苦参碱对豚鼠心肌细胞钾电流的抑制作用(英文)

目的研究苦参碱对豚鼠心肌细胞动作电位时程和钾电流的影响,探讨其抗心律失常作用的可能机制。方法应用全细胞膜片钳技术记录心室肌细胞的动作电位时程和钾电流。结果在频率0.1Hz时,苦参碱100μmol.L-1以非频率依赖方式延长动作电位复极90%的时程达40%,在-120mV抑制内向整流钾电流(IK1)接近47%,减少快激活延迟整流钾电流的尾电流达50%,对慢激活延迟整流钾电流的尾电流无影响。结论苦参碱抗心律失常的机制可能与其抑制多种钾电流和延长动作电位时程有关。     

苦参碱、小檗胺与胺碘酮、RP58866抗心律失常作用的比较

目的阐明苦参碱和小檗胺抗心律失常作用弱于胺碘酮和RP58866的分子机制。方法采用冠脉结扎、电刺激和乌头碱诱导的心律失常模型观察药物的抗心律失常作用，采用全细胞膜片钳技术测定单个心室肌细胞的I_K1，I_Kr，I_Ks和 I_to。结果苦参碱和小檗胺对冠脉结扎、乌头碱诱发的大鼠心律失常有明显对抗作用，对家兔电刺激致颤阈（VFT）有明显提高作用，但与胺碘酮和RP58866相比，抗心律失常作用明显低于前者。电生理结果显示：苦参碱和小檗胺对家兔I_K1,I_Kr,I_Ks和犬I_to有抑制作用，但较胺碘酮和RP58866作用弱。结论苦参碱和小檗胺的抗心律失常作用及对I_K1,I_Kr,I_Ks和I_to的抑制作用弱于胺碘酮和RP58866。     

RP58866对哺乳动物心室肌细胞跨膜钾电流的作用(英文)

目的:研究RP58866对于豚鼠或犬分离心室肌细胞I_K,I_(to),和I_(Kl)的影响。方法:采用全细胞膜片箝技术。结果:在-100 mV时,RP58866以浓度依赖方式明显减少了豚鼠心室肌细胞I_(kl),其IC_(50)为(3.4±0.8)μmol·L~(-1)(n=6)。在犬心室肌细胞,RP58866可明显抑制I_(to),其IC_(50)为(2.3±0.5)μmol·L~(-1)。RP58866 100μmol·L~(-1)阻断豚鼠的心室肌细胞I_K,在 40mv时使I_(Kstep)减少(58±13)％,其IC_(50)为(7.5±0.8)μmol·L~(-1),I_(Ktail)减少(86±17)％,其IC_(50)为(3.5±0.9)μmol·L~(-1)。尾电流分析表明,RP58866对I_(Kr)和I_(Ks)均有阻断作用。结论:RP58866对心肌细胞的I_(Kl)和I_(to),I_K均有抑制作用,而不是一种特殊的I_(Kl)抑制剂。     

比较奎尼丁,E-4031对大鼠和豚鼠药物诱发心律失常模型的作用

通过整体动物实验，探讨具有钾通道亚型选择性的奎尼丁和Ｅ－４０３１，与抗心律失常作用的关系．本实验选择了具有不同钾离子通道特性的动物模型．由于动物的种属差异，采取乌头碱诱发大鼠心律失常，毒毛花甙Ｇ诱发豚鼠心律失常的经典方法，观察了Ｉａ类抗心律失常药物奎尼丁和Ⅲ类药Ｅ－４０３１在这两种动物模型上的作用．实验结果表明，奎尼丁１０ｍｇ·ｋｇ－１可明显抑制大鼠的心律失常，但３０μｇ·ｋｇ－１的Ｅ－４０３１无效，而在豚鼠模型上，３μｇ·ｋｇ－１的Ｅ－４０３１即可抑制室性早搏的出现，奎尼丁３０ｍｇ·ｋｇ－１才出现抑制作用．推测两种药物的作用与它们对钾通道亚型的选择性有关     

比较奎尼丁, E-4031对大鼠和豚鼠药物诱发心律失常模型的作用

通过整体动物实验, 探讨具有钾通道亚型选择性的奎尼丁和E-4031, 与抗心律失常作用的关系. 本实验选择了具有不同钾离子通道特性的动物模型. 由于动物的种属差异， 采取乌头碱诱发大鼠心律失常,毒毛花甙G诱发豚鼠心律失常的经典方法, 观察了Ia类抗心律失常药物奎尼丁和Ⅲ类药E- 4031在这两种动物模型上的作用. 实验结果表明, 奎尼丁10 mg·kg^-1可明显抑制大鼠的心律失常, 但30 μg·kg^-1 的E-4031无效, 而在豚鼠模型上, 3 μg·kg^-1 的E-4031即可抑制室性早搏的出现, 奎尼丁30 mg·kg^-1才出现抑制作用. 推测两种药物的作用与它们对钾通道亚型的选择性有关.     

苦参碱对缺血性心室肌细胞快速延迟整流钾电流的作用

目的观察苦参碱对病理条件下(缺血、酸中毒)单个心室肌细胞快速延迟整流钾电流(rapid component of delayed rectifier potassium current,IKr)的作用,初步探讨苦参碱治疗缺血性心律失常的作用机制。方法冠状动脉左前降支结扎建立家兔心肌梗死模型,应用全细胞膜片钳技术记录酶解法分离的心肌梗死模型家兔苦参碱灌胃1mon后右心室心肌细胞IKr的变化。在pH=7·4和pH=6·5的条件下,应用全细胞膜片钳技术记录苦参碱对酶解法分离的豚鼠心室肌细胞IKr的作用。结果在正常细胞外液(pH=7·4)的条件下苦参碱(50μmol·L-1)降低IKr,在刺激电压为+60mV时,IKr电流密度由(12·15±0·70)pA/pF降低至(9·22±0·65)pA/pF(n=8,P<0·05)。在细胞外液酸化(pH=6·5)的条件下苦参碱(50μmol·L-1)仍表现抑制IKr电流的作用,在刺激电压为+60mV时,IKr电流密度由(7·05±0·41)pA/pF降低至(5·76±0·28)pA/pF(n=8,P<0·05)。家兔冠状动脉结扎1mon后,在刺激电压为+60mV时,心肌梗死组家兔心室肌细胞IKr电流密度为(1·17±0·12)pA/pF较正常组(1·70±0·11)pA/pF降低(n=12,P<0·05)。苦参碱组(8mg·kg-1·d-1)家兔心室肌细胞IKr电流密度为(0·86±0·25)pA/pF较心梗组降低(n=12,P<0·05)。结论苦参碱阻断心室肌细胞IKr,可能是其延长有效不应期,降低异位节律的发生率,治疗心律失常的机制之一。苦参碱对酸化条件及长期心肌缺血后心室肌细胞IKr仍表现出明显的抑制作用,表明其对心肌梗死后心律失常有效。     

心肌I_(K1)激动剂zacopride抗左甲状腺素致大鼠心室重构作用的研究

目的探讨心肌内向整流钾通道(I_(K1))激动剂zacopride对左甲状腺素致大鼠心室重构的抑制作用及可能的机制。方法 SD大鼠,随机分为对照组,左甲状腺素模型组,zacopride 5、15、50μg·kg~(-1)干预组,zacopride(15μg·kg~(-1))+氯喹(7.5μg·kg~(-1))组和卡托普利阳性对照组。连续给药10 d。超声测量大鼠左室舒张期内径(LVIDd)、左室收缩期内径(LVIDs)、室间隔厚度(IVS)、左室射血分数(EF)和左室短轴缩短率(FS);测心肌肥厚指数;Langendorff急性分离成年大鼠单个心室肌细胞,全细胞膜片钳技术测量各组I_(K1)电流、L-型钙通道(I_(Ca-L))电流的变化;Fluo-4激光共聚焦显微镜观察细胞形态,测胞内游离钙离子浓度([Ca~(2+)]_i)。结果与对照组比,左甲状腺素模型组全心和左心肥厚指数明显增加,LVIDd、LVIDs增大,IVS增厚,EF和FS明显降低(P<0.01);I_(K1)电流减小,ICa-L增加(P<0.01);心室肌细胞增宽、肥大,[Ca~(2+)]_i增高(P<0.01)。Zacopride干预后,各指标均明显改善,15μg·kg~(-1)为最适效应剂量。氯喹7.5μg·kg~(-1)作为I_(K1)通道相对特异性阻断剂,可阻断zacopride对I_(K1)通道的激动效应,明显逆转zacopride的减轻钙超载和抗心室重构作用。结论 Zacopride可能通过选择性激动心肌I_(K1),减轻细胞内钙超载而逆转左甲状腺素诱发的心室重构。     

苄基四氢巴马汀对豚鼠心室肌细胞慢激活延迟整流钾电流及其尾电流的作用(英文)

目的　研究苄基四氢巴马汀 (BTHP)的抗心律失常机理。方法　采用全细胞膜片钳技术记录心室肌细胞慢激活延迟整流钾电流 (IKs)及其尾电流(IKs ,tail)。结果　BTHP在 1～ 10 0 μmol·L- 1的范围内以浓度依赖性、电压依赖性和频率依赖性方式阻滞IKs ,tail,其IC50 为 9.3μmol·L- 1(95 %可信限 :7.8～11.8μmol·L- 1)。BTHP 30 μmol·L- 1可使IKs 及IKs,tail分别降低 (40± 6 ) %和 (39± 5 ) % (P <0 .0 1)。BTHP可以抑制IKs ,tail。该药主要使IKs ,tail的失活时间常数缩短 ,从而使IKs ,tail 失活速度增加 ,而对IKs,tail的激活动力学影响不大。结论　BTHP对IKs有明显的抑制作用。     

AMP579与腺苷对大鼠心室肌细胞Na~+/Ca~(2+)交换电流作用的比较(英文)

目的阐明AMP579与腺苷不同药理作用与临床效果的机制。方法采用全细胞膜片钳记录Na+/Ca2 +交换电流。结果AMP579对Na+/Ca2 +交换的外向和内向电流均呈浓度依赖性增强。灌流腺苷A1受体阻断剂PD116948 30μmol·L-1,A2受体阻断剂DMPX10μmol·L-1,蛋白激酶A特异阻断剂KT5720 0 .2μmol·L-1或蛋白激酶C特异阻断剂GF109203X0 .4μmol·L-1对AMP579 Na+/Ca2 +交换电流的激动作用均无影响,提示AMP579对Na+/Ca2 +交换电流具有直接的激动作用。结论AMP579对Na+/Ca2 +交换电流可能具有直接的激动作用。     

氯沙坦对大鼠肥厚心肌L-型钙电流的作用(英文)

目的 研究腹主动脉结扎诱发大鼠肥厚心肌L-型钙电流的变化以及用氯沙坦治疗对此变化的影响。方法　用结扎腹主动脉的方法诱发大鼠心肌肥厚模型。用全细胞膜片钳技术记录肥厚左心室肌细胞L-型钙电流。结果 肥厚组心肌细胞膜电容 (148±29 pF) 明显大于假手术组 (102±14 pF, P<0.01) 和氯沙坦治疗组 (118±27, P<0.01)。肥厚组ICa,L 峰值及电流密度均大于假手术组 (－835±124 pA vs －1404±417 pA 和(7.5±1.8 pA·pF-1 vs －0.5±2.2 pA·pF-1, P<0.01)。氯沙坦治疗组ICa,L 峰值 (－956±170 pF) 及电流密度 (－8.2±1.6 pA·pF-1) 均比肥厚组明显减小 (P<0.05)。肥厚组半数激活电压 (－20.6±1.0 mV)与假手术组 (－15.6±1.6 mV) 及氯沙坦治疗组 (－17.4±1.0 mV) 相比向负向移动 (P<0.01)。肥厚组激活曲线斜率 (5.7±0.4)比假手术组 (6.4±0.5) 略减小 (P<0.05)。肥厚组半数失活电压 (－27.6±1.9 mV) 比假手术组 (－31.4±2.2 mV) 略正移 (P<0.05)。三组心肌失活曲线斜率无差异。结论　氯沙坦 (30 mg·kg-1·d-1, ig) 可防止腹主动脉结扎诱发大鼠心肌细胞肥大的发生及相关的L-型钙电流的变化。     

雌二醇抑制豚鼠心室肌细胞内向整流和延迟整流钾通道电流

目的:研究雌二醇(Estradiol,Est)对心室肌细胞动作电位(AP)、内向整流钾通道电流(I_(K1))及延迟整流钾通道电流(I_K)的影响。方法:全细胞膜片箝技术。结果:EST 10μmol·L~(-1)使豚鼠心室肌细胞AP时程明显缩短,APD_(50)由给药前(474±71)ms缩短至(330±75)ms(P<0.05),Est 100μmol·L~(-1)使APD_(50)缩短至(229±67)ms(P<0.01),使APD_(90)由(587±60)ms缩短至(418±79)ms(P<0.05)。Est浓度依赖性地抑制I_K尾电流(I_K·tail),10μmol·L~(-1)浓度下,I_K·tail减少53％(P<0.05),100μmol·L~(-1)浓度下,I_K·tail减少80％(P<0.05)。10μmol·L~(-1)以上浓度Est明显抑制I_(K1),在-100mV刺激电压下,内向电流最大抑制为49％(P<0.01);在-40mV刺激电压下,外向电流最大抑制为72％(P<0.01)。同时,Est使I_(K1)翻转电位向负电位方向移位(由-70mV变为-76mV)。结论:Est对豚鼠心室肌细胞I_(K1)和I_K通道具有明显的抑制作用。     

未成年人心房肌细胞瞬间外向钾电流和内向整流钾电流的特性(英文)

目的:研究未成年人心房肌细胞瞬间外向钾电流(I_(to))和内向整流钾电流(I_(Kl))的特性。方法:膜片箝全细胞技术。结果:I_(to)是电压依赖性电流,快速激活,快速失活,被I_(to)的选择性阻断剂4-AP阻断。IC_(50)=0.64mmol·L~(-1)。4-AP1mmol·L~(-1)使I_(to)的半数激活电位增加;4-AP0.3mmol·L~(-1)使I_(to)的半数失活电位减少,对激活曲线没有明显影响并使I_(to)的恢复时间延长。I_(Kl)也表现出电压依赖的特性,其反转电位在-40mV。结论:在未成年人心房肌细胞上,I_(to)和I_(Kl)是两种重要的K~ 通道电流。4-AP0.3mmol·L~(-1)时对I_(to)的失活和失活后的恢复有明显影响,1mmol·L~(-1)时影响I_(to)的激活。     

血清素抑制大鼠心室肌细胞瞬时外向钾电流

目的:观察血清素(5-HT)对大鼠心室肌细胞瞬时外向钾电流I_(to)的影响并探讨其作用机制.方法:全细胞膜片箝技术记录I_(to).结果:I_(to)电流密度在正常心肌和肥厚心肌细胞无明显差异.在实验电压为 70mV时,5-HT浓度依赖性抑制I_(to),在正常和肥厚心肌细胞,其半数抑制浓度分别为(4O ±5)μmol/L和(38±7)μmol/L.5-HT_2受体阻断剂米胺舍林和磷脂酶C抑制剂 Compound 48/80均可逆转 5-HT抑制I_(to)的作用;蛋白激酶激动剂醋酸佛波酯显著加强5-HT的抑制作用,而蛋白激酶抑制剂白屈菜季铵碱则逆转5-HT抑制I_(to)的作用.结论:5-HT具有抑制心肌细胞I_(to)的作用.此作用是通过激动 5-HT_2受体,启动磷脂酶C信号转导途径,进一步激活蛋白激酶从而抑制心肌I_(to)。     

豚鼠心室肌细胞延迟整流钾电流快慢成分在生长发育过程中的变化

目的研究豚鼠从幼年到成年的发育过程中心室肌细胞延迟整流钾电流快(IKr)、慢成份(IKs)及动作电位的变化。方法酶解法急性分离新生、幼年及成年3个不同年龄阶段豚鼠心室肌细胞。(1)室温下采用全细胞膜片钳技术首先记录总的延迟整流钾电流IK,再加入选择性IKr阻断剂E-4031区分IKr和IKs,计算各成份尾电流密度;(2)采用打孔膜片钳技术观察动作电位在生长发育过程中的变化。结果(1)从新生、幼年到成年3个阶段的发育过程中,豚鼠心室细胞IKr和IKs的电流密度呈增长趋势,但二者的变化方式不同。IKs呈逐渐递增式发育,表现为幼年组在-30～+50 mV范围内均明显高于新生组,成年组亦明显高于幼年组;而幼年组IKr的电流密度在-10～+50 mV范围内高于新生组,但幼年与成年组无明显差别。(2)在1Hz的刺激频率下,豚鼠心室肌细胞90%复极的动作电位时程APD90随动物年龄的增长明显延长。结论 (1)豚鼠从出生、幼年到成年发育过程中心室肌细胞IKr和IKs电流密度呈不同方式增长;(2)豚鼠心室肌细胞动作电位时程出生至成年逐渐延长,提示内向电流成分在发育过程中发挥重要作用。     

抗心律失常药E-4031通过蛋白激酶C途径影响豚鼠心室肌细胞Na+/Ca2+交换

应用全细胞电压钳技术的斜坡脉冲程序,测定离体豚鼠心肌细胞准稳态电流-电压关系曲线,研究E-4031增强Na⁺/Ca²⁺交换电流的机理. 结果表明蛋白激酶C激动剂十四酰佛波乙酯（TPA）5,10和15 nmol·L^-1使膜电位+50 mV时的Ni²⁺敏感电流分别增加（116±43）%,（225±63）% 和（289±69）%. 使膜电位-100 mV时的Ni²⁺敏感电流分别增加（29±17）%,（104±21）%和（140±29）%. 蛋白激酶C拮抗剂他莫昔芬20 μmol·L^-1可完全阻断E- 4031和TPA对该电流的刺激作用. 结果提示,E-4031通过蛋白激酶C途径激动Na⁺/Ca²⁺交换.     

维司力农对培养鸡胚心室肌细胞内向整流性钾电流的作用

目的研究维司力农对培养鸡胚心室肌细胞内向整流性钾电流（Ik1）的作用。方法采用细胞贴附式膜片钳技术。结果1×10-5mol·L-1维司力农可抑制Ik1通道的稳态电导，同时使斜率电导从28.44pS降至10.77pS，Ik1通道的开放时间常数也缩短。结论维司力农对Ik1具有显著的抑制作用。这一效应可部分解释为何作为强心药的维司力农还同时具有抗心律失常作用。