EB病毒特异性DNA酶的纯化制备

目的 纯化ＥＢ病毒特异性ＤＮＡ酶（ＥＢＶ－ＤＮａｓｅ）为鼻咽癌血清学诊断方法－血清ＥＢＶ－ＤＮａｓｅ抗体的检测奠定基础。方法 采用多重纤维素柱层析对用联合化学诱导的方法制备的ＥＢＶ－ＤＮａｓｅ粗提物进行纯化。 结果 在ＳＤＳ－ＰＡＧＥ检测中,从粗提物到纯化终产物,蛋白质带逐渐减少直至单一条带。其分子量为５２ｋＤ,其对应的每豪克蛋白质酶单位分别为５．４６,４９．１９,１３４．８６,３９１,２５,９６     

血清EB病毒特异性DNA酶抗体的检测

目的建立一种新的鼻咽癌(NPC)血清学诊断方法.方法以纯化的EBV-DNase为抗原,采用WesternBlot法对NPC、头颈部其它肿瘤(OT)及健康成人(HA)血清中的EBV-DNase抗体进行检测.与同时进行的EBVCA～IgA抗体检测比较.结果①用West-ernBlot法检测NPC组、OT组、HA组血清中EBV-DNase抗体阳性率分别为83.71%,0.00%,000%,NPC组抗体阳性率与其它两组差异显著(均为P＜0.01),后两组之间无显著差异(P＞0.05).而同时检测的EBVCA-IgA阳性率分别为85.98%,9.38%,7.50%.两种方法阳性率比较,在NPC组无差异(P＞0.05),而在其它两组的差异显著(P＜0.05);②以病检结果为"金标准”,EBV-DNase抗体WesternBlot法检测的特异性明显高于EBVCA-IgA检测(P＜0.01),而两者的灵敏度相当(P＞0.05).结论①NPC血清中存在高滴度的EBV-DNase抗体;②用WesternBlot法检测血清中的EBV-DNase抗体,具有较高的灵敏度及特异性,可以减少NPC的漏诊和误诊,不失为一种NPC血清学诊断方法.     

EB病毒特异性DNA多聚酶的研究现状

EBV-DP(Epstein-Barr virus specified DNA palymerase)是EB病毒早期抗原成分之一,也是EB病毒复制的关键酶,研究该酶不仅有助于鼻咽癌的早期诊断,而且有可能为研究EB病毒与鼻咽癌的关系提供新的线索。本文就该酶的来源、化学性质、提取、纯化、活性测定以及临床应用等问题作简要介绍。     

EB病毒特异性胸腺嘧啶核苷激酶与鼻咽癌

本就ＥＢ病毒特异性胸腺嘧啶核苷激酶（ＥＢＶ－ＴＫ）理化酶学特征的研究及其在鼻咽癌早期诊断中的价值等作简要介绍。     

EB病毒DNA与鼻咽癌关系的动态研究

目的：探讨EB病毒DNA（EBV—DNA）在鼻咽癌放疗前后的动态变化及与复发、远处转移的关系。方法：采用PCR加限制性内切酶酶切技术检测EBVDNA。结果：放疗前,74例标本中有71例（95．9％）EBV—DNA片段检出阳性;放疗50Gy／5周时,23例鼻咽原发灶和颈部淋巴结消失,其阳性率为13．0％（3／23）,余51例肿块未消者阳性率为62,7％（32／51）;放疗至70Gy／7周时,7例放疗后有残留,有残留者在放疗结束时EBV—DNA片段的检出阳性率为71．4％（5／7）,在67例肿块消失者中未检出阳性EBV—DNA片段。12例复发者中,11例EBV-DNA片段检出阳性;8例转移者中EBV—DNA片段检出均为阳性。结论：检测血浆EBV—DNA能很好地反映肿瘤的消长,是诊断鼻咽癌残留、复发及远处转移的敏感指标。     

鼻咽癌患者血清EB病毒DNA数量与鼻咽癌临床分期的关系

目的 探讨鼻咽癌患者血清EBV-DNA数量与鼻咽癌临床分期的关系,评估EBV-DNA水平在鼻咽癌病情进展中的意义.方法 初诊鼻咽癌患者127例,其中1期17例,Ⅱ期23例,Ⅲ期45例,Ⅳ期42例.抽取血清样品,应用巢式荧光定PCR技术检测鼻咽癌患者血清EBV-DNA的拷贝数,分析其数量与鼻咽癌临床分期的相关性.结果 本组鼻咽癌患者血清EBV-DNA的检出率为97.6%(124/127),EBV-DNA拷贝数的中位数为8 897 400 copies/μ1(0～221 667 600 copies/μ1).l、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期患者DNA拷贝数分别为(4.34±1.04)×103,(4.34±0.79)×104,(8.77±1.74)×105,(8.09±1.74)×106,依病情进展而显示了逐步升高的趋势(P<0.05),呈正相关性(r=0.687,P<0.05).结论 鼻咽癌患者血清EBV-DNA水平与鼻咽癌患者临床分期呈正相关性,提示EBV-DNA水平与鼻咽癌病情进展密切相关,有助于评估患者预后.     

鼻咽癌与EB病毒相关性研究

鼻咽癌是鼻咽部常见的一种多基因遗传性恶性肿瘤,具有明显地域差异和民族聚集现象,发病隐匿,且癌肿易向颅底、咽旁间隙及颈动脉鞘等部位浸润,严重危害患者健康。鼻咽癌的具体病因及发生、发展至今尚不完全清楚,研究认为EB病毒与鼻咽癌密切相关。本文就EB病毒感染与NPC相关研究进展做一综述。     

EB病毒潜伏膜蛋白与鼻咽癌

鼻咽癌是耳鼻咽喉头颈外科常见肿瘤之一,其发病与EB病毒感染密切相关。EB病毒潜伏膜蛋白（latent membrane protein,LMP）在鼻咽癌的发生发展中具有极其重要的作用。本文结合近年来的相关文献报道,对EB病毒LMP与鼻咽癌的关系进行综述。     

血浆EB病毒DNA 定量测定对鼻咽癌的诊断价值

目的分析血浆EB病毒（Epstein-Barr virus,EBV）DNA定量测定对鼻咽癌的诊断价值。方法采用荧光定量聚合酶链反应（fluorescence quantitative polymerase chain reaction,FQ-PCR）技术,测定35例经病理确诊的鼻咽癌患者血浆EB病毒DNA含量,并与50例健康对照者比较。结果鼻咽癌患者血浆EBV-DNA阳性率和复制量均高于健康对照者。两组阳性率和中位浓度的比较均有统计学差异。结论血浆EBV-DNA定量分析不能作为临床上确诊鼻咽癌的方法,但对鼻咽癌的筛查有实用价值,值得进一步研究。     

酶联免疫电转移印迹技术(EITB)检测抗EB病毒特异性DNA酶抗体

本研究用酶联免疫电转移印迹技术,检测血清中抗 EB 病毒特异性 DNA 酶抗体,试图建立一种可常规应用于临床的检测方法。结果表明:50例鼻咽癌患者血清中,26例在52～59KD 范围内出现由4条阳性显带融合而成的阳性反应区;健康成人和其他头颈部肿瘤患者血清无一例在此区域内出现阳性显带,表明其特异性甚高。     

鼻咽癌患者血浆EB病毒DNA水平与肿瘤的分期关系

鼻咽癌是我国常见恶性肿瘤,广西属鼻咽癌高发区,仅次于广东省[1].早期鼻咽癌治愈率明显高于二晚期,但早期诊断非常困难.目前尚缺乏鼻咽癌临床分期的有效分子标志物.     

EB病毒潜伏膜蛋白1与鼻咽癌

鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)为我国南方高发的上皮来源的肿瘤,其病因不清。大量研究表明,EB病毒(Epstein-Barr virus,EBV)编码的潜伏膜蛋白1(latent mem- brane protein 1,LMP1)是目前唯一被证实与细胞转化有关的具有癌基因功能的潜伏膜蛋白,通过干扰细胞内信号传导途径等发挥作用,促进鼻咽癌发生、发展和转移。本文旨在对EB病毒LMP1与鼻咽癌的发生发展研究现状做一综述。     

EB病毒潜伏膜蛋白1与鼻咽癌

鼻咽癌（nasopharyngeal carcinoma,NPC）为我国南方高发的上皮来源的肿瘤,其病因不清。大量研究表明,EB病毒（Epstein-Barr virus,EBV）编码的潜伏膜蛋白1（latent mem- brane protein 1,LMP1）是目前唯一被证实与细胞转化有关的具有癌基因功能的潜伏膜蛋白,通过干扰细胞内信号传导途径等发挥作用,促进鼻咽癌发生、发展和转移。本文旨在对EB病毒LMP1与鼻咽癌的发生发展研究现状做一综述。     

与鼻咽癌有关的EB病毒研究

自Old等(1966)首次用免疫扩散法在鼻咽癌病人血清中检测到高滴度抗EB病毒沉淀性抗体以来,通过各方面的大量研究,人们已公认EB病毒与鼻咽癌有着密切的关系,其主要根据可归纳为:(1)鼻咽癌患者血清中常具有高滴度EB病毒相关的抗体(包括EA、主要是EA(D)、VCA、EBNA、MA、CF/S等抗体),且其滴度的升降与病程经过有一定关系,例如,临床治愈患者,滴度常常下降,肿瘤如复发或转移,滴度又可随之上升,且上升往往出现在得到病理组织学证实以前(Henle W,Henle G et al,1970;Kawamura A et al,1970;Lin TM,Yang CSet al,1973;Henle W,Ho HC et al,1973;Henle G,Henle W,1976)。(2)通过核酸杂交试验,证明鼻咽癌活检组织的癌细胞中,存在着EB病毒的双链去氧核糖核酸(DNA)(Zur Hausenet al,1970;Wolf H,Zur Hausen et al,1973);用补体免疫荧光法证实鼻咽癌细胞内含     

用聚合酶链反应检测鼻咽癌脱落细胞中EB病毒DNA

应用聚合酶连反应（ＰＣＲ）技术检测３５例鼻咽癌患者（２４例刚进行￣（６０）Ｃｏ放疗或未治疗，１１例放疗接近结束或刚结束）的鼻咽部脱落细胞中的ＥＢ病毒ＤＮＡ，１２例急、慢性扁桃体炎或咽炎患者为正常对照组，另有４例鼻咽癌的活检组织。结果：２４例鼻咽癌未治疗或刚治疗组中脱落细胞ＥＢ病毒ＤＮＡ阳性２０例（８３．３％），阴性４例（１６．７％）；１１例鼻咽癌放疗将近结束或刚结束组ＥＢ病毒阳性１例（９．１％），阴性１０例（９０．９％）；１２例对照组ＥＢ病毒ＤＮＡ阳性１例（８．３％），阴性１１例（９１．７％）。４例鼻咽部活检组织ＥＢ病毒ＤＮＡ均阳性。说明应用鼻咽部刮片脱落细胞进行ＰＣＲ反应检测ＥＢ病毒ＤＮＡ是一种方法简单、痛苦少，特异性强、灵敏度高的检测手段，可用于鼻咽癌的诊断、普查、流行病学调查等。     

用聚合酶链反应检测鼻咽癌脱落细胞中EB病毒DNA

应用聚合酶连反应技术检测３５例鼻咽癌患者（２４例刚进行＾６０Ｃｏ放疗或未治疗，１１例放疗接近结束或刚结束）的鼻咽部脱落细胞中的ＥＢ病毒ＤＮＡ，１２例急、慢性扁桃体炎或咽炎患者为正常对照组，另有４例鼻咽癌的活检组织。结果：２４例鼻咽癌未治疗或刚治疗组中脱落细胞ＥＢ病毒ＤＮＡ阳性２０例（８３．３％），阴性４例（１６．７％）；１１例鼻咽癌放疗将近结束或刚结束组ＥＢ病毒阳性１例（９．１％），阴性１０例（９     

血浆EB病毒DNA定量测定对鼻咽癌患者的预后判断

对鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)治疗前患者、放疗后缓解者及放疗后局部复发者进行血浆EB病毒(epstein-barr virus,EBV)DNA的定性及定量分析,探索血浆EBV-DNA对NPC预后判断的价值.