固相萃取-高效液相色谱-串联质谱法测定贝类产品中麻痹性贝类毒素

目的建立了贝类产品中石房蛤毒素(STX)、新石房蛤毒素(neo STX)、膝沟澡毒素(GTX14)、脱氨甲酰基类毒素(包括dc STX、dcneo STX和dc GTX23)8种麻痹性贝类毒素的固相萃取-高效液相色谱-串联质谱测定方法。方法匀浆贝组织以0.1 mol/L乙酸提取,HLB固相萃取小柱净化,10 000 MW超滤离心管离心纯化。采用TSK gel Amide-80柱分离,以乙腈-2 mmol/L乙酸铵溶液(均含0.1%甲酸)为流动相进行梯度洗脱,以正离子多反应监测模式检测,基质标准校正外标法定量。结果 8种麻痹性贝类毒素的定量限为10μg/kg~50μg/kg;在各自相应浓度范围内线性关系良好,相关系数0.990;2种添加水平的平均加标回收率为75.5%~103.0%;相对标准偏差为4.3%~13.2%。应用建立的方法对多份贝类样品进行分析,均未检出目标组分。结论方法选择性高、灵敏、准确,适用于贝类产品中麻痹性贝类毒素的确证及定量分析。     

UPLC-MS/MS测定水产品中4种麻痹性贝类毒素

目的建立超高效液相色谱—串联质谱法检测水产品中4种麻痹性贝类毒素的方法。方法贝类样品用0.1 mol/L乙酸超声提取,经亲水亲脂固相萃取小柱净化后,目标物以乙腈(含0.1%甲酸)和乙酸铵(含0.1%甲酸)溶液为流动相,经色谱柱HILIC 150 mm×2.1 mm,3μm梯度洗脱分离,采用电喷雾离子源,多反应监测(MRM)正离子模式进行定性与定量分析,外标法定量。结果各种麻痹性贝类毒素与杂质能良好分离,在各自的线性范围内线性关系良好,相关系数(r)0.999,方法检测限为10.0μg/kg~31.0μg/kg,在不同浓度水平加标平均回收率(n=6)为81.0%~104%,相对标准偏差(RSD)为0.47%~6.9%。结论本方法前处理方法简单,有较好的灵敏度和重现性,满足水产品中麻痹性贝类毒素的确证和定量分析要求。     

免疫亲和柱净化-光化学柱后衍生-HPLC法检测茶叶中黄曲霉毒素

目的建立免疫亲和柱净化-光化学柱后衍生-高效液相色谱(HPLC)-荧光法测定茶叶中黄曲霉毒素AFB1、AFB2、AFG1、AFG2的检测方法。方法样品经甲醇-水(7∶3,V/V)提取,提取液经过滤、稀释后,滤液经过免疫亲和色谱柱纯化,以甲醇-水(45∶55,V/V)为流动相洗脱,Cloversil C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm)分离,采用光化学衍生器衍生,荧光检测器在激发波长360 nm、发射波长440 nm处测定。结果 AFB1、AFG1在0.50μg/L~20μg/L时具有良好的线性关系,检出限为0.50μg/kg,AFB2、AFG2在0.15μg/L~6.0μg/L时具有良好的线性关系,检出限为0.20μg/kg,其相关系数均0.999 2,回收率为82.6%~94.4%,相对标准偏差10%。结论该方法具有快速、灵敏、简便、准确等优点,适用于测定茶叶中的黄曲霉毒素AFB1、AFB2、AFG1、AFG2。     

固相萃取-高效液相色谱-串联质谱法检测贝类产品7种脂溶性贝类毒素

目的:建立固相萃取、高效液相色谱串联质谱法测定贝类产品中AZA1、YTX、OA、PTX2、GYM、SPX1、DTX-1 7种脂溶性贝类毒素残留的方法。方法:贝类样品用甲醇提取后,Strata-X固相萃取柱净化,甲醇洗脱。采用Waters Sun-FireTMC18(100 mm×2.1 mm,3.5μm)色谱柱,以乙腈-2 mmol/L乙酸铵水(80:20,v/v)作为流动相,流速0.2 ml/min,采用电喷雾质谱电离,多反应监测模式(MRM)对目标化合物定性及定量分析,外标法定量。结果:7种贝类毒素线性相关系数均大于0.998;方法定量下限(LOQ)为0.1μg/kg~2.7μg/kg;高、中、低3个添加水平的平均加标回收率在72.2%~101.9%,相对标准偏差为2.0%~13.6%。结论:该方法灵敏度高、操作简单高效,适用于贝类样品中脂溶性贝类毒素的定量及确证分析。     

超高效液相色谱-大体积流通池荧光法检测食品中的4种黄曲霉毒素

目的建立具有大体积流通池的荧光检测超高效液相色谱法测定食品中4种黄曲霉毒素(B_1、B_2、G_1、G_2)的方法。方法食品经乙腈水提取液超声提取30 min,免疫亲和柱净化,氮气吹干,10%乙腈溶液定容,C_(18)反相色谱柱分离,采用具有大体积流通池的荧光检测器检测,激发波长为365 nm,发射波长为450 nm。结果 4种黄曲霉毒素在C_(18)高效液相色谱柱上得到了很好的分离,5 min内完成检测,方法的检出限为0.010μg/kg(黄曲霉毒素B_1、黄曲霉毒素G_1)和0.003μg/kg(黄曲霉毒素B_2、黄曲霉毒素G_2),平均回收率为77.55%~102.89%,RSD为1.2%~4.4%,4种黄曲霉毒素在0.1 ng/ml~10 ng/ml时线性关系良好(相关系数r0.999)。采用大体积流通池的荧光检测器后,灵敏度提高5倍~20倍。结论采用免疫亲和柱净化有效去除了基质中的杂质,改用大体积流通池的荧光检测器,省去了衍生步骤,简单快速,提高了黄曲霉毒素检测的灵敏度及准确度,适用于食品中黄曲霉毒素的测定。     

高效液相色谱-荧光法测定葡萄酒中氨基甲酸乙酯的含量

目的建立葡萄酒中氨基甲酸乙酯(EC)含量的高效液相色谱-荧光检测器(HPLC-FLD)测定方法。方法葡萄酒样品经9-羟基吨衍生后,采用高效液相色谱-荧光法测定,以Agilent TC-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm×5μm)分离,乙腈-0.02mol/L乙酸钠溶液为流动相,梯度洗脱,荧光检测器的激发波长为233 nm,发射波长为600 nm,衍生化反应时间30 min,外标法计算含量,并与GC-MS方法比较,评价HPLC-FLD方法可靠性。结果 EC在10~500μg/L范围内呈良好的线性关系,平均加标回收率为93.7%~106.0%,相对标准偏差为1.4%~2.8%,定量限为15μg/L。HPLC-FLD和GC-MS两种方法对葡萄酒的EC含量测定结果无明显差异。结论HPLC-FLD适合于葡萄酒中EC含量的快速测定。     

茶叶中黄曲霉毒素的碘柱后衍生化和光化学柱后衍生化-高效液相色谱法比较

目的比较茶叶中黄曲霉毒素测定的碘柱后衍生化和光化学柱后衍生化-高效液相色谱法。方法样品经过多功能净化柱净化,HPLC-柱后衍生化-荧光检测器检测。采用Agilent XDB C_(18)(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱分离,检测激发波长为360 nm,发射波长为420 nm;以甲醇-水(40∶60,V/V)为流动相,流速为1.0 ml/min。柱后衍生化系统:(1)碘衍生化:衍生化溶液为0.05%碘溶液,流速为0.5 ml/min,衍生化反应温度为70℃;(2)光化学衍生化:接Welch Toxin Star光化学衍生器,内含254 nm紫外光源及15 m反应环。结果对于碘衍生化和光化学衍生化方法,黄曲霉毒素G2、B2在0.6 ng/ml~6 ng/ml,黄曲霉毒素G1、B1在2 ng/ml~20 ng/ml时线性关系良好,r0.999 0,回收率为80.2%~97.5%。结论 2种衍生化方法的测定结果比较接近,光化学衍生化方法较灵敏,操作简单,2种柱后衍生方法都适用于茶叶中黄曲霉毒素的测定。     

邻苯二甲醛-柱后衍生-高效液相色谱荧光法测定功能型饮料中的牛磺酸

目的建立功能型饮料中牛磺酸的柱后衍生-高效液相色谱荧光法。方法样品稀释后直接进样,柱后OPA衍生,荧光检测器检测,外标法定量。色谱条件:流动相:乙腈-水(20∶80,V/V);柱后衍生反应温度:55℃;荧光检测器激发波长:330 nm;发射波长:450 nm。结果牛磺酸的浓度为0μg/L~80μg/L时,标准曲线线性关系良好,线性相关系数(r)为0.999 9,检出限为1μg/L,相对标准偏差(RSD)为0.2%~1.0%,加标回收率为97.2%~102.8%,精密度和准确度符合检测要求。结论本方法具有选择性好、精密度高和准确度好等优点,而且由于采用荧光检测器,大大提高了灵敏度,可采取大体积稀释,更易排除其他组分的干扰,更简便,更快捷,适用于日常的检测工作中。     

超高效液相色谱法检测花生油中4种黄曲霉毒素的含量

目的建立一种超高效液相色谱法测定花生油中4种黄曲霉毒素(B_1、B_2、G_1和G_2)含量的方法。方法花生油样品经甲醇-水提取后,静置2 min~3 min,过滤后稀释,用免疫亲和柱净化、浓缩。采用BEH C_(18)色谱柱(50 mm×2.1 mm,1.7μm),考察了不同流动相等度和梯度洗脱法,优化后的方法以甲醇-水溶液为流动相进行梯度洗脱,设定激发波长为360 nm、发射波长为450 nm进行检测。结果空白样品无干扰,4种黄曲霉毒素B_1、B_2、G_2在0.10μg/L~50.00μg/L,G_1在0.50μg/L~50.00μg/L时,线性关系良好,相关系数(r)均0.999,最低检出限为0.04μg/kg~0.25μg/kg,相对标准偏差(RSD)为1.13%~8.82%,回收率为87.4%~104.6%。结论本方法简便、快速、准确,检出限低,干扰小,无需衍生,可用于粮油食品中黄曲霉毒素的检测。     

柱前衍生-高效液相色谱法快速检测人血清中牛磺酸

目的建立人血清中牛磺酸的柱前衍生-高效液相色谱快速检测方法。方法人血清中牛磺酸样品在经乙腈沉淀蛋白、丹磺酰氯柱前衍生后,采用ODS-C_(18)色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm)分离,乙酸钠缓冲液和乙腈混合溶液(75+25,V/V)作为流动相,荧光检测器检测,检测激发波长为330 nm,发射波长为530 nm,色谱柱温度为40℃,仪器进样体积为10μl。结果牛磺酸在3.26μg/ml～26.08μg/ml浓度内,线性关系良好,相关系数(r)为0.999 5,加标回收率为88.6%～106.2%,相对标准偏差(RSD)为1.13%～4.11%(n=6),方法检出限为0.5μg/ml。结论本法快速、简单、准确,可用于人血清中牛磺酸快速测定。     

Osteogenesis induced by bone matrix is inhibited by inflammation

This study was designed to examine the effect of inflammatory reaction elicited by percutaneous tube on bone induction. Inflammation was provoked by different types of biomaterials. In order to evaluate incorporation of percutaneous tubes, bone matrix and subcutaneous tissue, demineralizing bone matrix was implanted in the subcutaneous tissue of rats and was exposed to interaction with inflammatory conditions. Inhibition to the induction of cartilage and bone by the inflammatory process could be clearly demonstrated. It is suggested that the low pH levels, typical to enzymes operative in inflammation are a direct cause for inhibition of chondro and osteogenesis. The process of calcification is characterized by the activation of enzymes in high pH levels.