第145期

第１４５期邵循道　主编西安医科大学（７１００６１）ＲＥＡＤＩＮＧＭＡＴＥＲＩＡＬ（阅读材料）（Ｆｏｒｉｎｔｅｎｓｉｖｅｒｅａｄｉｎｇ供精读用）ＨａｉｒＬｏｓｓａｎｄＢａｌｄｎｅｓｓ（落发与秃发）１．ｔｈｉｎ［ｉｎ］变稀，变薄２．ｃｒａｓｈ［ｋｒｅ］ａ...     

醋氨酚大鼠肝细胞损伤及其机制的研究

醋氨酚（ＡＡＰ）引起大鼠肝细胞膜损伤发生在肝细胞还原型谷胱甘肽（ＧＳＨ）明显下降之后，提示ＧＳＨ下降是ＡＡＰ损伤肝细胞的原因之一。同步测定培养大鼠肝细胞ＧＳＨ和胞浆自由钙离子浓度（［Ｃａ＾２＋ｆ］ｃ）的结果证明：加１０ｍｍｏｌ／Ｌ ＡＡＰ培养２．５小时可引起ＧＳＨ显著降低，［Ｃａ＾２＋ｆ］ｃ明显升高。二巯基苏糖醇（ＤＴＴ）５ｍｍｏｌ／Ｌ可使加ＡＡＰ后，细胞ＧＳＨ仍维持较高水平，［Ｃａ＾２＋ｆ］ｃ明     

EHF病毒在人肾细胞融合中的结构蛋白分子定位分析和人胚肾细胞融合的电镜观察

用辣根过氧化物酶标记ＭｃＡｂＦ（ａｂ＇）_２、ＭｃＡｂＬＶ４８Ａ、ＭｃＡｂ３Ｄ_８和ＭｃＡｂＡ_（３５），分别对２７例ＥＨＦ患者尿液中融合细胞（ＦＣ）进行免疫酶染色。结果ＭｃＡｂＦ（ａｂ＇）_２检出率为２７／２７（１００％）；ＭｃＡｂＬＶ４８Ａ为１９／２７（７０．３７％）；ＭｃＡｂ３Ｄ_８为２０／２７（７４．０７％）；ＭｃＡｂＡ_（３５）为２／２７（７．４１％）。人胚肾细胞感染ＥＨＦ病毒后，在偏酸性（ｐＨ６．０）条件下可以产生特异性细胞融合现象，并经电镜证实了细胞之间膜的融合。此结果表明ＥＨＦ病毒可以导致人肾细胞融合，ＥＨＦ患者尿液中ＦＣ的形成可能与ＥＨＦ病毒膜蛋白在宿主细胞膜上的表达有关。     

O-糖基化HBV Pre-S(2)CTL表位分子模建及免疫学活性研究

目的 研究Ｏ－糖基化（Ｇｌｙｃｏｓｙｌａｔｉｏｎ）修饰对ＨＢＶ Ｐｒｅ－Ｓ（２）上ＣＴＬ表位结构及其免疫学活性的影响。方法 选择ＨＢＶ Ｐｒｅ－Ｓ（２）上公认的ＨＬＡ－Ａ２限制性ＣＴＬ表位４４～５３（ＳＩＬＳＫＴＧＤＰＶ）,以Ｓｅｒ４４为糖基化位点,进行计算机分子模建,并利用糖肽合成技术,固相合成α－ＧａＩＮＡｃ－糖基化可改变表位形态使之更适宜与ＨＬＡ－Ａ２类分子结合,糖基部分基团可从ＨＬＡ－Ａ２     

内源性高甘油三酯血症患者血浆高密度脂蛋白亚类分析

内源性高甘油三酯血症（ＨＴＧ）常伴血浆ＨＤＬ－Ｃ含量下降及ＨＤＬ组成异常。为了研究ＨＴＧ患者血浆ＨＤＬ亚类的改变,作者建立了密度梯度聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳法（ＧＧＥ）,对２５例ＨＴＧ患者（血浆ＴＧ＞２．２６ｍｍｏｌ／Ｌ,ＴＣ＜６．７２ｍｍｏｌ／Ｌ）及２５例年龄、性别匹配的血脂正常者（血浆ＴＧ＜１．６９ｍｍｏｌ／Ｌ,ＴＣ＜５．１７ｍｍｏｌ／Ｌ）的ＨＤＬ亚类——ＨＤＬ２ａ、ＨＤＬ２ｂ、ＨＤＬ３ａ、ＨＤＬ３ｂ和ＨＤＬ３ｃ进行了分析,同时对血浆及ＨＤＬ中脂质及载脂蛋白（ａｐｏ）ＡⅠ、ＡⅡ、Ｂ１００、ＣⅡ、ＣⅢ及Ｅ进行了测定。结果发现,ＨＴＧ患者空腹血浆ＴＧ、ａｐｏＢ１００、ａｐｏＣⅡ、ａｐｃＣⅢ及ａｐｏＥ显著增加（Ｐ＜０．００１）,ＨＤＬ－Ｃ及ａｐｏＡⅠ显著降低（Ｐ＜０．００１及Ｐ＜０．０５）;患者血浆ＨＤＬ组成异常,ＨＤＬ中ＴＧ含量显著增加（Ｐ＜０．００１）,ＴＣ、ａｐｏＡⅠ、ａｐｏＣⅡ、ａｐｏＣⅢ及ａｐｏＥ含量下降（Ｐ＜０．０１）;患者血浆ＨＤＬ亚类含量改变,ＨＤＬ２ｂ显著降低（Ｐ＜０．０２）,ＨＤＬ２ａ及ＨＤＬ３ａ增加（Ｐ＜０．０５）,且随血浆ＴＧ含量的升高而升高,ＨＤＬ３ｂ及ＨＤＬ３ｃ则未见改变     

抗人C1—INHMcAb轻,重链可变区基因的克隆及其在E.coli中表达的研究

抗人Ｃ１┐ＩＮＨＭｃＡｂ轻、重链可变区基因的克隆及其在Ｅ．ｃｏｌｉ中表达的研究ＴｈｅｃｌｏｎｉｎｇａｎｄｅｘｐｒｅｓｉｏｎｉｎＥ．ｃｏｌｉｏｆＶＨ／ＶＬｇｅｎｅｏｆａｎｔｉ┐ｈｕｍａｎＣ１┐ＩＮＨＭｃＡｂ高宁朱锡华（第三军医大学基础部免疫学教研室）...     

乳酸脱氢酶同工酶1试剂盒的研制及探讨

乳酶脱氢酶（ＬＤＨ）同工酶系指催化同一反应（乳酸丙酮酸）而结构不同的一组酶类。其广泛分布于全身各组织，而ＬＤＨ１绝大部分分布于心肌细胞中［１］，所以当心肌细胞发生病变或损伤时，ＬＤＨ１急剧升高，因此测定ＬＤＨ１对诊断心脏疾病具有较高的灵敏性。国内外测定ＬＤＨ１的方法很多，如：电泳法［２］、免疫化学法、ＥＬＩＳＡ法［３］、单克隆法及化学法［４］等。国内常用的电泳法其过程较长而且繁琐，我们用化学抑制剂及生化分析仪对ＬＤＨ１进行测定并就此方法的科学性、实用性进行了探讨。材料和方法材料（ｌ）化学法（供全…     

EHF病毒在人肾细胞融合中的结构蛋白分子定位分析和人胚？…

用辣根过氧化物酶标记ＭｃＡｂＦ（ａｂ′）２，ＭｃＡｂＬＶ４８Ａ，ＭｃＡｂ３Ｄ３８和ＭｃＡｂＡ３５，分别对２７例ＥＨＦ患者尿液中融合细胞（ＦＣ）进行免疫酶染色，结果ＭｃＡｂＦ（ａｂ′）２检出率为２７／２７（１００％）；ＭｃＡｂＬＶ４８Ａ为１９／２７（７０．３７％），ＭｃＡｂ３Ｄ８为２０／２７（７４．０７％）；ＭｃＡｂＡ３５为２／２７（７．４１％），人胚肾细胞感染ＥＨＦ病毒后，在偏酸性（ｐＨ６．０）条     

HCV核心抗原C33肽单克隆抗体的研制与初步鉴定

用ＨＣＶ核心抗原（Ｃ３３肽）与鼠血清白蛋白交联后免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，用杂交瘤技术获得有实用价值的二株ＭｃＡｂ。此二株ＭｃＡｂ除与免疫抗原有较强的抗原－抗体反应外，与ＨＣＶ核心抗原ＣＰ１０也有很好的反应；但与ＨＣＶＮＳ３、ＶＳ５及核心区ＣＰ９抗原无反应性。在竞争ＥＬＩＳＡ中对抗ＨＣＶ－ＩｇＧ阳性血清有较好的抑制作用。     

单克隆抗体F（ab‘）2片段2种纯化方法的建立及比较

目的：建立纯化（ｍＡｂ）Ｆ（ａｂ‘）２片段的有效方法。方法：在ｐＨ５．５环境下，用ＤＴＴ激活木瓜酶，在没有ＤＴＴ存在下消化抗人肝癌ｍＡｂ ＨＡｂ１８ ＩｇＧ１，３７℃，反应８ｈ，然后分别用Ｓｅｐｈａｃｒｙｌ Ｓ－２００（１ｃｍ×６５ｃｍ）凝胶过滤柱和ＤＥＡＥ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ－ＦＦ（２ｃｍ×１８ｃｍ）阴离子交换柱纯化。结果：经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ（１００ｇ／Ｌ）电泳测定，２种方法纯化的Ｆ（ａｂ’）２     

人Fas抗原死亡表位分析

目的：分析确定人Ｆａｓ（Ｈ－Ｆａｓ）抗原具有死亡效应的表位区域。方法：采用可及性方案、可塑性方案,结合抗原性方案,二级结构方案预测Ｈ－Ｆａｓ抗原Ｂ细胞表位,Ｆｍｏｃ固相合成法合成部分预测表位肽段并鉴定后,经固相ＥＬＩＳＡ确定是与具有导细胞凋亡（ＰＣＤ）的抗人ＦａｓｍＡｂ２Ａｌ、ＤＸ２、ＣＨ－１１反应,结果：Ｈ－Ｆａｓ捩的胞外区的Ｂ细胞表位可能位于Ｎ－末端氨基酸（ＡＡ）残基５１－７８．１０２－１１０     

酶联免疫吸附试验HBsAg后带现象的解决方法

在血清免疫学检验中 ,抗原抗体需有一定的比例才出现可见的反应 ,如果比例不适则发生抑制反应的现象 (抑制带 )。抗体过剩称抑制带为前带 ,抗原过剩则称后带 ［１］。现在酶联免疫吸附试验检测ＨＢｓＡｇ 的方法已广泛应用于临床 ,特异性、敏感性均很好 ,且方法更趋向快速简便 ,但也带来某些弊端 ,即出现高滴度ＨＢｓＡｇ标本表现假阴性结果 ,即后带现象［２］现探讨解决方法。１材料与方法１．１材料乙型肝炎Ｅ抗原（ＨＢｅＡｇ）阳性伴乙型肝炎核心抗体（抗—ＨＢｃ）阳性血清标本２７８份 ,乙型肝炎Ｅ抗体（抗—ＨＢｅ）阳性血清标本１９…     

费县乙型肝炎感染标志的血清学调查

我们于１９９８年３月对费县正常人群进行了ＨＢｓＡｇ、ＨＢｓＡｂ和ＨＢｃＡｂ三项血清学调查，结果如下。１　材料和方法１．１　标本来源及研究方法　用整群系统抽样方法随机抽取８２１人进行体格检查，询问有关病史，剔除乙肝疫苗接种者，并填写调查表，同时采静脉血分离血清置－２０℃下保存待检。１．２　检测方法与判定　应用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）检测ＨＢｓＡｇ、ＨＢｓＡｂ和ＨＢｃＡｂ，试剂盒由上海科华生物技术有限公司生产，结果用９６０酶标仪检测，三项指标中有一项阳性即判定为ＨＢＶ感染。２　结果见表１、表…     

分泌抗丙型肝炎病毒NS5蛋白单克隆抗体杂交瘤细胞株的建？…

目的 建立能稳定分泌抗丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）ＮＳ５重组蛋白单克隆抗体（ＭｃＡｂ）,并对其生物学活性进行实验室鉴定。方法 用重组ＨＣＶ ＮＳ５区蛋白为抗原免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠,取其脾细胞与骨髓瘤细胞ＳＰ２／０进行融合,经有限稀释克隆３次后制备分泌ＭｃＡｂ的杂交瘤细胞株,并用酶免疫（ＥＩＡ）法对其分泌抗体进行初步鉴定。结果 融合后的阳性克隆中筛选出６株能稳定分泌ＭｃＡｂ的杂交瘤细胞株,命名为２Ｃ８,２     

乳酸脱氢酶同工酶C4与男性不育的关系

用自制的抗人乳酸脱氢酶同工酶Ｃ４（ＬＤＨ－Ｃ４）单克隆抗体（ＭｃＡｂ），以免疫荧光，ＢＡ－ＥＬＩＳＡ及聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＰＡＧＥ）等方法，测定了１１０例正常及各种不育症患者精子及精浆中ＬＤＨ－Ｃ４的含量。结果表明：不明原因性不育症，少精症及无精症患者精液中ＬＤＨ－Ｃ４的含量明显低于正常对照组，与正常组比较Ｐ值均〈０．００１，有极显著性差异；免疫荧光还发现不育症组伴有各种畸形精子。ＬＤＨ－Ｃ４含…     

抗HCV NS3抗原单克隆抗体的研制与初步鉴

目的：为研制抗丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）ＮＳ３抗原单克隆抗体,用于检测丙肝患者血清中的ＨＣＶＮＳ３抗原。方法：用基因工程表达的ＨＣＶ非结构区ＮＳ３蛋白与鼠血清白蛋白交联后,免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠,用杂交瘤技术获得能分泌单克隆抗体（ＭｃＡｂ）的细胞株。结果：获得有实用价值的两株ＭｃＡｂ。两株ＭｃＡｂ与免疫抗原有较强的抗原－抗体反应,与ＨＣＶＮＳ４、ＮＳ５及核心区Ｃ３３肽、ＣＰ９、ＣＰ１０抗原无反应性,在竞争ＥＬＩＳＡ中,对ＨＣＶ－ＩｇＧ阳性血清有较好的抑制作用。结论：用基因工程表达的ＨＣＶ非结构区ＮＳ３蛋白,能够制备出有实用价值的单克隆抗体。     

Effects of EDRF on the Vasoconstrictor Action of NE in Rat Aorta

ＥｆｆｅｃｔｓｏｆＥＤＲＦｏｎｔｈｅＶａｓｏｃｏｎｓｔｒｉｃｔｏｒＡｃｔｉｏｎｏｆＮＥｉｎＲａｔＡｏｒｔａ［吴士渭，周明正，朱俭．中国药理学通报，１９９７；１３（３）：２３８］ＡｂｓｔｒａｃｔＯｂｊｅｃｔｉｖｅＴｈｅｉｎｆｌｕｅｎｃｅｏｆＥＤＲＦｏｎ...     

代谢性酸中毒犬脑脊液［HCO－_3］与Pco_2的关系

作者旨在探讨代谢性酸中毒时脑脊液（ＣＳＦ）［ＨＣＯ－３］与ＰＣＯ２的相互关系。两组代谢性酸中毒模型均由静脉内输入０．２ｍｏｌ／ＬＨＣＩ产生，［ＨＣＯ－３］ａ１ｈ内下降到（１２２）ｍｍｏｌ／Ｌ。实验６ｈ时ＣＳＦ［ＨＣＯ－３］：１组（正常碳酸血性代酸）下降了１．６ｍｍｏｌ／Ｌ；组（低碳酸血性代酸）下降了７．０ｍｍｏｌ／Ｌ．ＣＳＦ［ＨＣＯ－３］与ＣＳＦＰｃｏ２，显著正相关（ｒ＝０．８３４，Ｐ＜０．０ｌ）．结果说明代谢性酸中毒时ＣＳＦ［ＨＣＯ－３］并不受［ＨＣＯ－３］ａ的明显影响，主要取决于ＣＳＦＰｃｏ２的变化，其调节机制与脉络丛上皮细胞内ＣＯ２的水化作用和ＣＡ活性有关。     

抗CD4单克隆抗体可变区基因克隆及测序

目的：获取抗ＣＤ４单克隆抗体（ＭｃＡｂ）可变区基因，为构建抗ＣＤ４嵌合抗体打下基础。方法 从分泌抗人ＣＤ４ ＭｃＡｂ的杂交瘤细胞系中提取总ＲＮＡ，用家族特异性引物进行逆转录多聚酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ），分别扩增出重链可变区（ＶＨ）基因及轻链可变区（ＶＬ）基因。将ＰＣＲ产物克隆至ｐＧＥＭ－Ｔ载体，然后转化ＪＭ１０９细菌。并用全自动 ＤＮＡ序列分析仪对ＶＨ及ＶＬ基因序列进行测定。结果：ＶＨ基因为３５１     

含CpG寡聚脱氧核苷酸对肿瘤抗原肽P815AB的免疫佐剂效应研究

目的 以肿瘤抗原Ｐ８１５ＡＢ抗原肽为模式抗原,研究ＣｐＧ寡聚脱氧核苷酸（ＣｐＧ ＯＤＮ）对该肿瘤抗原表位肽的免疫佐剂效应。方法 用［＾３Ｈ］－ＴｄＲ掺入法研究ＣｐＧ ＯＤＮ体外刺激小鼠脾细胞增殖效应,用ＥＬＩＳＰＯＴ和［＾３Ｈ］－ＴｄＲ释放法检测不同构成形式的疫苗在体诱发特异性ＣＴＬ应答的效应。结果 ＯＤＮ１８２６在体外可刺激小鼠脾细胞显著增殖,经４次免疫,在“肽＋ＯＤＮ１８２６＋ＩＦＡ”组中,４