选择性先天缺牙家系的表型与基因型分析：附2例报告

目的: 探讨选择性先天缺牙患者的遗传学病因。方法: 对2例非综合征型先天缺牙患者进行临床检查、家系调查、影像学检查以及外周血采集,通过全外显子测序后与正常人类基因组比对,并进行Sanger测序验证,确定致病基因及突变位点后,进行蛋白结构预测和多物种保守性分析。结果: 2例选择性先天缺牙家系中家系1为散发型,家系2为家族型。全外显子测序结果显示,先证者1和先证者2分别存在LRP6无义突变（II:1, c.C1573T,p.R525X）以及移码突变（II-1, c.4611delT ,p.C1537fs）。蛋白结构分析表明,p.R525X使LRP6蛋白截短,为失功能突变。多物种保守性分析揭示位点在进化过程中高度保守,提示突变具备有害性。结论: 2例选择性先天缺牙家系可能由于LRP6突变导致,为遗传咨询和产前诊断提供了参考。     

牙唇面根充法联合烤瓷牙修复效果评价

目的评价牙唇面根充法进行根管治疗联合烤瓷牙修复改善上前牙前突和增进美观的临床疗效。方法选取我科2010年1月—2014年1月门诊就诊的上前牙前突患者100例,通过牙唇面根充法完成根管治疗后进行烤瓷牙修复。比较治疗前、后患者头颅侧位X线片测量数据和牙龈炎发生率,评价治疗后烤瓷牙外观及功能。应用SPSS18.0软件包对数据进行统计学分析。结果治疗后U1-SN、U1-X、U1-Y均显著低于治疗前（P<0.01）,治疗后U1-L1显著高于治疗前（P<0.01）;治疗后牙龈炎发生率显著下降（χ²=16.2749,P<0.01）。治疗后烤瓷牙整体轮廓、上前牙前突纠正、与邻牙匹配度和减轻深覆及深覆盖优良率分别为96.00%、95.00%、98.00%和91.00%。结论牙唇面根充法进行根管治疗联合烤瓷牙修复可以有效改善上前牙前突,增加美观,值得临床应用。     

AXIN2基因的3个SNP位点与新疆维吾尔族先天缺牙的相关性

目的：探讨维吾尔族单纯型先天缺牙患者标本中AXIN2基因的突变位点。方法：收集维吾尔族非单纯型先天缺牙家系3个,采集家系患者颊黏膜拭子提取DNA,采用聚合酶链反应技术,对分段纯化的PCR产物进行DNA双向测序检测患者的DNA。结果：3个家系的单纯型先天缺牙临床表型符合常染色体显性遗传规律,患者出现不同数量的缺失牙或伴发锥形牙。测序后检测出AXIN2的3个可能的SNP位点。结论：AXIN2基因片段中某些编码基因的改变可能与维吾尔族单纯型先天缺牙有关。     

EDA基因在4个少汗型外胚层发育不全家系中的检测及分析

目的 对4个少汗型外胚层发育不全家系的EDA基因进行测序分析,研究突变的位置、类型,为临床诊断提供遗传学依据.方法 提取先证者及其亲属的基因组DNA,其中患者5人,无症状者12人,另外抽取100名无先天缺牙家族史的正常成人外周血,提取基因组DNA作为对照,设计EDA基因8个外显子的引物,通过聚合酶链反应和DNA测序的方法与正常序列比对.结果 4个家系的患者均存在EDA基因不同位点的突变,分别为c.466C>T、c.663-697缺失、c.587-615缺失、c.878T>G,携带者存在杂合突变,正常对照不存在以上突变.结论 EDA基因的c.466C>T、c.663-697缺失、c.587-615缺失、c.878T>G突变是导致家系先证者及患者出现少汗型外胚层发育不全的病因.其中,EDA基因的c.663-697缺失、c.587-615缺失、c.878T>G是未报道的新突变.     

一先天缺牙家系基因芯片检测分析及FGF20基因的检测

目的 研究一先天缺牙家系的遗传学特点并探寻其可能的致病基因。方法 一先天缺牙家系3代共17人,在患者和家属知情同意及伦理委员会批准的前提下对全部成员进行临床检查和X线辅助检查,抽取其家系成员静脉血,提取DNA,应用基因芯片技术进行基因筛查,对可疑基因FGF20进行聚合酶链式反应（PCR）并测序。结果 该非综合征型先天缺牙家系为3代连续遗传,且没有性别差异,外显率为100%,诊断为常染色体显性遗传;基因芯片检测提示FGF20可能为该家族先天缺牙的致病基因,但经PCR检测未发现突变位点。结论 先天缺牙的致病机制较复杂,可能是多基因联合控制的疾病;基因芯片技术在筛查牙齿先天缺失家系的致病基因方面仍有一定的局限性。     

纤维增强化学固化树脂关闭后牙邻间隙的疗效评价

目的 探讨纤维增强化学固化树脂关闭后牙邻间隙、阻断食物嵌塞的临床疗效。方法选择后牙食物嵌塞患者162例,嵌塞部位170处,按照邻间隙破坏程度分为窄隙组和宽隙组,2组均采用聚乙烯纤维带增强化学固化树脂关闭邻间隙,6个月、12个月复查,最终完成二次随访154例患者、161颗修复体,应用SPSS13.0软件包对2组数据进行χ²检验,评价修复效果。结果2组修复体存留率在6个月时比较,窄隙组修复体存留率显著低于宽隙组（P<0.05）,但12个月时比较则无显著差异（P>0.05）。2组修复体的完整性在6个月、12个月时比较,均无显著差异（P>0.05）。结论纤维增强化学固化树脂关闭后牙邻间隙更适合临床牙冠伸长、牙龈退缩、牙槽骨吸收、邻间隙组织量发生变化而导致的食物嵌塞病例。     

下颌中切牙唇倾度与牙槽骨厚度关系的锥形束CT分析

目的应用锥形束CT（CBCT）测量分析下颌中切牙不同唇倾度与牙槽骨厚度的关系。方法选择60例患者的头颅侧位片和CBCT影像资料,按照下颌中切牙-下颌平面角（L1-MP）分为3组,即舌倾组L1-MP<85.6°;正常组L1-MP为85.6°~99.6°;唇倾组L1-MP>99.6°。三维重建CBCT,在矢状面图像上沿下颌中切牙长轴,选择牙槽骨截面最大的图像,将牙根从釉牙骨质界到根尖点平均分为4段,测量唇、舌侧牙槽骨厚度并合计得到总厚度,观察计数骨开窗及骨开裂发生情况。采用SPSS17.0软件包对数据进行统计学分析。结果舌侧及总牙槽骨厚度在各测量位点间的差异均有统计学意义。根中1/2、根尖1/4及根尖处牙槽骨厚度唇侧均小于舌侧。舌侧牙槽骨厚度在各测量位点均为舌倾组小于唇倾组, 牙槽骨总厚度在根尖、根尖1/4、根中1/2处舌倾组比唇倾组薄。唇倾组和舌倾组的骨开裂发生率均高于正常组,差异显著(P<0.05)。结论下颌中切牙舌侧及总牙槽骨厚度从根尖区到根颈区逐渐变小,舌倾组舌侧及牙槽骨总厚度比唇倾组薄,下颌中切牙牙轴过度唇倾或舌倾易发生骨开裂。     

非综合征型先天缺牙致病基因和分子机制的研究进展

先天缺牙是牙齿发育过程中常见的牙数目发育异常,对患者的颌面部发育及美观和咀嚼功能产生严重的影响。根据有无伴发全身症状,先天缺牙可分为综合征型先天缺牙与非综合征型先天缺牙。近几年发现新的相关基因和新的突变位点及分子机制已成为目前非综合征型先天缺牙基因研究的主要方向。本文通过对近年来文献的回顾,对与非综合征型先天缺牙主要相关的Wnt/β-catenin信号通路、TGF-β/BMP信号通路、PAX9基因和MSX1基因、EDA/EDAR/NF-κb信号通路的分子机制以及相互调节的紧密联系进行综述,为未来先天缺牙的防治提供了新的理论基础。非综合征型先天缺牙致病基因的分子机制的研究目前甚少,对于其机制的精准探索将成为先天缺牙未来主要的研究方向之一。     

单纯性多数牙缺失家系的AXIN2基因突变分析

目的：通过对AXIN2基因多态性与单纯性多数牙先天缺失关系的探讨，寻找该病发病的可能基因因素。方法对单纯性多数牙先天缺失家系中患者进行临床和实验室相关检查；而后提取基因组DNA ，通过RT?PCR方法对AXIN2基因的外显子进行扩增、测序，同时分析基因突变类型。结果 DNA测序显示，在AXIN2基因的3号外显子及附近的内含子区2例患者出现3个相同类型的基因突变，分别是：c.1365A>G（p.Pro455=），c.956+16A>G（Ⅱ?1：纯合型；Ⅲ?1：杂合型），c.1200+71A>G（纯合型），同时先证者的母亲（Ⅱ?2）出现c.1365A>G和c.1200+71A>G的杂合突变类型。经生物信息软件分析认为均是多态性位点。结论 AXIN2基因的c.956+16A>G，c.1365A>G和c.1200+71A>G突变可能与该家系的单纯性多数牙齿缺失密切相关，但AXIN2在多数牙缺失发生发展各阶段的确切作用还需要进一步的研究。     

WNT10A基因杂合突变致多数牙先天缺失伴前牙反1例

本文报道1例以多数牙先天缺失伴前牙反为临床表现的患者, 其父母临床表型未见异常, 采用二代测序技术对先证者及其父母进行致病基因鉴定, 测序结果显示先证者携带WNT10A基因的杂合突变c.791G>T;p.Cys264Phe, 家系鉴定证实该错义突变遗传自母亲。对该家系的临床和遗传资料进行分析, 讨论先证者的临床治疗并深入理解WNT10A突变在先天缺牙致病机制中的作用。     

Tooth agenesis: from molecular genetics to molecular dentistry

Tooth agenesis may originate from either genetic or environmental factors. Genetically determined hypodontic disorders appear as isolated features or as part of a syndrome. Msx1, Pax9, and Axin2 are involved in non-syndromic hypodontia, while genes such as Shh, Pitx2, Irf6, and p63 are considered to participate in syndromic genetic disorders, which include tooth agenesis. In dentistry, artificial tooth implants represent a common solution to tooth loss problems; however, molecular dentistry offers promising solutions for the future. In this paper, the genetic and molecular bases of non-syndromic and syndromic hypodontia are reviewed, and the advantages and disadvantages of tissue engineering in the clinical treatment of tooth agenesis are discussed.     

Functional evaluation of a novel tooth agenesis‐associated bone morphogenetic protein 4 prodomain mutation

The detection of gene mutations in patients with congenitally missing teeth is not very complicated; however, proving causality is often quite difficult. Here, we report the detection of a substitution mutation, A42P, within the prodomain of bone morphogenetic protein 4 (BMP4) in a small family with tooth agenesis and describe a functional alteration that may be responsible for the tooth phenotype. As BMP4 is essential for the development of teeth and also for many other organs, it would be of considerable interest to find a BMP4 mutation that is associated only with tooth agenesis. Our in vitro investigations revealed that the A42P mutation neither affected processing and secretion of BMP4 nor altered functional properties, such as the induction of alkaline phosphatase or signaling through Smad1/5/8 phosphorylation by the mature BMP4 ligand. However, immunofluorescence staining revealed that the prodomains of BMP4 which harbor the A42P substitution form fibrillar structures around transfected cells in culture and that this fibrillar network is significantly decreased when mutant prodomains are expressed. Our finding suggests that in vivo, BMP4 prodomain behavior might also be altered by the mutation and could influence storage or transport of mature BMP4 in the extracellular matrix of the developing tooth.     

A novel WNT10A mutation causes non-syndromic hypodontia in an Egyptian family

Objective

Tooth agenesis is the most common dental anomaly, whose aetiology still remains to be fully elucidated. The aim of this study was to investigate the genetic cause of non-syndromic hypodontia with clinical variability in an Egyptian family.

Design

The entire coding regions including exon-intron boundaries of the MSX1, PAX9 and WNT10A genes were investigated by direct sequencing in all affected family members.

Results

Novel heterozygous mutation inherited in an autosomal dominant manner was identified in the WNT10A gene. This 21-bp deletion combined with 1-bp insertion, c.-14_7delinsC, eliminates the translation initiation codon leading to either no protein production or translation of alternative open reading frames. None of the control subjects (400 chromosomes) were carriers of this novel WNT10A mutation. No pathogenic mutations were found in the MSX1 and PAX9 genes.

Conclusions

The novel c.-14_7delinsC mutation might be the etiological variant of the WNT10A gene responsible for the permanent tooth agenesis in the Egyptian family. WNT10A is a major candidate gene for non-syndromic hypodontia.     

SDF-1在拔牙创软组织愈合过程中的表达及分布

目的:观察拔牙创软组织内基质细胞衍生因子l(SDF-1)的表达及分布,为促进拔牙创愈合提供新思路。方法:Wistar雄性大鼠30只,随机分为10组,每组3只,分别拔除左侧下颌第一磨牙。于拔牙后1、2、4、7、10 d分别采用免疫组织化学染色和RT-PCR技术观察SDF-1在创缘软组织内的分布及表达变化情况。采用SPSS12.0软件包对数据进行统计学分析。结果:免疫组织化学染色显示,拔牙早期创口周围牙龈组织内SDF-1表达增强,染色部位主要分布于牙龈上皮的棘层及基底层细胞胞质与细胞间。越靠近基底层细胞,染色越明显。拔牙后4 d,阳性染色部位主要位于基底细胞层,新生肉芽组织内可见新生血管的内皮细胞和增殖活跃的成纤维细胞阳性表达。拔牙后7 d,牙龈上皮细胞层染色变得均匀,固有层可见少量阳性染色的新生血管内皮细胞及成纤维细胞;拔牙后10 d,牙龈上皮染色特点基本与正常牙龈相似。实时定量PCR检测结果表明,SDF-1mRNA的表达水平在拔牙后1 d达到最高（P<0.01）,第2天开始下降(P<0.05),拔牙后4 d出现第2次峰值（P<0.01）,7 d后其表达水平仍高于对照组(P<0.05),10 d时恢复正常水平(P>0.05)。结论:SDF-1参与拔牙创软组织的早期愈合过程,可能对拔牙创的愈合起着一定的促进作用。     

PAX9基因与非综合征型多数牙先天缺失的关系及研究进展

先天性缺牙是人类牙列中最常见的发育异常,包括个别牙先天缺失,多数牙先天缺失和先天无牙症。多数牙先天缺失按照其表现型不同通常可分为综合征型和非综合征型,表现为常染色体的显性或隐性遗传、X-连锁遗传特性,有的具有家族遗传史,有的则是无家族史的散发病例。本文就近年来非综合征型牙齿发育不全研究中的热点基因PAX9的研究进展作一综述。     

冷光美白对釉质表面细菌生物膜形成的影响

目的:研究Beyond冷光美白对牙釉质表面主要致龋菌生物膜形成的影响。方法:制备4 mm×4 mm×1 mm的釉质片20片,随机分为冷光美白组、美白剂组、冷光照射组和对照组4组,每组5片。冷光美白组用Beyond美白凝胶（主要成分为H₂O₂）+冷光照射美白3次,每次12 min;美白剂组只在釉质片表面涂布美白凝胶美白3次,每次12 min;冷光照射组仅用冷光灯照射釉质片3次,每次12 min;对照组不做任何处理。在人工口腔模型内,将上述4组釉质片置于变形链球菌、黏性放线菌、具核梭杆菌混合菌液中培养36 h,用激光共聚焦显微镜(confocal laser scanning microscopy, CLSM）观察所形成的混合细菌生物膜,采用SAS8.2软件包对所得数据进行Kruskal-Wallis秩和检验。结果:CLSM扫描可见冷光美白组、美白剂组、冷光照射组的生物膜较对照组生物膜稀疏,生物膜厚度均显著小于对照组（P<0.05）;冷光美白组、美白剂组、冷光照射组之间生物膜厚度差异无显著性（P>0.05）;与对照组相比,冷光美白组、美白剂组、冷光照射组釉质表面生物膜中活菌百分比显著降低（P<0.001）。结论:冷光美白可抑制釉质表面混合细菌生物膜的形成,破坏生物膜的结构,降低混合细菌生物膜中活菌的数量。     

A new hypo/oligodontia syndrome: Carvajal/Naxos syndrome secondary to desmoplakin-dominant mutations

Dental agenesis is either syndromic or non-syndromic. Here, we describe a familial case with Carvajal/Naxos syndrome associating woolly hair, palmoplantar keratoderma, and biventricular dilated cardiomyopathy. In addition to these signs, all three affected family members had hypo/oligodontia ranging from absence of the lower left second molar to 15 missing teeth, the typical pattern of oligodontia being absent 2nd premolars and absent 2nd and 3rd molars. Mutation screening in the desmoplakin gene (DSP) revealed a de novo missense mutation (c.1790 C>T, p.Ser597Leu) changing a serine residue conserved in all vertebrates. In addition, this variation was absent from 100 control DNA samples. There were no mutations in the plakoglobin gene. This familial case report and two other previous reports demonstrate that autosomal-dominant mutations in the DSP gene are associated with hypo/oligodontia in the setting of Carvajal/Naxos syndrome. This study suggests that dentists discovering oligo/hypodontia should screen for woolly hair and palmoplantar keratoderma because of the probable cardiac involvement with an inherent high risk of severe cardiomyopathy. In addition, this study reveals the role of desmosomes in the development of teeth and suggests that other genes encoding proteins of the desmosome could be involved in oligo/hypodontia.     

心理护理在阻生牙拔除术中对患者焦虑情绪的影响

目的:探讨心理护理在阻生牙拔除术中对患者出现焦虑情绪的影响。方法:70例需行阻生牙拔除术的患者,随机分为干预组和对照组,每组各35例。干预组由专职护士根据患者的自身情况在术前、术中和术后进行全方位的心理护理干预以及护理配合;对照组按常规向患者交代治疗中的注意事项,进行一般的知识宣教。拔牙结束后,发放焦虑量表。采用SPSS13.0软件包中的χ²检验对2组患者产生焦虑情绪的情况进行比较。结果:干预组中出现焦虑情绪的患者人数显著低于对照组（P<0.05）。结论:通过有计划的心理护理,可帮助患者在阻生牙拔除术中减轻焦虑情绪。     

丹参对大鼠正畸牙牙周组织TGF-β1表达的影响

目的:观察丹参注射液对大鼠正畸牙牙周组织TGF-β₁蛋白的表达变化。方法:选取SD雄性大鼠192只,随机分为丹参+加力组(A)、单纯加力组(B)、丹参对照组(C)和空白对照组(D)。A、B 2组再根据加力时间点建立正畸牙移动模型。A、C 2组与B、D 2组隔天于左侧上颌第一磨牙颊侧黏膜下分别注射丹参注射液及生理盐水。于加力后l、3、5、7、10、14 d分批处死大鼠,收集标本。体式显微镜测量大鼠正畸牙移动距离的改变,H-E染色观察牙周组织变化,免疫组织化学染色检测TGF-β₁蛋白的表达变化,采用SPSS17.0软件包对数据进行统计学分析。结果:除第1天外,A组TGF-β₁的表达均高于其余组别,3 d时TGF-β₁染色显著增强,5 d达高峰;与B组相比,第3、5、7天时间点TGF-β₁平均吸光度值分别为0.5181±0.0037、0.5857±0.0023和0.4363±0.0021,均具有显著差异（P<0.01）;与C组及D组相比,任何时间点均有显著差异（P<0.05）。结论:丹参注射液可通过改善牙周组织微循环,进而促进TGF-β₁蛋白的表达,可能是加速正畸牙移动的作用机制之一。