三种阳离子脂质体转染效率的测定

目的 测定研制的３种阳离子脂质体（Ａ,Ｂ,Ｃ）的转染效率,并且与ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ的转染效率进行比较。方法 采用分子克隆的方法。将ｌｕｅ基因片段插入ｐｃＤＮＡ３载体。以质粒ｐｃＤＮＡ３－ｌｕｃ与一定量的阳离子脂质体及ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ转染食管癌Ｅａ１０９细胞,一定时间后测定荧光强度以确定ｌｕｃ的表达量。结果 成功地构字质粒ｐｃＤＮＡ３－ｌｕｅ,转染后,。发现阳离子脂质体Ａ的转染效率较高,接近ｌ     

三种脂质体法转染试剂转染原代大鼠气道平滑肌细胞效果的比较

气道平滑肌细胞（airway smooth muscle cells,ASMCs）是呼吸道的重要组成部分之一,受气道内各类免疫细胞所释放的细胞因子和炎性介质的调节产生相应的收缩,其自身也能够分泌细胞因子、趋化因子、生长因子、黏附分子和基质金属蛋白酶等,参与气道炎症、气道高反应性与气道重塑的发生发展,是研究哮喘、COPD 等气道呼吸性疾病细胞分子机制的重要载体[1]。国内外研究中使用的 ASMCs 大多从活组织（比如动物气管、支气管和活检样品等）中分离并原代培养获得,这比细胞系更能准确地模拟来源组织在体内环境的特异性特征。     

TRI_(ZOL):一种适于一步分离RNA的新试剂

能否在基础和临床研究的很多领域取得进展取决于能否获得高质量的RNA。在众多分离RNA的方法中,一种建立在异硫氰酸胍/苯酚/氯仿抽提基础之上的一步RNA分离法已被广泛接受,主要由于这种方法在保证质量的同时可大幅度地减少分离RNA所需时间。TRI_(ZOL)是RNA一步分离法改进后的方法。 TRI_(ZOL)试剂是一种由苯酚和异硫氰酸胍组成的单相溶液。在样品均浆或裂解过程中,TRI_(ZOL)试剂能保证在破坏细胞和溶解细胞成份时RNA仍保持其完整性。加入氯仿,然后离     

用基因转染技术生产一种新的单克隆抗体

一种将免疫球蛋白(Ig)基因传染到淋巴细胞中的方法业已建立。传染到基因得到如实表达,并在传染链和内源链及两个传染链间发生组合。可用基因传染来重建Ig分子,并产生新的免疫球蛋白分子。这些新的分子能代表重链与轻链间专一结合,换言之,用DNA重组技术可在体外组合,转染及表达基因。这样,就能在种内及种间进行有效的转换。作者用此     

一种新的工程疫苗:多抗原性肽(MAP)

概述 1988年,Tam报道用分段固相法(stepwise solid-phase method)合成了一种新的多肽工程疫苗:多抗原性肽(multiple antigen peptide,MAP)。每一MAP分子由一呈对称分枝状的寡聚赖氨酸(Lys)核心和数条带抗原表位的寡肽链所组成。各     

脂质体介导的VEGF_(165)基因转染对内皮细胞生长的作用

构建血管内皮细胞生长因子基因VEGF165真核表达载体pcDNA3 VEGF165,以阳离子脂质体介导的基因转染技术 ,将基因转入原代培养的人脐静脉内皮细胞中。结果表明 ,基因转染 1h后细胞内就有VEGFDNA存在 ,VEGFmRNA水平显著上升 ;基因转染 2d后培养液上清VEGF蛋白表达显著上升 (135 5 12± 6 2 34)pg/ml和 (19 2 7± 2 96 )pg/ml,P <0 0 1。转染VEGF165基因 2d的内皮细胞再经程序降温冷冻保存复苏后 ,其存活率显著高于对照组 (pcDNA3 组 ) (90 13%± 2 84 %和81 5 2 %± 2 15 % ,P <0 0 5 ) ,凋亡率显著低于对照组 (7 15 %± 0 4 2 %和 17 6 1%± 1 5 6 % ,P <0 0 5 )。MTT法显示转染VEGF165基因能促进内皮细胞VEGF蛋白的表达 ,促进细胞增殖 ,抑制细胞凋亡。在治疗心脏及下肢动脉缺血性疾病中 ,VEGF165基因治疗可能具有重要的意义。     

一种新的培养嗅鞘细胞方法(英文)

为了建立一种新的培养嗅鞘细胞的方法,从而为神经诱导修复材料的研究提供种子细胞。本研究取新生鼠的嗅球最外两层经胰蛋白酶消化成单细胞悬液,经差速贴壁法纯化,观察并记录其形态特征;经HE染色以及神经生长因子蛋白受体p75(NGFR-p75)和S-100免疫组化染色鉴定并计算其纯度。结果显示,获得的嗅鞘细胞突起呈双极或三级,p75和S-100阳性细胞纯度达到91%。上述结果提示该方法经济易行,所获得的嗅鞘细胞纯度高、活性好。     

一种新的切取尸检颞骨的方法(摘要)

一种新的切取尸检颞骨的方法（摘要）徐伟恒刘兆华陈继川（第三军医大学大坪医院野战外科研究所耳鼻咽喉科，重庆６３００４２）本文介绍了一种经颅内、外联合径路切取尸检颞骨技术的方法和步骤。从器械准备、开颅取脑至颞骨的最后取出均作了详细叙述。提到必须注意的几点...     

降钙素基因相关肽(CGRP)——一种新的神经肽

降钙素基因相关肽(Calcitonin gene-related peptide,CGRP)是由重组DNA和分子生物学技术发现的一种新的神经肽。它在脑内的分布特性,不同于任何已知的神经肽,可能是起着递质或细胞外调节物样作用,是一个崭新的神经肽系统。     

一种新的蛋白质~(99m)Tc标记方法

直接法~(99m)Tc标记单克隆抗体或其它用于体内显像的蛋白质,因操作简单近来受到越来越多的重视。直接法标记的关键件是,选择合适的蛋白质及~(99m)TcO_4的还原剂,以获得高标记率及保持蛋白质的生物学活性。Thakur等最近报道的方法在这些方面较为成功。我们在其基础上,适应本实验室的条件,建立了用抗坏血酸及连二亚硫酸钠作为还原剂的标记方法,并初步用于动物实验研究。     

一种新的高效免疫抑制剂——FK—506

FK—506是继CsA 以后发现的又一高效免疫抑制剂。国外对此药的免疫药理作用已进行了许多研究。FK—506的强免疫抑制效应引起了免疫药理学家和临床医学家的极大兴趣。本文综述了近年来对FK—506的免疫抑制作用及其机理的研究概况,并介绍了其在同种和异种器官移植排斥及自身免疫病等方面的应用情况,对其临床应用前景作了简单的评述。     

增食欲素:一种新的神经肽

增食欲素作为一种神经肽 ,其神经元主要分布在下丘脑 ,必须与特异性受体结合才能发挥其生理作用 ,能够影响摄食行为、协调睡眠 觉醒系统、调节血糖代谢及疼痛的感知 ,借助其多样性和特异性的生理活性可以制造出治疗肥胖、糖尿病、恶病质等药物 ,解决目前许多依然困惑的难题     

单克隆抗体ELISA夹心法定量测定一种多聚体分子:铁蛋白

铁旦白(P.M.=465000)是一种确定亚基的多聚体,显示某些重复的决定簇,超过一种单克隆抗体分子可与相同的铁旦白分子结合。作者已建立了一种ELISA夹心法:将单克隆抗体Bambou 8包被于聚苯乙稀珠上,再用相同的抗体辣根过氧化物酶标记。是一种一步法:     

掌骨延长术治疗手指缺损(介绍一种新的手术方法)

<正> 本文介绍了18例病员全为男性,工业伤。损伤各指均有,以单纯拇指缺损为多。治疗方法是行自体髂骨移植掌骨延长术。总有效率达84％。植骨块长度:第一掌骨延长术植骨块长度以1.5～1.8cm为宜;第二掌骨延长术植骨块略长些,可达1.8～2.0cm左右,植骨来源可取自髂骨。若有邻近手指无功能的掌骨或指骨也可利用。掌骨延长术为缺损     

一种新的淋巴因子-白细胞介素-7(IL-7)

在最近澳大利亚召开的“Biology and Clinical APPlication of Cytokines and stemCells”国际会议和在法国举行的第六届淋巴因子专题讨论会上,Henney等报导了一种新的淋巴因子—白细胞介素7(IL-7)。 Immunex Corp(Seatfle,USA)已从骨髓基质细胞(Bone marrow sfromal cells)获得基因克隆。IL-7分子量为25KD,4×10~9活性单位/mg,作用浓度约为10~(-18)M。     

一种新的组织块培养新生大鼠雪旺细胞方法(英文)

目的:为了建立一种组织块培养雪旺细胞的有效方法,为周围神经组织工程修复的研究提供种子细胞。方法:本研究从新生大鼠的周围神经分离雪旺细胞,经组织块法培养并纯化,观察并记录其形态特征;经HE染色以及S-100免疫组化染色鉴定并计算其纯度。结果:结果显示,4 d后,获得的雪旺细胞突起呈双极或三极,S-100阳性细胞纯度达到95%以上。结论:上述结果表明该方法快速有效,所获得的雪旺细胞纯度高、活性好。     

1,25(OH)_2D_3一种新的免疫调节激素

1,25(OH)_2D_3在无机盐及骨骼代谢的重要性早已明确肯定,但是1,25(OH)_2D_3受体广泛地分布于各组织,并不一定参与无机盐代谢,显然它一定有比以前所认为的更广泛生物学功能,作者观察到正常单核细胞及恶性淋巴细胞上存在着1,25-(OH)_2D_3受体,而静止的T-淋巴细胞与B-淋巴细胞则无此种受体。虽然从正常人获取的T-与B-淋巴细胞表现出1,25(OH)_1D_3受体,但是在离体试验中此细胞是分别被致有丝分裂的植物凝血素(PHA)与Epst Bar病毒所激活的。PHA刺激下淋巴细胞增生,诱发各种淋巴刺激素,包括白细胞间介素(IL-2)的生成,H-2系T-淋巴细胞生长的重要因子。本研究表明,1,25(OH)_2D_3由ILPHA     

细胞焦亡:一种新的细胞死亡方式

细胞焦亡是近年来发现并证实的一种新的程序性细胞死亡方式,其特征为依赖于半胱天冬酶-1(caspase-1),并伴有大量促炎症因子的释放.细胞焦亡的形态学特征、发生及调控机制等均不同于凋亡、坏死等其他细胞死亡方式.研究表明,细胞焦亡广泛参与感染性疾病、神经系统相关疾病和动脉粥样硬化性疾病等的发生发展,并发挥重要作用.对细...