TGF－β高调在鼻腔给予AChR抑制EAMG中起重要作用

用放射标记的ｃＤＮＡ寡核苷酸探针，使用原位杂交技术检测表达γ干扰素（ＩＦＮ－γ）、白细胞介素４（ＩＬ－４）和转移生长因子β（ＴＧＦ－β）ｍＲＮＡ的单个核细胞（ＭＮＣ）。结果表明，实验性自身免疫性重症肌无力（ＥＡＭＧ）对照组大鼠窝和腹股沟淋巴结（ＰＩＬＮ）的ＭＮＣ乙酰胆碱受体（ＡＣｈＲ）诱导的ＩＦＮ－γ、ＩＬ－４ＴＧＦ－βｍＲＮＡ表达细胞数明显增高，与给予ＰＢＳＣＦＡ注射组比较差异显著。鼻腔耐受组与ＥＡＭＧ对照组相比，某些淋巴器官中ＡＣｈＲ诱导的ＩＦＮ－γ、ＩＬ－４数降低，ＡＣｈＲ诱导的ＴＧＦ－β细胞明显上调。提示ＩＦＮ－γ、ＩＬ－４和ＴＧＦ－β与ＥＡＭＧ的发病有关，而ＴＧＦ－β高调在鼻腔ＡＣｈＲ耐受ＥＡＭＧ中起重要作用。     

重症肌无力患者胸腺及外周血白细胞介素和干扰素—γ分泌细胞的检测

目的 研究重症肌无力（ＭＧ）胸腺以及外周血辅助性Ｔ细胞（Ｔｈ）,包括Ｔｈ１和Ｔｈ２亚群的免疫功能。方法 利用酶联免疫斑点（ＥＬＩＳＰＯＴ）法检测２０例ＭＧ患者胸腺及外周血乙酰胆碱受体（ＡＣｈＲ）特异反应性白细胞介素－２（ＩＬ－２）、白细胞介素－４（ＩＬ－４）、白细胞介素－１０（ＩＬ－１０）、干扰素－γ（ＩＦＮ－γ）分泌细胞数。结果 ＭＧ患者胸腺ＡＣｈＲ特异反应性ＩＬ－２、ＩＬ－４、ＩＬ－１０、ＩＦＮ－γ分泌细胞数均增高,外周血ＡＣｈＲ特异反应性ＩＬ－１０、ＩＦＮ－分泌细胞数增高,外周血与胸腺间ＡＣｈＲ特异反应性ＩＬ－４、ＩＬ－１０分泌细胞数呈正相关,３例ＭＧ患者在治疗后,外周血ＡＣｈＲ特异反应性ＩＬ－２、ＩＬ－４、ＩＦＮ－γ分泌细胞数均下降,ＩＬ－１０分泌细胞数则１例降低,２例增高。结论 ＭＧ胸腺及外周血存在着     

TGF—β高调在鼻腔给予AChR抑制EAMG中起重要作用

用放射标记的ｃＤＮＡ寡核苷酸探针，使用原位杂交技术检测表达子γ干扰素（ＩＦＮ－γ）白细胞介素４（ＩＬ－４）和转移生长因子β（ＴＧＦ－β）ｍＲＮＡ的单个核细胞（ＭＮＣ）。结果表明，实验性自身免疫性重症肌无力（ＥＡＭＧ）对照组大鼠Ｇｕｏ窝和腹股沟淋巴结（ＰＩＬＮ）的ＭＮＣ乙酰胆碱受体（ＡＣｈＲ）诱导的ＩＦＮ－γ，ＴＧＦ－βｍＲＮＡ表达细胞数明显增高，与给予ＰＢＳＣＦＡ注射组比较差异显著。鼻腔耐受组与Ｅ     

AChRAb阳性和阴性重症肌无力患者IL—4和IFN—γ…

将行胸腺切除术的重症肌无力（ＭＧ）患者分成乙酰胆碱受体抗体（ＡＣｈＲＡｂ）阳性和阴性２组，采用免疫酶点法检测其外周血、骨髓和胸腺白细胞介素４－（ＩＬ－４）分泌细胞和干扰素－γ（ＩＦＮ－γ）分泌细胞的数量，结果表明ＡＣｈＲＡｂ阳性组其外周血和骨髓中ＩＬ－４和ＩＦＮ－γ分泌细胞数量均显著高于ＡＣｈＲＡｂ阴性组（Ｐ〈０．０５），而胸腺细胞两组间差异无显著性意义（Ｐ〉０．０５）。提示ＩＬ－４和ＩＦＮ－γ在     

重症肌无力患者外周血乙酰胆碱受体特异性T细胞sIL-2R、IFN-γ、IL-4的表达和转录

目的了解ＭＧ患者的乙酰胆碱受体（ＡＣｈＲ）特异性细胞免疫应答。方法采用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）检测３０例ＭＧ患者和２０名健康对照者经ＡＣｈＲ刺激后外周血单核细胞（ＰＢＭＣ），辅助性Ｔ细胞１（Ｔｈ１）相关的干扰素（ＩＦＮ）γ、辅助性Ｔ细胞２（Ｔｈ２）相关的白细胞介素（ＩＬ）４及与细胞免疫活化密切相关的可溶性白细胞介素２受体（ｓＩＬ２Ｒ）的分泌，用逆转录聚合酶链反应（ＲＴＰＣＲ）结合狭缝印迹杂交检测ＩＦＮγ、ＩＬ４的信息核糖核酸（ｍＲＮＡ）转录。结果总ＭＧ患者组ＩＦＮγ显著高于健康对照组，尤以急性ＭＧ患者组（１４例）更明显，且其升高与其ｍＲＮＡ转录水平一致。虽然这两组ＭＧ患者的ｓＩＬ２Ｒ亦明显高于健康对照组，但患者组的ＩＬ４表达及其ｍＲＮＡ转录与健康对照组相比差异无显著意义。结论ＭＧ患者有Ｔｈ１和Ｔｈ２的失衡，ＭＧ患者有ＡＣｈＲ特异性细胞免疫活化，Ｔｈ１的细胞因子ＩＦＮγ可能作为效应因子参与了ＭＧ的发病。     

重症肌无力患者外周血干扰素—γ和白细胞介素—10分泌性T细？…

目的 探讨重症肌无力（ＭＧ）患者乙酰胆碱受体（ＡＣｈＲ）特异性Ｔ细胞免疫应答及其国酰胆碱受体抗体间的关系。及该类Ｔ细胞在胸腺瘤切除前后的变化。方法 采用酶联免疫斑点技术在１５例ＭＧ患者和１０例其他神经疾病（ＯＮＤ）患者中,检测在ＡＣｈＲ等不同抗原特异干扰素－γ分泌性Ｔｈ１细胞和白细胞介素－１０（ＩＬ－１０）分泌笥ＺＴｈ２细胞数。结果 ＡＣｈＲＡｂ阳性组ＭＧ患者外周血ＡＣｈＲ特异性ＩＦＮ－γ、ＩＬ＿     

多发性硬化外周血单个核细胞IL—2及TGF—βmRN …

目的 观察多发性硬化（ＭＳ）患者外周血单个核细胞ＩＬ－２及ＴＧＦ－βｍＲＮＡ的表达。方法 采用逆转录ＰＣＲ方法检测２４例ＭＳ患者及１５名对照组外周血单个核细胞白介素－２（ＩＬ－２）及转化生长因子（ＴＧＦ－β）ｍＲＮＡ表达，其中ＭＳ组患者活动期１５例，稳定期９例。结果 活动期ＭＳ较稳定期和对照组ＩＬ－２ｍＲ－ＮＡ表达显著增高（Ｐ〈０。０１），而ＴＧＦ－β表达明显降低（Ｐ〈０．０１）。稳定期患者的ＩＬ     

逆转录－聚合酶链反应、狭缝印迹检测重症肌无力患者IL－2mRNA表达水平

为了探讨重症肌无力的发病机制利用逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）、狭缝印迹技术和非放射性地高辛配基（ＤＩＧ）ＤＮＡ标记和检测手段，采用分子生物学技术和免疫学反应相结合，定量检测了重症肌无力（ＭＧ）患者和健康对照外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）的白细胞介素－２信使核糖核酸（ＩＬ－２ｍＲＮＡ）表达水平。结果表明：ＲＴ－ＰＣＲ方法特异而灵敏，可检测出１００ｆｇ含量的ＤＮＡ。重症肌无力患者（ｎ＝３５）与健康对照（ｎ＝１５）的ＩＬ－２ｍＲＮＡ表达水平无明显差异（Ｐ＝０．１７）。用ＰＨＡ刺激ＰＢＭＣ，患者和对照的ＩＬ－２ｍＲＮＡ表达均明显增多。摘除胸腺或（和）肾上腺皮质激素治疗，可明显抑制ＩＬ－２ｍＲＮＡ表达水平     

重症肌无力患者外周血乙酰胆碱受体特异性T细胞sIL—2R,IFN—γ,IL— …

目的 了解ＭＧ患者的乙酰胆碱受体（ＡＣｈＲ）特异性细胞免疫应答。方法 采用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）检测３０例ＭＧ患者２０名健康对照者经ＡＣｈＲ刺激后外周血单核细胞（ＰＢＭＣ）辅助性Ｔ细胞１（Ｔｈ１）相关的干扰素（ＩＦＮ）－γ，辅助性Ｔ细胞（Ｔｈ２）相关的白细胞介素（ＩＬ）－４及与细胞免疫活化密切要关的可溶性白细胞介素－２受体（ｓＩＬ－２Ｒ）的分泌，用逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）结合狭     

地塞米松对MS的IFN—γ及IL—10分泌性T细胞的影响

目的 检测多发性硬化（ＭＳ）口才外周血单个核细胞在地塞米松（Ｄｅｘ）影响下的ＩＦＮ－γ和ＩＬ－１０的分汔细胞水平。方法 采用酶联免疫斑点技术（ＥＬＩＳＰＯＴ）检测体外培养的外周血单个核细胞（ＭＮＣ）在ＣＮＳ髓鞘素抗原ＭＢＰ下的地塞米松对照试验,检测ＩＦＮ－γ和ＩＬ－１０分泌笥Ｔ细胞水平,并与其他神经疾病（ＯＮＤ）组及健康对照组的检测结果进行对比。结果 显示ＭＳ患者ＩＦＮ－γ分泌细胞水平高于对照组,     

多发性硬化外周血单个核细胞IL-2及TGF-β mRNA表达研究

目的　观察多发性硬化（ＭＳ） 患者外周血单个核细胞ＩＬ－２ 及ＴＧＦ－βｍ ＲＮＡ的表达。方法　采用逆转录ＰＣＲ方法检测２４ 例ＭＳ患者及１５ 名对照组外周血单个核细胞白介素－２ （ＩＬ－２） 及转化生长因子（ＴＧＦ－β） ｍ ＲＮＡ 表达, 其中ＭＳ组患者活动期１５ 例, 稳定期９例。结果　活动期ＭＳ较稳定期和对照组ＩＬ－２ ｍ Ｒ－ＮＡ 表达显著增高（Ｐ＜ ０．０１）,而ＴＧＦ－β表达明显降低（Ｐ＜ ０．０１）。稳定期患者的ＩＬ－２ｍ ＲＮＡ表达明显降低,ＴＧＦ－β表达明显增高, 与活动期各相应指标对比,其差异也有显著性意义（Ｐ＜ ０．０１）。结论　提示这些细胞因子参与ＭＳ自身免疫的过程。     

许旺细胞的IGF—I基因转染及其mRNA和蛋白表达

为探索类胰岛素生长因子－Ⅰ（ＩＧＦ－Ⅰ）基因转染旺细胞的可能性，采用体外培养许旺细胞（ＳＣｓ），构建ＩＧＦ－Ⅰ逆转录病毒载体，利用基因转梁技术将ＩＧＦ－Ⅰ基因转入ＳＣｓ，核酸分子杂交及细胞免疫组化检测ＳＣｓ表达ＩＧＦ－Ⅰ ｍＲＮＡ及其蛋白水平，辅以正常ＳＣｓ作对照。结果：ｐＬＸＳＮ－ＩＧＦ－Ⅰ转染的ＳＣｓ在体外相同培养条件下较正常ＳＣｓ表达ＩＧＦⅠ ｍＲＮＡ及其蛋白水平能力分别增强４．８和３．２倍     

细胞因子在重症肌无力发病机制中的作用

重病肌无力（ＭＧ）是Ｔ细胞依赖性，自身抗体介导以横纹肌无力和易疲劳为特征的自身免疫性疾病［１］。自身抗体对突触后膜烟碱型乙酰胆碱受体（ｎＡｃｈＲ）的自身免疫攻击引起ＡｃｈＲ数目的减少，而导致肌无力的发生，抗体的产生受细胞因子的调节。关于细胞因子中的肿瘤坏死因子（ＴＮＦＳ）、转化生长因子（ＴＧＦ－β）、干扰素（ＩＦＮＳ）、白细胞介素Ｉ（ＩＬ－ｌ）、白细胞介素２（ＩＬ－２）在ＭＧ中的作用，国内外已有大量文献报道，在此不作赘述。本文仅以ＩＬ－４、ＩＬ－６、ＩＬ－１０、ＩＬ－１２为例作一综述，试说明细胞…     

THE T CELL REPERTOIRE TO ACETYLCHOLINE RECEPTOR SUBUNITS IN MYASTHENIA GRAVIS AND CONTROLS

（１）目的：多数重症肌无力（ＭＧ）患者可见作为烟碱样乙酰胆碱受体（ｎＡＣｈＲ）抗体（Ａｂ）升高基础的抗原特异性辅助性Ｔ细胞（Ｔｈ）增多，本研究目的在于探讨此类细胞的可能作用。（２）方法：设重症肌无力、其它神经科患者和正常对照三组。用体外测试的免疫酶点法，即以电鳗的ＡＣｈＲα－，β－，γ－，和δ－亚单位作为特异性抗原以及ＰＰＤ和与多发性硬化相关的髓鞘碱性蛋白作为非特异性抗原，于抗原刺激后计数分泌γ干扰素（ＩＦＮ－γ）的Ｔｈ１细胞数。测定周围血中针对这些抗原的Ｔ细胞亚群计数。（３）结果：ＭＧ患者识别ＡＣｈＲ四种亚单位的Ｔ细胞数均增高，依次为：１／２５０００，１／５９０００，１／８３０００和１／２５０００个细胞。６５％ＭＧ患者的Ｔ细胞主要识别α－亚单位，有些则主要识别γ－和δ－亚单位。少数ＭＧ患者测不到对任何亚单位起反应的Ｔ细胞。（４）结论：ＭＧ患者中，ＡＣｈＲ的四种亚单位均为通过分泌ＩＦＮγ的Ｔｈ１样细胞自身免疫攻击的靶。     

AVP_(4-8)增加海马组织内NGF mRNA和蛋白含量

本文采用了Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交和ＥＬＩＳＡ法，观察了神经肽ＡＶＰ４－８对大鼠海马组织中神经生长因子（ＮＧＦ）ｍＲＮＡ和蛋白水平的影响，结果显示：给大鼠皮下注射ＡＶＰ４－８１２ｈ后，海马组织中ＮＧＦｍＲＮＡ的水平明显高于生理盐水对照组。而给大鼠皮下注射精氨酸加压素（ＡＶＰ）和催产素（ＯＴ）对ＮＧＦｍＲＮＡ的水平均无显著影响。另外，用ＡＶＰ４－８孵育离体大鼠海马组织切片，能使ＮＧＦ蛋白表达量升高，且在４．５ｈ左右达到高峰。     

重症肌无力患者血清sIL—2R的研究

目的 探讨重症肌无力（ＭＧ）患者血清可溶性ＩＬ－２Ｒ（ｓＩＬ－２Ｒ）水平的变化及临床意义。方法 应用单克隆抗体，采用免疫酶标ＥＬＩＳＡ法检测了３８例不同临床类型（Ｉ，ⅡＡ，ⅡＢ型）ＭＧ患者和３５例健康对照者的血清ＳＩＬ－２Ｒ水平。结果 ＭＧ患者血清ｓＩＬ－２Ｒ水平显著高于健康对照组（Ｐ〈０．０１），伴有胸腺瘤和病情较严重的ＭＧ患者血清ｓＩＬ－２Ｒ水平的增高也较显著（Ｐ〈０．０５）。结论 ＭＧ患者血     

Alzheimer型痴呆的髓鞘素蛋白自身应答性T细胞免疫反应

通过计数分泌细胞因子γ－干扰素（ＩＦＮ－γ）、辅助性Ｔ细胞（Ｔｈ１），检查ＡＤ患者外周血和脑脊液（ＣＳＦ）中Ｔ细胞免疫应答。方法：将单个核细胞（ＭＮＣ）暴露于中枢神经系统（ＣＮＳ）髓鞘素抗原髓鞘碱性蛋白（ＭＢＰ）和含脂质蛋白（ＰＬＰ）中进行体外短时间培养，用酶联免疫斑点试验（Ｅｌｉｓｐｏｔ）检测ＩＦＮ－γ分泌性Ｔｈ１细胞链，同时检测急性脑血管病（ＣＶＤ）和其他神经疾病（ＯＮＤ）患者作为对照。结果显示ＡＤ患者外周血中呈高水平ＭＢＰ应答性Ｔｈ１细胞链，而其ＣＳＦ中尤为明显，外周血中ＰＬＰ应答性Ｔｈ１细胞亦显著高于ＯＮＤ对照组。结论认为ＡＤ患者存在高水平的髓鞘素蛋白自身应答性Ｔ细胞反应，且在与ＣＮＳ紧邻的ＣＳＦ中表现得尤为显著，其在ＡＤ发病机制中的作用还有待进一步深入探讨。     

腺病毒介导反义IGF-1抑制鼠胶质瘤细胞增殖的实验研究

目的重组腺病毒反义ＩＧＦ－１基因（ＡｄＨＣＭＶ－ＩＧＦ－１Ａ）治疗大鼠Ｃ６胶质瘤。方法体外克隆反义ＩＧＦ－１３００ｂＰ基因片段重组入腺病毒,经扩增纯化,测定滴度,体外体内感染Ｃ６胶质瘤细胞,观察ＩＧＦ－１的表达及肿瘤大小、生存期变化。结果重组腺病毒反义ＩＧＦ－１滴度６．５×１０１０ｐｆｕ／ｍｌ,反义ＩＧＦ－１基因序列正确,体外Ｃ６－Ａｄ－ＩＧＦ－１Ａ的ＩＧＦ－１表达降低,Ａｄ－ＩＣＦ－１Ａ治疗皮下Ｃ６肿瘤细胞接种组,肿瘤完全消失。与对照组相比有显著性差异（Ｐ＜０．０１）,Ａｄ－ＩＧＦ－１Ａ治疗脑内Ｃ６肿瘤细胞接种组,大鼠生存期超过９０天,而对照组分别为１６．５±１．４天（Ａｄ－ｌａｃｚ组）、１５．７±１．６天（生理盐水组）,Ｐ＜０．００１。结论重组腺病毒反义ＩＧＦ－１可抑制Ｃ６细胞ＩＧＦ－１的表达,ＡｄＨＣＭＶ－ＩＧＦ－１Ａ治疗大鼠Ｃ６胶质瘤效果显著。     

急性脑梗死和Alzheimer病脑脊液高水平髓鞘素抗原B细胞免疫应答

目的确认急性脑梗死（ＡＣＩ）和Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ病（ＡＤ）对髓鞘素碱性蛋白（ＭＢＰ）、髓鞘素结合糖蛋白（ＭＡＧ）和含脂质蛋白（ＰＬＰ）的Ｂ细胞免疫应答。方法采用酶联免疫斑点技术检测了ＡＣＩ、临床可能ＡＤ和其它神经疾病（ＯＮＤ）对照组患者外周血和脑脊液（ＣＳＦ）中ＭＢＰ、ＭＡＧ和ＰＬＰ抗体分泌细胞。结果ＡＣＩ、ＡＤ和ＯＮＤ患者外周血中均可检出ＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＭ三种表型ＭＢＰ、ＭＡＧ、ＰＬＰ抗体分泌细胞，无显著差异。但ＡＣＩ和ＡＤ患者ＣＳＦ中ＩｇＧ型ＭＢＰ、ＭＡＧ和ＰＬＰ抗体分泌细胞均呈显著性增高。结论ＡＣＩ急性脑缺血损伤和ＡＤ神经变性可能导致体内Ｂ细胞激活及ＣＮＳ内髓鞘素反应性Ｂ细胞免疫应答，其病理意义有待探讨。     

人脑胶质瘤免疫抑制因子研究

实验表明人脑胶质瘤原代培养细胞及４个人脑恶性胶质瘤体外细胞系细胞培养上清液（Ｓｕ－ｐｅｒｎａｔａｎｔ，ＳＮ）显著抑制植物血凝素ＰＨＡ－Ｐ刺激的正常人或胶质瘤患者自体和异体外周血淋巴细胞增殖。我们发现用抗转化生长因子－β_２（ＴＧＦ－β_２）单克隆抗体可显著降低胶质瘤ＳＮ的免疫抑制活性。４个人脑胶质瘤体外细胞系应用抗ＴＧＦ－β_２单抗免疫组化染色呈阳性反应，３例正常脑组织呈阴性反应。Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交实验表明上述４个人脑胶质瘤体外细胞系均表达６ｋｂ的ＴＧＦ－β_２ｍＲＮＡ，而４例人胎脑则无表达。这些结果提示人脑胶质瘤细胞可以自体分泌免疫抑制因子抑制患者的免疫功能，而这抑制因子的主要成份是ＴＧＦ－β_２。