荷瘤小鼠骨髓来源树突状细胞诱导的抗肿瘤作用

目的:探讨能否从荷瘤小鼠骨髓细胞诱导出功能正常、具有抗肿瘤作用的树突状细胞(DC),与正常小鼠骨髓来源的DC比较有无差异。方法:于体外用mGM-CSF和mIL-4分别从正常小鼠和CT26结肠腺瘤小鼠的骨髓细胞诱导DC,并用CT26肿瘤细胞抗原冲击致敏。用相差显微镜观察DC的形态学变化;流式细胞术检测CT26肿瘤细胞抗原致敏前后DC表面分子变化;3H-TdR掺入法检测肿瘤抗原致敏DC刺激T细胞增殖的能力;乳酸脱氢酶(LDH)4 h释放法检测肿瘤抗原致敏DC诱导同基因T细胞增殖、分化为细胞毒性T细胞(CTL)的杀伤活性。结果:荷瘤小鼠骨髓来源DC与正常小鼠骨髓来源DC的Ia-Kd、H-2Kd、CD80、CD86I、CAM-1表达水平和它们刺激T细胞增殖的能力以及所诱导产生的CTL杀伤活性均无显著性差异。结论:荷瘤小鼠骨髓来源的DC与正常小鼠骨髓来源的DC具有相似的功能和抗肿瘤作用,提示可以从荷瘤机体的DC前体诱导出具有抗肿瘤作用的DC用于肿瘤的免疫治疗。     

肿瘤抗原致敏树突状细胞诱导机体产生抗肿瘤作用的实验研究

目的：探讨肿瘤抗原冲击致敏的树突状细胞（Dc）诱导机体产生的特异性抗肿瘤作用。方法：体外培养的小鼠骨髓树突状细胞用小鼠结肠腺癌细胞株CT26细胞抗原冲击致敏；混合淋巴细胞反应检测肿瘤抗原致敏DC刺激同基因型T淋巴细胞增殖的能力；观察小鼠经皮下免疫肿瘤抗原致敏DC后诱导产生肿瘤特异性细胞毒性T淋巴细胞（CTL）和抵抗CT26细胞再攻击的能力。结果：肿瘤抗原致敏DC能有效刺激同基因型T淋巴细胞增殖反应；小鼠经肿瘤抗原致敏DC免疫后可诱导强烈的CT[，杀瘤活性，产生免疫保护作用，能有效抵抗CT26细胞再攻击，肿瘤生长明显减缓，与未经抗原致敏DC免疫的小鼠组比较，差异有统计学意义（P〈0．01）。结论：肿瘤抗原致敏的DC能有效诱导机体产生特异性的抗肿瘤作用。     

大鼠树突状细胞在抗肿瘤中作用的初步研究

本文采用大鼠脾脏细胞分离获得的树突状细胞（ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌｓ ＤＣｓ）联合ＩＩＬ－２诱生的ＩＡＫ细胞进行体内，外抗肿瘤试验，结果发现ＤＣｓ能明显促进ＬＡＫ的抗肿瘤作用。     

大鼠树突状细胞在抗肿瘤中作用的初步研究

本文采用大鼠脾脏细胞分离获得的树突状细胞（ｄｅｎｄｒｉｔｉｃｃｅｌｓＤＣｓ）联合ＩＬ－２诱生的ＬＡＫ细胞进行体内、外抗肿瘤试验，结果发现ＤＣｓ能明显促进ＬＡＫ的抗肿瘤作用     

人外周血及脐血树突状细胞的体外诱导及抗肿瘤作用比较

目的:比较人外周血和脐血体外诱导扩增的树突状细胞在冻融抗原激活后的抗肿瘤作用.方法:分离正常人外周血或脐血单个核细胞,用重组粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、白介素4(IL-4)将其分别诱导为外周血树突状细胞(PbDC)及脐血树突状细胞(CbDC),2者分别于诱导前、诱导第7 d及抗原刺激3 d后用流式细胞仪检测DC表面共刺激分子的改变;分别将PbDC、CbDC与外周血T细胞共孵育,以K562为靶细胞,采用MTT比色法检测T细胞抗肿瘤活性的差异.结果:PbDC于诱导第7 d、CbDC于诱导第5 d呈现典型的DC形态.外周血和脐血单个核细胞经GM-CSF、IL-4诱导培养后,CD86、CD11c、CD54、MHC-I类分子表达均增高,脐血单个核细胞MHC-Ⅱ类分子表达增高,与培养前相比差异有统计学意义(P＜0.01).负载抗原后,MHC-I和CD54表达进一步增高,与负载抗原前比较差异有统计学意义(P＜0.05).分别以PbDC或CbDC诱导活化的T细胞为效应细胞,均可使肿瘤细胞的生长受到抑制,并最终导致其死亡,杀伤率与未负载抗原的对照组相比差异有统计学意义(P＜0.01).PbDC组及CbDC组对肿瘤细胞均有杀伤活性,2组对比差异无统计学意义(P＞0.05).结论:经肿瘤抗原激活的外周血及脐血DC具有相似的抗肿瘤活性.     

脐血树突状细胞的超微结构及其抗肿瘤效应的实验研究

目的 观察脐血来源的树突状细胞(dendritic cell，DC)的超微结构，并研究其在肿瘤免疫中的作用。方法 从脐血中分离单个核细胞，在含有粒单细胞集落刺激因子(GM～CSF)、白细胞介素4(IL-4)、肿瘤坏死因子α(TNFα)及人AB型血清的RPMI1640培养基中培养，流式细胞仪检测其表型。并与同基因型T细胞共同培养72h，检测激发的T细胞对多发性骨髓瘤细胞株XG-7细胞的抑制作用。结果 透射电镜观察表明，细胞表面有大量不规则树枝状突起(粗细不等)，细胞核不规则，核仁小；DC可诱导特异性CTL的产生，肿瘤细胞生长受到明显抑制。结论 脐血中的DC前体细胞可在体外诱导成为功能性DC，并可诱导肿瘤特异性CTL的产生。     

树突状细胞及其负载胃癌细胞总RNA的抗肿瘤作用

目的 以小鼠胃癌细胞总RNA负载树突状细胞(DC),研究其抗肿瘤免疫作用。方法 磁性细胞分选器(MACS)自小鼠脾细胞中分选出CDllc 的DC作短期培养,以小鼠前胃癌细胞株的总RNA脉冲DC,分别以RNA脉冲的DC(RNA/DC)和未脉冲的DC(UDC)皮下注射免疫小鼠2次;免疫后7d,皮下接种小鼠前胃癌细胞MFC 5×105/鼠,以未作免疫注射的小鼠作为对照。接种肿瘤细胞后21d,处死实验动物,测量肿瘤体积,检测自然杀伤细胞(NK)、细胞毒性T淋巴细胞(CTL)活性和血清IL-12含量。结果 RNA/DC免疫组、UDC免疫组和对照组的皮下肿瘤体积分别为(0.3688±0.6571)、(0.7536±0.3659)、(2.6323±1.1435)cm3。RNA/DC免疫组外周血和脾细胞NK活性均明显升高,较对照组分别高出66.2％和65.4％;其肿瘤特异性CTL也明显升高,较对照组升高49.5％。UDC组NK和CTL活性也明显高于对照组。结论 短期培养的DC和以肿瘤细胞总RNA作为抗原脉冲的DC均可诱导较强的抗肿瘤免疫。     

中药多糖增强树突状细胞抗肿瘤免疫作用的研究进展

恶性肿瘤是一大类严重威胁人类健康并危及人类生命的疾病。近几年,人们发现中药有效成分之一的中药多糖具有很好的免疫调节抗肿瘤作用,在一定剂量范围内能够增强机体免疫功能或使紊乱的机体免疫状态恢复正常。     

树突状细胞的体外培养及其诱导的抗肿瘤免疫作用

目的 建立体外培养扩增树突状细胞（DC）的方法,并观察其诱导的抗肿瘤免疫作用。方法 分离外周血单个核细胞,应用GM－CSF及IL－4诱导DC产生,用TNF－α和PGE2促进其成熟,并用肺癌细胞系GLC－82可溶性抗原致敏。将成熟DC与自体LAK细胞混合培养（DC－LAK）,用MTT法检测DC－LAK细胞及LAK细胞对多种肿瘤细胞系的杀伤作用。结果 经GM－CSF,IL－4,TNF－α,PGE2作用后,细胞表达CD1a阳性率为71．0％,CD8350．0％,CD14阳性率低于10．0％,高表HLA－I,HLA-Ⅱ和CD45,为典型的DC表型特征。DC－LAK和LAK细胞对4种肿瘤细胞（GLC－82,A549,moser和MCF－7）的杀伤率,前为84．7％,66．9％,49．3％和56．0％,后为43．5％,31．3％,45．0％和32．4％。结论 成功的诱导出具有典型形态特征及增强LAK细胞杀伤活性的DC。     

树突状细胞抗肿瘤作用研究进展

树突状细胞(dendritic cell,DCs)是体内最有效的专职抗原递呈细胞(antigen presenting cell,APC),是识别病原侵入的第一道防线.机体的免疫识别首先由DCs捕获、加工和处理抗原,再将抗原递呈给T、B淋巴细胞,从而引发一系列免疫应答,在体内发挥强大的免疫监视功能[1].近年来,DCs在抗肿瘤免疫中所发挥的重要作用日益受到人们的重视.随着对DCs肿瘤抗原识别、摄取、加工处理及提呈的分子基础和作用机制的进一步阐明,以DCs为基础的肿瘤疫苗治疗得到快速发展.目前在DCs疫苗抗肿瘤实验研究和临床研究方面已取得了令人振奋的进展,显示了广泛的应用前景.     

树突状细胞在免疫学中的作用

树突状细胞（dentriticcell,DC）是一类膜表面高度表达MHCll类分子,能移行至淋巴器官和刺激初始型T细胞活化并具有一些相对特异性表面标志的细胞[1]。特点是形态不规则,胞浆有许多长突起呈触须状,使整个细胞的形态象一个蜘蛛。近年来,随着分子免疫学,分子生物学等理论和技术的日趋完善,人们对po在机体中所起的重要作用有了更深的了解。DC是目前发现的功能最强的抗原提呈细胞（antigenpresentingcell,APC）,具有诱导初次免疫应答的独特功能[2],与免疫激活和免疫耐受密切相关,在抗感染、抗肿瘤、移植排斥和自身免疫疾病中发挥…     

树突状细胞抗肿瘤免疫的研究进展

树突状细胞(dendritic cell,DC)是体内最有效的专职抗原递呈细胞(antigen presenting cell,APC),其主要功能为捕获、加工处理抗原,并将抗原信息呈递给T、B淋巴细胞,进而引发一系列免疫应答.有别于其他APC,DC最大特点是能够刺激初始型T细胞活化,在诱导机体免疫应答中起关键作用.近年来,随着对DC在肿瘤抗原的识别、加工处理及递呈过程中作用机制的进一步阐明,DC在抗肿瘤免疫中的重要作用日益受到关注,DC介导的肿瘤免疫治疗研究也取得了较大进展,显示其在抗肿瘤免疫治疗中良好的应用前景.本文就DC的生物学特性、抗肿瘤机制、DC疫苗及其在肿瘤免疫治疗中的应用等方面予以综述.     

乳酸杆菌在树突状细胞诱导抗肿瘤免疫杀伤中的作用

目的 探讨乳酸杆菌在树突状细胞(DC)诱导抗肿瘤免疫杀伤中的作用及其意义.方法 采用混合淋巴细胞反应(MLR)、ELISA法分别测定经乳酸杆菌作用后的冻融宫颈癌抗原负载DC体外刺激T细胞的增殖情况以及上清液中白细胞介素12(IL-12)与γ干扰素(IFN-γ)的含量;噻唑蓝法(MTT法)测定乳酸杆菌冻融抗原致敏DC激活的细胞毒T淋巴细胞(CTL)对宫颈癌HeLa细胞的杀伤作用.结果 与单纯冻融抗原、单纯乳酸杆菌致敏DC比较,经乳酸杆菌作用后的冻融宫颈癌抗原负载DC在体外明显增强T细胞的增殖能力(P<0.05)、增加上清液中IL-12与IFN-γ的含量(P<0.05);与单纯冻融抗原、单纯乳酸杆菌致敏DC比较,乳酸杆菌明显增强冻融抗原致敏DC激活的CTL对宫颈癌Helm细胞的杀伤力(P<0.05),结论乳酸杆菌可以增强树突状细胞诱导的对宫颈癌细胞的肿瘤免疫杀伤作用.     

人胃癌细胞RNA转染树突状细胞诱导特异性抗肿瘤免疫的实验研究

目的：观察人胃癌细胞株RNA转染的树突状细胞（DC）所诱导的行异性抗肿瘤免疫效应，探讨肿瘤细胞RNA直接转染DC进行胃癌生物治疗的可能性。方法：胃癌细胞株AGS体外培养，提取RNA；正常人外周血，进行体外DC的培养扩增；胃癌RNA直接转染DC，MTT法检测胃癌RNA活化DC所诱生的淋巴细胞对胃癌AGS、视网膜母细胞瘤SoRb-70的体外杀伤效应。结果：正常人外周血来源的DC，经胃癌AGS细胞株RNA直接转染后，成功诱导特异性抗肿瘤免疫反应，AGS RNA组CTL在靶效比为20：1时对AGS、SoRb-70的杀伤率分别为84．54％、1．53％，而对照组对这两种细胞的杀伤率分别为1．34％和1．70％。结论：肿瘤RNA转染DC可以诱导特异性抗肿瘤免疫，是一种有前景的胃癌治疗手段，有进一步研究的价值。     

细胞因子诱导的杀伤细胞的生物学特性及抗肿瘤作用研究

目的 探讨细胞因子诱导的杀伤细胞（CIK）的生物学特性及抗肿瘤作用。方法 用淋巴细胞分离液分离健康献血者血中单个核细胞,用IFN-γ、IL-1β、IL-2、CD3单抗诱导CIK细胞。以CD3AK细胞作为对照。流式细胞仪检测细胞表型;乳酸脱氢酶（LDH）释放法分析细胞毒活性。结果 CIK细胞和CD3AK相比,在前期细胞增殖能力无明显差异,但至第10～21天时CIK细胞的增殖能力显著高于CD3AK细胞（P〈0．05）。诱导14d时,CD3^＋细胞和CD3^＋CD56^＋阳性细胞显著增多（分别约占84．75％和33．45％）。不同效靶比例的CIK细胞对K562细胞、BeL-7402细胞和Hela3细胞的溶瘤率均显著高于CD3AK细胞（P〈0．01）,在40：1的效靶比时,其杀瘤活性最强。但CIK细胞对不同肿瘤细胞的杀伤率比较无显著性差异（P〉0．05）。结论 CIK细胞是CD3^＋CD56^＋双阳性细胞群,其增殖能力及杀瘤活性明显优于CD3AK细胞。CIK细胞可作为一种新的广谱、高效的免疫效应细胞应用于临床。     

树突状细胞疫苗抗肿瘤作用研究进展

近年的研究证明,肿瘤本身的低免疫原性,肿瘤产生的免疫抑制因子,以及肿瘤病人免疫力的低下,都是造成肿瘤细胞"免疫逃逸"现象发生的原因。而树突状细胞作为体内功能最强的抗原递呈细胞,在以T细胞识别肿瘤抗原为核心的肿瘤免疫治疗中起重要作用。本文主要就树突状细胞在治疗肿瘤方面的作用及研究进展作一综述。     

慢性粒细胞白血病树突状细胞诱导及其抗肿瘤功能的体外研究

目的 探讨人慢性粒细胞白血病(CGL)来源的树突状细胞(DC)的免疫功能。方法 应用重组人粒-巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)联合重组人白介素(rhIL)-4在体外诱导培养CGL细胞,获得DC。应用流式细胞仪(FACS)检测诱导前、后的细胞表型,观察其诱导的细胞毒T淋巴细胞(CTL)的体外抗肿瘤效应。采用酶联免疫吸附试验(ELIS)测定DC培养及DC与外周血单个核细胞(PBMNC)共同培养的上清液中IL-12及干扰素(IFN)-γ的量。结果 联合rhGM-CSF及rhIL-4可诱导CGL细胞分化为DC;CGL-DC体外激活的CTL对CGL细胞具有特异性细胞毒活性;分别从诱导DC培养上清液和DC PBMNC培养的上清液中检测出一定量IL-12及IFN-γ。结论 CGL-DC具有抗原提呈细胞的免疫功能,可望用于CGL的免疫治疗。     

树突状细胞抗肿瘤研究进展

树突状细胞 (ＤｅｎｄｒｉｔｉｃＣｅｌｌｓ ,ＤＣ)因其成熟时生出许多树突样伪足而得名 ,是目前发现的功能最强的专职性抗原提呈细胞 (Ａｎｔｉｇｅｎ - ｐｒｅｓｅｎｔｉｎｇＣｅｌｌｓ ,ＡＰＣ) ,能摄取和加工提呈抗原 ,表达高水平ＭＨＣ分子、共刺激分子、粘附分子并分泌高水平ＴＨ1型细胞因子ＩＬ - 12 ,启动Ｔ细胞介导的免疫反应。近年来 ,越来越多的证据表明ＤＣ激活的细胞免疫尤其是ＣＴＬ(ＣｙｔｏｔｏｘｉｃＴＬｙｍｐｈｏｃｙｔｅ)介导的免疫反应。在机体抵御恶性肿瘤中发挥着十分重要的作用 ,而新近的ＤＣ疫苗临床Ⅰ、Ⅱ期试验…     

树突状细胞及其抗肿瘤研究进展

树突状细胞(dendritic cell，DC)是一组骨髓衍生的与单核细胞有亲缘关系、不同于淋巴细胞的免疫细胞，因其细胞膜上具有膜样或刺样突起而得名，DC的最大特点是能够激活初始T淋巴细胞，诱导免疫应答，在肿瘤免疫过程中，T细胞介导的免疫应答起着主导作用。T细胞的致敏、激活、扩增，依赖抗原提呈细胞，T细胞识别肿瘤抗原不是被肿瘤细胞提呈，而是被APC提呈，而DC是体内最具免疫活力的抗原提呈细胞．因此，在肿瘤免疫治疗中的作用越来越被重视。     

胃癌Hsp70-肽复合物致敏树突状细胞抗肿瘤作用的研究

目的探讨胃癌Hsp70-肽复合物致敏树突状细胞(DC)抗肿瘤作用。方法采用GM-CSF,IL-4刺激,培养胃癌患者外周血单个核细胞,增殖产生大量DC,用离子交换层析法从临床胃癌组织中提取Hsp70肽复合物,并行westernbolt鉴定,Hsp70-肽复合物修饰DC,通过细胞因子检测试剂盒对修饰DC上清液进行检测,用DC激活混合T淋巴细胞,观察其对胃癌细胞的杀伤作用。用未被Hsp70-肽复合物修饰DC作对照。结果Hsp70-肽复合物DC分泌IL-12、TNF-α、IL-1β含量分别为(305.02±20.70)pg/ml、(480.61±32.52)pg/ml和(519.60±39.12)pg/ml,而未被Hsp70修饰DC分泌IL-12、TNF-α、IL-1β的含量分别为(3.81±0.84)pg/ml、(3.50±0.21)pg/ml、(50.11±2.86)pg/ml,两者比较,有显著性差异(P<0.01)。Hsp70修饰DC激活的T淋巴细胞后对胃癌细胞的杀伤率为(93.54±8.26)%明显高于对照组的(6.20±0.38)%(P<0.01)。结论胃癌Hsp70-肽复合物致敏DC并激活T淋巴细胞后对胃癌细胞具有很强的杀伤作用。