宫颈癌细胞对以低密底脂蛋白为载体的阿克拉霉素复合物摄取比较的研究

采用保温交换法制备阿克拉霉低密度脂蛋白复合物，荧光光度法测定细胞内ＡＣＭ－Ａ含量，研究宫颈癌Ｈｅｌａ细胞对ＡＣＭ－Ａ－ＬＤＬ复合物及了ＡＣＭ－Ａ的摄取、细胞对复合物的摄取与ＬＤＬ受体活性的关系及该复合物对Ｈｅｌａ细胞ＤＮＡ及ＲＮＡ合成的抑制作用。     

肝癌H22细胞摄取LDL—ACM复合物的实验研究

为探讨低密度脂蛋白（ＬＤＬ）介导的肿瘤靶向治疗作用,我们用温育交换法将阿克拉霉素（ＡＣＭ）掺入ＬＤＬ制成低密度脂蛋白－阿克拉霉素（ＬＤＬ－ＡＣＭ）复合物,观察小鼠肝癌Ｈ２２细胞及正常肝细胞对ＡＣＭ和ＬＤＬ－ＡＣＭ复合物的摄取量及影响因素,现报告如下。...     

C－sis、C－myc癌基因反义寡脱氧核苷酸抑制动脉平滑肌细胞增殖

用合成Ｃ－ｓｉｓ、Ｃ－ｍｙｃ癌基因反义寡脱氧核苷酸（ＡＯＤＮ）与兔动脉平滑肌细胞（ＡＳＭＣｓ）共同培养，旨在通过ＡＯＤＮ对癌基因的封闭，动态观察ＡＯＤＮ对ＡＳＭＣｓ增殖的影响，探讨ＡＯＤＮ对动脉粥样硬化（ＡＳ）尤其是冠脉成形术后再狭窄（ＲＡＣＡ）的防治作用。结果表明：①Ｃ－ｓｉｓＡＯＤＮ、Ｃ－ｍｙｃＡＯＤＮ具有明显抑制ＡＳＭＣｓ增殖作用，其抑制作用随浓度增加而加强；②Ｃ－ｓｉｓＡＯＤＮ＋Ｃ－ｍｙｃＡＯＤＮ具有协同抑制ＡＳＭＣｓ增殖作用；③Ｃ－ｓｉｓＡＯＤＮ、Ｃ－ｍｙｃＡＯＤＮ明显抑制ＤＮＡ合成，二者联合应用，具有加强抑制ＤＮＡ合成作用。研究结果提示：Ｃ－ｓｉｓ、Ｃ－ｍｙｃ癌基因ＡＯＤＮ抑制ＡＳＭＣｓ增殖，尤其是二者联合应用，有可能为ＡＳ，特别是ＲＡＣＡ防治提供一个新的途径。     

对肺动脉平滑肌细胞趋化反应和DNA合成的研究

探讨肺血管平滑肌细胞（ＰＶＳＭＣ）迁移在缺氧性肺血管结构重组中的作用以及缺氧本身对ＰＶＳＭＣ增殖和迁移的影响。方法利用细胞趋化研究方法和３Ｈ－胸腺嘧啶掺入法研究了血小板衍生生长因子（ＰＤＧＦ）对培养的新生小牛肺动脉平滑肌细胞（ＰＡＳＭＣ）趋化反应和ＤＮＡ合成的作用，以及缺氧和心钠素（ＡＮＰ）对ＰＤＧＦ这种作用的影响。结果表明缺氧可促进ＰＤＧＦ诱导的ＰＡＳＭＣ的趋化反应和ＤＮＡ合成，ＡＮＰ可抑制ＰＡＳＭＣ对ＰＤＧＦ的趋化作用，并抑制ＰＡＳＭＣ的ＤＮＡ合成，鸟苷酸环化酶抑制剂美蓝（ＭＢ）可抑制ＡＮＰ的这种抑制作用。结论研究提示ＰＤＧＦ、ＡＮＰ和缺氧本身对ＰＡＳＭＣ的增殖和迁移有重要作用，这可能对缺氧性肺血管结构重组具有重要意义     

钙离子拮抗剂等对成纤维细胞增殖的影响

目的研究硝苯啶（Ｎｉｆ）、脑益嗪（Ｃｉｎ）、Ａ２３１８７和氯丙嗪（ＣＰＺ）对３Ｔ６成纤维细胞增殖的影响．方法以含１０％小牛血清的ＲＰＭＩ１６４０培养基培育３Ｔ６细胞，分别加入３种浓度的Ｃｉｎ，Ｎｉｆ，Ａ２３１８７和ＣＰＺ，处理２４ｈ后用图像分析仪和流式细胞仪检测３Ｔ６细胞的ＤＮＡ，ＲＮＡ和总蛋白以及细胞周期．结果Ｎｉｆ剂量依赖性地延迟３Ｔ６细胞Ｇ２期向Ｍ期的进展；Ｃｉｎ，Ａ２３１８７和ＣＰＺ分别呈剂量依赖性地抑制３Ｔ６细胞Ｇ１期向Ｓ期的进程；Ｎｉｆ，Ａ２３１８７和ＣＰＺ促进细胞的ＲＮＡ合成，Ｃｉｎ抑制细胞ＤＮＡ及ＲＮＡ的合成；Ａ２３１８７和ＣＰＺ（１０μｇ）抑制细胞蛋白质的合成，Ｃｉｎ（３０μｇ）及ＣＰＺ（５μｇ）促进细胞蛋白质合成．结论Ｎｉｆ等通过对细胞周期进程的延迟及引起细胞不平衡生长，抑制３Ｔ６成纤维细胞的增殖．     

同种LAK细胞、5－FU等抗癌剂腹腔注入治疗原发性肝癌腹水的临床观察

本文采用同种ＬＡＫ细胞联合ＩＬ－２腹腔注入（ＩＰ），５－ＦＵ联合ＭＭＣ、ＣＢＤＣＡ腹腔注入，同种ＬＡＫ细胞联合ＩＬ－２静脉输入以及放腹水、利尿、补充白蛋白等方法，分别治疗晚期ＰＨＣ腹水患者共４０例，结果表明，同种ＬＡＫ细胞联合ＩＬ－２经ＩＰ（１０例），５－ＦＵ联合ＭＭＣ、ＣＢＤＣＡ经ＩＰ（１０例），均使４例（４０％）腹水减少或消失、症状明显改善；同种ＬＡＫ细胞联合ＩＬ－２全身治疗（１０例），以及放腹水、利尿、补充白蛋白等一般治疗（１０例），均仅使１例（１０％）腹水减少，疗效欠佳；结果提示，腹腔内ＬＡＫ联合ＩＬ－２治疗及腹腔内５－ＦＵ联合ＭＭＣ、ＣＢＤＣＡ化疗，是值得推荐的治疗晚期肝癌腹水的手段之一。     

精氨酸加压素促血管平滑肌细胞增殖效应及其对IL－6分泌的影响

我们以培养的ＳＤ大鼠血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣｓ）为模型，动态观察了精氨酸加压素（ＡＶＰ）对ＶＳＭＣｓ增殖作用和白细胞介素－６（ＩＬ－６）分泌功能的影响，亦对ＩＬ－６与ＶＳＭＣｓ增殖效应的关系进行了研究，旨在探讨ＡＶＰ和ＩＬ－６在高血压发病中的意义。结果表明：（１）ＡＶＰ对培养大鼠ＶＳＭＣｓ具有明显促增殖效应，随剂量增加和时间延长其作用加强；（２）ＶＳＭＣｓ可自身分泌ＩＬ－６，ＡＶＰ对其分泌有明显的抑制作用，且作用时间愈长，抑制作用愈显著；（３）ＩＬ－６作用于ＶＳＭＣｓ可明显促进其ＤＮＡ合成。上述结果提示，ＡＶＰ与ＩＬ－６可能均参与了高血压的发病。     

人胰岛素样生长因子Ⅱ反义RNA对肝癌细胞恶性表型的抑制作用

研究人胰岛素样生长因子Ⅱ（ＩＧＦ－Ⅱ）反义ＲＮＡ对肝癌细胞株ＳＭＭＣ－７７２１的抑制效应。方法人ＩＧＦ－ⅡｃＤＮＡ０．１ｋｂ反向插人真核细胞表达载体ｐｃＮＡ３,获得ＩＧＦ－Ⅱ反义ＲＮＡ表达载体ｐＩＧＦ－ⅡＡＳ,将其导人人肝癌细胞株ＳＭＭＣ-７７２１,观察软琼脂培养集落形成的能力。流式细胞仪（ＦＣＭ）测定ｐＩＧＦ－ⅡＡｓ表达ＩＧＦ－Ⅱ反义ＲＮＡ对ＳＭＭＣ-７７２１细胞生长的影响。结果转导人ｐＩＧＦ－ⅡＡｓ的ＳＭＭＣ－７７２１细胞,不能在软琼脂上形成集落,ＦＣＭＭ实导人ＰＩＧＦ－ⅡＡｓ细胞Ｓ期增多,而对照组ＳＭＭＣ－７７２１细胞和带ＤＣＤＮＡ３空载体的ＳＭＭＣ－７７２１细胞则无明显变化．结论ｐＩＧＦ-ⅡＡＳ＆义ＲＮＡ体外可抑制肝癌细胞株ＳＭＭＣ－７７２１的致瘤性。     

合成多肽体外诱导乙肝病毒抗原特异性T杀伤细胞实验研究

目的及方法 为探讨ＨＢＶ抗原特异性细胞毒Ｔ细胞（ＨＢＶ－ＣＴＬ），根据ＨＢｃＡｇ的ＨＬＡ分子结合关键序列合成抗原多肽２段，分别与转铁蛋白（Ｔｆ），抗ＣＤ单克隆抗体（ＣＤ３ｍＡｂ）和ＩＬ－２联合体外诱导ＨＢＶ－ＣＴＬ，应用＾３Ｈ－ＴｄＲ释放法分别测定ＨＢＶ－ＣＴＬ对ＨＢＶＤＮＡ转染的ＨｅｐＧ２．２．１５细胞特异性活性及无ＨＢＶＤＮＡ转染的ＨｅＰＧ２细胞的非特异性杀伤率。结果 ＨＢＶ－ＣＴＬ对ＨＢＶＤ     

90例85岁以上老人血脂,脂蛋白和载脂蛋白的研究

对９０例８５岁以上高龄老人的血脂、脂蛋白和载脂蛋白进行测定，并与陈旧性心肌梗塞（ＯＭＩ）组对比。结果显示：与ＯＭＩ组比较，高龄老人血清ＴＣ、ＬＤＬ－Ｃ、ＡｐｏＡⅠ和ＡｐｏＢ_（１００）的明显低，而ＨＤＬ－Ｃ／ＴＣ、ＨＤＬ－Ｃ／ＬＤＬ－Ｃ和ＡｐｏＡⅠ／ＡｐｏＢ_（１００）明显高；ＴＧ、ＨＤＬ－Ｃ和ＶＬＤＬ－Ｃ在两组之间无统计学差异。单因素相关分析显示，ＨＤＬ－Ｃ／ＴＣ，ＨＤＬ－Ｃ／ＬＤＬ－Ｃ和ＡｐｏＡⅠ／ＡｐｏＢ_（１００）与长寿呈正相关，与ＯＭＩ呈负相关；而ＴＣ、ＬＤＬ－Ｃ、ＡｐｏＡⅠ和ＡｐｏＢ_（１００）则与长寿呈负相关，与ＯＭＩ呈正相关；ＨＤＬ－Ｃ、ＴＧ和ＶＬＤＬ－Ｃ与长寿和ＯＭＩ几乎无相关关系。对各检测指标进行多元逐步回归分析，ＡｐｏＢ_（１００）对长寿作用最大，其次为ＡｐｏＡⅠ／ＡｐｏＢ_（１００）和ＨＤＬ－Ｃ．因此认为血清ＡＰｏＢ_（１００）水平的低值、ＨＤＬ－Ｃ和ＡｐｏＡⅠ／ＡｐｏＢ_（１００）的高值，是高龄老人血脂、脂蛋白和载脂蛋白的特点，亦是长寿的指标。     

自身免疫性肝炎特异性靶抗原的表达及免疫学鉴定

目的 克隆、表达可溶性肝抗原（ＳＬＡ）及细胞色素Ｐ４５０ ２Ｄ６（ＣＹＰ ２Ｄ６）。方法 采用 ＲＴ—ＰＣＲ技术从人肝组织ｐｏｌｙ（Ａ）＋ＲＮＡ中扩增ＳＬＡ及 ＣＹＰ ２Ｄ６ ｃＤＮＡ，经ＢａｍＨ　Ⅰ、Ｈｉｎｄ Ⅲ双酶切定向插入载体ＰＱＥ－３０并在大肠杆菌Ｍ１５中表达。对表达载体ＰＱＥ—３０／ＳＬＡ、ＰＱＥ—３０／ＣＹＰ ２Ｄ６中的目的基因进行序列分析，表达产物用 ＳＤＳ—ＰＡＧＥ、免疫印迹方法鉴定。结果 表达产物经 ＳＤＳ－ＰＡＣＥ和免疫印迹分析后在分子量 ４．７ × １０４和５．０ × １０４处各有一条明显的蛋白带，并分别能特异性与抗ＳＬＡ、ＣＹＰ２Ｄ６阳性血清反应。结论 表达ＳＬＡ、ＣＹＰ２Ｄ６为自身免疫性肝炎的诊断及其发病机制研究提供物质基础。     

细胞凋亡与骨髓增生异常综合征疾病演变的关系

目的探讨骨髓增生异常综合征（ＭＤＳ）骨髓细胞凋亡特征及其病理学意义。方法用原位末端脱氧核糖核苷酸转移酶介导的ｄＵＴＰ缺口末端标记（ＴＵＮＥＬ），ＤＮＡ梯子和体外培养等方法对３８例ＭＤＳ患者骨髓单个核细胞（ＢＭＭＣ）凋亡进行研究。结果ＭＤＳ患者ＢＭＭＣ的ＴＵＮＥＬ凋亡细胞阳性指数（ＰＩ）为２０．１９％±１１．０７％，显著高于正常人、ＭＤＳ转化的白血病、急性髓细胞白血病（ＡＭＬ）及缺铁性贫血（ＩＤＡ）组，（Ｐ＜０．００１和Ｐ＜０．０１）。ＴＵＮＥＬ和ＣＤ４１碱性磷酸酶抗碱性磷酸酶免疫酶标法（ＡＰＡＡＰ）双标记证明ＭＤＳ骨髓病态小巨核细胞发生了凋亡。动态观察１０例ＭＤＳ患者，转为白血病后凋亡细胞ＰＩ值显著下降，尚未转为白血病患者随病情恶化凋亡呈下降趋势。７例ＭＤＳ患者ＢＭＭＣ体外培养后，晚期ＰＩ（ＬＰＩ）显著增高，３例出现ＤＮＡ梯子，ＡＭＬ和ＩＤＡ组ＬＰＩ未见明显升高，未出现ＤＮＡ梯子。结论ＭＤＳ骨髓细胞凋亡过度与演变和转为白血病有关。原位检测细胞凋亡可作为监测ＭＤＳ预后指标     

脂蛋白、钙拮抗剂对大鼠贮脂细胞的影响

目的观察脂蛋白、钙拮抗剂对大鼠贮脂细胞增殖、透明质酸及胶原合成的影响．方法通过ＭＴＴ法,透明质酸放射免疫分析法及３Ｈ脯氨酸掺入法测定了低密度脂蛋白（ｌｏｗｄｅｎｓｉｔｙｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ,ＬＤＬ）、钙拮抗剂尼卡地平（Ｎｉｃａｒｄｉｐｉｎｅ,Ｎｉｃ）和维拉帕米（Ｖｅｒａｐａｍｉｌ,Ｖｅｒ）及其联合应用对大鼠贮脂细胞（ｆａｔｓｔｏｒｉｎｇｃｅｌ,Ｆｓｃ）增殖、透明质酸（ｈｙａｌｕｒｏｎｉｃ,ＨＡ）及胶原合成的影响．结果ＬＤＬ能促进ＦＳＣ增殖、ＨＡ及胶原合成,同时Ｎｉｃ及Ｖｅｒ对ＬＤＬ刺激引起的ＦＳＣ增殖、胶原合成有明显的抑制作用,但对ＨＡ的抑制作用不明显．结论ＬＤＬ参与ＦＳＣ的增殖及细胞外基质的合成,Ｎｉｃ及Ｖｅｒ则有对抗ＬＤＬ的作用     

低密度脂蛋白对大鼠肝贮脂细胞的调控作用

目的研究低密底脂蛋白（ＬＤＬ）对大鼠肝贮脂细胞（ＦＳＣ）的调控作用。方法采用放射配体结合法检测肝ＦＳＣ是否存在ＬＤＬ受体。通过噻唑蓝（ＭＴＴ）法、透明质酸（ＨＡ）放射免疫分析法及３Ｈ－脯氨酸掺入法测定ＬＤＬ对ＦＳＣ增殖、ＨＡ及胶原合成的影响。结果大鼠肝脏ＦＳＣ上存在特异性的、高度亲和性的及可饱和性的ＬＤＬ结合位点：ＬＤＬ能促进ＦＳＣ增殖、ＨＡ及胶原合成。结论ＬＤＬ参与ＦＳＣ增殖、转化和基质合成，并可能通过受体介导影响ＦＳＣ功能。     

慢性髓细胞性白血病病程进展中调节蛋白c—Myc,Bcl—2ey Fas的表？…

目的 了解细胞程序死亡（ＰＣＤ）与慢性细胞性白血病（ＣＭＬ）急变的关系。方法 采用流式细胞术，测定２１例ＣＭＬ及１２例正常骨髓标本单个核细胞的髓系免疫表型及三种与ＰＣＤ有关的调节蛋白－ｃ－Ｍｙｃ、Ｂｃｌ－２、Ｆａｓ的表达。结果 与未治慢性期比较，加速／急变期膜抗原最显著的变化是ＨＬＡ－ＤＲ％的提高，ＣＤ１５％ＨＬＡ－ＤＲ％比值倒置。正常骨髓及ＣＭＬ各期ＨＬＡ－ＤＲ及ＨＬＡ＿ＤＲ细胞几乎均表达ｃ－ｍ     

氧化苦参碱抗丙型肝炎病毒的体外实验研究

目的观察氧化苦参碱体外抗丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）的活性。方法借助脂质体将重组ＨＣＶ基因（ｐＢＫ－ＨＣＶ）转染ＳＭＭＣ－７７２１细胞,并以此为模型,通过ｂＤＮＡ信号扩增法定量检测细胞内ＨＣＶ ＲＮＡ的变化,观察氧化苦参碱对ＨＣＶ ＲＮＡ的抑制作用; ＭＴＴ比色法观察药物的细胞毒性。结果建立了重组ＨＣＶ基因转染的稳定表达细胞模型,可作为药物研究的工具。氧化苦参碱浓度为１００— １０００μｇ／ｍｌ时能明显降低细胞内ＨＣＶＲＮＡ水平,有效浓度范围内无明显细胞毒性作用。结论氧化苦参碱能够在细胞水平有效地抑制ＨＣＶ ＲＮＡ,具有直接抗ＨＣＶ作用。     

CD3AK细胞联合IL—2脂质体抗鼠肝转移瘤的实验研究

目的 观察ＩＬ－２脂质体对ＣＤ３ＡＫ体内抗肿瘤的增强作用。方法：利用Ｇ５７ＢＬ／６小鼠脾细胞与抗ＣＤ３单克隆抗体和白细胞介素－－－２（ＩＬ－２）共同培养制备ＣＤ３ＡＫ细胞（ＣＤ３ＭｃＡｂ ａｃｔｉｖａｔｅｃｄ ｋｉｌｌｅｒ ｃｅｌｌｓ）；从脾内注射Ｂ１６黑色素瘤细胞制备鼠肝转移瘤模型：用ＰＣ和ＣＨ合成ＩＬ－２复合脂质体；ＣＤ３ＡＫ细胞联合ＩＬ－２脂质体用于体内抗Ｂ１６黑色素瘤肝转移。结果：共同培养     

高血压病人白细胞流变性与细胞粘附分子表达的变化

目的探讨白细胞流变性和细胞粘附分子（ＣＡＭＳ）表达与高血压发生及病情严重程度的关系。方法采用红细胞变形能力测定仪、体外血栓血小板粘附两用仪和酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ），检测１４９例高血压病人和１１０例健康人外周血白细胞变形能力（ＬＤ）、白细胞粘附功能（ＬＡＦ）、白细胞ＣＤ１８表达及血清可溶性细胞间粘附分子－１（ｓＩＣＡＭ－１）浓度的变化。结果高血压病人白细胞滤过指数（ＬＦＩ）、白细胞粘附率（ＬＡＲ）、白细胞ＣＤ１８表达和ｓＩＣＡＭ－１浓度均明显增高，与对照组比较差异有极显著性（Ｐ＜０．００１），三期病人各指标之间比较差异也具有极显著性（Ｐ＜０．００１），且以第３期病人各指标增高最明显。高血压病人ＬＡＲ与ＬＦＩ呈正相关（ｒ＝０．５７９，Ｐ＜０．００１）；ＬＡＲ和ＬＦＩ与白细胞ＣＤ１８表达和ｓＩＣＡＭ－１浓度呈正相关（ｒ＝０．６６２～０．８０４，Ｐ＜０．００１）。结论ＬＤ降低、ＬＡＦ及白细胞ＣＤ１８表达和ｓＩＣＡＭ－１浓度增高参与高血压的发生，且与病情严重程度有密切关系。     

钙通道阻滞剂对环孢素A所致内皮细胞损伤的保护作用

目的：研究钙通道阻滞剂异搏定对环孢素Ａ（ＣｓＡ）所致内皮细胞（ＥＣ）所致内皮细胞（ＥＣ）损伤的保护作用。 方法：在培养的ＥＣ中加入ＣｓＡ１００μｇ／Ｌ的同时加入异搏定１００μｇ／Ｌ作用２４ｈ，以直接计数粘附细胞数观察细胞分离；光镜、电镜观察细胞形态；Ｈ＾３－ＴｄＲ掺入法及流式细胞仪观察ＤＮＡ抑制；Ｆｕｒａ－２ＡＭ荧光负载法检测细胞内游离钙（［Ｃａ＾２＋］ｉ）；放射免疫法检测细胞上清中内皮素（ＥＴ）     

转导人TIMP—2基因抑制癌浸润转移的实验研究

目的 外源性人ＴＩＭＰ－２基因在人ＬＡＫ细胞中的表达及其对胃癌浸润转移的抑制作用。方法 通过磷酸钙－ＤＮＡ共沉淀的方法将ＴＩＭＰ－２重组真核表达质粒ｐＬ（ＴＩＭＰ－２）ＳＮ转染兼性包装细胞ＰＡ３１７包装形成病毒颗粒。用病毒液感染人ＬＡＫ细胞,再以Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交、ＳＤＳ－ＰＡＧＥ及反向酶谱试验进行表达及活性分析。用转基因ＬＡＫ细胞（ＬＡＫ／ＬＴ）２×１０＾６给胃癌转移模型腹腔内注射。结果 ＴＩ