体外香菇多糖对顺铂抑制胃癌细胞增殖的促进作用

目的:研究体外香菇多糖(Lentinan)对多药耐药基因表达的影响和促进顺铂抑制胃癌细胞增殖的作用.方法:分别用顺铂(Cisplatin)、香菇多糖和顺铂联合香菇多糖处理SGC-7901胃癌细胞,将其分为4组:对照组(Con组),香菇多糖组(Len组),顺铂组(Cis组)和顺铂联合香菇多糖组(L+C)组.应用RT-PCR检测多药耐药基因MDR1、MRP1和LRP基因mRNA表达;应用CCK-8试剂盒检测Con组和药物处理组前后的胃癌细胞增殖状态.结果:正常SGC-7901胃癌细胞中多药耐药基因MDR1、MRP1和LRP均表达mRNA,香菇多糖能显著降低多药耐药基因表达而对细胞增殖无明显影响;顺铂明显增加多药耐药基因表达,同时抑制细胞增殖(P<0.05);香菇多糖联合顺铂作用后,MDR1和MRP1基因表达完全受到抑制,LRP表达显著降低,细胞增殖速度明显低于Con组、Len组和Cis组,差异具有统计学意义(10d:0.54vs1.90,1.88,0.92,均P<0.05).结论:香菇多糖联合顺铂后因抑制多药耐药基因表达而显著增强顺铂的抑制细胞增殖作用.     

胃癌组织中多药耐药基因产物LRP、GST-π、TopoⅡ表达及临床意义

目的探讨（MDR）基因产物LRP、GST-π、TopoⅡ在胃癌多药耐药（MDR）发生中的作用,为胃癌化疗药物的选择提供依据。方法应用免疫组化SP法检测156份胃癌组织中LRP、GST-π和TopoⅡ表达并分析其与胃癌临床病理特征的关系。结果胃癌组织中LRP、GST-π和TopoⅡ阳性率分别为64.1%、61.5%和50%,与性别、肿瘤大小、部位、临床分期及浸润深度无明显关系（P〉0.05）;高、中分化腺癌LRP阳性率明显高于低分化腺癌（P〈0.05）;GST-π和TopoⅡ表达与胃癌淋巴结转移有关（P〈0.05）;印戒细胞癌TopoⅡ阳性率明显低于其他组织学类型（P〈0.05）。结论 LRP、GST-π及TopoⅡ在胃癌MDR发生中起重要作用;三者联合检测有助于胃癌化疗药物的选择及预后判断。     

ATP结合盒式蛋白转运蛋白在结直肠腺癌中表达及其临床意义

目的探讨多药耐药基因(MDR)1、多药耐药相关蛋白(MRP)1及乳腺癌耐药蛋白(ABCG2)在结直肠腺癌中的表达及其与临床病理特征的关系。方法采用增强型二步法免疫组织化学方法检测MDR1、MRP1及ABCG2三个基因在116例结直肠腺癌组织中的表达,并分析其可能的临床预后价值。结果 MDR1、MRP1及ABCG2在结直肠腺癌的阳性表达率显著高于切端正常组织(P<0.05)。MDR1、MRP1及ABCG2的表达与病理学分级、淋巴结转移及Duke分期密切相关(P<0.05),而与年龄、性别及肿瘤发生部位无关(P>0.05)。在结直肠腺癌中MDR1、MRP1及ABCG2的表达呈显著正相关(P<0.05)。结论结直肠腺癌中存在原发性耐药现象,MDR1、MRP1及ABCG2可能在结直肠癌侵袭转移中存在协同作用。联合检测MDR1、MRP1及ABCG2在结直肠腺癌组织中的表达对化疗药物的选择、化疗方案优化及估计患者预后具有重要指导意义。     

食管鳞癌中MDR1基因的表达与多药耐药的关系

目的探讨MDR1基因与食管鳞癌多药耐药的关系。方法逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测80例食管鳞癌、不典型增生及正常食管组织中MDR1基因的表达水平,并比较食管鳞癌组织中MDR1基因表达与不同临床参数之间的关系。利用阿霉素(ADM)药物浓度递增细胞培养方法建立食管癌多药耐药细胞Eca109/ADM,利用RT-PCR、流式细胞术及激光共聚焦显微镜检测Eca109/ADM细胞中MDR1基因及蛋白表达水平。结果 MDR1基因在食管鳞癌中的表达水平显著高于不典型增生及正常食管组织(P<0.05)。食管鳞癌中MDR1基因表达与食管癌细胞分化程度、有无淋巴结转移及浸润深度密切相关(P<0.05)。Eca109/ADM细胞中MDR1基因及蛋白表达水平显著高于其亲代细胞Eca109中的表达水平(P<0.05)。结论 MDR1基因在食管鳞癌中的异常高表达可能参与了多药耐药的形成。     

COX-2与LRP在胃癌组织中的表达及其意义

目的: 观察环氧合酶-2(cyclooxygenase -2,COX-2)及肺耐药蛋白(lung resistance protein,LRP)在胃癌组织中的表达, 探讨COX-2介导胃癌耐药与LRP的关系.方法: 采用免疫组织化学法, 检测63例胃癌标本与30例非胃癌胃组织中COX-2和LRP的表达, 并分析其表达与胃癌的组织学类型、分化程度、淋巴结转移及与患者的年龄、性别的关系.结果: COX-2和LRP在胃癌组织中阳性表达率高于非胃癌胃组织(87.3% vs 53.3%, 66.7% vs43.3%, 均P<0.05). 胃癌组织中COX-2和LRP的表达与患者的年龄、性别及组织的分化程度、浸润深度等无明显关系; COX-2在淋巴结转移患者的阳性表达率明显高于无转移者(100% vs 69.2%, P<0.05), 而LRP的表达与淋巴结转移无明显关系. 在胃癌组织中COX-2与LRP的表达呈正相关( r = 0.033, P<0.05).结论: LRP可能是引起胃癌原发性耐药的耐药蛋白之一; COX-2可能通过影响LRP的表达介导胃癌耐药性的发生.     

胃癌及癌前病变组织中MUC1基因的表达及其意义

目的:揭示胃癌及肠化组织中的 MUC1基因的表达与临床病理行为之间的联系。方法:用 BC1抗体和免疫组织化学 SP 法检测人正常胃肠道粘膜、肠化粘膜以及胃癌组织中 MUC1基因核心蛋白的表达。结果:人正常胃粘膜组织中广泛分布 MUC1基因产物(100%),而肠化组织及胃癌组织的表达阳性率分别为75.9%、63.0%;胃癌组织中 MUC1基因表达与癌组织大小(P<0.01)、淋巴结转移(P<0.05)和临床分期(P<0.01)有明显的相关;胃癌组织中 MUC1基因表达程度与淋巴结转移及临床分期相关(P<0.05),随着 MUC1基因表达的增强,淋巴结转移减少,临床Ⅰ—Ⅱ期的比例增多,不同类型肠化中 MUC1基因表达无差异(P>0.05)。结论:上述结论强烈提示用 BC1抗体检测的 MUC1基因是胃癌进展有用标志,与胃癌的临床病理行为密切相关,而与肠化分型无关。     

肺腺癌患者胸水中肿瘤耐药相关基因蛋白的表达及临床意义

目的检测P-糖蛋白(P-gp)、肺癌耐药蛋白(LRP)、多药耐药相关蛋白(MRP)在肺腺癌及恶性间皮瘤患者胸水沉渣包埋组织中的表达及临床意义。方法采用S-P免疫组化方法,对63例未做放化疗的肺腺癌或恶性间皮瘤患者进行检测,记录其胸水沉渣包埋组织中P-gp、LRP、MRP的表达水平。结果肺腺癌患者胸水沉渣包埋组织中P-gp、LRP、MRP的阳性率均高于非肿瘤性胸水患者(P0.05);恶性间皮瘤患者胸水沉渣包埋组织中P-gp、LRP的阳性率均高于非肿瘤性胸水患者(P0.05),但两者MRP阴性率无显著差异(P0.05)。P-gp、LRP、MRP与肺腺癌患者年龄、组织分化程度及淋巴结转移无密切相关(P0.05)。结论肺腺癌及恶性间皮瘤肿瘤细胞对转运蛋白类耐药基因有较强的耐药性,检测Pgp、LRP、MRP的阳性表达对指导临床化疗方案的实施有重要意义。     

miR-191在胃癌组织中的表达及其靶基因的预测

目的:分析胃癌组织中miR-191的表达及预测其靶基因,并检测靶基因在胃癌组织中的表达.方法:胃癌及配对癌旁正常组织标本50例,应用基于SYBRGreenⅠ的实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测miR-191的表达情况,后用2-??CT方法进行相对定量分析.利用生物信息学软件对miR-191进行靶基因预测.用免疫组织化学检测靶基因在胃癌组织中的表达情况,并分析其与miR-191表达情况的关系.结果:miR-191在胃癌组织中的表达显著高于癌旁正常组织[0.0314(0.0037-0.4924)vs0.0240(0.0037-0.1593),P<0.05],miR-191与临床病理特征(性别、年龄、病理组织分型、淋巴结转移和TNM分期)无显著相关性.对miR-191预测得到磷脂酶C-delta1(phospholipaseC-delta1,PLCD1)、SOX4等9个靶基因,其中SOX4和NDST1被证明是miR-191的靶基因.PLCD1在胃癌组织中的表达显著低于癌旁正常组织(56.7%vs96.7%,P<0.01),且其与miR-191在胃癌中的表达呈负相关(90%vs30%,r=-0.639,P<0.01).结论:miR-191在胃癌组织中呈高表达,可能通过调控PLCD1对胃癌的发病起重要作用.     

MTA1基因表达与人胃癌的浸润和转移

目的:探讨MTA1基因在胃癌及癌周组织中的表达及其表达水平与胃癌浸润和转移潜能的相关性.方法:采用荧光定量PCR及Western印迹技术,分别在mRNA和蛋白水平检测42例手术切除的人胃癌组织及癌旁组织中MTA1的表达,结合胃癌的临床生物学特征分析MTA1表达与胃癌病理类型、淋巴结转移的关系.结果:胃癌组织中MTA1mRNA相对量的表达显著高于癌旁胃黏膜组织(0.6711vs0.3940,P<0.01),蛋白水平表达与mRNA一致.低分化胃腺癌组织中的MTA1mRNA的相对量表达显著高于中高分化胃腺癌组织(0.7475vs0.3460,P<0.01),而伴有淋巴结转移的胃癌组织中MTA1mRNA的相对量表达明显高于不伴有淋巴结转移的胃癌组织(0.8128vs0.4933,P<0.01).结论:MTA1的表达与促进胃癌的转移相关,检测MTA1表达可作为预测胃癌生物学行为、判断胃癌患者预后的一个参考指标.     

p16基因高甲基化在胃癌发展中的作用

目的:通过检测胃癌、癌前病变和正常对照组中p16基因启动子区CpG岛甲基化水平及其表达,并结合临床病理资料,分析他们在胃癌发生、发展中的作用.方法:用甲基化特异性聚合酶链反应(methylation-specific PCR,MSP)检测41例胃癌组织、40例癌前病变组织和38例正常对照组织中p16基因启动子5′CpG岛甲基化;应用免疫组化检测基因的蛋白表达.结果:胃癌组织中p16基因甲基化阳性率为56.1%(23/41),癌前病变组织中为17.5%(7/40),而正常对照组织中为2.6%(1/38),前组与后两组之间的差异有显著性(P<0.05).胃癌组织中p16基因表达阳性率为51.2%,癌前病变组织中为90.0%,正常对照组织中为100.0%,前组与后两组之间的差异有显著性(P<0.05).低分化型胃癌组织中的p16基因甲基化阳性率明显高于高分化型(81.3%vs 40.0%,P<0.05).有淋巴结转移的胃癌组织中,p16基因甲基化阳性率与无转移组的差异有显著性(81.0%vs 30.0%,P<0.05).浸润深达浆膜层的胃癌组织中,甲基化阳性率与未达浆膜层组无统计学差异(60.0%vs 52.4%,P>0.05).胃癌组织中p16基因甲基化阳性组的蛋白表达阳性率显著低于甲基化阴性组(26.1%vs 83.3%,P<0.01).结论:胃癌组织中存在有p16基因启动子5′CpG岛高甲基化,并导致其基因表达率显著低于正常对照及癌前病变组织.p16基因的高甲基化与胃癌分化程度、淋巴结转移相关.p16基因甲基化的发生,从正常、癌前病变到胃癌有逐渐增加的趋势,提示其基因CpG岛高甲基化有可能作为诊断早期胃癌的一项较为敏感的指标.     

肝细胞癌中耐药基因的表达及意义

目的通过对肝细胞癌（HCC）中3种耐药基因MDR1、MRP、GST-π的检测,探讨肝细胞癌中耐药基因的表达特点及临床意义。方法应用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）技术检测3种耐药基因在51例肝细胞癌组织和10例正常肝组织中的表达。结果 （1）MDR1、MRP、GST-π在肝细胞癌中的表达分别为0.55±0.27、0.62±0.29、0.64±0.31,正常肝组织中的表达分别为0.23±0.10、0.25±0.07、0.26±0.12,耐药基因在肝细胞癌中的表达高于正常肝组织,差异具有统计学意义（P〈0.05）;（2）耐药基因的表达与肿瘤Edmondson分级呈正相关（P〈0.05）;（3）MRP与GST-π的表达相关。结论肝细胞癌中存在有原发性耐药的现象,且多种机制并存。MDR1、MRP、GST-π在肝细胞癌中有较高的表达。联合检测对制定科学有效的治疗方案有一定价值。     

MDR1 and MRP1 gene expression are independent predictors for treatment outcome in adult acute myeloid leukaemia

Multi drug resistance (MDR) is a major obstacle for cancer therapy. The three major candidates accounting for the development of MDR in acute myeloid leukaemia (AML) are multi drug resistance gene (MDR1), multi drug resistance-related protein gene (MRP1) and lung resistance protein gene (LRP). So far, the differential impact of resistance gene expression on treatment outcome in AML is not clear. Therefore, we examined MDR1, MRP1 and LRP gene expression at diagnosis in 331 adult AML patients in the context of other known prognostic factors, such as age, disease status, cytogenetics and FMS-like tyrosine kinase 3 (FLT3)-internal tandem duplication mutational status. Median observation time was longer than 5 years [64.1 months (40.0-87.6)]. MDR1 expression proved to be an independent prognostic factor for outcome of induction therapy (P <0.001) and overall survival (P=0.02), whereas MRP1 expression was an independent predictor for disease-free survival (P=0.01) in the multivariate analysis. This prognostic impact of both resistance genes was also found in patients with intermediate risk cytogenetics. LRP expression, however, had no impact on treatment outcome in AML. Our study shows that resistance gene expression should be considered together with age, cytogenetics and FLT3 mutational status for risk-adapted treatment strategies in AML in the future.     

高温对SGC7901/ADM细胞多药耐药蛋白表达的影响和意义

目的:研究高温43℃对多药耐药基因表达产物P-gp、MRP、LRP在蛋白水平上的影响及其生物学意义,更深入地了解热效应逆转耐药的机制.方法:采用免疫细胞化学染色法、RT-PCR以及Western blot方法,检测在不同温度和不同药物作用下,人胃癌耐药细胞株SGC7901/ADM和对照的人胃癌敏感细胞SGC7901株中,与人胃癌多药耐药相关的分子MDR1、P-gp、MRP、LRP在蛋白水平上的表达差异.结果:采用免疫细胞化学染色法检测人胃癌耐药株SGC7901/ADM细胞,发现高温43℃60 min处理可使P-gp蛋白表达下调率(down-regulated rate,DRR)31.78%(P=0.016),而MRP表达DRR为20.22%(P=0.037),差异有统计学意义,LRP未表达.采用Western blot法在SGC7901细胞中未检测出P-gp蛋白表达,而SGC7901/ADM细胞中P-gp高表达;在ADM和CDDP处理组细胞中,高温43℃时P-gp的表达量较37℃时DRR分别为45.65%(P=0.007)、17.95%(P=0.021),差异有显著学意义;TAX处理组DRR为11.90%,差异无显著学意义(P=0.065).结论:高温43℃的短期处理对人胃癌SGC7901/ADM细胞中P-gp和MRP多药耐药蛋白的表达有一定的抑制作用,可能是逆转耐药的机制之一.     

肝癌组织中HIF-1α蛋白的表达与多药耐药蛋白相关性研究

目的：探讨肝癌组织中乏氧诱导因子-1α（HIF-1α）蛋白的表达与多药耐药蛋白（multi-drug resistance protein,MRP）的关系。方法收集78例原发性肝细胞癌患者肝组织和对应癌旁正常肝组织的石蜡标本,采用免疫组织化学 SP法检测原发性肝细胞癌组织及其癌旁正常肝组织中 HIF-1α和 MRP 蛋白的表达情况。结果 HIF-1α和MRP蛋白在肝癌组织中的阳性表达率明显高于癌旁正常肝组织（P〈0.05）。病理分级（Ⅲ-Ⅳ级）、TNM 分期（Ⅲ-Ⅳ期）、有门静脉癌栓、有淋巴结转移的肝癌组织中 HIF-1α的阳性表达率明显增高（P〈0.05）;病理分级（Ⅲ-Ⅳ级）、有淋巴结转移的肝癌组织中 MRP的阳性表达率明显增高（P〈0.05）。78份肝癌组织中,HIF-1α和 MRP 的表达之间呈正相关（r=0.524,P〈0.05）。结论 HIF-1α和 MRP过表达可能在肝癌的恶性增殖、分化及淋巴结转移过程中发挥重要作用,且两者在肝癌组织中的表达可能具有协同作用。     

宫颈鳞癌组织中P-gp、LRP的表达及临床意义

目的探讨多药耐药基因蛋白（P-gp）和肺耐药蛋白（LRP）在宫颈鳞癌组织中的表达及指导宫颈癌化疗的意义。方法采用Real time RT-PCR和MaxVision免疫组化法检测30份宫颈鳞癌组织（宫颈癌组）及30份正常宫颈组织（正常组）中P-gp编码基因（mdr1）、LRP编码基因（lrp）表达量及P-gp、LRP阳性率,并分析mdr1与lrp的相关性,P-gp、LRP之间及与宫颈鳞癌临床病理参数的相关性。结果宫颈癌组及正常组mdr1 mRNA表达量分别为45.830±0.570、43.567±0.151,lrp mRNA表达量分别为49.989±0.762、45.138±0.550,P-gp阳性表达率分别为83.3%、20%,LRP阳性表达率分别为86.7%、26.7%,组间比较P均〈0.01;mdr1 mRNA、lrp mRNA及P-gp、LRP表达均无相关性（P〉0.05）。结论联合检测P-gp和LRP在宫颈鳞癌组织中的表达,对宫颈鳞癌化疗药物的选择有重要参考价值。     

Expression of nitric oxide synthase in human gastric carcinoma and its relation to p53, PCNA

AIM: To investigate the expression of NOS in gastric carcinoma, and to explore the relationship between the expression of nitric oxide synthases (NOS) and p53, PCNA, pathological features and clinical staging of gastric cancer. METHODS: The activity of NOS protein was investigated in 85 samples of human gastric carcinoma and 25 samples of normal gastric mucosal tissue by biochemical assay. We then examined the expression of NOS, p53, PCNA in 85 samples of human gastric cancer was examined by immunohistochemistry, and NOS mRNA expression in 85 gastric cancer tissue specimens by In situ hybridization. RESULTS: Biochemical assay showed that the activity of NOS was significantly higher in gastric carcinoma than in normal gastric mucosal tissues (t=0.4161, P＜0.01). Immunohistochemistry revealed that endothelial nitric oxide synthase (eNOS) expressed in all samples of normal gastric mucosa, but only 6 cases of 85 gastric cancer specimens showed weak positive immunohistochemical reactions to eNOS (20%). Inducible nitric oxide synthase (iNOS) was expressed strongly in human gastric carcinoma (81.2%). In situ hybridization analysis showed that iNOS mRNA expression was significantly stronger than eNOS mRNA expression in gastric cancer tissue (X~2 = 10.23, P＜0.01). The expression of iNOS in gastric cancer was associated with differentiation, clinical stages or lymph node metastases (r=0.3426,P＜0.05). However, iNOS expression did not correlate with histological classifications and morphological types. The expression of iNOS was significantly correlated with p53 or PCNA expression (r=0.3612, P＜0.05). The expression of neuronal nitric oxide synthase (nNOS) was not examined by immunohistochemistry and in situ hybridization in gastric cancer specimens and normal gastric mucosa. CONCLUSION: In human gastric cancer, there is an enhanced expression of iNOS, but not of eNOS. NOS promotes the proliferation of tumor cells and plays an important role in gastric cancer spread. Inactivation of antioncogene p53 and overexpression of iNOS might play a synergetic role in the process of carcinogenesis of human gastric carcinoma.     

胃癌组织SDF-1、MRP1表达与临床病理参数的相关性分析

目的 探讨胃癌组织基质细胞衍生因子1(SDF-1)、多重耐药蛋白1(MRP1)表达与临床病理参数的相关性.方法 选取2017年6月至2018年6月邯郸市中心医院收治的胃癌患者50例,采用免疫组化法检测正常胃黏膜组织、胃癌组织及其癌旁组织SDF-1、MRP1的表达,分析胃癌组织SDF-1、MRP1与临床病理参数的相关性....