏试验，并对试验数据进行分析处理。结果：总耐药率依次为：呋喃妥因93．3％、头孢唑啉88．9％、氯霉素85．9％、氨苄青霉素84．0％、SMZ－TMP81．7％；总多重耐药率为26．7％。结论：治疗铜绿假单胞菌感染的首选抗生素是多粘菌素B，其次为头孢他啶与环丙沙星；而呋喃妥因、头孢唑啉、氯霉素、氨苄青霉素、SMZ－TMP均不宜采用；不同部位的感染应选用适宜的抗生素。     

铜绿假单胞菌外毒素A对淋巴细胞转化的抑制作用

目的探讨铜绿假单胞菌外毒素A（PEA）对人淋巴细胞转化的抑制作用及抗．PEA血清的中和作用。方法采集健康成年人的静脉血,密度梯度离心分离外周血单个核细胞（PBMC）。采用台盼蓝染色排除法及四甲基偶氮唑蓝（MTT）法确定PEA对淋巴细胞的非毒性剂量范围。抑制实验分为对照组、4个不同浓度PEA组及抗血清预处理组6个组。非毒性剂量范围内不同浓度的PEA、植物血凝素（PHA）与淋巴细胞37℃、5％CO2共同温育48h,MTT法测定淋巴细胞转化。结果PEA对淋巴细胞的非毒性剂量范围为0～800ng／ml。PEA浓度在50—400ng／ml,对淋巴细胞转化存在显著抑制作用（P〈0．05）;而抗．PEA血清可完全中和PEA射淋巴细胞转化的抑制作用,与对照组比较差异无显著性（P〉0．05）。结论非毒性剂量的PEA对淋巴细胞转化存在抑制作用,抗-PEA血清具有保护性中和作用。     

铜绿假单胞菌外毒素A对淋巴细胞转化的抑制作用

目的探讨铜绿假单胞菌外毒素A(PEA)对人淋巴细胞转化的抑制作用及抗-PEA血清的中和作用。方法采集健康成年人的静脉血,密度梯度离心分离外周血单个核细胞(PBMC)。采用台盼蓝染色排除法及四甲基偶氮唑蓝(MTT)法确定PEA对淋巴细胞的非毒性剂量范围。抑制实验分为对照组、4个不同浓度PEA组及抗血清预处理组6个组。非毒性剂量范围内不同浓度的PEA、植物血凝素(PHA)与淋巴细胞37°C、5%CO2共同温育48 h,MTT法测定淋巴细胞转化。结果PEA对淋巴细胞的非毒性剂量范围为0~800 ng/m l。PEA浓度在50~400 ng/m l,对淋巴细胞转化存在显著抑制作用(P<0.05);而抗-PEA血清可完全中和PEA对淋巴细胞转化的抑制作用,与对照组比较差异无显著性(P>0.05)。结论非毒性剂量的PEA对淋巴细胞转化存在抑制作用,抗-PEA血清具有保护性中和作用。     

烧伤病人铜绿假单胞菌感染流行病学分析

[目的]了解烧伤病人铜绿假单胞菌感染情况。[方法]对烧伤病区病人及周围环境进行流行病学调查,采集铜绿假单胞菌培养样本252份。[结果]252份样本中,铜绿假单胞菌阳性22份,阳性率8.7%;病人创面、病房物体表面铜绿假单胞菌检出率较高。[结论]警惕区域性铜绿假单胞菌交叉感染,烧伤病区工作人员手、公共医疗用品的消毒不容忽视。     

Role of motility in the endogenousPseudomonas aeruginosa sepsis after burn

We investigated the relationship between bacterial motility and the lethal endogenous sepsis after burn in mice orally challenged withPseudomonas aeruginosa, by using motility mutants. The mortality rates of postburn endogenous sepsis in mice orally challenged with low-motility mutants (strains B16–40 and B16–46) were 12% and 7.7%, respectively. By contrast, the mortality rates in mice who had been fed a high-motility mutant (B16–52) or the parentalP. aeruginosa B16 (a high-motility strain) were 36% and 33%, respectively. Significant differences were found for mortality rates in groups fed the high-motility or lowmotility strains. A multiple regression analysis examining the effect of motility, number of cecalP. aeruginosa cells, and production of exotoxin A and total protease on the murine mortality rates associated with the 3 motility mutants and the parental strain showed a linear relationship between murine mortality and bacterial motility. In addition, when human monoclonal antibody specific for type-b flagella proteins ofP. aeruginosa was intravenously administrated to mice orally challenged withP. aeruginosa B16, the mortality rate significantly decreased to 5.6%, compared with 33% in similar mice given intravenous saline. These results suggest that the occurrence of the lethal endogenous sepsis after burn in mice was closely related to the motility of theP. aeruginosa colonized in their intestinal tract, and that motility is an important virulence factor in endogenousP. aeruginosa sepsis after burn injury.     

79例铜绿假单胞菌肺炎的临床分析

目的分析铜绿假单胞菌肺炎感染的临床特征、抗牛素敏感性及危险因素等。方法回顾性分析本院2004年发生的铜绿假单胞菌肺炎病例。结果79例患者的临床表现无特异性，大多伴有基础疾病，其中以神经系统疾病最常见。前期使用抗生素、入住ICU和72h内有侵人性操作为感染的主要危险因素。抗生素敏感试验表明，铜绿假单胞菌对阿米卡星、妥布霉索和哌拉西林／他唑巴坦最敏感。结论铜绿假单胞菌肺炎多发生在有各种基础疾病和危险因素的患者，临床表现无特异性，加强耐药性监测和合理应用抗生素十分重要。     

Pseudomonas aeruginosa sepsis presenting as peripheral subcutaneous nodules. Report of 2 cases

Two patients developed disseminated subcutaneous nodules with febrile illness. In both cases, Pseudomonas aeruginosa was isolated from the lesions; blood cultures yielded the same organism in one case, and were negative in the other. The portal of entry was thought to be a jugular hemodalysis catheter in the first case and a necrotic zoster complicating lymphoma in the second case. Both patients' condition improved with antibiotic therapy and the Pseudomonas nodules resolved without surgical drainage.     

多重耐药铜绿假单胞菌β-内酰胺酶检测与分析

目的了解本地区多重耐药铜绿假单胞菌β-内酰胺酶产生情况,为临床治疗及控制医院感染提供依据。方法用K-B法进行常规药敏试验,筛选出50株多重耐药铜绿假单胞菌,用改良三维试验检测各种β-内酰胺酶,同时用2-巯基丙酸抑制试验检测金属酶。结果50株多重耐药铜绿假单胞菌中产ESBLs2株(4%)、产AmpC酶20株(40%),11株同时产ESBLs和AmpC酶(22%),金属酶筛选出8株(16%)阳性。结论本地区多重耐药铜绿假单胞菌β-内酰胺酶以AmpC酶为主,临床应根据药敏试验结果,合理选用抗生素,以减少耐药菌株产生和控制医院感染。     

耐亚胺培南铜绿假单胞菌的感染特点和耐药性分析

目的了解耐亚胺培南铜绿假单胞菌的感染特点及对抗菌药物的敏感性。方法分析我院2012年分离培养的耐亚胺培南绿假单胞菌感染特点。采用微量稀释法和纸片扩散法测定铜绿假单胞菌与耐亚胺培南铜绿假单胞菌对常见抗菌药物的敏感性。结果耐亚胺培南铜绿假单胞菌主要来自于痰液。在老干部病房、ICU和呼吸科比普通病房更加严重,耐药组泌尿道及呼吸机的使用率高于对照组,差异有统计学意义。对照组对抗菌药物的耐药率明显低于耐亚胺培南铜绿假单胞菌。结论耐亚胺培南铜绿假单胞菌选择抗菌药物的范围很窄,只有环丙沙星和阿米卡星的活性较好。     

医院分离铜绿假单胞菌的分布情况与耐药性分析

目的了解医院临床分离铜绿假单胞菌的分布情况及耐药现状,为临床医生合理使用抗菌药物提供依据。方法收集2008年7月至2009年6月临床各科送检标本,采用梅里埃公司的Vitek2compact全自动微生物鉴定和药敏分析仪同时进行菌株鉴定与药敏测定。结果共分离出铜绿假单胞菌381株,其中痰标本中分离出铜绿假单胞菌最多,占62.2%;重症医学科、儿科和呼吸内科分离的菌株数居前3位;铜绿假单胞菌对阿米卡星的敏感性较高,耐药率为4.5%,对庆大霉素和妥布霉素这类氨基糖甙类抗菌药物敏感性均较好,耐药率低于10%,头孢吡肟和哌拉西林/他唑巴坦对铜绿假单胞菌具有较好的抗菌活性,耐药率分别为11.3%和11.8%。结论铜绿假单胞菌对抗菌药物的耐药性呈上升趋势,加强医院感染病原菌的耐药性监测,对合理使用抗菌药物及减缓多药耐药菌的产生尤为重要。