α-突触核蛋白在锰诱导神经细胞内质网应激中的作用

目的探讨α-突触核蛋白(α-Syn)在锰诱导神经细胞内质网应激中的作用。方法将野生型和α-Syn基因敲除(α-Syn~(-/-))型C57小鼠各24只,均随机分成4组(每组6只),即对照组(腹腔注射0.9%氯化钠)和低、中、高剂量染锰组(分别腹腔注射50、100和200μmol/kg氯化锰),注射容量为5 ml/kg,每周5次,共4周。而后处死小鼠,切取脑纹状体组织,检测锰含量、细胞凋亡率以及内质网应激和细胞凋亡相关信号分子表达情况。结果随着锰暴露剂量的增加,野生型和α-Syn~(-/-)型小鼠纹状体锰含量及细胞凋亡率均不断升高;高剂量染锰组α-Syn~(-/-)型小鼠细胞凋亡率明显高于野生型小鼠;与对照组比较,中、高剂量染锰组野生型小鼠PERK和eIF2α的磷酸化水平均明显升高,ATF4基因和蛋白表达均明显升高,IRE1磷酸化水平明显升高;中、高剂量染锰组,α-Syn~(-/-)型小鼠PERK和eIF2α蛋白表达升高,而磷酸化水平相对下降,IRE1磷酸化水平明显升高;高剂量组的总XBP-1及割裂的XBP-1基因表达升高,ATF6蛋白表达升高,野生型和α-Syn~(-/-)型小鼠CHOP和割裂的Caspase12蛋白表达均明显高于对照组,细胞凋亡率、IRE1磷酸化水平、CHOP和割裂的Caspase12蛋白表达则均明显高于野生型。结论α-Syn与锰诱导内质网应激PERK-eIF2α信号通路的活化有关,而且α-Syn对锰诱导的细胞凋亡在一定程度上有保护作用。     

莱菔硫烷对APP/PS1转基因AD模型小鼠认知功能的影响及其机制探讨

目的探讨莱菔硫烷(sulforaphane,SFN)对阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)的作用及机制,为防治AD提供依据。方法将20只4月龄APP/PS1双转基因小鼠分为AD模型(APP/PS1)和AD模型干预(APP/PS1+SFN)、野生型小鼠对照(Wild type)和野生型小鼠干预(Wild type+SFN)4组,每组10只,雌雄各半。各干预组经口灌胃SFN 25 mg/(kg·bw),1/d,Wild type及APP/PS1组灌胃等量蒸馏水,连续5月。采用跳台实验检测小鼠的认知功能;刚果红染色法检测脑组织淀粉样斑块;丫啶橙染色法检测自噬小体,Western Blot法、免疫组织化学法分别检测脑皮质与海马微管相关蛋白1轻链3(LC3)蛋白表达水平,以反映脑组织自噬水平。结果与Wild type组相比,APP/PS1组小鼠的认知功能下降,脑组织淀粉样斑块增多,脑组织自噬小体减少、脑皮质LC3Ⅱ/Ⅰ比值、海马LC3蛋白表达水平降低,差异均有统计学意义(P0.05或P0.01);与APP/PS1组相比,APP/PS1+SFN组小鼠认知功能增强,脑组织淀粉样斑块减少,脑组织自噬小体增多,脑皮质LC3Ⅱ/Ⅰ比值、海马LC3蛋白表达水平升高差异均有统计学意义(P0.05或P0.01)。Wild type+SFN组小鼠海马CA1区LC3蛋白表达水平高于Wild type组(P0.05),其余各检测指标与Wild type组相比,均未见统计学差异(P0.05)。结论 SFN可改善APP/PS1转基因小鼠的认知功能,减轻该模型小鼠脑组织自噬水平的下降以及脑内淀粉样斑块的异常沉积。     

莱菔硫烷对APP/PS1转基因AD模型小鼠认知功能的影响及其机制探讨北大核心CSCD

目的探讨莱菔硫烷(sulforaphane,SFN)对阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)的作用及机制,为防治AD提供依据。方法将20只4月龄APP/PS1双转基因小鼠分为AD模型(APP/PS1)和AD模型干预(APP/PS1+SFN)、野生型小鼠对照(Wild type)和野生型小鼠干预(Wild type+SFN)4组,每组10只,雌雄各半。各干预组经口灌胃SFN 25 mg/(kg·bw),1/d,Wild type及APP/PS1组灌胃等量蒸馏水,连续5月。采用跳台实验检测小鼠的认知功能;刚果红染色法检测脑组织淀粉样斑块;丫啶橙染色法检测自噬小体,Western Blot法、免疫组织化学法分别检测脑皮质与海马微管相关蛋白1轻链3(LC3)蛋白表达水平,以反映脑组织自噬水平。结果与Wild type组相比,APP/PS1组小鼠的认知功能下降,脑组织淀粉样斑块增多,脑组织自噬小体减少、脑皮质LC3Ⅱ/Ⅰ比值、海马LC3蛋白表达水平降低,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01);与APP/PS1组相比,APP/PS1+SFN组小鼠认知功能增强,脑组织淀粉样斑块减少,脑组织自噬小体增多,脑皮质LC3Ⅱ/Ⅰ比值、海马LC3蛋白表达水平升高差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。Wild type+SFN组小鼠海马CA1区LC3蛋白表达水平高于Wild type组(P<0.05),其余各检测指标与Wild type组相比,均未见统计学差异(P>0.05)。结论 SFN可改善APP/PS1转基因小鼠的认知功能,减轻该模型小鼠脑组织自噬水平的下降以及脑内淀粉样斑块的异常沉积。     

TIP30基因敲除小鼠EGFR下游信号通路活性

目的探讨TIP30基因敲除后是否影响小鼠EGFR下游信号通路的活性。方法获取野生型及TIP30基因敲除的BALB/c小鼠乳腺组织及乳腺癌组织,用免疫组化检测EGFR下游信号通路相关分子pAKT及pErk1/2的表达。结果 Tip30~(-/-)小鼠乳腺上皮细胞pErk1/2及pAkt阳性率分别为(27.83±8.46)%和(30.83±6.65)%(n=4),显著高于Tip30~(+/+)小鼠乳腺上皮细胞的(12.58±5.87)%和(14.94±5.77)%(n=4),P值分别0.02和0.011。而Tip30~(-/-)小鼠乳腺肿瘤细胞pErk1/2及pAkt阳性率分别为(51.68±8.57)%和(56.08±8.44)%(n=4),则显著高于Tip30~(-/-)小鼠乳腺上皮细胞阳性率,P分别为0.002和0.001。结论 TIP30基因缺失可能通过使EGFR下游ERK/MAPK及PI3K/AKT信号通路的活化,从而导致TIP30基因缺失小鼠发生乳腺癌。     

CYP1B1对肥胖小鼠脂肪组织血管新生因子影响

目的 探讨血管新生因子血管生成素Ⅰ和Ⅱ在保护幼年细胞色素P4501 B1(CYP1 B1)基因敲除小鼠营养性肥胖中作用.方法 CYP1 B1基因敲除和野生型雄性C57/BL小鼠(3周龄)各16只,给予低脂膳食(10％脂肪)、高脂膳食(60％脂肪)饲料11周;小鼠处死后取附睾脂肪组织检测血管密度及血管新生因子基因和蛋白表达.结果 野生高脂组小鼠脂肪组织血管密度下降,基因敲除小鼠脂肪组织血管分布不受影响;高脂膳食诱导下,野生型和基因敲除小鼠血小板-内皮细胞粘附分子CD31 mRNA表达下调(P＜0.05),野生型小鼠CD31蛋白表达下调(P＜0.05);与野生低脂组比较,高脂诱导后野生型和基因敲除小鼠血管生成素Ⅰ表达量分别为0.35和0.50(P ＜0.05),瘦素表达量则分别为2.48和1.42(P＜0.05);敲除高脂组瘦素表达量较野生高脂组下降(P＜0.05).结论 CYP1B1基因敲除对血管新生相关因子的调控可能在其营养性肥胖中起一定保护作用.     

1,3-β-葡聚糖可激活自噬诱发小鼠肺组织炎症

目的 探讨1,3-β-葡聚糖诱导炎症小鼠的肺组织自噬水平，为肺组织炎症的预防、诊断及治疗提供依据。方法 将20只实验小鼠分为两组，1,3-β-葡聚糖实验组、生理盐水对照组，每组10只。小鼠非暴露气管灌注1,3-β-葡聚糖，于灌注后第3天、第28天分别收集小鼠肺组织。采用苏木素伊红和Masson染色，观察肺组织病理改变；采用Western blot检测小鼠体内自噬特异性蛋白微管相关蛋白1轻链3(LC3)和自噬相关蛋白sequestosome 1(p62)的表达水平。结果 镜下可见，与对照组相比，实验组小鼠肺组织出现大量炎症细胞和胶原沉积。Western blot结果显示，实验组小鼠体内LC3-Ⅱ表达水平较对照组升高（t=-2.932,P<0.05）,p62表达水平较对照组升高（t=-5.151,P<0.05）。结论 1,3-β-葡聚糖可明显著提高小鼠肺组织自噬特异性蛋白LC3及自噬相关蛋白p62的表达水平，证明肺组织炎症的小鼠细胞自噬水平升高。     

A_(2A)R敲除对新生小鼠HIBD细胞凋亡和凋亡诱导因子表达的影响

目的研究敲除腺苷A_(2A)R对新生小鼠HIBD大脑皮层、海马CA1区AIF和TUNEL阳性细胞表达的变化。方法将A_(2A)R基因敲除(KO)小鼠40只及同窝野生型(WT)小鼠40只分为KO组和WT组,每组下设假手术组和HIBD组,后者分1 d、3 d、7 d共3个时间点,参照经典Rice-Vannucci法建立7日龄新生小鼠HIBD模型。采用3种发育反射(翻正、趋地和悬崖逃避)对小鼠进行短期神经功能评定,TUNEL染色法观察阻断A_(2A)R对新生小鼠HIBD后神经细胞凋亡的影响,免疫组化检测皮层和海马CA1区AIF的表达。结果 A_(2A)R敲除能显著加重神经功能缺损和脑组织病理损伤;TUNEL染色示野生型模型组(1 d、3 d)凋亡细胞明显少于敲除型模型组(P0.01);HIBD后AIF迅速增加,于造模后1 d达高峰;敲除型模型组均多于野生型模型组(P0.05)。结论腺苷A_(2A)R敲除可增加脑缺血缺氧小鼠海马皮层和CA1区的神经细胞凋亡和AIF表达,提示A_(2A)R对新生小鼠缺氧缺血性脑损伤起保护作用。     

Toll样受体3对高脂饮食小鼠棕色脂肪组织中解偶联蛋白1表达的影响

目的探究Toll样受体3(Toll like receptor 3,TLR3)对高脂饮食诱导小鼠棕色脂肪组织中解偶联蛋白1(uncoupling protein 1,UCP-1)表达的影响。方法将雄性C57BL/6小鼠和TLR3基因敲除小鼠各14只分别饲以正常饮食(normal diet,ND)和高脂饮食(high-fat diet,HFD),为期15周。在造模前和15周末对小鼠的体重进行称量。用HE(Hematoxylin and eosin)染色、免疫组化、实时定量PCR方法和Western blot法检测棕色脂肪组织形态和UCP-1表达情况。结果 (1)高脂饮食末,野生型高脂饮食(wildtype-high-fat diet,WT-HFD)组小鼠体重和棕色脂肪组织重量明显高于野生型正常饮食(wildtype-normal diet,WT-ND)组,上述改变被TLR3基因敲除所阻断。(2)与WT-ND组相比,WT-HFD组小鼠棕色脂肪组织中UCP-1的mRNA水平显著升高;与WT-HFD组相比,TLR3-HFD组的UCP-1的mRNA水平有升高趋势;(3)与WT-ND组相比,WT-HFD组小鼠棕色脂肪组织中UCP-1的蛋白水平明显升高;与WT-HFD组相比,TLR3-HFD组的UCP-1的蛋白水平显著升高,过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅助激活因子1α(peroxisome proliferator activated receptorγcoactivator-1α,PGC-1α)的蛋白水平有升高趋势。结论TLR3通过抑制棕色脂肪组织的UCP-1的表达,参与高脂饮食引起的肥胖。     

CYP1B1基因敲除对成年小鼠肝脏脂肪代谢的影响及可能机制

目的探讨CYP1B1对高脂膳食诱导的成年小鼠脂肪代谢的作用。方法 CYP1B1基因敲除(KO)和野生型(WT)雄性成年C57/BL小鼠(6 w龄)各16只,给予低脂(LFD,30%)、高脂肪(HFD,60%)饲料共6 w。小鼠处死后取血清、附睾脂肪和肝脏组织检测相应的生化和分子生物学指标。结果 6 w高脂膳食后,KO小鼠能量摄入总量稍高于WT小鼠,但其体重增量和附睾脂肪组织重量均显著低于WT小鼠;WT小鼠脂肪细胞直径明显大于KO小鼠,且血糖、血清及肝脏组织中甘油三酯(TG)水平亦明显高于KO小鼠;肝脏组织RT-PCR结果显示,CYP1B1基因敲除后,启动脂肪形成的核因子及脂肪合成相关基因如CD36、SREBP1c、SCD1等表达下降,而调控脂肪氧化分解的基因如CPT-1α,UCP-2表达显著上升;蛋白印迹结果显示,CYP1B1基因敲除增强腺苷-磷酸激酶(AMPK)的磷酸化。结论 CYP1B1基因敲除对成年小鼠营养性肥胖的保护作用可能与AMPK磷酸化增强并调控肝脏中脂肪代谢相关基因的表达有关。     

白藜芦醇对小鼠非酒精性脂肪性肝炎干预作用

目的探讨自噬通路在白藜芦醇(RSV)减轻蛋氨酸-胆碱缺乏(MCD)饮食诱导的非酒精性脂肪性肝炎(NASH)中的作用及机制。方法雄性C57BL/6J小鼠40只,随机分为对照组、模型组、白藜芦醇低、高剂量组(100、250 mg/kg)(n=10);对照组和模型组小鼠分别喂饲基础饲料和MCD饲料,白藜芦醇组在喂饲MCD饲料同时给予RSV灌胃,4周后测定小鼠体重、肝重、血清中谷丙转氨酶(ALT)含量,分离小鼠肝脏,测定甘油三酯(TG)和丙二醛含量,苏木素-伊红染色观察肝组织形态学变化,油红O染色观察脂肪变性情况,Western blot检测自噬标志蛋白LC3及各通路蛋白的表达量。结果与对照组比较,模型组小鼠血清ALT和肝组织TG含量[分别为(144.17±0.32)U/L和(112.77±0.88)mg/g]明显升高(P<0.01),肝脏LC3Ⅱ和腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)表达水平[分别为(1.27±0.01)、(1.81±0.09)]升高(P<0.05);与模型组比较,高剂量白藜芦醇组小鼠血清ALT含量、肝组织TG含量[分别为(83.16±0.40)U/L、(40.75±0.19)mg/g]明显降低(P<0.01),LC3Ⅱ、AMPK蛋白表达水平[分别为(2.25±0.14)、(3.01±0.16)]明显升高(P<0.01);蛋白激酶B(Akt)和哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(m TOR)表达水平无明显变化。结论白藜芦醇可以改善MCD饮食诱导的NASH,其机制可能与激活自噬AMPK途径有关。     

UCH—L1基因敲除小鼠的饲养、繁殖及鉴定

目的饲养、繁殖和鉴定泛素羧基末端水解酶L1（UCH．L1）基因敲除小鼠,获得UCH—L1基因敲除纯合子小鼠,为深入研究UCH．L1的生物学功能奠定基础。方法从美国购进的UCH．L1基因敲除小鼠经适应性饲养1周后,将1只雌性杂合子和1只雄性杂合子小鼠合笼饲养并繁殖,剪取子代小鼠尾尖部0．5cm组织,提取基因组DNA,PCR方法鉴定其基因型。雄性杂合子与雌性杂合子交配生产后代中,野生型和UCH—L1基因敲除纯合子小鼠用于后续的生物学功能研究：杂合子小鼠用于繁殖。观察UCH—L1基因敲除纯合子小鼠的表型变化,并利用免疫印迹法验证UCH—L1基因敲除的效果。结果小鼠成功繁殖后,利用杂合子交配共生产370只小鼠,其中UCH．L1＋/-占34．1％、UCHL1＋/-占50．5％、UCH．L1-/-占15．4％,成功获得UCH-L1基因敲除纯合子小鼠,并建立了饲养、繁殖和鉴定方法。结论采用雌性和雄性UCH—L1基因敲除杂合子小鼠交配．不仅可以获得UCH—L1基因敲除纯合子小鼠,而且有利于长期饲养与繁殖。     

上皮钙通道基因在维生素D受体和Calbindin-D28k双基因敲除鼠中的变化

目的研究上皮钙通道TRPV5和TRPV6基因与维生素D受体(VDR)和钙结合基因Calbindin-D28k的关系,以及肾钙的重吸收减少是否与TRPV5和TRPV6基因表达减少有关。方法制备VDR和CaBP-D28k双基因敲除小鼠,普通和高钙食物喂养下,检测野生型鼠(WT),CaBP-D28(-/-),VDR(-/-),和VDR(-/-)/CaBP-D28k(-/-)鼠的体重、摄食量及血尿参数值,用实时RT-PCR的方法检测各种鼠肾脏TRPV5和TRPV6的mRNA水平。结果普通饮食下,双基因敲除小鼠尿钙的分泌和血清甲状旁腺激素水平更高。TRPV5和TRPV6两者的表达在CaBP-D28k敲除鼠中均无变化,而在VDR敲除鼠和双基因敲除鼠中下调的幅度相当。高钙饮食下,VDR及双基因敲除小鼠的血离子钙水平正常。所有小鼠这两个基因的表达普遍降低,而在VDR和双基因敲除鼠中的表达更低。结论这些结果证实了上皮钙通道基因受钙和维生素D的调节,CaBP-D28k的缺失对两者无影响。肾钙的重吸收减少与TRPV5和TRPV6基因表达无明显关系。     

m6A去甲基化酶ALKBH5对小鼠精原细胞功能的影响

目的探究N~6-甲基腺嘌呤(m6A)去甲基化酶ALKBH5对小鼠精原细胞(GC-1)功能的影响。方法在GC-1细胞中敲除和过表达ALKBH5,LC-MS/MS检测敲除和过表达细胞的m6A含量,qPCR检测精子功能相关基因(CRISP2、DEFB1)表达水平。结果在GC-1细胞中成功敲除和过表达ALKBH5,ALKBH5敲除细胞m6A水平升高,CRISP2、DEFB1表达水平降低;ALKBH5过表达细胞m6A水平减低,CRISP2、DEFB1表达水平升高。结论 ALKBH5促进m6A去甲基化,影响精子功能相关基因的表达,从而可能进一步影响精原细胞的功能。     

Plin1基因敲除对肥胖小鼠脂肪组织炎症反应的影响及机制研究

目的 探究Plin1基因敲除对肥胖小鼠脂肪组织炎症水平的作用及其可能分子机制。方法 将雄性野生型C57BL/6J小鼠和Plin1基因敲除小鼠随机分为普通饲料组和高脂饲料组4组（n=6）,喂养12 w后,隔夜禁食自由饮水12h,眼眶采取所有新鲜血液及组织样本,并颈椎脱臼处死,取各组小鼠血清及部分附睾脂肪组织,酶法测定小鼠血清中游离脂肪酸（nonesterified fatty acid,NEFAs）的水平;酶联免疫吸附法（enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA）试验测定小鼠血清和脂肪组织中肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor alpha,TNF-α)、白细胞介素6(Interleukin-6,IL-6)及单核细胞趋化因子1(monocyte chemotactic protein-1,MCP-1)的水平;免疫组织化学染色法观测F4/80的表达程度;免疫荧光染色法和Western blot法观察核因子κB (Nuclear Factor kappa-B,NF-κB)亚基P65的转位及表达水平和NF-κB亚基P65表达及磷酸化差异...     

激活蛋白-1介导二氧化硅诱导的巨噬细胞细胞因子的表达

目的 探讨SiO2诱导小鼠巨噬细胞RAW 264.7细胞肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和转化生长因子-β1(TGF-β1)表达改变是否与激活蛋白-1(AP-1)活化有关.方法 用AP-1的抑制剂姜黄素处理巨噬细胞后,用Western blotting检测核蛋白AP-1(c-jun/c-fos)的表达,用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测细胞上清液中TNF-α、TGF-β1蛋白的含量;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测TNF-α、TGFβ1 mRNA的表达.结果 10和20 μmol/L姜黄素处理组c-jun的核蛋白表达为1.150±0.020、1.010±0.108,c-fos的核蛋白表达为0.430±0.023、0.256±0.015,明显低于SiO2刺激组(1.550±0..029、0.860±0.036),差异有统计学意义(P《0.01),且呈剂量依赖关系.20μmo/L姜黄素处理组TNF-α、TGFo-β1蛋白表达分别为123.58±45.78、32.12±5.34,明显低于SiO2刺激组(1582.18±437.52、55.60±5.51);TNF-α、TGF-β1 mRNA表达水平分别为0.74±0.01、0.22±0.04,也明显低于SiO2刺激组(2.27±0.33、2.96±0.15),差异均有统计学意义(P《0.01).结论 SiO2刺激巨噬细胞生成TNF-α、TGF-β1与AP-1的活化有关.     

缺糖缺氧经内质网应激途径诱导宫颈癌Hela细胞自噬

目的:构建肿瘤细胞体外缺糖缺氧模型,观察缺糖缺氧对肿瘤细胞内质网功能和自噬的影响及其机制。方法:连二亚硫酸钠消耗培养基中氧、平衡盐溶液EBSS取代细胞正常培养液构建缺糖缺氧模型;实验分为对照组(Control)、缺糖缺氧4 h组(4 h)、缺糖缺氧8 h组(8 h)、缺糖缺氧12 h组(12 h)。MDC检测细胞内自噬泡的形成;Western Blotting检测各组肿瘤细胞内质网应激-自噬相关蛋白的表达水平。结果:与对照组相比,MDC结果显示细胞内自噬泡数量明显增加;WesternBlotting结果显示,缺糖缺氧各组细胞LC3-Ⅱ表达水平明显升高,同时内质网应激-自噬相关蛋白GRP78、p-eIF2α、p-PERK表达水平也明显升高。结论:缺糖缺氧通过内质网应激-自噬途径诱导Hela细胞发生自噬。     

母子分离应激对ComplexinⅡ基因敲除鼠感觉门控的影响

目的:探讨母子分离应激后ComplexinⅡ基因敲除小鼠感觉门控的影响,为精神分裂症的病因,病理生理演化以及治疗和预防提供依据.方法:将刚出生的仔鼠进行母子分离应激,每天lh,共21天.于30天后将小鼠分成4个实验组,分别为无应激野生型组(NW)、应激野生型组(SW)、无应激ComplexinⅡ-/-组(NK)以及应激ComplexinⅡ-/-组(SK).应用PCR技术检测4组ComplexinⅡ基因型,并检测各组惊跳反射水平和前脉冲抑制的百分率,评价感觉门控.结果:与无应激野生型组相比,应激野生型组与应激ComplexinⅡ-/-组的惊跳反射水平明显升高(P＜0.05).前脉冲抑制均显著降低(P＜0.05),以应激ComplexinⅡ-/-组变化更为明显.结论:母子分离应激明显影响小鼠的惊跳反射水平,应激对ComplexinⅡ基因敲除小鼠感觉门控具有明显损害.     

缺血性脑血管病细胞自噬相关因子与斑块炎性反应的相关性

目的 探讨缺血性脑血管患者细胞自噬相关因子与炎性因子的相关性,为完善其病理机制,寻找新的治疗靶点提供依据.方法 选取缺血性脑血管病患者85例,按照颈动脉斑块分级分为三组:Ⅰ级21例、Ⅱ级35例、Ⅲ级29例,并以33例健康志愿者为对照组.抽取空腹肘静脉血,采用WB法测定自噬相关因子LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ与Beclin-1的蛋白表达量,采用ELISA法测定炎性因子IL-1β、IL-6和TNF-α水平.结果 对照组、Ⅰ级斑块、Ⅱ级斑块、Ⅲ级斑块的LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、Beclin1表达和血清IL-1β、IL-6和TNF-α水平依次升高(P<0.05);经Pearson分析,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ表达与IL-1β、IL-6和TNF-α水平之间,Beclin1表达与IL-1β、IL-6和TNF-α水平之间均呈线性正相关(P<0.05);经秩相关分析,颈动脉斑块分级与LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、IL-1β、IL-6、TNF-α之间均呈正相关性(P<0.05).结论 缺血性脑血管病患者细胞自噬能够通过与炎性反应的相互作用影响斑块稳定性,可能为其病理机制的重要组成部分.     

锌缺乏对生长期雄性大鼠海马泛素C末端水解酶L1表达的影响

[目的]观察缺锌对生长期大鼠海马泛素C末端水解酶L1(UCH-L1)表达的影响。[方法]将SD大鼠随机分为正常组、缺锌配喂组和缺锌组,正常组喂饲常锌饲料(32.5mg/kg),缺锌配喂组喂饲高锌饲料(73.5mg/kg),缺锌组喂饲缺锌饲料(1.2mg/kg)。饲养4周后处死动物,取海马组织,RT-PCR法检测UCH-L1mRNA的表达水平,Westernblot法检测UCH-L1蛋白的表达水平。[结果]与正常组和缺锌配喂组比较,缺锌大鼠海马中UCH-L1mRNA和蛋白的表达水平均显著下调。[结论]缺锌大鼠海马UCH-L1的表达异常,可能是缺锌导致认知损伤的重要机制之一。     

白藜芦醇抑制NLRP3炎性小体介导的细胞焦亡信号通路改善肥胖小鼠认知功能

目的 观察白藜芦醇(RES)对肥胖小鼠认知功能的保护作用,并探讨其海马组织核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎性小体—细胞焦亡信号通路机制。方法 50只小鼠随机均分为：正常对照组、模型组和白藜芦醇高(100 mg/kg)、中(50 mg/kg)、低(25 mg/kg)剂量组,喂养6个月后,检测小鼠认知功能,海马组织细胞焦亡水平,海马组织沉默信息调节因子1(SIRT1)、NLRP3、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1(Caspase-1)、白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-18和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)等蛋白表达情况。采用单因素方差分析或重复测量方差分析进行结果分析。结果 与模型组比较,白藜芦醇高剂量组小鼠终体质量降低(t=-14.453,P=0.021),海马组织细胞焦亡水平降低(t=-17.328,P=0.011),学习记忆能力改善,海马组织SIRT1蛋白表达升高(t=32.812,P<0.001),NLRP3、Caspase-1、IL-1β、IL-18和TNF-α蛋白表达均下降(t=-28.462,P=0.003;t=-38.148,P<0.001;t=-...