全反式维甲酸对糖尿病大鼠肾小管-间质TGF-β1表达的影响

目的观察全反式维甲酸对糖尿病肾病肾小管-间质转化生长因子β1表达的影响。方法24只链脲佐菌素（STZ）诱导的糖尿病大鼠模型,随机分为治疗组（T）,模型组（D）各12只,和12只正常组（N）,T组给予全反式维甲酸20mg/（kg·d）油溶液灌胃,D组和N组分别灌等量的溶剂。4、8周每组各处死大鼠6只,测量24h尿微量清蛋白排泄率、肾重/体重、血肌酐、血糖（BX）。肾组织PAS、Masson s染色。免疫组化方法检测肾小管-间质转化生长因子β1的表达。结果全反式维甲酸可减轻肾小球系膜区基质、细胞的增生,明显缓解肾小管的损伤,肾间质的基质减少。4周尿微量清蛋白的排泄实验组低于模型组（3.08±0.48μg/min VS 3.35±0.56μg/min,P〈0.05）,8周时尿微量清蛋白的排泄率明显低于同期模型组（2.49±0.40μg/min VS 4.53±0.87μg/min,P〈0.01）;肾小管上皮细胞转化生长因子β1的表达明显低于模型组。结论全反式维甲酸可减轻糖尿病肾病肾小管-间质的损害,减少蛋白尿。可能通过抑制转化生长因子β1的表达防止肾间质的纤维化,保护肾功能。     

全反式维甲酸对HL-60细胞核因子-κB、NO 表达的影响与细胞周期的关系

目的探讨全反式维甲酸(ATRA)诱导HL-60细胞分化的机制.方法分为对照组(NS)、维甲酸组(ATRA)、增强组(ATRA SNP)、抑制组(ATRA L-NMMA),分别加入HL-60细胞培养液中共同培养48h后收集细胞,用流式细胞仪检查HL-60细胞核因子-kB荧光强度、细胞周期比例,硝酸还原酶法测定NO.结果与对照组相比,各组HL-60细胞核因子-kB活性均降低,以增强组最低,差异均有显著性(P＜0.05),NO表达水平升高,其中维甲酸组、增强组差异均有显著性(P＜0.05),而抑制组差异没有显著性(P＞0.05);与对照组相比,各组G1期细胞比例均升高,差异有显著性(P＜0.05);与维甲酸组相比,抑制组G1期细胞比例降低但差异没有显著性(P＞0.05),增强组G1期比例升高且差异有显著性(P＜0.05).结论全反式维甲酸通过下调核因子-kappaB活性,同时增强NO合成是其抑制HL-60细胞增殖抗肿瘤机制之一.     

全反式维甲酸对M1型巨噬细胞极化的影响

目的 利用M1型巨噬细胞极化模型,探讨全反式维甲酸(ATRA)对M1型巨噬细胞极化的影响.方法 选用8周龄C57BL/6雌性小鼠,提取并纯化腹腔巨噬细胞,随机分为M组、M1组、DMSO组和ATRA组.脂多糖(LPS,100 ng/mL)联合干扰素-γ(IFN-γ,20 ng/mL)诱导巨噬细胞构建M1型巨噬细胞极化模型...     

全反式维甲酸对大鼠腹膜透析模型腹膜TGF-β1和COL-Ⅰ表达的影响

目的研究全反式维甲酸(ATRA)对大鼠腹膜透析模型腹膜转化生长因子-β1(TGF-β1)和胶原(COL-Ⅰ)表达的影响,初步探讨其对腹膜纤维化的作用机制。方法建立大鼠腹膜透析模型,ATRA2mg/kg(小剂量组)、5mg/kg(大剂量组)每日腹腔内注射进行干预,在实验第28d取腹膜组织进行Masson染色,免疫组织化学检测TGF-β1、COL-Ⅰ在脏层腹膜的表达;RT-PCR检测TGF-β1mRNA的表达。结果Masson染色显示,模型组腹膜较对照组明显增厚,胶原大量沉积;ATRA治疗组腹膜病变均有不同程度减轻。免疫组化和RT-PCR结果表明,模型组腹膜组织中TGF-β1和COL-Ⅰ的表达明显高于对照组,小、大剂量ATRA组表达均显著降低,且大剂量组较小剂量组表达低。结论ATRA可以下调TGF-β1的表达和抑制COL-Ⅰ的合成,延缓腹膜纤维化的进展。     

全反式维甲酸对儿童卵黄囊瘤细胞增殖及维甲酸β受体表达的影响

目的:研究全反式维甲酸(ATRA)对儿童卵黄囊瘤细胞诱导分化过程中细胞形态及维甲酸β受体表达的影响.方法:在体外细胞培养的基础上,观察细胞形态学的变化、细胞增殖动力学的变化,采用MTT比色法测定细胞细胞增殖活性,以半定量RT-PCR方法检测维甲酸β受体(RAR-β)mRNA的表达.结果:全反式维甲酸能使卵黄囊瘤细胞形态趋向良性分化,有效地抑制了肿瘤细胞增殖;半定量RT-PCR结果显示,经不同浓度的ATRA处理后的卵黄囊瘤细胞的RAR-β mRNA表达水平均上调.结论:ATRA对卵黄囊瘤细胞有诱导分化作用,ATRA通过上调维甲酸β受体基因表达实现其诱导分化作用.     

全反式维甲酸对单侧输尿管梗阻大鼠肾脏TGF-β1/Smad3信号通路的影响

目的:探讨全反式维甲酸(ATRA)对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾脏组织TGF-β1/Smad3信号通路的影响.方法:雄性Wistar大鼠72只随机分成3组:假手术组、UUO组、ATRA干预组,每组均为24只.UUO组和ATRA组大鼠腹腔注射麻醉后,行左侧输尿管结扎术.在同样的条件下,假手术组只探及肾包膜.ATRA组自...     

全反式维甲酸对人胃癌细胞株caveolin-1表达和定位的影响

目的探讨全反式维甲酸(ATRA)对人胃癌细胞株SGC7901的增殖及对胞膜蛋白caveolin-1表达和定位的影响。方法 MTT法检测不同浓度(5、10、25μmol/L)ATRA对SGC7901细胞增殖的影响;免疫荧光法检测cavolin-1在细胞中的定位,Western blot检测caveolin-1的表达。结果 ATRA可明显抑制人胃癌细胞株SGC7901的增殖。ATRA处理3 d后,SGC7901细胞caveolin-1的表达无明显变化,但caveolin-1在胞浆中的分布明显降低,胞膜上分布明显增加。结论 ATRA可明显抑制SGC7901的增殖,促进caveolin-1在细胞膜上定位。     

全反式维甲酸对糖尿病大鼠肾小管-间质纤维化的作用及机制

目的 探讨全反式维甲酸对糖尿病大鼠肾小管-间质纤维化的作用以及对肾间质转化生长因子β1(TGF-β1)、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达的影响.方法 24只链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病大鼠模型,随机分为治疗组(T)、模型组(D)各12只、正常组12只(N),T组给予全反式维甲酸(atRA)(20mg·kg-1·d-1)油溶液灌胃,D组和N组分别灌等量的植物油.4、8周每组各处死大鼠6只,测量24h尿微量清蛋白排泄率、肾重/体质量、血肌酐、血糖(BS).肾组织PAS、Masson染色.免疫组化方法检测肾小管-间质TGF-β1、α-SMA的表达.结果 atRA可减轻肾小球系膜区基质、细胞的增生,明显缓解肾小管-间质的纤维化.4周尿清蛋白的排泄率实验组低于模型组[(3.08±0.48)μg/min与(3.35±0.56)μg/min,P<0.05],8周时尿清蛋白的排泄率明显低于同期模型组[(2.49±0.40)μg/min与(4.53±0.87)μg/min,P<0.01];肾小管上皮细胞TGF-β1的表达明显低于模型组(P<0.01),肾小管-间质α-SMA的表达明显低于模型组(P<0.01).结论 atRA可减轻糖尿病大鼠肾小管-间质的纤维化,减少尿蛋白.可能通过下调肾小管-间质TGF-β1的表达、减少肾小管-间质肌成纤维细胞的数量,防止肾间质的纤维化,保护肾功能.     

全反式维甲酸诱导的食管癌细胞DNA聚合酶β的表达

目的：了解食管癌细胞分化过程中DNA聚合酶β(polβ)基因的表达。方法：采用全反式维甲酸(ATRA)诱导人食管癌Eca109细胞分化,应用甲基绿-派洛宁染色、原位杂交、免疫组化和Western blot方法分别检测细胞分化和polβ基因的表达。结果：ATRA作用5d后可以诱导Eca109细胞分化。Wt—polβ和mt—polβ(截短的)基因的表达随着Eca109细胞的分化而降低。结论：ATRA可下调Eca109细胞wt-polβ和mt—polβ的表达,促使其分化。     

全反式维甲酸对阿霉素肾病大鼠保护作用的实验研究

目的探讨TGF-β,ET-1在肾脏病发病机制中的作用,探讨全反式维甲酸对阿霉素肾病大鼠肾脏病变进展的影响,并为此药治疗临床肾脏疾病提供科学依据。方法雄性Wistar大鼠36只,随机分为正常对照组、肾病对照组及维甲酸治疗组。采用尾静脉一次注射阿霉素（ADR）6．5mg／kg方法建立阿霉素肾病模型。造模7d蛋白尿24小时〉30mg,造模成功。维甲酸治疗组给予全反式维甲酸20mg／kg溶于2ml花生油灌胃,共4周。造模后第7d、21d、42d分别检测24h尿蛋白定量;取肾脏做HE染色,观察肾脏病理形态学改变,免疫组化法测定肾组织中TGF-β1、ET-1表达变化。结果1）维甲酸治疗组24小时尿蛋白定量低于肾病对照组（P〈0．05）;2）免疫组化显示：肾病对照组TGF-β1、ET-1表达明显高于正常对照组,比较有统计学意义（P〈0．05）,维甲酸治疗组TGF-β1、ET-1表达明显低于肾病对照组（P〈0．05）。结论全反式维甲酸可以下调阿霉素肾病大鼠肾脏中TGF-β1、ET-1表达,降低阿霉素肾病大鼠24小时尿蛋白排泄量,减轻肾脏病理损害,对肾脏有保护作用。     

全反式维甲酸对兔后发性白内障的抑制作用

目的探讨全反式维甲酸（ATRA）对兔后发性白内障的抑制作用。方法将12只健康家兔（24只眼）随机分为眼用平衡盐液组（空白对照组）和ATRA组（药物实验组）,每组6只兔（12只眼）,在全麻下进行透明晶状体囊外摘除术。分别于术后1、3、7、14、30和60d对术眼进行裂隙灯和眼底检查,并抽取房水置于-80℃保存。用酶联免疫吸附测定术后兔眼房水中的白细胞介素-1β（IL-1β）和转化生长因子-β（TGF-β）的含量。3月后处死动物,分别对两组兔眼进行组织病理学及电镜观察。结果术后房水中IL-1β和TGF-β含量实验组明显低于对照组（P〈0．001）。术后3月实验组晶体后囊透明度优于对照组（P〈0．05）。对照组晶体后囊前覆盖一层晶体上皮细胞,实验组晶体后囊前无明显晶体上皮细胞增殖。结论ATRA可抑制房水中IL-1β和TGF-β的含量,能够有效抑制后发性白内障的发生。     

全反式维甲酸对糖尿病大鼠肾小管-间质Prohibitin表达的影响

目的探讨全反式维甲酸对糖尿病大鼠肾小管-间质Prohibitin表达的影响。方法24只链脲佐茵素（STZ）诱导的糖尿病大鼠，随机分为治疗组（T），模型组（D）各12只和12只正常组（N），T组给予全反式维甲酸20mg／（kg·d）油溶液灌胃，D组和N组分别灌等量的溶剂，4、8周每组各处死大鼠6只，测量尿清蛋白排泄率、肾重／体重、血肌酐、血糖（BS）。肾组织Masson’s染色。免疫组化方法检测肾小管-间质Prohibitin的表达。结果全反式维甲酸可缓解肾小管的损伤，减少肾间质的细胞外基质，4、8周时尿清蛋白的排泄率治疗组分别显著低于模型组（P〈O．01），血肌酐治疗组与同期模型组相比也显著降低。治疗组肾小管．间质Prohibitin的表达上调，明显高于模型组。结论全反式维甲酸可能通过上调肾小管-间质Prohibitin的表达防止肾间质的纤维化，保护肾功能。     

全反式维甲酸对SHI-1细胞株糖基转移酶表达的影响

目的：探讨全反式维甲酸对SHI-1细胞株中糖基转移酶表达的影响。方法：采用半定量RT-PCR和RealTime PCR方法,比较在不同浓度ATRA作用下,SHI-1细胞中不同糖基转移酶家族（多肽：N-乙酰氨基半乳糖转移酶家族、133N-乙酰氨基葡萄糖基转移酶家族和O-连接N-乙酰氨基葡萄糖转移酶家族）的表达情况。结果：在SHI-1细胞株中ppGalNAcT1、T2、T3、T4,133GnT1、β3GnT5,O-GnT有不同程度的表达,加入全反式维甲酸后133GnT5表达量下降,PP-GalNAcT2、T4、β3GnT1、O-GnT表达量升高。结论：加入诱导分化剂全反式维甲酸后,SHI-1细胞中的糖基化作用升高。     

全反式维甲酸对糖尿病肾病模型大鼠转化生长因子β1基因甲基化水平影响的实验研究

目的:探讨全反式维甲酸(ATRA)对糖尿病肾病(DN)模型转化生长因子β1(TGF-β1)基因甲基化水平的影响。方法:将30只成年雄性SD大鼠随机分为对照组、DN组、DN+ATRA组,每组10只。采用高糖高脂饮食加腹腔注射小剂量链脲佐菌素建立DN大鼠模型,对照组和DN组给予等体积0.9%氯化钠溶液灌胃,DN+ATRA组给予5 mg/kg ATRA灌胃,连续干预4周。观察各组大鼠24 h尿蛋白和血液生化指标,肾脏组织行HE染色和PAS染色,选择MS-PCR检测各组大鼠肾脏中TGF-β1基因的DNA甲基化水平,选择逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)、Western blot法及免疫组织化学检测肾脏组织TGF-β1 mRNA及蛋白表达。结果:与对照组比较,DN组大鼠空腹血糖(FBG)、血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、24 h尿蛋白升高(均P<0.05)。与DN组比较,DN+ATRA组大鼠FBG、BUN、Scr、24 h尿蛋白降低,但高于对照组(均P<0.05)。HE染色和PAS染色DN组肾小球形状不规则,系膜基质增多着玫瑰红色,部分肾小管有萎缩且存在管腔扩张,肾小管周围有较...     

全反式维甲酸对狼疮性肾炎小鼠的治疗作用

目的探讨全反式维甲酸(ATRA)对狼疮性肾炎(LN)小鼠的治疗作用。方法将18只MRL/lpr小鼠随机分为对照组、环磷酰胺治疗组和ATRA治疗组,每组6只。对照组小鼠给予生理盐水灌胃(10 mg·kg-1·d-1),给药8周;ATRA治疗组小鼠给予ATRA灌胃(10 mg·kg-1·d-1),给药8周;环磷酰胺治疗组小鼠腹腔注射环磷酰胺(100 mg·kg-1·d-1),连续给药2 d。实验结束后采集小鼠血液及肾脏组织标本。使用全自动生物化学分析仪检测小鼠血尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)和尿肌酐(Ucr)水平,过碘酸雪夫染色观察肾组织结构变化,免疫组织化学法检测小鼠肾组织中转化生长因子-β1(TGF-β1)和单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的表达。结果 ATRA治疗组和环磷酰胺治疗组小鼠Scr和BUN水平低于对照组,Ucr水平高于对照组(P<0.01);ATRA治疗组小鼠BUN水平高于环磷酰胺治疗组,Ucr水平低于环磷酰胺治疗组(P<0.01);ATRA治疗组和环磷酰胺治疗组小鼠Scr水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。对照组小鼠可见肾小球基底膜增厚、系膜增生,肾小管基底膜增厚;环磷酰胺治疗组和ATRA治疗组小鼠也可见肾小球基底膜增厚、系膜增生,肾小管基底膜增厚,与对照组比较均有减轻,环磷酰胺治疗组减轻更明显。环磷酰胺治疗组和ATRA治疗组小鼠肾组织中MCP-1、TGF-β1表达均低于对照组(P<0.05);ATRA治疗组小鼠肾组织中MCP-1、TGF-β1表达高于环磷酰胺治疗组(P<0.05)。结论环磷酰胺和ATRA均可降低LN小鼠Scr、BUN水平,减轻肾脏病理改变,减少肾脏组织中TGF-β1和MCP-1的表达,但环磷酰胺效果优于ATRA。     

全反式维甲酸对HL-60细胞NF-kB、 Cyclin D1表达的影响

目的探讨全反式雏甲酸（ATRA）对HL-60细胞周期、NF-kB和Cyclin D1表达的影响。方法采用不同浓度的ATRA作用于HL-60细胞，于48h后收集细胞，用流式细胞术分析HL-60细胞周期、NF-kB和Cyclin D1表达的变化。结果维甲酸纽HL-60细胞G1期细胞比值升高，S期细胞比例下降，NF-kB、Cyclin D1表达均下降，其中10^-7M、10^-6M浓度组与对照纽相比差异均有显著性（P〈0．05），而10^-8M浓度组却差异均无显著性（P〉0．05）；维甲酸10^-6M浓度组NF-kB、CyclinDI的表达呈显著正相关（r=0．55．P〈0．0l，n=12）。结论全反式维甲酸（ATRA）通过下调NF-KB抑制CyclinDl活性表达，可能是其阻滞细胞周期诱导HL-60细胞分化的机制。     

脑梗死患者血清白介素-6白介素-8白介素1β及白介素-18水平的研究

目的:监测脑梗死患者血清白介素-6、白介素-8、白介素-1β及白介素-18水平.方法:采用ELISA法测定血清中上述炎性介质的水平,并进行组间比较.结果:脑梗死患者血清白介素-6、白介素-8、白介素-1β及白介素-18水平均高于正常对照者,具有统计学差异.结论:脑梗死患者体内炎性介质的上调是脑梗死组织细胞学损伤的机制之一.     

前列腺素E2对人肝癌细胞β1-integrin表达调控及相关机制的研究

目的:阐明前列腺素E2(prostaglandin E2,PGE2)通过EP1受体上调肝癌细胞Huh-7中β1-integrin的表达及其相关的信号转导通路?方法:用PGE2?EP1受体激动剂(17-PT-PGE2)?EP1受体抑制剂SC19220?NF-κB抑制剂PDTC处理Huh-7细胞,通过Western blot?免疫荧光组织化学实验等方法检测β1-integrin蛋白表达水平和NF-κB的活性?结果:5 μmol/L的PGE2处理Huh-7细胞24 h后,β1-integrin的表达水平与对照组相比上升了129.48% (P < 0.01),5 μmol/L EP1受体激动剂17-PT-PGE2处理使细胞β1-integrin的蛋白表达水平升高了216.34%(P < 0.01)?10 μmol/L的EP1受体抑制剂SC19220处理后β1-integrin表达水平与PGE2组相比下降了34.51%(P < 0.05)?免疫荧光组织化学实验显示17-PT-PGE2处理Huh-7细胞120 min后,NF-κB核表达水平明显增加;Western blot实验显示5 μmol/L 17-PT-PGE2处理Huh-7细胞120 min后,磷酸化NF-κB-p65上升了209.27%(P < 0.01)?NF-κB抑制剂PDTC处理Huh-7细胞后β1-integrin蛋白表达水平与EP1受体激动剂组相比降低了63.49%(P < 0.01)?结论:PGE2可通过EP1受体上调Huh-7细胞中β1-integrin的表达,此调节作用可能与NF-κB信号转导通路有关?     

急性胰腺炎大鼠caspase-1依赖性腺泡细胞焦亡的观察

目的 观察急性胰腺炎大鼠半胱天冬酶-1 (caspase-1)依赖性腺泡细胞焦亡的情况.方法 选用Wistar大鼠12只,随机分为对照组和胰腺炎组各6只.胰腺炎组经腹腔注射精氨酸制作急性胰腺炎模型.造模成功后24 h,观察胰腺组织病理变化.采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测胰腺caspase-1、蛋白质...     

全反式维甲酸对大鼠C6胶质瘤细胞周期及周期因子表达的影响

目的:探讨全反式维甲酸对大鼠C6胶质瘤细胞周期及周期因子的影响及其机制。方法:建立大鼠C6脑胶质瘤模型,腹腔注射全反式维甲酸后,流式细胞仪检测细胞增殖时相变化,免疫组化法检测p27kip1蛋白和Cyc-lin D1蛋白表达的变化。结果:治疗组较对照组,G1期细胞比例增加,S期细胞比例减少,p27kip1蛋白表达增多,Cyc-lin D1蛋白表达减少。结论:维甲酸处理后,大鼠C6胶质瘤细胞周期发生G1期阻滞,其机制同上调p27kip1蛋白表达及下调Cyclin D1蛋白表达有关。