乳鼠心肌细胞的培养改进

目的探讨原代心肌细胞培养的条件和方法。方法采用胰蛋白酶、胶原酶Ⅰ型和透明质酸酶混合消化分离心肌组织,差速贴壁和化学抑制法相结合纯化心肌细胞。结果心肌细胞未贴壁时呈圆形,24 h后贴壁生长,伸出伪足,呈三角形、多边形等,细胞完整,细胞核大且胞浆丰富,立体感明显,折光性强。3～4 d后伪足可相互接触交织成网,形成细胞单层或细胞簇,其搏动同步化。结论该心肌细胞培养方法存活率较高,是一种可靠的的心肌细胞培养方法。     

基于数字图像处理的离体培养心肌细胞搏动行为的动态分析技术

通过对离体培养的心肌细胞搏动特征参数进行动态定量分析,对于从细胞水平上探索心血管疾病的发病机理、研究药品的药理药效等方面具有十分重要的生物学意义.我们以心肌细胞自主节律性搏动视频为对象,运用数字图像处理的方法,对心肌细胞自主搏动引发的光密度信号变化进行连续采集与处理,为从多角度对心肌细胞的搏动行为特征进行有效动态分析提...     

缺氧导致体外培养乳鼠心肌细胞凋亡的研究

目的:通过体外培养乳鼠心肌细胞模拟缺氧模型,探讨心肌细胞缺氧损伤时是否发生心肌细胞凋亡。方法:取(1~3)d新生SD乳鼠心肌进行心肌细胞培养,采用模拟缺氧模型,通过HE染色、流式细胞仪等手段观察检测细胞凋亡的改变。结果:在本实验心肌细胞缺氧模型中,HE染色可见凋亡细胞体积变小,胞核浓缩,胞质嗜酸性增强。流式细胞仪检测出明显的凋亡峰。结论:本实验培养乳鼠心肌细胞缺氧模型可导致心肌细胞凋亡,可通过HE染色观察凋亡细胞形态学的变化,流式细胞术检测细胞DNA含量而对凋亡细胞进行定量分析。     

红景天苷促进培养乳鼠心肌细胞肌质网钙离子的释放

目的: 观察红景天苷对乳鼠心肌细胞胞浆Ca²⁺浓度的影响并分析其可能的作用机制。方法: 应用荧光指示剂Fluo-3/AM负载培养大鼠乳鼠的心肌细胞,用激光共聚焦显微镜动态观察胞内游离钙荧光信号强度的变化,检测不同浓度红景天苷对培养心肌细胞胞内游离钙离子浓度([Ca²⁺]_i)的影响。结果: 红景天苷浓度为15 mg/L、30 mg/L和60 mg/L时,细胞内的平均[Ca²⁺]_i升高,峰值分别为574.08±4.65、591.86±3.64和618.66±4.27(均P<0.01);有剂量依赖性而无时间依赖性。用维拉帕米阻断细胞膜外钙内流时,红景天苷同样引起细胞内[Ca²⁺]_i升高,峰值由357.74±3.13、387.17±2.37和391.43±1.34分别上升到480.86±3.98、496.70±3.08和522.18±3.19(均P<0.01)。结论: 红景天苷能升高乳鼠心肌细胞中[Ca²⁺]_i,其机制可能与其促进肌浆网钙离子释放有关。     

二乙酰吗啡干预离体乳鼠心肌细胞动作电位和钙离子电流的变化

文题释义：二乙酰吗啡：半合成的阿片受体纯激动剂,由吗啡和醋酸酐为原料经化学反应制成,其镇痛作用强于吗啡,镇痛效果为吗啡的4-8倍,其成瘾速度快,戒断难度大。长期使用后不仅会对人体的免疫功能造成严重破坏,还可导致心、肝、肾等重要脏器的功能损害。钙离子：作为细胞内第二信使,主要负责维持细胞膜正常电生理功能,以及确保机体多种生物信号转导途径正常进行。在心肌缺血缺氧过程中,当缺血引起心肌异常的L型钙电流逐渐恢复正常,钾通道活性程度降低,导致动作电位时程相对延长,L型钙电流在激活和失活的重叠区形成“窗流”,导致心肌细胞膜电位不稳而形成电震荡;当细胞内Ca2+大量积聚,增加 Ca2+-CaM复合物生成,心肌细胞易造成早期和晚期后除极,导致室性心律失常概率增加。 背景：阿片类药物可调控心肌细胞膜电位和Ca²⁺电流的变化,但是目前二乙酰吗啡是否诱导心肌节律、细胞动作电位和钙离子电流改变尚未见报道。 目的：探讨二乙酰吗啡对离体SD乳鼠心肌细胞动作电位和钙离子电流的影响。方法：①体外培养SD乳鼠心肌细胞,采用5个浓度二乙酰吗啡(0,10^-2,10^-3,10^-4,10^-5 mol/L)和20 mol/L维拉帕米作用于心肌细胞;②将细胞分为对照组、二乙酰吗啡组、二乙酰吗啡+维拉帕米组。后2组分别以二乙酰吗啡、二乙酰吗啡+维拉帕米(浓度20 μmol/L)联合干预心肌细胞;对照组加入等量PBS。实验于2018-05-21经新疆医科大学第一附属医院动物实验医学伦理委员会批准,批准号IACUC201805-K1。 结果与结论：①当不同浓度二乙酰吗啡干预心肌细胞24 h后,心肌细胞形态异常数量亦随其浓度的改变而明显增加,呈剂量依赖性改变。当二乙酰吗啡浓度逐渐升高,细胞存活数量亦逐渐减少,细胞胞质体积缩小,胞膜收缩,伪足减少,细胞核结构模糊。②与对照组相比,当加入二乙酰吗啡干预心肌细胞后,心肌细胞自发性搏动频率和节律差异有显著性意义。静息膜电位负值降低,动作电位中动作电位时程显著增加,动作电位幅度显著减小。③与对照组相比,二乙酰吗啡组中心肌膜电位改变数量明显增加,当加入维拉帕米后,心肌膜电位改变细胞数量有所降低。与对照组相比,心肌膜电位改变细胞数量有所升高。④提示二乙酰吗啡可致离体SD乳鼠心肌细胞形态异常,心肌自发性搏动频率和节律显著增加,心肌细胞膜电位和动作电位发生改变,钙通道阻滞剂维拉帕米对二乙酰吗啡引起的心肌细胞节律异常有一定改善作用。  ORCID: 0000-0002-5113-6050(苏丽萍) 中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程     

免疫损伤对离体培养心肌细胞力学特性的影响

目的：探讨病毒性心肌炎时免疫损伤对心肌细胞损害的发病机理。方法：成功建立自身免疫离体心肌细胞模型，在此基础上进行心肌细胞的细胞力学特性的分析。结果：免疫损伤对心肌细胞有明显的损害，心肌细胞收缩力下降，其中免疫损伤的心肌细胞在２４小时的心肌收缩力下降比１２小时更为明显。结论：免疫损伤使心肌细胞收缩力下降。     

小鼠乳鼠原代心肌细胞的改良培养

背景：大鼠心肌细胞原代培养技术日渐成熟,但小鼠心肌细胞在同样实验条件下不易获得,而小鼠基因组与人类基因组有更多相似之处,具有更高的研究价值。目的：改进小鼠乳鼠原代心肌细胞的培养方法,得到纯度高、活力强、保持心肌细胞原有结构和功能的心肌细胞。方法：将小鼠心肌组织利用酶消方法分离为单个的心肌细胞,实验步骤中将经典的胰酶、胶原蛋白酶混合酶消法分解开,先用胰酶消化心肌组织,使心肌组织变得松散,再用胶原蛋白酶,作用于细胞间质的胶原纤维,使心肌组织分离为单个的心肌细胞。调整胰酶和Ⅱ型胶原蛋白酶的浓度和作用时间,严格控制试剂pH值和各步骤的温度。结果与结论：心肌细胞在接种24 h后开始贴壁,48 h后可观察到部分心肌细胞出现自主搏动,72 h后彼此形成交联,96 h后可观察到心肌细胞形成细胞簇,并出现一致性搏动。心肌细胞的存活率和纯度均达95%以上。结果证实,实验采用改良方法成功培养出小鼠乳鼠心肌细胞,并且保留心肌细胞的结构和功能,纯度和成活率高,是可行的培养方法。中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程     

锌对培养的乳鼠心肌细胞自发性搏动和电活动的影响

本文研究了不同浓度的Zn对培养的乳鼠心肌细胞自发性搏动及心肌细胞动作电位的影响。实验结果表明,加Zn在0.125—2ppm范围内,自发性搏动群落的出现率增高,与对照组比较,P<0.001。但Zn的浓度超过一定范围(4 ppm),自发搏动率则呈降低趋势;8 ppm组明显低于对照组,P<0.01.Zn对心肌细胞动作电位的影响表现为动作电位的发放频率减慢,波幅降低,波宽变窄和最大除极速度减慢。     

乳鼠心肌细胞可成片生长的分离和培养方法北大核心

背景:传统方法培养的心肌细胞活力、纯度仍不高,细胞多呈簇状生长,细胞与细胞之间的联系较少,细胞多呈单个搏动。目的:改进传统的乳鼠心肌细胞培养方法,获得纯度高、成片生长的心肌细胞。方法:运用0.1%胰蛋白酶4℃过夜消化心肌组织后加入Ⅱ型胶原酶重复消化,二次差速贴壁分离法联合化学抑制剂纯化心肌细胞。倒置相差显微镜下动态观察心肌细胞形态变化,培养48 h后用抗心肌肌钙蛋白T抗体鉴定心肌细胞纯度,连续10 d隔日记录心肌细胞的搏动频率。结果与结论:(1)心肌细胞在24 h内贴壁,72 h后成簇状分布,5-7 d细胞连接成片生长;(2)细胞存活率为96%,免疫荧光鉴定心肌细胞纯度97%以上,连续10 d内心肌细胞搏动频率差异无显著性意义(P>0.05);(3)综上,通过这种改进的培养方式获得成片生长的心肌细胞纯度、活力更高,是一种更为有效的乳鼠心肌细胞培养方法。     

17β-雌二醇对培养的乳鼠心肌细胞肥大的影响

目的观测17β-雌二醇（17β-estradiol,E2）对肾上腺素（PE）诱导的乳鼠心肌细胞肥大的影响并探讨其机制。方法以培养的乳鼠心肌细胞为模型并分组给药,用计算机图像分析软件测量心肌细胞表面积,[^3H]标记亮氨酸掺入法测定心肌细胞蛋白质合成速率,免疫细胞化学方法检测心肌细胞原癌基因c-fos蛋白表达,半定量RT-PCR检测心肌细胞肥大特征性胚胎型基因β-肌球蛋白重链（pMHC）、α-骨骼肌肌动蛋白（α-skA）和心房肽（ANP）的mRNA表达。结果17β-雌二醇明显抑制肾上腺素诱导的心肌细胞表面积和蛋白质合成速率的增加;17β-雌二醇减弱肥大心肌细胞c-fos蛋白表达;17β-雌二醇降低pMHC、α-skA的mRNA表达,但增加ANPmRNA表达。结论17β-雌二醇可抑制心肌细胞肥大,其作用机制可能与抑制原癌基因c-fos的蛋白表达,逆转收缩蛋白基因（β-MHC和α-skA）向胚胎型转化及促进ANPmRNA表达有关。     

红细胞形态特征统计分布及计算机图像分析方法研究

基于计算机图像处理技术,对红细胞形态和图像特征进行分析,建立红细胞形态变化特征分布统计模型,实现红细胞形态特征的自动统计分类。引用形状因子对红细胞形态特征进行描述和分类,建立红细胞分割、识别和测量的相关模型和算法,并用VC 引进编程实现。该方法能快速自动地对红细胞形态特征作出统计分析,结果显示溶血性贫血症的红细胞形态分布（双峰曲线）与正常红细胞形态分布（单峰曲线）有显著差异,即统计分布曲线可获得不同形态和类型的红细胞比例的数据。在以正常红细胞形态特征参比的条件下,红细胞形态特征统计方法可用于与红细胞形态变化相关疾病（如溶血性贫血、早期白血症）的辅助诊断。     

真彩色医学图像处理分析系统与临床应用

通过临床使用自行研制的真彩色通用医学图像处理分析系统发现：该系统充分考虑实验科学研究样本分析的特点，综合医学各科对图像处理分析的不同需求及多种图像分析仪之优点，在微机上实现了处理分析各种医学图像的功能，尤其适合对同一类图像样本的重复处理、分析与测量。系统提供了图像输入／输出，图像增强、编辑、分割，参数测量统计软件的数据接口等功能，可测量图像的几何参数、灰度参数、体视学参数等４０余项。可广泛应用于医学生物学、冶金、机械、材料、地质、石油、化工等领域。     

法乐四联症心肌纤维结构变化与心功能关系研究

目的　探讨法乐四联症心肌纤维肥大的程度对心功能与术后恢复的影响。方法　对 80例法乐四联症患者右室流出道心肌组织切片改变观察及心肌纤维直径测定 ,结合临床术前彩超测定心功能参数以及右心导管测定参数进行分析。结果　心肌纤维肥大程度与心功能指标有一定的关系。一部分四联症病例心肌纤维发生增生肥大 ,肥大的程度对射血分数无影响 (P >0 0 5 ) ,但与心肌每搏量和年龄有十分显著的相关关系 (P <0 0 1) ,并对术后恢复有一定的影响。结论　法乐四联症心肌纤维形态改变随年龄增长而加重 ,提示在条件允许的情况下 ,应尽早手术为宜     

Quantitative Imaging Biomarkers: The Application of Advanced Image Processing and Analysis to Clinical and Preclinical Decision Making

The importance of medical imaging for clinical decision making has been steadily increasing over the last four decades. Recently, there has also been an emphasis on medical imaging for preclinical decision making, i.e., for use in pharamaceutical and medical device development. There is also a drive towards quantification of imaging findings by using quantitative imaging biomarkers, which can improve sensitivity, specificity, accuracy and reproducibility of imaged characteristics used for diagnostic and therapeutic decisions. An important component of the discovery, characterization, validation and application of quantitative imaging biomarkers is the extraction of information and meaning from images through image processing and subsequent analysis. However, many advanced image processing and analysis methods are not applied directly to questions of clinical interest, i.e., for diagnostic and therapeutic decision making, which is a consideration that should be closely linked to the development of such algorithms. This article is meant to address these concerns. First, quantitative imaging biomarkers are introduced by providing definitions and concepts. Then, potential applications of advanced image processing and analysis to areas of quantitative imaging biomarker research are described; specifically, research into osteoarthritis (OA), Alzheimer's disease (AD) and cancer is presented. Then, challenges in quantitative imaging biomarker research are discussed. Finally, a conceptual framework for integrating clinical and preclinical considerations into the development of quantitative imaging biomarkers and their computer-assisted methods of extraction is presented.     

基于数字图像处理的初级纤毛定量分析

初级纤毛是一种由微管构成并突起于细胞表面的细胞器。初级纤毛的结构在某些疾病中会发生改变,特别对肿瘤的发生发展具有重要的影响。基于显微影响,分析初级纤毛的形态结构,有助于相关疾病的研究和诊断。传统分析方法主要采用Photoshop软件画线量取其长度指标,因此存在准确度低、重复性差、分析效率低等问题。本研究结合数字图像处理技术,应用色彩分离技术,将细胞与初级纤毛有效分离;并对比分析中值滤波、均值滤波、Sobel、Roberts、Prewitt、Log算子多种算法对初级纤毛形态边缘的保持效果,选取Prewitt、Log算子,改进并提升边界提取效果;再利用最大类间方差法去除杂质;最后通过连通域标记获得每个初级纤毛的周长与面积参数。与传统方法对比,本研究方法测量初级纤毛结构参数的时间由50~80 min减少为2 s,相对误差ω提高了19.08%以上,达到了快速精确测量的目的。     

临床球结膜微循环图像计算机处理方法的探讨

通过对临床微循环图像的分析,采用计算机图像处理和分析技术,定量提取球结膜微循环多功能参数指标。详细介绍了球结膜微循环图像处理的基本原理和方法;阐述了微血管管径、密度、毛细血管扩散距离、灌流比、步进法测流速等各项指标的提取方法,并将该方法应用于临床高血压病人的微循环综合评价。     

图像分析系统及其在生物医学中的应用

目前图像分析系统在组织细胞形态与化学成份定量分析研究工作和辅助临床病理诊断中起着重要的作用。随着计算机技术的快速发展，图像分析系统也有了长足的进步，其测试功能，速度，精度及自动化程度有了大幅度的提高，同时，医学的进步，大大推动了医学图像分析系统的发展，本文就图像分析系统的发展过程，基本结构和工作原理作了着重阐明，并介绍了图像分析系统在生物医学中的应用。     

扫描电镜图像处理系统及其在细胞超微结构定量计算中的应用

本文介绍一种具有较高性能价格比的生物医学电镜图像处理系统,该系统以IBM PC/XT,AT或386计算机为主机,图像接口板直接插入机内扩展槽。应用软件可对生物医学图像作图像处理和定量计算。作者通过对人膈腹膜超微结构进行定量分析,为腹水的治疗和腹膜透析(CAPD)等临床医学研究,提供了形态学定量资料。     

心电门控技术在超声心动图分析中的应用

研究门控技术在2-D超声心动图像采集中的应用,选择30例正常人和25例疑似患者,采用心电R波门控,采集心动周期各时相图像,并结合人机对话的方式,利用鼠标勾画心脏的形态和结构,借助计算机的识别和计算功能获得心功能多项定量指标以及左室容积曲线等功能性指标,为冠心病早期定位诊断和心肌缺血诊断提供一定的定量参数信息。