妇科腹腔镜手术对机体腹膜形态学的影响

目的 探讨妇科腹腔镜手术对机体腹膜形态学的影响。方法 将40例子宫肌瘤或单纯卵巢囊肿患者(排除腹膜炎症患者)随机分别进行腹腔镜手术和开腹手术，于手术O、30、60、90及120min分别采集壁层腹膜。对其进行透射电镜(TEM)和扫描电镜(SEM)观察腹膜间皮细胞形态学变化。结果 腹腔镜组充气后间皮细胞迅速肿胀，60min可见腹膜间皮细胞间连接断裂，基底膜裸露，120min更明显，而在开腹组间皮质细胞未见明显变化，90min细胞间连接偶可见断裂。结论 妇科腹腔镜组与开腹组相比，改变了腹膜的形态学，而且与充气时间有关，可能有利于腹腔内恶性肿瘤的转移。     

腹膜透析液对于腹膜间皮细胞的影响

作为治疗尿毒症的有效手段之一,腹膜透析可以有效地纠正尿毒症患者的部分生理异常。而在此治疗过程中,由于腹膜透析液的组成有别于人体的体液,因而具有一定程度的生物不相容性,其非生理性的主要因素包括低pH、高糖、高渗、缓冲剂的组成等。这些因素可以导致腹膜细胞发生形态、功能的改变,腹膜透析效能降低,损害宿主的防御机制。以往的研究较多关注腹腔内的中性粒细胞、巨噬细胞;近年来,通过对于腹膜透析时人腹膜间皮细胞(HPMC)形态与功能的研究,发现HPMC在腹腔局部     

人参总皂甙抑制乳酸盐腹膜透析液对人腹膜间皮细胞的损伤

目的观察人参总皂甙（TSPG）对乳酸盐腹膜透析液（0PDS）致人腹膜间皮细胞（HPMC）损伤程度的影响,为其保护HPMC提供实验依据。方法采用酶消化法从人腹膜组织中分离间皮细胞,建立稳定的体外培养模型后分5组,F12完全培养液对照组、腹膜透析液组（2．5％L-PDS组）、2．5％L-PDS＋TSPG组（终浓度为500μh／ml）、2．5％LPDS＋TSPG组（终浓度为50μg／ml）、单纯TSPG组。经各种因素处理后的细胞在培养60min和300min后用MTT法检测细胞的增殖,用自动生化分析仪检测各组培养液中乳酸脱氢酶的水平,来反映细胞的损伤程度。结果HPMC在终浓度为500μg／ml的TSPG和2．5％的乳酸盐腹膜透析液培养体系中培养1h后,和对照组相比,HPMC增殖能力明显增强（P〈0．05）,培养体系中的LDH含量明显下降（P〈0．05）。结论人参总皂甙能抑制乳酸盐腹透液导致的HPMC的损伤。     

卵巢纤维瘤合并腹膜恶性间皮瘤临床病理观察

目的探讨卵巢纤维瘤合并腹膜恶性间皮瘤的诊断与鉴别诊断以及可能的发病机制。方法采用HE染色、免疫组化标记、临床追踪随访并复习文献对卵巢纤维瘤合并腹膜恶性间皮瘤进行观察分析。结果患者女性,60岁。盆腔占位伴大量腹水。组织学上卵巢为巨大纤维瘤,合并腹腔弥漫性上皮样细胞增生,细胞呈乳头状或巢片状分布,异型性不明显,核分裂少见,部分区域肿瘤向脂肪小叶内浸润生长。免疫组化:上皮样细胞MC、CR、D2-40和CK5/6(+),p16和上皮性标记物(-)。结论卵巢纤维瘤合并腹膜恶性间皮瘤罕见,发生机制不清。形态学上容易误诊为卵巢纤维瘤伴弥漫性间皮细胞增生、腹膜或卵巢原发性浆液性肿瘤,免疫标记及临床特征有助于鉴别。     

腹膜透析液对腹膜间皮细胞早衰的影响及间充质干细胞干预的研究

目的探讨腹膜透析液对腹膜间皮细胞早衰的影响及骨髓间充质干细胞的干预作用。方法首先从择期行腹膜透析置管手术者大网膜分离培养出腹膜间皮细胞。将腹膜透析液加入常规培养的腹膜间皮细胞,通过腹膜间皮细胞传代数、细胞增殖、细胞周期、端粒的检测以观察腹膜透析液对腹膜间皮细胞衰老的影响及可能机制;通过在培养液中加入骨髓间充质干细胞,观察骨髓间充质干细胞对腹膜间皮细胞早衰的干预作用。结果与仅用RPMI1640培养基培养的腹膜间皮细胞相比,腹膜透析液致腹膜间皮细胞传代数减少4~5代,生长速率降低42%,细胞周期阻滞于G1期[(69.1±0.3)%],端粒长度缩短(4.35±0.12)kb比(5.45±0.10)kb,t=2.228,P=0.000]。腹膜透析患者透出液中分离培养出腹膜的间皮细胞接近衰老细胞,加入骨髓间充质干细胞培养的间皮细胞衰老进程延缓。结论骨髓间充质干细胞可延缓腹膜透析液所诱导的腹膜间皮细胞的衰老进程。为临床上延缓腹膜纤维化,改善腹膜透析的远期疗效提供一种新的理论依据和治疗手段。     

应用自制扫描电镜图像处理系统进行人盆腹膜孔的研究

应用一种具有较高性能价格比的扫描电镜图像处理系统，对人体盆腹膜孔进行研究。发现人盆腹膜有两类间皮细胞，即扁平形和立方形间皮细胞。盆腹膜孔仅出现在立方形间皮细胞之间，呈偏态分布，其标准差和标准误分别为９．４４和０．９８。盆腹膜孔面积主要分布在１．３４－３２．１１μｍ＾２之间，变异系数为９４．４０。在盆腹膜上，腹膜孔的平均密度为７．２％，最大密度是１１．６％。     

二氧化碳气腹和无气腹腔镜手术对腹膜形态学的影响

目的:探讨CO2气腹和无气腹腔镜手术对腹膜形态学的影响。方法:对38例子宫肌瘤患者(排除腹膜炎症患者)分别进行CO2气腹腹腔镜手术(有气腹腔镜组,n=20)和无气腹腔镜手术(无气腹腔镜组,n=18),于手术0、30、60、90、120min分别采集壁层腹膜,对其行透射电镜和扫描电镜观察腹膜间皮细胞形态学变化。结果:有气腹腔镜组充气后间皮细胞迅速肿胀,60min时可见腹膜间皮细胞间连接断裂,基底膜裸露,120min时更明显;而在无气腹腔镜组间皮细胞未见明显变化,120min时仅见细胞肿胀。结论:CO2气腹腹腔镜手术与无气腹腔镜手术相比,改变了腹膜的形态学,而且与充气时间有关,可能有利于腹腔内恶性肿瘤的转移     

钙对人腹膜间皮细胞损伤、增殖及纤维连接蛋白合成的影响

目的研究不同浓度钙对体内外人腹膜间皮增殖、损伤和间质纤维化的影响。方法体外试验:以人腹膜间皮细胞永生化细胞株(HMrSV5)为研究对象,予不同浓度钙(0、0.25、0.75、1.25、1.75、2.25mmol/L)处理该细胞12、24h。采用四甲基偶氮唑盐(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)比色法和乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)评估细胞的增殖能力和损伤。蛋白免疫印迹法检测纤维连接蛋白(fibronectin,FN)的表达。临床试验:随机选择47例既往使用低钙透析液(Baxter PD4,含钙1.25mmol/L)的稳定维持性腹膜透析患者,平均透析时间为(18.5±11.7)个月。采用前后自身对照法进行研究。以患者刚入选本研究时作为对照组,入选后换用含钙1.75mmol/L的PD2进行透析(其他成份均与PD4相同)4周,其他治疗(降压、降磷、活性维生素D3等)不变。患者使用PD2透析后的每一周末作为一组(分别为第1、2、3、4周组)。酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测腹膜透析引流液中的FN和LDH,电化学发光法(electrochemiluminescence assay,ECLA)检测CA125。同时检测血清钙、磷及全段甲状旁腺激素(intact parathyroid hormone,iPTH)水平。结果体外试验:钙呈时间及浓度依赖性促进HMrSV5增殖,含钙1.75mmol/L组最高;不同浓度钙呈时间依赖性显著诱导LDH上调,其中钙1.25mmol/L组LDH最低(P<0.05);FN亦呈钙浓度及时间依赖性表达上调。临床试验:4个试验组腹膜透析引流液中LDH值均与对照组有显著差异且呈时间依赖性升高。第4周组的FN和LDH水平显著高于其他组,CA125水平明显低于其他组,差异均有统计学意义(均P<0.01)。第4周组的血清钙高于对照组,血磷低于对照组差异均有统计学意义(均P<0.05),iPTH与对照组差异无统计学意义(P>0.05)。结论在体内外试验中,高钙(1.75mmol/L)可促进人腹膜间皮细胞增殖,同时加重细胞损伤,促进FN合成,而生理浓度钙(1.25mmol/L)对人腹膜间皮细胞有一定保护作用并可能预防腹膜纤维化。     

腹膜间皮细胞转分化中microRNA302c的作用研究

目的 探讨腹膜间皮细胞转分化中micro RNA302c的作用。方法 应用医学样本培养法,选取临沂市人民医院2019年5月至2019年11月择期行腹膜透析置管手术(即终末期肾脏疾病)患者,应用“大网膜血管结扎分离器”分离方法分离腹膜间皮细胞;将腹膜透析液(葡萄糖腹透液、氨基酸腹透液、葡聚糖腹透液等)注入常规腹膜间皮细胞,而后就micro RNA302c对样本腹膜间皮细胞传代数、细胞增殖、细胞周期、端粒等影响进行总结。结果 腹膜透析腹膜间皮细胞转分化主要历经上皮细胞向间充质细胞转分化两种过程,这也是肌成纤维细胞的主要来源类型;上皮细胞向间充质细胞作为腹膜纤维化的起始部分,以结缔组织生长下游因子(CTGF)影响TGF-β1信号通路为决定性作用,期间micro RNA302c作为CTGF表达起到了关键性作用。结论 micro RNA302c在腹膜间皮细胞转分化中起了关键性作用,且随着腹透时间的延长而降低,通过培养出的腹透流出液中CTGF、EMT相关分子标记物与患者的基因突变紧密相关,可作为患者疾病预后的有效监测指标。     

糖皮质激素对人腹膜间皮细胞分泌细胞外基质的影响

目的探讨糖皮质激素对人腹膜间皮细胞分泌细胞外基质的影响。方法采用胰蛋白酶消化法从人腹膜组织中分离间皮细胞,建立稳定的体外培养模型。将第三代细胞转板,至细胞融合后,将其分为:①对照组(F12);②2.5%葡萄糖组(F12 葡萄糖2.5%);③LPS组(F12 LPS10mg/L);④2.5%葡萄糖加DXM组(DXM为3种不同的浓度,依次为10nmol/L、100nmol/L、1000nmol/L);⑤LPS加DXM组(DXM为三种不同的浓度,依次为10nmol/L、100nmol/L、1000nmol/L);所有分组均培养24h后收集细胞上清液,低温离心(1000r/m)5min后,采用酶联免疫吸附法检测上清液中纤维连接蛋白(FN)和纤溶酶原抑制剂(PAI-1)的含量。结果①腹膜间皮细胞在2.5%葡萄糖和10mg/LLPS刺激下分泌FN及PAI-1明显增加,与对照组比较差异有显著性意义(P<0.01);10mg/LLPS组分泌FN及PAI-1较2.5%葡萄糖组分泌高,差异有显著性意义(P<0.01);②腹膜间皮细胞在2.5%葡萄糖加入不同浓度的DXM(10nmol/L、100nmol/L、1000nmol/L)干预后,24h内分泌FN及PAI-1较2.5%葡萄糖组减少,差异有显著性(P<0.05);③腹膜间皮细胞在LPS加入不同浓度的DXM(10nmol/L、100nmol/L、1000nmol/L)干预后,24h内分泌FN及PAI-1较LPS组减少,差异有显著性意义(P<0.05)。     

灯盏花素对腹膜透析液诱导人腹膜间皮细胞转化生长因子β1的影响

背景：从不同层面了解灯盏花素阻止/延缓腹膜功能衰竭的作用及其机制,从而在临床上推广使用灯盏花素来阻止/延缓腹膜功能衰竭从而延长终末期肾脏病患者腹膜透析时间、提高透析质量、减少透析失败率,提高腹膜透析远期疗效具有广泛的应用前景。目的：观察灯盏花素对腹膜透析液诱导的人腹膜间皮细胞转化生长因子β1分泌及其增殖活性的影响。方法：体外培养人腹膜间皮细胞,分为5组：分别为对照组、腹膜透析液组、灯盏花素终浓度为5,10,20μmol/L组。检测各组上清液中转化生长因子β1的水平以及间皮细胞的增殖活性。结果与结论：腹膜间皮细胞在腹膜透析液诱导下,转化生长因子β1分泌显著增加、细胞增殖活性显著降低。灯盏花素5μmol/L组转化生长因子β1分泌低于腹膜透析液组（P〈0.05）,细胞增殖活性高于腹膜透析液组（P〈0.05）;灯盏花素10,20μmol/L组转化生长因子β1分泌显著低于腹膜透析液组（P〈0.01）,细胞增殖活性显著高于腹膜透析液组（P〈0.01）。结果显示灯盏花素可以抑制腹膜间皮细胞转化生长因子β1分泌,拮抗腹膜透析液对腹膜间皮细胞增殖活性的抑制作用。     

灯盏花素对腹膜透析液诱导人腹膜间皮细胞转化生长因子β1的影响

背景:从不同层面了解灯盏花素阻止/延缓腹膜功能衰竭的作用及其机制,从而在临床上推广使用灯盏花素来阻止/延缓腹膜功能衰竭从而延长终末期肾脏病患者腹膜透析时间、提高透析质量、减少透析失败率,提高腹膜透析远期疗效具有广泛的应用前景。目的:观察灯盏花素对腹膜透析液诱导的人腹膜间皮细胞转化生长因子β1分泌及其增殖活性的影响。方法:体外培养人腹膜间皮细胞,分为5组:分别为对照组、腹膜透析液组、灯盏花素终浓度为5,10,20μmol/L组。检测各组上清液中转化生长因子β1的水平以及间皮细胞的增殖活性。结果与结论:腹膜间皮细胞在腹膜透析液诱导下,转化生长因子β1分泌显著增加、细胞增殖活性显著降低。灯盏花素5μmol/L组转化生长因子β1分泌低于腹膜透析液组(P<0.05),细胞增殖活性高于腹膜透析液组(P<0.05);灯盏花素10,20μmol/L组转化生长因子β1分泌显著低于腹膜透析液组(P<0.01),细胞增殖活性显著高于腹膜透析液组(P<0.01)。结果显示灯盏花素可以抑制腹膜间皮细胞转化生长因子β1分泌,拮抗腹膜透析液对腹膜间皮细胞增殖活性的抑制作用。     

创伤性腹膜后血肿的诊治体会

目的：探讨创伤性腹膜后血肿的早期诊断及合理治疗方法。方法：收集1996—2005年创伤性腹膜后血肿患者43例进行回顾性分析。结果：本组43例采用手术治疗32例，40例治愈，3例死亡。结论：早期诊断主要依靠临床表现、腹腔穿刺、B超和CT。钝性损伤后表现有明显失血性休克，证实有腹腔内脏器或血管损伤，以及穿透伤后所致腹膜后血肿均应及时手术；肾周血肿或仅为骨盆区血肿则无需立即手术。     

人腹膜间皮细胞的改良分离及其鉴定

背景：腹膜间皮细胞作为腹膜的重要组分,分泌多种细胞因子,在参与抗炎、免疫调节、腹膜纤维化等方面起着重要作用,如何获得优质、均一的腹膜间皮细胞成为解决这些问题的关键。目的：拟建立改良的人腹膜间皮细胞消化培养法。方法：0.1%胶原酶Ⅰ消化腹部大网膜组织,去除红细胞后用含体积分数为10%胎牛血清的1640培养基培养。在培养过程中以倒置显微镜观察细胞形态变化,CCK-8观察培养液对间皮细胞生长的促进作用,透射电子显微镜观察细胞超微结构,激光共聚焦免疫荧光鉴定细胞。结果与结论：分离培养的细胞为多角形,汇合时呈铺路石样排列,培养细胞的纯度达90%以上;生长良好,迅速,可传代至四五代。透射电子显微镜下见细胞表面大量的微绒毛,免疫荧光显示角蛋白、波形蛋白抗原阳性,白细胞CD45、第Ⅷ因子相关抗原阴性;所有被鉴定特征均符合间皮细胞的特点。结果提示胶原酶Ⅰ消化法是一种简单、高效、重复性高的分离腹膜间皮细胞的方法。     

胰岛素对人腹膜间皮细胞增殖、损伤及凋亡的影响

目的明确胰岛素是否对人腹膜间皮细胞具有毒性或者保护作用。方法使用人腹膜间皮细胞细胞株，传代培养。用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)测定HPMC的增殖程度。采用全自动生化分析仪测定培养液中乳酸脱氢酶LDH水平示细胞损伤，Hoechst33258染色观察细胞凋亡形态学变化及计算凋亡细胞百分比。分为单纯培养基对照组，4．25％葡萄糖组，不同浓度胰岛素组和不同浓度的胰岛素加4．25％葡萄糖组。结果与对照组相比，4．25％葡萄糖致LDH水平明显增高，并显著降低NIT渗入量，明显增加凋亡细胞百分比；不同浓度的胰岛素对HPMC增殖无影响，不同浓度胰岛素24h后可明显升高LDH水平(P＜0．05)，不同浓度胰岛素作用12h均后导致凋亡细胞百分比显著升高(P＜0．05)；不同浓度葡萄糖胰岛素组12h、24hMMT渗入量较葡萄糖组明显升高(P＜0．05)，组间差异无显著性(P＞0．05)，浓度大于25U／L胰岛素加葡萄糖组作用24h后与葡萄糖组相比显著降低LDH水平(P＜0．05)；不同浓度胰岛素加葡萄糖组作用12h后与葡萄糖组相比凋亡细胞百分比明显下降(P＜0．05)。结论胰岛素能导致HPMC损伤、诱导凋亡，同时在一定范围内可缓解高糖对HPMC的毒性作用。     

人腹膜间皮细胞的改良分离及其鉴定

背景:腹膜间皮细胞作为腹膜的重要组分,分泌多种细胞因子,在参与抗炎、免疫调节、腹膜纤维化等方面起着重要作用,如何获得优质、均一的腹膜间皮细胞成为解决这些问题的关键。目的:拟建立改良的人腹膜间皮细胞消化培养法。方法:0.1%胶原酶Ⅰ消化腹部大网膜组织,去除红细胞后用含体积分数为10%胎牛血清的1640培养基培养。在培养过程中以倒置显微镜观察细胞形态变化,CCK-8观察培养液对间皮细胞生长的促进作用,透射电子显微镜观察细胞超微结构,激光共聚焦免疫荧光鉴定细胞。结果与结论:分离培养的细胞为多角形,汇合时呈铺路石样排列,培养细胞的纯度达90%以上;生长良好,迅速,可传代至四五代。透射电子显微镜下见细胞表面大量的微绒毛,免疫荧光显示角蛋白、波形蛋白抗原阳性,白细胞CD45、第Ⅷ因子相关抗原阴性;所有被鉴定特征均符合间皮细胞的特点。结果提示胶原酶Ⅰ消化法是一种简单、高效、重复性高的分离腹膜间皮细胞的方法。     

锌离子对脂多糖作用下大鼠腹膜间皮细胞凋亡的影响及机制

目的 研究锌离子对脂多糖（LPS）诱导的大鼠腹膜间皮细胞（RPMC）凋亡的影响及机制的探索,从而为锌离子在腹膜透析中的应用提供实验基础.方法 胰蛋白酶消化法培养原代大鼠腹膜间皮细胞、传代、经鉴定后分组：①对照组;②LPS组;③ZnSO4组;④ZnSO4/LPS组.应用AnnexinV-FITC凋亡检测试剂盒及流式细胞仪检测RPMC凋亡率,并采用Westen Blot方法检测细胞外信号调节激酶（P-ERK）,BAX,凋亡诱导因子（AIF）,天冬氨酸特异性半胧氨酸蛋白酶3（caspase3）,天冬氨酸特异性半胧氨酸蛋白酶9 （caspase9）蛋白表达.应用流式细胞术,采用活性氧自由基（ROS）检测试剂盒检测各组别的ROS蛋白表达情况.结果 与对照组相比,LPS组RPMC凋亡细胞数量和相关凋亡蛋白（BAX,AIF,caspase3,caspase9）表达升高（P＜0.01）.与LPS组相比,ZnSO4作用组RPMC凋亡细胞数量和相关凋亡蛋白表达明显降低（P＜0.01）.LPS组ROS显著高于对照组而ZnSO4作用组ROS显著低于LPS组（P＜0.01,P＜0.01）.与LPS组相比,ZnSO4作用组P-ERK的表达明显升高（P＜0.01）.结论 ZnSO4可能可以逆转LPS所致的RPMC凋亡,对腹膜透析相关腹膜炎过程中所导致的RPMC损伤具有保护作用,其作用机制可能是通过ERK通路而发挥作用.     

创伤性腹膜后血肿的诊治

为进一步掌握腹膜后血肿的诊断和处理 ,本文对 3 0例外伤后经证实腹膜后血肿的病例进行分析。腹膜后血肿大多在剖腹探查术中被确诊。对于腹部钝性伤后疑有内出血、腹膜炎者及开发性损伤者应积极剖腹探查 ,腹膜后血肿是否切开探查应综合分析 ,对于稳定型腹膜后血肿可在严密观察下保守治疗。