McAb ELISA IgM捕捉法对EHF快速诊断的研究

采用McAb ELISA捕捉法检测流行性出血热(EHF)患者血清特异性IgM抗体,检测EHF病人血清351份,总阳性率为94.58%,而正常人血清和非EHF病人血清146份全部阴性。第2病日血清中即可检出EHF-IgM抗体,第4、6病日阳性率分别为87.50%和96.43%,第8病日26份血清全部阳性。对1例典型EHF病人血清IgM抗体动态观察,发现病后1周抗体滴度最高,病后1个月明显下降,病后3个月转阴。     

应用EHF-A549细胞抗原片检测流行性出血热抗体的初步报告

以往检测流行性出血热(EHF)抗体采用的间接兔疫荧光试验是以KHF-A549细胞作为底物的。最近,我国已分离成功流行性出血热病毒,并可在A549细胞中传代。本文应用国产EHF-A549细胞涂片检查本地区EHF病人血清特异性抗体。检测结果与临床诊断符合率较高,急性期测IgM,阳性率为84.4％;恢复期测定IgG,阳性率为90.6％。由此认为国产抗原片更适宜于检测本国EHF患者的血清抗体。     

一种快速检测流行性出血热IgM抗体的方法

目的：探讨一种快速检测流行性出血热（EHF）IgM抗体的检测方法，为早期诊断流行性出血热提供诊断依据。方法：将纯化的流行性出血热病毒抗原经胶体金标记，配合抗人μ链抗体，和病人血清进行金标斑点渗透试验。结果：检测28份临床诊断为EHF的患者血清标本，27份EHF－IgM抗体阳性，1份阴性，符合率为96．4％；检测16份非EHF患者的血清样本，1份EHF－IgM抗体阳性，15份为阴性。EHF－IgM抗体在病程第二病日即可检测到。结论：提示胶体金标斑点渗透法检测流行性出血热IgM抗体，操作简便快速，敏感性高，特异性强，可为临床早期诊断提供依据。     

视觉法特异性IgM酶免疫技术早期诊断流行性出血热的临床应用

本文报告应用视觉法特异性IgM酶联免疫吸附试验(IgM ELISA)检测43例流行性出血热(EHF)患者血清中的特异性IgM。结果表明,在第3病日即可检出EHF病毒特异性IgM。检出的阳性率在3～5病日达83.3％,6～10病日达98.3％,21病日开始下降。在病程的早期各临床病型患者的特异性IgM阳性血清率之间无明显差异。本法特异性强,灵敏性高,无需特殊设备,操作简便,适合基层早期诊断EHF。     

流行性出血热患者对野、家鼠型病毒多肽抗原的抗体应答

应用兔抗流行性出血热(EHF)病毒血清及EHF病人血清对野、家鼠型EHF病毒多肽抗原进行免疫识别,发现两型病毒多肽抗原间稍有差异。不同流行地区EHF病人血清大多数可与两型病毒49.6ku(50kd)多肽反应,提示该多肽可能是EHF病毒引起机体抗体应答反应的主要抗原成分。并对EHF病人血清中针对两型病毒多肽抗原的抗体检出率与临床病程及病型的关系进行了观察。     

六项 EB 病毒指标联合检测在儿童传染性单核细胞增多症诊断及治疗中的临床应用

1摘要目的：本文旨在研究六项 EB 病毒指标联合检测在儿童传染性单核细胞增多症诊断及治疗中的临床应用。方法：该实验室收集了366份已确诊传染性单核细胞增多症的患者资料,其同时做了 EB 病毒六项指标检测,其分别为 EB 病毒衣壳抗原 IgG 抗体、EB 病毒衣壳抗原 IgM抗体、EB病毒早期抗原 IgG 抗体、EB 病毒早期抗原 IgM抗体、EB 病毒核抗原 IgG 抗体、EB 病毒衣壳抗原 IgG 抗体亲合力检测,用酶联免疫吸附实验进行检测,综合分析以确定对传染性单核细胞增多症的诊断意义。结果：366份标本中 EB 病毒衣壳抗原 IgG 抗体阳性率为89．6％,EB 病毒衣壳抗原 IgM抗体阳性率为45．2％,EB 病毒早期抗原 IgG 抗体阳性率为48．5％,EB 病毒早期抗原 IgM抗体阳性率为32．2％,EB 病毒核抗原 IgG 抗体阳性率为56．2％,EB 病毒衣壳抗原 IgG 抗体高亲合力阳性率为39．2％,EB 病毒衣壳抗原 IgG 抗体低亲合力阳性率为58．2％。结论：六项 EB 病毒指标联合检测,并动态监测指标的变化,在诊断传染性单核细胞增多症及监测疗效中起到重要作用。     

特异性IgM抗体测定在甲型肝炎早期诊断上的应用

甲型肝炎(以下简称甲肝)的早期诊断,根据从患者粪便检出病毒抗原或由急性期病人血清检出特异牲IgM抗体。当黄疸出现后,粪便中病毒量甚少,由怠性期病人粪便检出甲肝病毒(HAV)对诊断价值不大。采集急性期病人血清,检测特异性IgM抗体,适于甲肝的早期诊断。固相放射免疫试验(SPRIA)和     

EHF早期快诊技术研究(Ⅴ.CoA法早期快速检测EHF病人血清和尿中抗原)

本文报告用CoA法检测血,尿中EHF抗原,经106份标本的实验结果表明,血EHF抗原阳性率为95.8％,尿EHF抗原阳性率为94.4％。用抗原,抗体二者联合检测的阳性率可提高倒98.6％。本文认为EHF病人抗原、抗体二者联合检测,有助于提高EHF诊断水平。     

Ⅰ型登革病毒感染后不同病程病毒核酸及其IgM抗体的变化规律

目的 探讨Ⅰ型登革病毒感染后病毒核酸及其IgM抗体在患者体内的变化规律,为指导临床快速、准确地诊断登革热提供理论支持.方法 回顾性分析2014年7-11月收集的Ⅰ型登革病毒感染者临床资料和血清标本,应用实时荧光定量RT-PCR和ELISA法分别检测病毒核酸和IgM抗体,分析不同病程两者的变化规律.结果 共检出222例阳性患者,其中病毒核酸阳性137例,IgM抗体阳性146例,两者同时阳性61例.病程急性期(发病l～5d)病毒核酸阳性率为75％ ～ 100％,IgM抗体阳性率在发病第1～2天较低,但第3～5天快速升高至50％ ～ 70％;进入恢复期(发病6～10 d)病毒核酸阳性率即快速降低,8d后仅20％左右,但IgM抗体阳性率显著升高达95％～100％.急性期和恢复期病毒核酸与IgM抗体检测结果构成比差异有统计学意义(x2=63.41,P＜0.05).结论 Ⅰ型登革病毒感染者急性期病毒核酸阳性率在75％以上.恢复期IgM抗体阳性率在95％以上.根据病程合理选择检测方法,可提高登革热的诊断效率.     

肾综合征出血热病毒单克隆抗体的研究与应用

作者概要地报道我室近年来对肾综合征出血热病毒单克隆抗体(McAb)的研究与应用,包括:①肾综合征出血热病毒及其血凝素抗原McAb杂交瘤细胞系的建之与鉴定,②选择其中高效优质的McAb进行病毒的抗原性分析;③以McAb亲和层析纯化病毒结构蛋白及其分析鉴定,④纯化HFRS-McAb及其应用;⑤以Mcab-IFAT检验HFRS患者外周血白细胞中的病毒抗原;⑥建立了McAb-ELISA间接夹心法检测HFRS病毒抗原、检测不同疫区人和动物血清中特异性抗体(IgM和IgG)、患者血清中血凝抑制抗体等。并已应用于研究HFRS病毒结构及其特征、纯化病毒抗原组份及保护性抗原,对本病的早期快速检验诊断、流行病学调查、研究疫苗及免疫治疗等都有重要意义。     

Application of Monoclonal Antibodies against Epidemic Hemorrhagic Fever Virus in Early Clinical Diagnosis and in Viral Antigen Analysis

Indirect fluorescent antibody test (IFAT) was employed to detectviral antigens in the peripheral blood lymphocytes from 77 patients withclinically diagnosed epidemic hemorrhagic fever (EHF). The positive ratewas 50.7%, and it was 64.3% (27/42) for early cases (2nd to 5th day ofdisease). It was found that the earlier and the more severe the cases were,the higher the positive rate was. Three McAbs, 4B9, 4E7 and 3H4 havebeen introduced to IFAT. Five reaction patterns of the three McAbs withviral antigen positive cases were observed. The McAbs showed theirdifferences in respect of positive rate. Combination of McAbs could raisethe positive rate. In the cases of early phase with positive EHFV antigensin the leucocytes, the positive rate of specific IgM in acute phase sera was96.3%. The positive rate and accuracy of EHF early diagnosis could beraised by combined application of detection of the viral antigens andspecific serum IgM in the acute phase.     

三种特异性血清学方法诊断流行性出血热的评价

本文用IFAT、ELISA、HI平行检测了出血热患者血清161份的出血热病毒抗体，阳性57.9～95.1％；ELISA、HI和IFAT分别于2、4病日出现阳性；ELISA、IFAT分别于60、90病日阴转，HI94病日仍阳性；HI的阳性率（95.1％）高于IFAT（IgM57.9％、IgG88.4％）及ELISA（IgM75.6％、IgG65.9％），其发热期阳性率亦高于其他两法；ELISA-IgM、IgG的阳性率及ELISA-IgM、HI抗体的滴度随病情加重而增加。因此，ELISA（主要是ELISA-IgM）和HI具有高度特异性、敏感度，阳性出现早，HI在三法中灵敏度最高。     

Detections of HFRS Virus Antigen and Antibody by a McAb ELISA Indirect Sandwich Method

An ELISA indirect sandwich method using monoclonal antibodies(McAb)against hem-orrhagic fever with renal syndrome(HFRS)virus has been developed fordetections of HFRS virus antigen and specific antibody.Dynamic changes of HFRS virusantigens in the cells infected and their culture supernatants were observed by indirectfluorescence-antibody technique(IFAT)and ELISA separately.It was shown that HFRSvirus antigens in the cells and in the supernatants peaked separately 8 days and 14 daysafter infection.A hundred and seventy-nine brain and lung specimens of suckling miceinfected were examined by ELISA and IFAT.The positive rates were 72.1% and 68.2%,respectively.Furthermore,the IgM antibodies of 121 sera from HFRS patients wereexamined by ELISA and IFAT.The positive rates were 90.1% and 83.5% respectively.The IgG antibodies of 178 sera from HFRS patients were also examined by the twomethods,and both of the positive rates were 89.3%.The antibody titer measured byELISA was higher than the titer by IFAT.The above results suggest that the ELISA is aspecific and sensitive method and can be used for early diagnosis,epidemiologicalsurveillance and etiological study of HFRS.     

抗人IgM单克隆抗体的制备及其特征研究

以人IgM作为抗原免疫Balb/C小鼠,采用杂交瘤技术获得5株分泌抗人IgM单抗的杂交瘤细胞株.通过酶联免疫吸附试验、免疫双向扩散试验证明:该组单抗仅与人IgM起反应,而不与其他各类免疫球蛋白反应。间接免疫荧光试验证明:该组单抗测得不同人群外周血淋巴细胞阳性数与用抗B细胞单抗和直接免疫荧光法测得的结果接近.免疫转印试验证明抗体作用的分子量为50～70kd(dalten法定单位为u,换算系数0.9921,下同).提示为IgM.本文还对单抗应用价值进行了讨论。     

免疫酶技术检查EHF患者外周血单个核细胞中病毒结构蛋白抗原的研究

２２例ＥＨＦ患者于不同病期外周血单个核细胞涂片，用已知抗病毒核蛋白的ＭｃＡｂＡ３５及抗膜蛋白的ＭｃＡｂ３Ｇ＿１进行免疫酶染色，以检查病毒结构蛋白抗原。３病日时抗原检出率为６３．１％，７病日时达１００％，１７病日时仅为１８．２％，与抗体应答规律一致，只是其检出比抗体检出约提早３ｄ，且核、膜蛋白抗原的检出率间差异无统计学意义，结合ＥＨＦ患者对病毒结构蛋白免疫应答的特点，可预测患者的转归。同时该法也可用于ＥＨＰ患者早期快速诊断，并值得推广应用于其它病毒性疾病的诊断中。     

分泌抗心脏肌凝蛋白及其轻链单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立及初步鉴定

心脏肌凝蛋白(Cardiac myosin,CM)及其轻链(CM—LC)是心肌特有的收缩蛋白质,其化学结构和免疫学性质均与其它组织来源者不同。当急性心肌梗塞(AMI)造成心肌细胞缺血坏死时,血清CM—LC水平升高。故可用于临床诊断AMI。这一诊断指标的特异性、敏感性、与梗塞灶大小     

单克隆抗体ELISA间接夹心法检测HFRS病人血清IgM和IgG抗体的研究

肾综合征出血热(HFRS)早期临床症状不典型,因此在病人血清中检出特异性抗体,特别是IgM抗体,对辅助临床早期诊断和流行病学监测均有重要意义。间接免疫荧光法(IFAT )和免疫酶染色法,虽已被广泛用于上述目的,但尚存在需用荧光显微镜或判定结果有一定主观性等不足之处。血凝抑制试验测出的则主要是IgG抗体。本文采用抗HFRS病毒单克隆抗体(McAb)和粗纯抗原建立了一种ELISA间接夹心法,以检测HFRS病人血清中IgM和lgG抗体,并与IFAT进行了比较。     

Interruption of early viremia in patients with epidemic hemorrhagic fever

Kinetic changes of viremia were observed in 287 patients with epidemic hemorrhagic fever (EHF) in whom ribavirin was administered with a double blind random controlled study by means of virus isolation, indirect immunofluorescence technique and ELISA. The positive rate of viremia was 79.7%, and the positive rate of EHF IgM was 85.0% before treatment. Viremia could be interrupted by ribavirin. In the ribavirin group, the positive rate of viremia decreased, duration of viremia was shortened, viral antigen products, viral titer and EHF IgG level were reduced as compared with the control group. These showed that viremia is very frequent in patients in the febrile phase, and ribavirin is an effective antiviral drug in treatment of EHF during the febrile phase. Dosage of the drug and the course of treatment are discussed.     

McAb-ELISA间接夹心法检测家鼠型HFRS疫区人和动物血清中特异性抗体

用McAb-ELISA间接夹心注和IFAT或酶标SPA染色法平行检测山西地区(家鼠型HFRS疫区)的人及动物血清中HFRS病毒特异性IgM和/或IgG抗体。结果ELISA检测174份HFRS患者血清的阳性率及抗体滴度均明显高于IFAT。检测295份无明确HFRS病史的健康人血清,ELISA的阳性率也高于IFAT。检测215份鼠类血清、102份兔血清及108份猪血清,ELISA的阳性检出率与IFAT或酶标SPA染色法基本相同。用阻断试验等证明本ELISA检出的抗体确为HFRS病毒特异性抗体。