低氧大鼠肺内结缔组织生长因子表达与肺血管重建的关系

目的了解低氧肺动脉高压时肺内结缔组织生长因子（CTGF）与肺血管重建的关系。方法将20只雄性Wistar大鼠分为低氧性肺动脉高压组（n=10）和对照组（n=10）两组,肺动脉高压组以常压低氧建立大鼠肺动脉高压模型,以微导管法测定各组大鼠肺动脉压,采用免疫组化法检测各组大鼠肺内CTGF和Ⅰ型胶原的表达,对肺组织切片进行图象分析。结果低氧3周后,低氧组大鼠形成明显的肺动脉高压,管壁增厚和管腔狭窄,低氧组大鼠肺动脉压（2.89±0.41）kP,右心室肥厚指数[RV/（LV＋S）]为41.01±2.79、管壁厚度占外径的百分比（WT%）为35.13±10.31,管壁面积占血管总面积的百分比（WA%）为54.18±11.46,分别与正常对照组（1.37±0.26）kP、24.59±3.51、23.66±9.74和40.59±13.87相比明显升高（P〈0.01）;肺小动脉CTGF免疫阳性染色在低氧组大鼠为1.32±0.05,与正常对照组1.10±0.04相比明显增强（P〈0.01）,低氧组大鼠Ⅰ型胶原免疫阳性染色为1.30±0.04,与正常对照组1.14±0.05相比明显增强（P〈0.01）。结论低氧所致CTGF的合成增多在低氧性肺血管重建和肺动脉高压的发病过程中起一定的作用。     

姜黄素对哮喘大鼠肺内胶原沉积、结缔组织生长因子表达及气道重构的影响

目的:通过观察姜黄素对哮喘大鼠肺内胶原沉积、结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)表达的影响,探讨姜黄素对哮喘气道重构的治疗作用。方法:36只雄性SD大鼠随机分为正常对照组(A组)、哮喘模型组(B组)、姜黄素治疗组(C组)各12只,采用卵蛋白致敏大鼠哮喘模型,观察3组动物哮喘发作症状、胶原沉积情况及SABC免疫组化法检测CTGF在肺组织的表达变化。结果:B组大鼠哮喘发作症状明显重于C组,A组无症状。B组支气管黏膜下、血管壁及周围、肺泡壁、肺间质均有胶原大量沉积,C组胶原沉积程度明显轻于B组。A组胶原沉积不明显。免疫组化发现B组CTGF表达最强,C组较弱,A组微弱表达。结论:姜黄素可抑制哮喘大鼠肺组织的胶原沉积,在延缓气道重建中起重要作用,其作用机制可能是通过抑制CTGF的表达来实现。     

阿托伐他汀对高血压大鼠血管纤维化及结缔组织生长因子的影响

目的:探究阿托伐他汀(atorvastatin)对肾血管性高血压血管纤维化及结缔组织生长因子(CTGF)表达的影响。方法:24只SD大鼠随机分为假手术组(N组)、高血压组(RH组)、阿托伐他汀组(他汀组)各8只;将RH组及他汀组大鼠建立二肾一夹肾血管性高血压(2K1C-RH)大鼠模型。术后4周末,他汀组开始以阿托伐他汀(10mg.Kg-1.d-1)灌胃,共8周。治疗前后RT-PCR法检测各组大鼠收缩压、胸主动脉CTGF、纤维连接蛋白(FN)、Ⅲ型胶原(ColⅢ)的表达,并用免疫组化显示CTGF的表达。结果:与N组比较,RH组大鼠胸主动脉CTG-FmRNA、FNmRNA、ColⅢmRNA显著增加(P0.01);他汀组与RH组比较则3项指标明显下调(P0.05)。结论:阿托伐他汀能抑制高血压血管纤维化,可能与下调CTGF的表达有关。     

细菌诱导大鼠慢性阻塞性肺疾病中结缔组织生长因子的mRNA表达

目的:研究结缔组织生长因子的mRNA在细菌感染导致的慢性阻塞性肺疾病大鼠肺组织中的表达。方法:以适量肺炎链球菌反复经气管穿刺注射感染大鼠,制作大鼠慢性阻塞性肺疾病模型,在感染后的不同时间段处死大鼠,采用实时荧光定量PCR,对大鼠肺组织中结缔组织生长因子的mRNA表达情况进行研究。结果:生理盐水对照组结缔组织生长因子mRNA的表达明显低于肺炎链球菌组(P<0.01)。同时,肺炎链球菌组结缔组织生长因子mRNA的表达随着细菌感染时间的增加而升高(P<0.01)。结论:大鼠长期反复细菌感染可诱导慢性阻塞性肺疾病,其机制可能和结缔组织生长因子表达上调有关。     

肺心合剂对肺动脉高压大鼠肺血管重建的影响

目的:探讨肺心合剂对野百合碱诱发肺动脉高压大鼠肺血管重建的影响.方法:利用野百合碱(50 mg/kg)复制大鼠肺心病模型.60只雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组,模型组,肺心合剂低、中、高剂量组及硝苯地平组6组,每组10只.分别于制模后14 d灌胃相应药物,连续用药8 d.处死动物后,利用特殊染色结合病理图像分析方法测定肺小动脉病理(光镜下观察和弹力纤维染色切片)及其形态计量学(指标为与终末细支气管伴行的肺小动脉管壁中膜厚度、外径、管壁面积、室管腔面积以及与血管外径的比值).结果:肺心合剂及硝苯地平均能明显减轻模型大鼠的肺血管重构(P均<0.01),以肺心合剂高剂量组效果最好;但治疗组各指标仍未完全恢复到正常对照组水平.结论:肺心合剂能部分逆转肺血管结构重建,有效降低肺动脉高压.     

运动训练对大鼠损伤远端脊髓及骨骼肌血管内皮生长因子表达的影响

目的:明确运动训练对大鼠损伤远端脊髓及骨骼肌血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响,探讨运动促脊髓损伤功能恢复的机制。方法:成年雌性SD大鼠24只,采用改良Allen撞击法制作T9不完全性脊髓损伤模型。术后随机分为损伤后1d组、1周组、训练组(术后1周开始训练,共4周)、对照组(未行训练)。分别在损伤前、损伤后第1、2、3、4及5周时采用Basso-Beattie-Bresnahan(BBB)评分评定运动功能。取损伤后1d、1周,对照组及训练组大鼠L5—S1节段脊髓及腓肠肌新鲜组织,采用RT-PCR及Westernblot法测定VEGFmRNA及蛋白表达。结果:①对照组与训练组BBB评分均较损伤后1周、2周明显提高,但训练组较对照组增加更为显著(P<0.05);②训练组脊髓及腓肠肌VEGFmRNA及蛋白表达较对照组、损伤后1d、1周组显著增加(P<0.05);对照组与损伤1周组、1d组比较脊髓及腓肠肌内VEGF表达差异无显著性(P>0.05);但1周组脊髓内VEGF较1d组表达增加(P<0.05),而腓肠肌内VEGF表达较1d组降低(P<0.05)。结论:运动训练能有效诱导脊髓损伤大鼠远端脊髓及骨骼肌VEGF表达,促进运动功能恢复。     

低氧诱导因子-1α和血管内皮生长因子在玉树地震救援人员急性高原反应低氧性肺动脉高压发生中的作用

目的 观察低氧诱导因子-1α(HIF-1α)和血管内皮生长因子(VEGF)在急性高原反应(AHAR)低氧性肺动脉高压(HPH)发生中的作用及返回低海拔后的变化。方法 选择2010年4月14日青海玉树大地震后由低海拔(1 500m)快速进入高海拔地区(3 700m)并从事重体力劳动的18～35岁男性官兵96名,根据AHAR症状评分分为无AHAR组(25名)、轻中度AHAR组(47名)和重度AHAR组(24名);在高海拔地区停留50 d后下撤前及返回低海拔地区后12h、15d分别测定平均肺动脉压(mPAP)和血清HIF-1α、VEGF水平。同时选择低海拔地区50名健康官兵作为对照。结果 高海拔无AHAR组mPAP(mm Hg,1 mm Hg=0.133 kPa)和血清HIF-1α(pg/L)、VEGF(ng/L)水平（分别为24.23±1.56、68.80±7.52、82.56±6.32）明显高于低海拔对照组(18.50±1.30、50.95±3.33、65.78±4.03);且随AHAR加重,各指标进一步升高,高海拔轻中度AHAR组分别为28.42±1.32、88.10±9.20、104.82±10.36,重度AHAR组分别为34.70±2.94、117,93±13.46、136.77±12.03,组间两两比较差异均有统计学意义(均P＜0.01)。高海拔AHAR总计分与mPAP、血清HIF-1α、VEGF水平均呈显著正相关(r值分别为0.672、0.737、0.634,均P＜0．01);mPAP与血清HIF- 1α、VEGF水平呈显著正相关(r值分别为0.706、0.638,均P＜0.01)。与低海拔对照组比较,96名官兵进入高海拔地区50 d时mPAP (mm Hg)和血清HIF- 1α (pg/I)、VEGF (ng/L)水平（分别为29.08±4.22、91.16±20.58、107.11±10.32）显著升高(均P＜0.01),返回低海拔地区12 h(分别为23.05±3.18、70.99±8.22、78.65±6.47)、15 d（分别为18.96±1.75、52.31±4.92、63.08±4.55）时各指标显著下降,且15d明显低于12 d(均P＜0．01),15d时各指标与低海拔对照组比较差异均无统计学意义(均P＞0.05)。结论 人体在高海拔低氧地区并从事重体力劳动时,AHAR越重,mPAP和血清HIF-1α、VEGF水平就越高,说明HPH与HIF-1α、VEGF水平升高有密切关系;返回低海拔地区后12h上述指标有显著改善,15d可恢复到正常水平。     

高糖透析液对大鼠腹膜结缔组织生长因子表达的作用

目的探讨腹膜透析液对大鼠腹膜结缔组织生长因子（CTGF）的表达及细胞外基质（ECM）合成的影响。方法将中南大学湘雅二医院动物实验中心提供的SD大鼠随机分为4组：正常对照组（Con）、生理盐水组（NS）、低糖透析液组（LG）、高糖透析液组（HG）。4周后,评价腹膜的功能。VG染色镜下测量腹膜胶原组织厚度。免疫组织化学方法检测CTGF、TGF-β1及纤连蛋白（FN）蛋白质的表达。采用RT-PCR检测大鼠腹膜组织中CTGF和TGF-β1mRNA的表达。结果LG、HG组与Con、NS组相比较,超滤量均显著下降（P〈0.05）;HG组与LG组比较,其超滤量明显减少（P〈0.05）。D/Pcr的比较：HG组比Con、NS组升高（P〈0.05）;D/DO的比较：HG组比Con、NS组明显下降（P〈0.05）,LG组比Con组低（P〈0.05）。HG组腹膜胶原厚度比与其余各组均增厚（P〈0.05）;LG组比Con组增厚（P〈0.05）;HG组CTGF、TGF-β1、FN蛋白表达水平显著高于其他各组（P〈0.05）;LG组显著高于Con、NS组（P〈0.05）。在Con及NS组中,TGF-β1、CTGFmRNA呈低水平表达,TGF-β1、CTGFmRNA在HG组中表达最高（P〈0.05）。结论腹膜透析液尤其是高糖腹膜透析液,能明显诱导大鼠腹膜CTGF的表达增强,并促使腹膜纤维化发生。     

低氧对肺动脉高压大鼠肺组织尾加压素Ⅱ合成及释放的影响

目的：探讨低氧性肺动脉高压大鼠肺组织中尾加压素Ⅱ的合成、分泌及其在低氧性肺动脉高压病理生理过程中的作用。方法：实验选用雄性Wistar大鼠76只，随机分为正常对照组，低氧10，20，30d组，每组19只，在低氧10d和20d后各有1只死亡。间断常压低氧方法复制低氧性肺动脉高压大鼠模型，应用光镜、免疫组化、放射免疫分析等方法，测定低氧各组和对照组大鼠肺组织中尾加压素Ⅱ蛋白表达及血浆、支气管肺泡灌洗液尾加压素Ⅱ含量的动态变化。结果：各组大鼠支气管黏膜上皮细胞、肺血管内皮细胞及其平滑肌细胞、肺巨噬细胞、肺泡Ⅱ型上皮细胞和支气管软骨细胞中尾加压素Ⅱ均呈阳性表达，低氧后上述各种细胞中尾加压素Ⅱ表达明显增强。血浆和支气管肺泡灌洗液尾加压素Ⅱ浓度于低氧10d开始升高[(4、26&;#177;1．61)，(20．93&;#177;6、64)pmol／L]，20d时两者均达高峰[(9．03&;#177;1．80)，(34．71&;#177;5．31)pmol／L]明显高于对照组[(3．74&;#177;1．08)，(16．83&;#177;4．99)pmol／L](t=6．15，7．39，P&;lt;0．001)，低氧30d出现下降趋势，但仍高于对照组(t=2．24，3．97，P&;lt;0．05)。结论：低氧可促进肺组织中尾加压素Ⅱ的合成和释放；在低氧性肺动脉高压病理生理过程中，尾加压素Ⅱ对调节肺循环和肺通气及肺血管改建等方面发挥重要作用。     

川芎嗪对肺动脉高压大鼠肺血管凋亡的影响

目的 观察川芎嗪对低O2高CO2肺动脉高压大鼠肺动脉平滑肌凋亡以及Bcl-2、Bax表达的影响.方法 将30只SD大鼠按随机数字表法分为正常对照组(N组)、低O2高CO2组(H组)、低O2高CO2+川芎嗪组(H+LTZ组)3组,每组10只.监测各组大鼠血流动力学变化;观察肺细小动脉管壁面积与总面积比值(WA/TA);用原位末端缺刻标记法(TUNEL)检测肺细小动脉凋亡情况,并计算凋亡指数(AI);用免疫组化法检测Bcl-2、Bax的含量.结果 H组和H+LTZ组平均肺动脉压(mPAP)、右心室重量比、WA/TA比值均明显高于N组,H+LTZ组则均明显低于H组(P均<0.01);3组间平均颈动脉压(mCAP)无明显差异(P均>0.05).H组和H+LTZ组肺细小动脉AI显著低于N组,H+LTZ组则显著高于H组(P<0.05或P<0.01).H组和H+LTZ组Bcl-2含量均显著高于N组,Bax含量、Bax/Bcl-2比值均显著低于N组;H+LTZ组Bcl-2含量显著低于H组,Bax含量、Bax/Bcl-2比值显著高于H组(P均<0.01).结论 川芎嗪有抑制慢性低O2高CO2肺动脉高压和肺血管重建的作用,抑制肺细小动脉的增殖、促进肺细小动脉凋亡是其可能机制.     

联合检测CTGF和NT-ProBNP在心衰诊断中的应用价值

目的：探讨血清结缔组织生长因子（CTGF）和N末端B型脑钠肽（NT-ProBNP）联合检测在心衰临床诊断中的价值。方法：对100例心衰患者和100例健康人群的血清CTGF、NT-ProBNP水平进行对比分析,观察CTGF、NT-ProBNP联合应用在心衰诊断中的意义。结果：随着NYHA分级的增加,CTGF、NT-ProBNP水平检查结果明显增加（P〈0.05）;Pearson＇s分析结果显示：慢性心衰患者的CTGF和NT-ProBNP水平与LVEF呈显著负相关（P〈0.05）;ROC曲线分析结果显示：与单独检测NT-ProBNP相比,联合检测CTGF和NT-ProBNP诊断心衰时的ROC曲线下面积明显增大（P〈0.05）。结论：在心衰的检测中,联合检测CTGF和NT-ProBNP有着较理想的灵敏度和特异性,能有效提高心衰诊断的准确性,且血清学检测简单方便,可作为诊断心衰的较为理想的辅助指标。     

Increasing angiotensin-converting enzyme(ACE)2/ACE axes ratio alleviates earlypulmonary vascular remodeling in a porcine model of acute pulmonary embolism with cardiac arrest

BACKGROUND:Acute pulmonary embolism(APE)with cardiac arrest(CA)is characterized by high mortality in emergency due to pulmonary arterial hypertension(PAH).This ...     

CTGF shRNA表达质粒对翼状胬肉成纤维细胞的转染条件优化

目的 用CTGF shRNA表达质粒转染翼状胬肉成纤维细胞,筛选质粒与脂质体的最佳比例,确定最佳转染方案.方法 组织块法培养人眼翼状胬肉成纤维细胞,经细胞免疫组化法(SP法)鉴定,取2~3代细胞,将CTGF shRNA表达质粒与脂质体转染试剂Lipofectamin 2000以不同的比例进行转染,24 h后应用流式细胞仪检测转染效率.测定各组的转染效率,筛选出质粒与脂质体的最适比例.结果 质粒与脂质体的转染比例为1∶2.5时,转染效率最高,达(56.7±1.5)%.结论 本实验为有效地进行体外胬肉成纤维细胞转染及进一步研究重组质粒CTGF shRNA对翼状胬肉干扰奠定了基础.     

Effects of rosuvastatin on serum asymmetric dimethylarginine levels and atrial structural remodeling in atrial fibrillation dogs

Background: Circulating asymmetric dimethylarginine (ADMA), an endogenous nitric oxide synthase inhibitor, is increased in atrial fibrillation (AF). The purpose of this study was to investigate the effects of rosuvastatin on serum ADMA levels and atrial structural remodeling in AF dogs induced by chronic rapid atrial pacing. Methods: Twenty dogs were randomly divided into the sham‐operated (n = 6), control (n = 7), or rosuvastatin (n = 7) groups. Sustained AF was induced by rapid pacing of the right atrium at 400 beats per minute for 6 weeks. Rosuvastatin was administered orally (1 mg/kg d) for 3 days before rapid pacing and was continued for 6 weeks. Transthoracic and transesophageal echocardiography were performed to detect left atrial structure and function. Serum levels of nitric oxide and ADMA were measured. Interstitial fibrosis and cardiomyocyte apoptosis in the atria were also identified. Results: After 6 weeks, compared with the control group, dramatic smaller left atrium and left atrial appendage volumes and higher atrial contractile function were observed in the rosuvastatin group. Serum nitric oxide concentration was increased, whereas ADMA was decreased in the rosuvastatin group compared with the control group. The percentages of interstitial fibrosis and atrial apoptosis in the control group were significantly higher than those in the sham‐operated group, and rosuvastatin attenuated these changes induced by atrial rapid pacing. Conclusion: A short course of rosuvastatin treatment decreased apoptosis and prevented atrial structural remodeling in association with a decrease in ADMA levels in AF dogs. PACE 2012; 35:456–464)     

Homocysteine induces connective tissue growth factor expression in vascular smooth muscle cells.

BACKGROUND: Increased homocysteine levels in blood might be an important risk factor for the development of cardiovascular diseases. Connective tissue growth factor (CTGF) was found to be involved in atherosclerotic plaque progression. So far, the possible connection between homocysteine and CTGF has not been studied. OBJECTIVE: This study was designed to test whether homocysteine could induce CTGF expression in vascular smooth muscle cells (VSMC). METHODS AND RESULTS: Hyperhomocysteinemia was induced in Sprague-Dawley rats after 4 weeks of a high-methionine diet. CTGF mRNA and protein expression was detected in the aortas isolated from hyperhomocysteinemic rats, but not in the controls. The underlying mechanism of homocysteine-induced CTGF expression was investigated in cultured human umbilical vein smooth muscle cells (HUVSMC). CTGF mRNA expression was induced after treatment with dl-homocysteine (50 micromol L(-1)) for 1 h, which remained at the elevated level for up to 8 h. CTGF protein level increased after homocysteine treatment for 8 h, and the elevated status was maintained for up to 48 h. Several intracellular signals elicited by homocysteine are involved in CTGF synthesis, including protein kinase C (PKC) activation and reactive oxygen species (ROS). Transfection HUVSMCs with a CTGF small interference RNA (siRNA) plasmid, which specifically inhibited the expression of CTGF, decreased extracellular matrix (ECM) accumulation caused by homocysteine. CONCLUSION: Our results demonstrate that homocysteine could increase the expression of CTGF in VSMC both in vivo and in vitro. The novel findings suggest that homocysteine might contribute to accelerated progression of atherosclerotic lesions by inducing CTGF expression.     

乳腺癌患者IL-11、CTGF的表达水平与及其与骨转移的相关性

目的分析乳腺癌患者白介素11(IL-11)、结缔组织生长因子(CTGF)的表达水平及其与骨转移的相关性。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测108例乳腺癌患者(乳腺癌组)、30例乳腺良性肿瘤患者(乳腺良性肿瘤组)及健康体检者(对照组)血清中IL-11、CTGF的表达水平,分析其与骨转移的关系,对患者随访2年,比较生存率在不同表达水平之间的差异。结果乳腺癌组血清IL-11、CTGF水平较对照组、乳腺良性肿瘤组均显著升高(P0.05);而乳腺良性肿瘤组与对照组比较,差异均无统计学意义(P0.05)。不同骨转移分级患者的血清IL-11、CTGF水平均显著高于无骨转移患者(P0.05),Ⅲ~Ⅳ级骨转移的乳腺癌患者血清IL-11、CTGF水平较Ⅰ~Ⅱ级患者明显升高(P0.05)。骨转移、无骨转移的乳腺癌患者血清IL-11与CTGF水平均呈正相关(r=0.514、0.477,P0.05)。术后2年,血清IL-11、CTGF高表达患者的生存率明显低于低表达患者(χ2=4.50、5.18,P0.05)。结论乳腺癌患者血清IL-11、CTGF呈过度表达状态,可作为骨转移诊断、预后判断的有效血清学肿瘤标志物。