金丝桃素对视神经损伤大鼠视网膜节细胞的保护作用

目的观察金丝桃素对视神经损伤大鼠视网膜节细胞的保护作用。方法24只SD大鼠随机分为正常对照组、单纯夹伤组、生理盐水对照组、金丝桃素治疗组4组,每组6只（12眼）。对所有大鼠行双上丘注射2％荧光金逆行标记节细胞,7d后,对单纯夹伤组、生理盐水对照组、金丝桃素治疗组进行球后视神经钳夹．同时在生理盐水对照组、金丝桃素治疗组玻璃体内分别注入生理盐水和金丝桃素5ul,14d后进行视网膜节细胞的计数。采用SPSS13．0统计软件对所得数据进行t检验。结果视神经夹伤后14d,存活的视网膜节细胞显著减少。单纯夹伤组节细胞存活率为50％,生理盐水对照组节细胞存活率为52％,金丝桃素治疗组节细胞存活率为68％。金丝桃素治疗组相比单纯夹伤组和生理盐水对照组,存活的节细胞明显要多（P〈0．05）。结论玻璃体内注射金丝桃素能减少大鼠视神经损伤后视网膜神经节细胞的死亡率．对视网膜节细胞有保护作用。     

氨基胍对视神经损伤后视网膜神经节细胞的保护性作用

视神经损伤是眼科常见疾病,多并发于颅脑外伤,预后不良,常致患者失明。由于视神经损伤的发病机制尚未完全明了,所以迄今为止其治疗仍是国内外眼科界的一大难题。现将视神经损伤后视网膜神经节细胞（retinal ganglion cells,RGCs）凋亡及氨基胍（Aminogunidine,AG）对其保护性作用做一综述。     

大鼠神经损伤视网膜病理改变的实验研究

目的 研究神经损伤早期视网膜的病理改变。方法 采用大鼠球后视神经横断务和钳夹伤模型,观察视网膜组织学及超微铁改变。结果 １）光镜：早期表现为神经纤维层血管扩张,损伤后７、１４天可见散在的核染色质边聚。空化的节细胞。２）电镜：损伤后１天节细胞出现胞浆成分疏松,内质网扩张等变性样改变,横断作３天及钳夹伤７天可见节细胞坏死,部分节细胞凋亡。结论 视神经损伤导致节细胞出现迟发性死亡,提示早期治疗具有重要意     

大鼠视神经夹伤模型中莫尼定的视网膜节细胞保护作用

目的 :研究莫尼定对大鼠视神经夹伤模型视网膜神经节细胞的保护作用。方法 :实验用SD大鼠 2 0只随机分为用药组 8只和对照组 12只。所有大鼠右眼用 40 g微型视神经夹紧贴球后夹持视神经 60秒 ,左眼未做夹持。用药组于夹伤前1小时及夹伤后每日腹腔注射莫尼定 1mg/kg ,阴性对照组于夹伤前 1小时及夹伤后每日腹腔注射生理盐水 5ml/kg ,实验观察2 8天。实验结束前 4天双上丘注射 3 %荧光金逆行标记视网膜神经节细胞。做视网膜铺片 ,距离视乳头中心上下左右各2mm拍摄照片 ,使用CPAS图像分析软件做节细胞定量分析 ,节细胞存活率 =右眼节细胞密度 /左眼节细胞密度× 10 0。结果 :用药组、对照组节细胞存活率分别为 61 0 1%和 53 48% ,两者之间存在显著性差异 (P =0 .0 3 5)。结论 :在大鼠视神经夹伤模型中 ,莫尼定具有明显的视网膜节细胞保护作用     

钙通道抑制介导轴突稳定对视神经损伤修复作用的研究进展

视神经损伤是常见的神经性疾病,其基本的病理特征为轴突变性和视网膜神经节细胞(RGCs)凋亡,从而导致视觉功能障碍等症状的出现。轴突变性是神经发育、轴突重塑和损伤反应的重要过程,包括轴突选择性退化、轴突横断诱导的Wallerian变性和凋亡诱导的轴突变性(轴突凋亡)。轴突变性是许多创伤性神经系统疾病的初始步骤之一,损伤的轴突一般无法再生,从而进一步导致神经元胞体凋亡。神经元凋亡导致胞体和轴突两者的退化,在发育过程中广泛发生并且应对神经元的各种损伤。近年来有研究证实,钙是轴突变性的主要调控因子。在视神经挤压伤(ONC)发生后,通过钙通道抑制剂阻止钙离子涌入轴突,可以减弱急性轴突变性(AAD)的程度,提高RGCs的存活率以及促进轴突的再生。     

大鼠视神经损伤视网膜病理改变的实验研究

目的研究现神经损伤早期视网膜的病理改变。方法采用大鼠球后视神经横断伤和钳夹伤模型,观察视网膜组织学及超微结构的改变。结果1）光镜：早期表现为神经纤维层血管扩张,损伤后7、14天可见散在的核染色质边聚。空化的节细胞。2）电镜：损伤后1天节细胞出现胞浆成分疏松,内质网扩张等变性样改变,横断伤3天及钳夹伤7天可见节细胞坏死,部分节细胞凋亡。结论视神经损伤导致节细胞出现迟发性死亡,提示早期治疗具有重要意义。     

兔视神经损伤后视网膜神经节细胞MDA/SOD的变化

目的:观察兔视神经损伤后视网膜神经节细胞(retinal ganglion cell,RGC)丙二醛(malondialdehyde,MDA)/超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)的变化。方法:选用新西兰白兔32只,分为对照组和损伤组,损伤组再根据损伤后不同时间分为3,7,14d组,每组8只16眼。采用硫代戊巴比妥酸法和黄嘌呤氧化法分别测定视网膜MDA/SOD含量。结果:损伤实验组MDA含量分别为5.95±0.78,7.67±0.64和8.29±1.02μmol/g,均明显高于正常对照组(3.82±0.54μmol/g);实验各组SOD含量分别为510±44,415±29和398±36μkat/g,均明显低于正常对照组(727±52μkat/g)。结论:自由基代谢在兔视神经损伤后RGC凋亡中起着重要作用,MDA/SOD含量测定在RGC凋亡的研究中有一定的意义。     

兔视神经损伤后视网膜神经节细胞线粒体跨膜电位的变化观察

目的观察兔视神经损伤后视网膜神经节细胞（retinal ganglion cell,RGC）线粒体跨膜电位（mitochondrial transmembrane potentials,△ψm）的变化。方法选用新西兰白兔32只,分为对照组和损伤组,损伤组再根据损伤后不同时间分为3d、7d、14d组,共4组,每组8只兔16眼。采用Rh123染色,流式细胞术测定RGC△ψm。结果正常新西兰白兔RGC△ψm为3836.67±21.32。在损伤后3d、7d、14d,视网膜细胞△ψm分别为3055.41±7.74、1822.07±18.66、2617.38±7.37。各时间点的△ψm均明显低于正常对照组,且各时间点间△ψm差异有统计学意义（P〈0.05）。结论△ψm在RGC凋亡早期的观测中有一定的意义,并且能进行定量分析研究。     

视神经损伤对视网膜结构的形态学研究

研究正常视网膜神经节细胞（RGC）核的形态。分类和视神经不完全损伤对其影响；建立视神经不全损伤豚鼠模型，术后3月，测量RGC核的平均体积和体密度，视网膜各层的厚度；正常豚鼠RGC核按其体积大小分成大、中、小3群，其平均体积分别为36．35μm3、185、3μm3、80.0μm3，所占比例分别为20．9％，28．6％，49．5％，外伤3月后每群节细胞核的平均体积不大，但所占比例分别为1．74％，14．2％，84．1％；细胞核体密度从7．2％下降到3．7％；视网膜各层厚度均有下降，以内视网膜层的变化最敏感；进行RGC核体积分型能更好地体现节细胞对损伤的反应；大型节细胞对外伤最敏感。     

挫伤性视网膜病变感光细胞凋亡的实验观察

目的 观察挫伤性视网膜病变感光细胞凋亡情况。方法 以3J的能量自由落体的方式造成兔眼挫伤性视网膜病变模型，通过光、电镜及末端脱氧核苷酸转移酶介导的生物素化dUTP(脱氧三磷酸尿苷)缺口末端标记(teminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP nick endlabeling,TUNEL)染色观察视网膜病变及感光细胞凋亡情况。结果 以3J的能量挫伤后的视网膜病变中存在着感光细胞凋亡现象。结论 细胞凋亡是挫伤性视网膜病变的一个重要机制。     

PEDF对大鼠视神经急性损伤后神经节细胞的保护作用

目的:观察色素上皮衍生因子(pigment epithelium derived factor,PEDF)对大鼠视神经急性损伤后视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells,RGCs)的保护作用.方法:选取健康雌性SD大鼠60只随机分为:空白组、模型组和实验组,每组各20只.采用视神经夹伤方法,建立大鼠视神经急性损伤模型.模型组制作视神经损伤模型成功后即刻向玻璃体腔注射平衡盐溶液5μL,之后的1、2wk分别向玻璃体腔注射平衡盐溶液5μL;而实验组在视神经损伤模型制作成功后即刻向玻璃体腔注射PEDF 5μL,同样在1、2wk时分别向玻璃体腔注射PEDF 5μL.通过HE 染色,光镜下观察视网膜形态学变化并且对视网膜神经节细胞进行计数.通过免疫组织化学半定量的方法对Bcl-2和Bax的表达进行检测,观察PEDF对受损视神经的影响.结果:HE染色观察,实验组神经节细胞从细胞形态上要好于模型组,且RGCs数量较模型组多.实验组的Bcl-2和Bax的蛋白表达与空白组、模型组比较,差异有统计学意义(P<0.05),实验组较模型组Bcl-2蛋白表达增加,Bax蛋白表达下降.结论:PEDF可通过上调视网膜Bcl-2蛋白的表达、减弱Bax蛋白表达,以减弱或抑制视神经损伤后RGCs的细胞凋亡,减轻视神经损伤.     

微脉冲半导体激光对兔视网膜损伤的实验研究

目的初步研究微脉冲半导体激光对兔眼视网膜损伤的生物学效应。方法8只有色兔(16眼)中每只眼的上、下方视网膜随机分别行810nm半导体激光连续波阈值光凝及微脉冲阈下光凝,于光凝后即刻观察光斑反应和眼底荧光造影后荧光素渗漏情况,并在光镜和电镜下观察其对视网膜和脉络膜造成的组织学改变。结果微脉冲激光阈下光凝后光斑不可见,亦无荧光素渗漏,视网膜损伤不明显;阈值光凝后可见光斑反应并有荧光素渗漏,视网膜损伤明显,外核层细胞数量减少,内、外核层均出现少量核固缩和胞浆空泡化,视网膜色素上皮细胞增生,Bruch膜完整无损。结论微脉冲激光光凝视网膜不会损伤视网膜,但确定阈能量时要从低能量起,且选择周边视网膜。     

微脉冲半导体激光对兔眼视网膜损伤的形态学观察

目的:研究微脉冲半导体激光对兔眼视网膜损伤的生物学效应.方法:有色兔8只16眼,每眼上、下方视网膜随机分别行810nm半导体激光连续波阈值光凝及微脉冲阈下光凝,于光凝后即刻观察光斑反应和眼底荧光造影后荧光素渗漏情况,并在光镜和电镜下观察其对视网膜和脉络膜造成的组织学改变.结果:微脉冲激光阈下光凝后光斑不可见,亦无荧光素渗漏,视网膜损伤不明显;阈值光凝后可见光斑反应并有荧光素渗漏,视网膜损伤明显,外核层细胞数量减少,内、外核层均出现少量核固缩和胞质空泡化,视网膜色素上皮细胞增生,Bruch膜完整无损.结论:微脉冲激光光凝视网膜不会损伤视网膜,但确定阈能量时要从低能量起,且选择周边视网膜.     

Brn3b基因对视神经损伤条件下视网膜神经节细胞的保护作用

目的　探讨Brn3b过表达对视神经损伤条件下视网膜神经节细胞（retinal ganglion cells,RGCs）的保护作用。方法　选取雄性健康成年BALB/c小鼠60只,用微型视神经夹将小鼠右眼球后视神经夹持损伤,按视神经损伤后的天数依次分为第1、3、5、7、14天组,小鼠左侧正常眼作为空白组,明确视神经损伤天数条件。选取雄性健康成年BALB/c小鼠40只,用微量进样器以小鼠右眼玻璃体内注射的方法将腺相关病毒载体转染小鼠视网膜,建立Brn3b过表达模型并分组:Brn3b过表达组［转染Brn3b过表达腺相关病毒载体（Brn3b overexpressed adeno-associated viral vector,AAV-CMV-Brn3b）］和阴性对照组［转染空白腺相关病毒载体（blank adeno-associated viral vector,AAV-CMV-GFP）阴性对照物］,每组20只;之后,取Brn3b过表达组和阴性对照组各10只,用微型视神经夹将小鼠右眼球后视神经夹持损伤,构建模拟小鼠视神经损伤（controlled optic nerve crush,CONC）模型并分组:CONC-Brn3b过表达组和CONC-阴性对照组。利用视网膜铺片和切片免疫荧光标记相关蛋白表达量,检测Brn3b过表达对视神经损伤条件下RGCs、Brn3b和Caspase3蛋白表达的影响,并对其共定位情况做出统计分析。结果　与阴性对照组相比,Brn3b过表达组小鼠视网膜Brn3b的表达水平明显增加。在小鼠CONC模型制作后的第7天RGCs的总凋亡数量达到65%,第14天RGCs的凋亡数量未见进一步改变。免疫荧光标记的蛋白表达量及其共定位分析显示,在视神经损伤条件下,与CONC-阴性对照组相比,CONC-Brn3b过表达组小鼠RGCs的凋亡量以及凋亡因子Caspase3的表达量均明显减少,差异均有统计学意义（均为P＜0.001）。结论　Brn3b基因对视神经损伤条件下RGC具有明确的保护作用,Brn3b基因对凋亡因子Caspase3的表达可能具有一定的抑制作用。     

BDNF preserves the dendritic morphology of alpha and beta ganglion cells in the cat retina after optic nerve injury

PURPOSE: To examine whether brain-derived neurotrophic factor (BDNF), a potent neuroprotectant in the mammalian retina, also plays a role in preserving the dendritic integrity of the surviving ganglion cells after optic nerve injury. METHODS: Single ganglion cells from cats that underwent unilateral optic nerve crush and received no treatment or nerve crush combined with intravitreous treatment of the affected eye with BDNF were labeled intracellularly, reconstructed using confocal microscopy, and compared quantitatively. RESULTS: Optic nerve injury produced a significant decrease in the soma, dendritic field size, and dendritic complexity of alpha cells. beta Cells also displayed a significant decrease in soma size, but their dendritic fields were not affected as severely as those of alpha cells. Intravitreous treatment of the eye with BDNF at the time of injury preserved the normal somal and dendritic morphologies of both alpha and beta cells. CONCLUSIONS: BDNF, in addition to promoting ganglion cell survival, plays an important role in preserving the somal and dendritic morphologies of the surviving ganglion cells, a necessary precursor to maintaining normal visual function. Ganglion cells, however, are not created equal with respect to their responses to nerve injury or to treatment of the eye with BDNF. Thus, development of effective treatment strategies for preserving ganglion cell function in optic nerve-related diseases mandates a clearer understanding of the cellular response characteristics of the specific neurons involved.     

人参皂苷Rg1对实验性视神经挫伤保护作用的研究

目的 研究人参皂苷Rg 1对大鼠视神经挫伤的保护作用.方法 制作大鼠视神经挫伤模型,设置实验组和对照组,腹腔注射人参皂苷Rg 1,10 mg/kg,连续注射20 d,对照组腹腔注射与实验组等体积生理盐水.20 d后F-VEP检查.取实验组和对照组的视神经挫伤眼和对照眼的眼球及球后视神经:HE染色,SABC法免疫组织化学染色:Bcl-2,Neurocan统计学分析.结果 F-VEP:实验组和对照组的损伤眼数据之间差异较大,但按统计学处理,差异无统计学意义,可能与样本较小及随访时间较短等有关,尚待进一步研究.HE染色健康大鼠视神经组织细胞和视神经挫伤组形态学有差异.免疫组化提示视神经挫伤后神经细胞凋亡明显增多,人参皂苷Rg 1腹腔注射能够明显改善细胞凋亡情况.视神经挫伤后神经纤维蛋白表达明显增多,可能部分与其改善细胞凋亡情况有关,但机制尚不清楚.结论 人参皂苷Rg 1对大鼠视神经挫伤似有保护作用.