人胎盘组织液在小鼠脑微血管内皮细胞增殖中的作用研究

目的:研究人胎盘组织液对小鼠脑微血管内皮细胞增殖的影响。方法:采用细胞计数和MTT法观察不同稀释度人胎盘组织液作用72 h后,小鼠脑微血管内皮细胞增殖情况。同时以免疫组织化学法检测不同稀释度人胎盘组织液对小鼠脑微血管内皮细胞增殖细胞核抗原表达的影响。结果:一定稀释度的人胎盘组织液可促进小鼠脑微血管内皮细胞的增殖,25 ml/L即可发挥作用,200 ml/L作用最明显。小鼠脑微血管内皮细胞PCNA表达阳性率与人胎盘组织液稀释度呈剂量相关性。结论:人胎盘组织液可促进体外培养的小鼠脑微血管内皮细胞增殖。     

氧化低密度脂蛋白对高糖状态下血管内皮细胞NO释放及ET-1分泌的影响

目的 观察高糖状态下氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)对体外培养的血管内皮细胞(ECV-304)一氧化氮(NO)释放及内皮素-1(ET-1)分泌的影响.方法 不同葡萄糖(Glu)浓度(5.5 mmol/L,20 mmol/L)的培养液细胞中,分别加入含不同浓度ox-LDL(0 μg/ml,50 μg/ml,100 μg/ml)进行氧化损伤48 h,观察细胞形态、3H-TdR标记法测定细胞增殖、特异性硝酸还原酶法检测细胞内NO表达、放射免疫法测定ET-1含量.结果 ①高糖状态下高浓度ox-LDL抑制ECV-304的增殖,且呈浓度依赖性;②高浓度Glu和ox-LDL具有正协同作用,促进ET-1的分泌,且对ET-1的促分泌作用高浓度ox-LDL可能要强于高血糖.而NO含量则随作用时间延长表现出先升高后下降的动态变化过程.结论 高浓度Glu和ox-LDL对ECV-304具有协同损伤作用,高糖状态下ox-LDL可直接导致VEC-304功能的异常,引起ET-1产生增多以及损伤内皮NO系统,促进糖尿病血管并发症的发生、发展.     

消可宁颗粒剂对高糖环境下内皮细胞的保护作用

目的 观察消可宁颗粒剂对高糖条件下培养的人脐静脉血管内皮细胞(ECV-304)的保护作用.方法 苏木精-伊红染色观察体外培养的不同消可宁浓度下的ECV-304细胞形态学改变和四甲基偶氮唑盐法(MTT)测定ECV-304细胞增殖活性.结果 ①高糖对照组ECV-304细胞生长抑制,变小变圆,出现不同程度的空泡变性.各消可宁组ECV-304细胞出现不同程度的细胞恢复.②80 g/L和100 g/L消可宁组可减轻高糖对ECV-304细胞的生长抑制,与高糖对照组比较具有显著性差异(P＜0.05).结论 高糖引起ECV-304细胞损伤,对其生长增殖具有明显的抑制作用.消可宁可有效减轻高糖对ECV-304细胞的损伤和生长抑制,从而保护内皮细胞.     

EFFECTS OF FOLATE ON PCNA EXPRESSION IN PLACENTA CELLS OF PREGNANCY RATS

目的:探讨叶酸对妊娠大鼠胎盘细胞PCNA表达的影响,为应用叶酸预防出生缺陷提供依据.方法:40只雌性成年SD大鼠随机分为叶酸大、中、小剂量干预组和对照组,每组10只大鼠.各组动物受孕后,叶酸干预组大鼠分别给予2mg/kg/d、1mg/kg/d、0.5mg/kg/d叶酸灌胃,对照组灌胃等容积生理盐水.各组大鼠取妊娠13.5d(E 13.5d)的胎盘,行HE染色和免疫组化学染色,观察胎盘的形态结构和胎盘细胞PCNA的表达情况.结果:HE染色显示各叶酸干预组大鼠胎盘组织结构与对照组比较无明显变化.PCNA阳性物质呈棕黄色颗粒状位于细胞核；各叶酸干预组大鼠胎盘细胞PCNA的表达明显高于对照组(P＜0.05),叶酸大、中剂量组大鼠胎盘细胞PCNA的表达明显高于小剂量组(P＜0.05).结论:叶酸可明显提高胎盘细胞PCNA的表达,提示叶酸可促进胎盘细胞的增殖活动.     

叶酸对妊娠大鼠胎盘细胞PCNA表达的影响

目的:探讨叶酸对妊娠大鼠胎盘细胞PCNA表达的影响,为应用叶酸预防出生缺陷提供依据。方法:40只雌性成年SD大鼠随机分为叶酸大、中、小剂量干预组和对照组,每组10只大鼠。各组动物受孕后,叶酸干预组大鼠分别给予2mg/kg/d、1mg/kg/d、0.5mg/kg/d叶酸灌胃,对照组灌胃等容积生理盐水。各组大鼠取妊娠13.5d(E 13.5d)的胎盘,行HE染色和免疫组化学染色,观察胎盘的形态结构和胎盘细胞PCNA的表达情况。结果:HE染色显示各叶酸干预组大鼠胎盘组织结构与对照组比较无明显变化。PCNA阳性物质呈棕黄色颗粒状位于细胞核;各叶酸干预组大鼠胎盘细胞PCNA的表达明显高于对照组(P0.05),叶酸大、中剂量组大鼠胎盘细胞PCNA的表达明显高于小剂量组(P0.05)。结论:叶酸可明显提高胎盘细胞PCNA的表达,提示叶酸可促进胎盘细胞的增殖活动。     

CASK下调表达对人血管内皮细胞ECV-304增殖能力的影响

目的 建立CASK下调表达细胞株,研究钙/钙调蛋白依赖性丝氨酸蛋白激酶(calcium,calmodulin-associated serine/threonine kinase,CASK)下调表达对ECV-304细胞增殖能力的影响.方法 将包含针对CASK基因干扰siRNA片段的pGenesil-1-hCASK重组质粒转染人ECV-304细胞株,经G418加压筛选,成功筛选出CASK下调表达的细胞株.用蛋白免疫印迹法鉴定转染细胞中CASK基因的表达水平.采用流式细胞技术、MTT法观察CASK下调表达对ECV-304细胞增殖能力的变化.结果 成功筛选出CASK下调表达ECV-304细胞株(siCASK细胞株),这些细胞在传代过程中绿色荧光蛋白能维持表达,细胞株中转染阳性率在90%以上;经蛋白免疫印迹法检测CASK表达明显降低;siCASK细胞株中G0/G1细胞比率下降,G2M期细胞比率明显上升,增殖指数明显提高,生长曲线左移.结论 成功建立了CASK下调表达的ECV-304细胞株,CASK下调表达可导致细胞增殖能力增强.     

无蹼壁虎抗肿瘤活性成分对ECV304细胞增殖和凋亡的影响

目的 观察无蹼壁虎抗肿瘤活性成分对人脐静脉内皮细胞系ECV304细胞增殖和凋亡的影响.方法 常规培养ECV304细胞,设正常对照组、无蹼壁虎抗肿瘤活性成分高浓度(200mg/L)组、中浓度(20mg/L)组、低浓度(2mg/L)组.采用免疫细胞化学法检测不同实验组细胞PCNA的表达,并计算细胞阳性率为细胞增殖指数(PI);应用AO/EB荧光染色技术检测无蹼壁虎抗肿瘤活性成分对细胞凋亡的影响.结果 ①无蹼壁虎抗肿瘤活性成分高,中浓度组与正常对照组比较,ECV304细胞PCNA的表达降低,细胞增殖指数降低,差异有显著性(P＜0.01);②与正常对照组比较,无蹼壁虎抗肿瘤活性成分高,中高浓度组均能促进ECV304细胞凋亡.结论 无蹼壁虎抗肿瘤活性成分能够抑制ECV304细胞增殖,引起细胞凋亡.     

17-β雌二醇对高糖环境中内皮细胞MT1-MMP mRNA表达变化及其凋亡的影响

目的:研究雌二醇(E2)对高糖(Glu,30 mmol/L)环境中内皮细胞系EVC-304的凋亡及其膜型基质金属蛋白酶-1(MT1-MMP)mRNA表达的影响.方法:用E2干预高糖环境中的ECV-304,用四唑盐比色试验(MTT)检测高糖和E2对ECV-304增殖的影响;用流式细胞术(flow cytometry,FCM)和细胞基因组DNA Ladder法检测高糖和E2干预后ECV-304凋亡;用半定量RT-PCR法检测高糖和E2干预后ECV-304 MT1-MMP mRNA表达.结果:高糖可以促进EVC-304凋亡(P＜0.01),也可以降低MT1-MMP的表达(P＜0.01);E2在浓度为0.01～0.10 mmol/L时,可以拮抗高糖的促凋亡效应(P＜0.01),也可恢复性上调MT1-MMP的表达(P＜0.05).E2的这种效应不随时间变化而变化(P＜0.05).结论:高糖对内皮细胞具有毒性作用,E2对内皮细胞具有保护作用;E2还可以上调高糖环境中内皮细胞MT1-MMP的表达.     

hSulf-1基因腺病毒表达载体的构建及其对血管内皮细胞增殖、迁移能力的影响

目的 构建携带人硫酸酯酶1基因(hSulf-1)的腺病毒载体,研究其对于人脐静脉内皮细胞ECV-304增殖、迁移能力的影响。方法 通过基因操作技术将hSulf-1基因插入到腺病毒基因组中,构建重组腺病毒Ad5-hSulf1;应用蛋白质免疫印迹法检测hSulf-1蛋白在ECV-304细胞中的表达及细胞内磷酸化Akt、ERK的表达变化;MTT实验检测hSulf-1过表达对于ECV-304细胞增殖的影响;采用划痕实验研究hSulf-1过表达对于ECV-304细胞迁移的影响。结果 成功构建携带目的基因hSulf-1的腺病毒载体;免疫印迹结果表明hSulf1基因过表达会下调ECV-304细胞Akt和ERK信号分子的磷酸化水平;细胞增殖实验结果表明hSulf1基因过表达抑制了ECV-304细胞增殖,感染复数为50、100时细胞存活率下降至(68.49±0.05)%以及(67.78±0.06)%(P<0.05);划痕实验结果表明hSulf1基因过表达能够抑制细胞的迁移,相比于对照组细胞迁移能力减弱(P<0.01)。结论 重组腺病毒Ad5-hSulf1介导的hSulf-1基因在ECV-304细胞中的过表达明显抑制细胞增殖及迁移,为hSulf-1用于肿瘤及血管生长相关疾病的基因治疗奠定了基础。     

辐射对血管内皮细胞生物学特性的影响

目的研究辐射对人脐静脉内皮细胞系ECV-304生物学特性的影响,探讨放射性皮肤烧伤的愈合机制.方法倒置显微镜观察不同剂量辐射下ECV-304细胞形态学的变化;^3H-TdR掺入法和CB法检测辐射对ECV-304增殖抑制及微核发生率的影响;RT-PCR半定量法检测辐射对内皮细胞VEGF的表达.结果辐射可导致ECV-304细胞核体积增大,细胞均质性变差;且对ECV-304增殖的抑制作用呈剂量依赖性,随剂量增加而增大;随剂量增加,微核发生率明显增加;RT-PCR结果表明,VEGF在细胞受到辐射后8 Gy以上表达增高,而且持续表达至72 h.结论γ射线通过损伤DNA和细胞染色体抑制ECV-304增殖,同时VEGF在内皮细胞受辐射后表达升高,可能对细胞具有辐射防护作用,这为放射性烧伤的治疗奠定了理论基础.     

麻疹的双相移位研究进展

近年新生儿、婴儿、成人麻疹患者逐年增加,临床表现一般仍较典型,成年人麻疹患者全身中毒症状较重。麻疹抗体检测结果阳性是主要的诊断依据。麻疹发病的双相移位的机理可能是,免疫保护力不足,婴儿出生时麻疹抗体力低。孕期母传胎的麻疹抗体减弱,母经乳汁传给婴儿的抗体减弱,成人麻疹抗体水平逐年下降。预防措施是怀孕前给予育龄妇女麻疹疫苗接种,鼓励母乳喂养,麻疹疫苗计划免疫适当提前,在成人追加麻疹疫苗的免疫,加强病毒变异的研究等。     

正常增殖期子宫内膜细胞增生状态的定量观察

以＾３氢－胸腺嘧啶核苷放射自显影法及ＨＥ染色，观察并分别测定了１８例正常子宫内膜增殖中期，１５例增殖晚期的腺上皮细胞或间质细胞的标记指数、分裂指数。结果显示：子宫内膜增殖晚期腺上皮细胞或间质细胞之ＬＩ均明显高于增殖中期。同时，增殖晚间质细胞之ＭＩ也明显高于增殖中期，即此两种细胞在增殖晚期中增生明显，其增生状态初步获得了定位定量测定的正常值。     

人工全髋关节置换术的手术配合

目的：介绍人工全髋关节置换术的手术配合做法;方法：主要在手术配合的六个方面,解决防感染、防栓塞等问题。结果：30例人工全髋关节置换术均获成功,结论：手术配合是护士责任心和基本功的全面体现,对提高手术效果有至关重要的影响。     

尿微量白蛋白检测在继发性肾脏疾病中的临床意义

目的探讨尿微量白蛋白（m-Alb）检测在继发性肾脏疾病中的临床意义。方法采用Beckman Immage全自动特种蛋白分析仪对糖尿病组、高血压组、心脏病组患者进行了m-Alb测定,同时与健康组结果作对比。结果m-Alb检测糖尿病组为3.7±5.26mg/dl,高血压组为7.5±8.18mg/dl,心脏病组为7.8±3.76mg/dl,健康组为0.66±0.48mg/dl,各试验组m-Alb增高百分率为糖尿病组48.9%,高血压组37.5%,心脏病组26.9%。结论尿蛋白阴性的糖尿病、高血压、心脏病患者进行m-Alb检测,可以监测病程的进展。     

尿液pH值对红细胞检验影响的探讨

[目的 ]通过尿液 pH值对红细胞检验影响的观察 ,更加科学、准确地诊断血尿和血红蛋白尿。[方法 ]采用干化学分析仪检测和尿液显微镜红细胞计数 ,观察 180例正常人尿标本加入正常人血标本后 ,不同 pH值 ,不同时间内 ,观察红细胞溶解情况。 [结果 ]pH <5 .5以下时 ,随着时间的延长 ,红细胞溶解现象明显。 1h后观察有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ;2h后有非常显著性差异 (P <0 .0 1)。[结论 ]pH <5 .5时对红细胞计数影响较大 ,易致红细胞发生溶解现象 ,出现假性血红蛋白尿 ,对血尿和血红蛋白尿很难区分 ,给临床诊断造成不便 ,更易引起漏诊和误诊。     

80例局限性银屑病误诊原因分析

本文报告80例局限于小腿或手或足的银屑病。均经皮肤组织病理检查确诊。因部位比较特殊。受多种理化因素影响,使皮疹形态发生轻重程度不同的变化,常看不到典型损害,因而误诊为神经性皮炎,湿疹,慢性皮炎及癣等。作者对误诊原因进行了分析后,提出了鉴别诊断方法。     

腰椎间盘突出症再次手术的原因分析

目的解决腰椎间盘突出症手术中神经压迫。方法对1980～1998年再手术资料进行统计分析,讨论分析再手术原因,再次手术前影像学检查,观察病理变化以确定再手术方法。结果对11例随访6个月～1年,优7例(68．4％),良3例(36．8％),差1例(2．8％)。结论初次手术前详细查体和分析X线片,术中用导尿管和神经剥离探查,尽量避免髓核遗留,手术范围不宜太大,尽量减少对软组织和脊柱结构的破坏,避免形成硬膜囊与神经根粘连而致单纯形疤痕。