p16蛋白表达与大肠癌生物行为关系

目的研究大肠癌组织中p16蛋白的表达和临床病理因素的关系。方法采用免疫组织化学SP法检测25例正常肠粘摸及70例大肠癌组织中p16蛋白的表达。结果大肠癌组织p16蛋白阳性率显著低于正常肠粘膜(P<0·05),p16蛋白表达与大肠癌组织分化程度、淋巴结转移和Dukes分期等密切相关(P<0·05)。结论大肠癌组织p16蛋白表达下调,p16蛋白表达与大肠癌的临床病理特征密切相关,检测p16蛋白的表达可能成为大肠癌诊断和判断预后的重要的分子生物学指标之一。     

cyclinD_1及p21~(WAF1)表达与大肠癌关系研究

目的 :探讨cyclinD1及 p2 1WAF1表达与大肠癌发生发展的关系。方法 :用免疫组化SP法对 40例大肠癌标本进行cyclinD1和 p2 1WAF1蛋白表达的检测 ,并与同期 2 8例大肠腺瘤、14例正常大肠粘膜作对比。结果 :cy clinD1和 p2 1WAF1的阳性表达率在大肠腺瘤 (92 .9% )和大肠癌 (6 7.5 % )均显著高于正常大肠粘膜 (35 .7% ) (P<0 .0 1,P <0 .0 5 )。cyclinD1的表达与大肠癌的分化程度及淋巴结转移无关。p2 1WAF1的阳性表达率在大肠癌 (37.5 % )显著低于正常大肠粘膜 (92 .8% ) (P <0 .0 1)。P2 1WAF1表达与大肠癌的分化程度及淋巴结转移有关。结论 :cyclinD1和 p2 1WAF1表达异常在大肠癌的发生、发展中是一个普遍事件。     

大肠癌中Survivin、PTEN、p16的表达及其临床意义

目的:探讨Survivin、PTEN、p16基因在大肠癌中的表达及其临床意义。方法:利用免疫组织化学SP法检测43例结直肠癌和12例正常结直肠粘膜组织中以上3种基因的表达产物。结果:43例结直肠癌组织中Survivin基因表达23例,癌旁正常直结肠组织中无Survivin基因的表达,Survivin的表达与结直肠癌的组织分型、浸润深度、Dukes'分期无明显相关性(P＞0．05),与结肠癌的转移有相关性(P＜0．05)。而PTEN,p16与大肠癌的分化程度、浸润深度、临床分期、淋巴结转移有关(P＜0．05)。结论:Survivin、PTEN、p16的异常表达在大肠癌发生、发展过程中起重要作用,联合检测Survivin、PTEN、p16表达水平有可能作为反映大肠癌进展和预后的生物学指标。     

MTS1/p16基因失活与大肠癌发生及患者生活质量的关系

背景本实验应用免疫组化及粘液组化方法观察 MTS1/p16基因产物在大肠癌组织的表达情况 ,并与癌旁移行黏膜及正常黏膜进行了对比,了解患者的预后与生活质量. 目的探讨 MTS1/p16基因失活与大肠癌发生的关系及对患者生活质量的意义. 设计标准对照的实验研究. 地点和对象 地点为中国医科大学附属第二医院外科,对象为 2000 01/2001 02住院大肠癌手术患者.男 67例,女 43例,年龄 40～ 83岁.病程 1个月～ 1.5年,选取患者大肠癌及癌旁组织新鲜标本. 方法应用免疫组化方法观察 MTS1/P16基因产物在 110例大肠癌组织的表达情况,并与非典型增生、癌旁移行粘膜及正常粘膜进行了比较. 主要观察指标以细胞呈清晰棕色为阳性判断标准 ,按阳性细胞所占的比例分为 +,阳性细胞数 < 25%;(++),阳性细胞数 25%～ 50%;(+++),阳性细胞数 >50%.以细胞无棕色或与背景一致的淡棕色为阴性.生活质量测定采用李凌江等编制的生活质量综合评定问卷. 结果癌组织 p16阳性分级表达低于正常黏膜及移行黏膜( P< 0.05).在管状腺癌中,高分化 22 例, p16阳性率 86%;中分化 43 例, p16阳性率 33%;低分化 7例, p16阳性率 29%,高低分化癌之间差异有显著意义 (t=5.1, P< 0.01). 结论 p16蛋白的表达缺失与大肠癌的发生有关,并随着分化程度下降 p16表达缺失增加.该指标对大肠癌患者病情的判定及疗效评价、恢复情况具有重要意义.     

p16基因蛋白在宫颈癌中表达的研究

目的　探讨抑癌基因p16与宫颈癌的关系。方法　采用S P免疫组化法检测正常宫颈组织 8例、宫颈炎组织 12例、宫颈鳞癌组织 10 0例中 p16基因蛋白的表达情况。 结果　p16基因蛋白在正常宫颈组织、宫颈炎组织、宫颈鳞癌组织阳性表达率及表达强度依次降低 87 5 %、66 67%、3 9 0 0 % ,3者有显著性差异 (P <0 0 5 ) ,p16蛋白在宫颈鳞癌中的表达随临床分期级别的增高而降低 :0期 75 0 0 %、Ⅰ期 62 5 0 %、Ⅱ期 48 72 %、Ⅲ期 17 0 7% ,4者差异显著 (P <0 0 5 ) ;随分化程度的降低而降低 :高分化 62 96%、中分化 3 6 5 9%、低分化 2 1 88% ,3者有显著差异 (P <0 0 5 )。p16蛋白在有淋巴结转移的宫颈癌中的表达为 2 1 43 % ,显著低于无淋巴结转移者 5 1 72 % ,2者有显著性差异 (P <0 0 5 )。结论　抑癌基因p16蛋白缺失与宫颈癌的发生、自然病程、恶性程度及淋巴转移有关。     

bcl-2,c-myc和p53在大肠腺瘤和大肠癌中的表达

目的　探讨癌基因bcl 2 ,c myc和 p5 3在大肠腺瘤与大肠癌中的表达情况及与临床病理特征的关系。 方法　采用免疫组化ABC法 ,检测 63例大肠癌和 40例大肠腺瘤的bcl 2 ,c myc和 p5 3表达。 结果　bcl 2 ,c myc和 p5 3在大肠腺瘤中的表达分别为 72 .7% ( 2 4/3 3 )、62 .2 % ( 2 3 /3 7)和 45 .0 % ( 18/4 0 ) ,而在大肠癌中的表达则依次为 3 4 .0 % ( 16/4 7)、82 .1% ( 3 2 /3 9)和 84.1% ( 5 3 /63 )。三个癌基因在大肠腺瘤和大肠癌中的表达均有显著的统计学意义 (P <0 .0 1) ,但三个癌基因的表达与临床病理特征无显著的相关性。结论　bcl 2基因的异常激活在肿瘤的发展和演变出现较早 ,而c myc和p5 3的表达则较迟 ,且两者起协同作用。     

p16基因突变在食管癌变进程中的意义及其策略

目的　探讨 p16基因突变在食管癌变进程中的作用 ,提出二级防治中干预对策。 方法　采用免疫组化 p16基因在15 0例食管癌标本中的表达。结果　 ( 1)本组 15 0例食管癌标本组织中 ,p16蛋白阳性率 42 % ,癌旁组织中 p16蛋白阳性率 68.7% ,“正常区”标本中 p16蛋白阳性率 80 % (P <0 .0 1) ;( 2 ) 71例伴淋巴结转移病例 ,p16蛋白阳性率 2 6.8% ,79例无淋巴结转移病例中 ,p16蛋白阳性率 63 .3 % (P <0 .0 1)。 ( 3 )随访 71例中 ,p16蛋白在死亡 42例中阳性率为 3 5 .7% ,在生存 2 9例中 ,p16蛋白阳性率为 72 .4% (P <0 .0 1)。 结论　p16基因的缺失与食管癌的发生、淋巴结转移有关。     

Twist在大肠癌中的表达及其与临床病理指标的关系

目的探讨肿瘤相关基因Twist表达在大肠癌临床病理诊断中的应用价值。方法应用鼠抗人Twist单克隆抗体采用S-P免疫组织化学方法检测112例不同类型大肠癌组织及40例正常肠粘膜组织中Twist的表达并与临床病理指标比较。结果在112例大肠癌组织中,Twist基因阳性表达78例;在正常组织中其阳性表达为15例,两者比较具有显著统计学差异(χ2=11.21,p=0.001);进一步综合临床病理资料统计分析,Twist在大肠癌组织中表达与肿瘤的分化程度、肿瘤浸润、淋巴结转移、Duke’s分期有关(p值分别为0.008、0.017、0.044、0.011),均有显著差异;而与病人年龄、性别无关(p值为0.286、0.887)。结论Twist基因表达检测能较好的判断大肠癌肿瘤分化程度、浸润、淋巴结转移等,在大肠癌诊断中作用明确,对临床病理学诊断有明确的指导作用。     

MTS1／p16基因失活与大肠癌发生及患者生活质量的关系

背景：本实验应用免疫组化及粘液组化方法观察MTS1／p16基因产物在大肠癌组织的表达情况，并与癌旁移行黏膜及正常黏膜进行了对比，了解患者的预后与生活质量。目的：探讨MTS1／p16基因失活与大肠癌发生的关系及对患者生活质量的意义。设计：标准对照的实验研究。地点和对象：地点为中国医科大学附属第二医院外科，对象为2000-01／2001-02住院大肠癌手术患者。男67例，女43例，年龄40～83岁。病程1个月～1．5年，选取患者大肠癌及癌旁组织新鲜标本。方法：应用免疫组化方法观察MTS1／P16基因产物在110例大肠癌组织的表达情况，并与非典型增生、癌旁移行粘膜及正常粘膜进行了比较。主要观察指标：以细胞呈清晰棕色为阳性判断标准，按阳性细胞所占的比例分为：+，阳性细胞数&;lt;25％；++，阳性细胞数25％～50％；+++，阳性细胞数&;gt;50％。以细胞无棕色或与背景一致的淡棕色为阴性。生活质量测定采用李凌江等编制的生活质量综合评定问卷。结果：癌组织p16阳性分级表达低于正常黏膜及移行黏膜(P&;lt;0．05)。在管状腺癌中，高分化22例，p16阳性率86％；中分化43例，p16阳性率33％；低分化7例，p16阳性率29%，高低分化癌之间差异有显著意义(t=5．1，P&;lt;0．01)。结论：p16蛋白的表达缺失与大肠癌的发生有关，并随着分化程度下降p16表达缺失增加。该指标对大肠癌患者病情的判定及疗效评价、恢复情况具有重要意义。     

胃癌、大肠癌组织中p27蛋白的表达及其意义

目的　探讨p2 7蛋白在胃癌及大肠癌组织中的表达及其与临床病理学特征的关系。方法　采用免疫组化方法对3 4例正常大肠组织、2 1例胃癌组织及 3 8例大肠癌组织 p2 7的表达及其与临床病理学特征的关系进行分析。 结果　p2 7在正常结肠组织中的高表达率为 10 0 % (3 4/3 4) ,而在胃癌及大肠癌组织中的高表达率为 5 2 5 % (3 1/5 9) ,p2 7在两组织中的表达差异有显著性 (P <0 0 0 5 ) ,而且p2 7低表达与胃癌及大肠癌的分级高、淋巴结转移多与TNM分期晚显著相关。结论　p2 7蛋白的表达与胃癌、大肠癌的临床病理学特征密切相关 ,可能是一个预测胃癌、大肠癌预后的重要指标。     

鼠双微基因2和多肿瘤抑制基因P16在大肠癌中的表达及临床意义

目的探讨鼠双微基因2（murine double mimute 2,MDM2）和多肿瘤抑制基因P16在大肠癌中的表达及临床意义。方法纳入2006年10月2007年3月收治的67例大肠癌患者,另取距肿瘤10cm以上癌旁组织30例、腺瘤组织20例、正常黏膜20例作为对照。采用免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶（SP）法检测肠黏膜MDM2和P16基因蛋白表达。结果 MDM2在大肠癌组织中的阳性表达率为71.6%（48/67）,明显高于结肠腺瘤组织、癌旁组织和正常黏膜（P〈0.05）。P16在大肠癌组织中的阳性表达率为38.8%（26/67）,与结肠腺瘤组织75.0%,癌旁组织83.3%,正常黏膜组织90.0%比较,差异均有统计学意义（P〈0.05）。大肠癌组织中MDM2在不同分化程度中表达差异无统计学意义（P〉0.05）。P16在不同分化程度中表达差异有统计学意义（P〈0.05）,MDM2和P16在不同Dukes分期中,有无淋巴结转移之间表达差异有统计学意义（P〈0.05）。MDM2与P16基因蛋白在不同年龄组,不同性别组中,表达差异无统计学意义（P〉0.05）。在大肠癌中MDM2蛋白与P16蛋白表达无明显相关性（P〉0.05）。结论 MDM2和P16的异常表达与大肠癌的发生、发展有关,联合检测MDM2和P16对大肠癌的临床诊断、治疗和判断预后有实际意义。     

癌基因C-myc和抑癌基因 p16在大肠癌中的表达

目的 :探讨大肠癌中癌基因 C- myc和抑癌基因 p16的表达及相关性。方法 :采用免疫组织化学 SP法检测78例大肠癌组织、2 0例癌旁组织和 2 0例大肠腺瘤中 C- myc和 p16的表达 ,并分析它们之间的相关性。结果 :大肠癌中C- myc表达率最高 ,p16表达率最低 (P<0 .0 5 ) ;C- myc阳性表达和 p16阴性表达与大肠癌的临床分期、分化程度、淋巴结转移和远隔转移密切相关 (P<0 .0 5 ) ;C- myc和 p16之间存在明显的相关性 (P<0 .0 5 )。结论 :C- myc与 p16表达具有协同性 ,C- myc的表达上调与 p16失活在大肠癌发展中起关键作用。     

p16和bcl-2基因蛋白在大肠癌的表达及临床意义

目的探讨p16、bcl-2基因在大肠癌发生、发展中的作用以及临床中的意义。方法运用免疫组化技术检测大肠癌及腺瘤中p16、bcl-2基因蛋白的表达。结果p16基因蛋白阳性表达率在大肠癌及腺瘤中分别为35．90％、77．27％（P〈0．01）；bcl-2基因蛋白阳性表达率在大肠癌及腺瘤中分别为61．53％、72．72％（P〉0．05）。p16与bcl-2基因蛋白表达在大肠癌中有相关关系，并与肿瘤分化程度、浆膜侵润、淋巴结转移有明显相关性，与年龄、性别、Dukes分期无相关性。结论p16基因的失活与bcl-2基因的过表达在大肠癌的发生、发展中起重要作用；大肠腺瘤是一种重要的癌前病变；对大肠癌及腺瘤进行p16、bcl-2基因检测有助于大肠癌的早期诊断及预后评估。     

原发性肝细胞肝癌发生发展中p16基因的遗传学改变

目的研究人原发性肝细胞肝癌中pl6基因DNA水平上发生的遗传学改变。方法采用聚合酶链反应(PCR)和全自动序列分析的方法,研究84例肝癌和癌旁肝组织中pl6基因第1、2外显子纯合缺失和点突变的情况。结果84例肝癌标本中p16基因第1外显子缺失9例,第2外显子缺失23例,其中有3例第1、2外显子共同缺失,总缺失率为34.5%。未发生基因缺失的病例,经过全自动序列分析,未发现点突变。结论原发性肝细胞肝癌中p16基因失活的主要机制是基因纯合缺失,点突变发生率可能非常低。而未发生基因缺失和突变的肝癌,以及发生p16蛋白阴性表达的癌旁肝组织,p16基因失活的原因可能是包括基因甲基化在内的其他遗传学改变引起的。     

结肠癌组织中差异表达基因的筛选和鉴定

目的 筛选和克隆结肠癌和正常结肠组织差异表达的基因片段,为探讨结肠癌的发病机制提供线索。方法 应用基因差异显示技术（DD—PCR）,比较结肠癌和正常结肠组织基因表达的差异,对其中一条有明显差异的基因片段进行克隆、测序,测序结果提交GenBank数据库中进行同源性分析,并用半定量RT—PCR进行初步鉴定。结果 同源性分析表明,该片段与已知基因DDX32高度同源（99％）。RT—PCR结果显示,在结肠癌组织中该基因mRNA的表达水平显著高于正常结肠组织（P〈0．05）。结论 DD—PCR是筛选差异表达基因的有效手段;在结肠癌组织中DDX32基因的表达显著高于正常结肠组织,此结果为研究DDX32基因在结肠癌发病中的作用提供了线索。     

非小细胞肺癌中p16基因甲基化的临床分析

目的：研究非小细胞肺癌中p16基因甲基化的表达,分析p16基因甲基化与临床、病理资料之间的相关性。方法对61例经手术切除且病理确诊的非小细胞肺癌在术中提取新鲜癌组织和癌旁组织样本冷冻保存,提取DNA后经重亚硫酸盐修饰,用甲基化特异性PCR（MSP）方法检测癌和癌旁组织中p16基因甲基化状态。结合临床及病理资料对实验结果进行统计学分析。结果非小细胞肺癌和癌旁组织中出现p16基因甲基化的阳性率分别为11.48%（7/61）和1.64%（1/61）（P＞0.05）。不同的病理分型、分化程度、TNM分期、淋巴结转移程度及吸烟指数间p16基因甲基化状态差异无统计学意义（P＞0.05）。结论非小细胞肺癌组织中存在p16基因甲基化。     

结直肠癌中p16基因的甲基化改变与蛋白表达的关系

目的 检测结直肠癌患者肿瘤组织中p16基因启动子区异常甲基化改变及蛋白表达情况,探讨其与结直肠癌发生发展与临床的关系。方法 采用甲基化特异PCR(MSP)和免疫组织化学链霉素过氧化物酶(SP)方法,对32份结直肠癌标本p16基因甲基化改变及蛋白表达情况进行检测分析。结果 p16甲基化阳性率为40.6％;p16蛋白表达阳性率75.0％;在病理分期中,DukesC、D期患者肿瘤组织中p16甲基化发生率63.0％,p16蛋白表达发生率为69.0％;DukesA、B期患者p16甲基化发生率为25.0％,p16蛋白表达阳性率为81.0％;在组织分化程度中,低分化癌中的p16甲基化阳性率为100.0％,p16蛋白表达阳性率为20.0％;在高、中分化癌中,p16甲基化的阳性率为30.0％,p16蛋13表达阳性率为85.0％;淋巴结转移癌患者肿瘤组织中p16基因甲基化阳性率为63.0％,淋巴结未转移的阳性率为25.0％;在肿瘤部位中,直肠癌p16蛋白表达阳性率为65.0％,结肠癌的阳性率为100.0％。结论 p16甲基化的改变可能影响p16蛋白的表达;p16甲基化、蛋白表达与结直肠癌的发生发展密切相关,p16甲基化和蛋白表达是结直肠癌患者诊断及预后的候选标志物之一。     

Survivin在大肠癌中的表达及其与血管生长因子的相关性研究

目的　检测大肠癌中凋亡抑制基因Survivin的表达,研究其与大肠癌临床特征和血管内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)表达的相关性,探讨Survivin在大肠癌发生、发展及转移中的作用及机制。方法　收集6 2例大肠癌标本及其病例资料,应用免疫组织化学方法检测Survivin、VEGF、bFGF在大肠癌标本中的表达情况。结果　Survivin、VEGF、bFGF基因在癌旁正常大肠组织中均不表达,在6 2例大肠癌组织中,30例Survivin表达阳性,阳性率为4 8. 39% ,Survivin与大肠癌的Ducks分期密切相关(P <0 .0 0 1)但与病理分化无关(P >0 .0 5 )。2 9例VEGF表达阳性,阳性率4 6 . 18% ,4 5例bFGF表达阳性,阳性率75 . 5 8%。肿瘤局限于黏膜层及黏膜下层和肌层、浆膜层时,VEGF、bFGF表达无明显差异(P >0 . 0 5 ) ,但当肿瘤侵犯到浆膜层和浆膜外时,VEGF、bFGF蛋白表达阳性率明显增高(P<0 . 0 0 1)。淋巴转移组的VEGF、bFGF阳性表达显著高于未发生淋巴转移组(P <0. 0 0 0 1)。结论　Survivin基因、VEGF、bFGF与大肠癌的Ducks分期有密切关系但与病理分化无关,检测Survivin更有意义。     

热休克蛋白与大肠癌发生、发展及生物学行为的关系

目的了解不同类型热休克蛋白(HSP)在大肠癌组织中的表达,并探讨其与大肠癌的发生、发展及生物学行为的关系。方法收集大肠癌患者标本存档蜡块48例,32例选自中国医科大学附属第二临床医院内窥镜中心,应用肠镜取材的病例标本,16例选自本院外科大肠癌手术后标本,48例标本分为两组,一组为大肠癌组织取材标本;另一组为同一大肠癌患者距癌组织10～15cm正常癌旁黏膜组织取材。应用免疫组化SABC法观察40例大肠癌组织和癌旁正常组织中HSP60、70、90α的表达,并比较期间是否存在差异性。结果大肠癌组织和癌旁正常组织粘膜中HSP60、70、90α的阳性表达率分别为54%、60%、79%和21%、17%、21%.3种HSP在癌组织与癌旁正常组织中表达差异均有显著性意义(χ2=13.653,21.333,28.800,P<0.01)。结论3种HSP可在大肠癌中呈高表达,各类型HSP的表达与大肠癌的分化程度及淋巴节转移无关,但HSP在直肠癌中的过量表达提示预后不良,可做为直肠癌预后判定监测标记。     

子宫内膜癌中p16蛋白异常表达及基因缺失和甲基化的研究

目的:研究子宫内膜癌中p16蛋白与其基因缺失及CpG岛甲基化的关系。方法:对36例子宫内膜癌标本分别用免疫组化方法和PCR技术检测MTS1/p16蛋白表达和基因纯合性缺失及第一外显子异常甲基化情况。结果:36例癌组织中14例p16蛋白表达阳性,蛋白表达缺失率为61.11%(22/36);9例发生基因缺失,12例发生甲基化,未发现基因缺失与甲基化同时存在的病例,p16基因总失活率58.33%;22例p16蛋白表达缺失标本有19例基因失活。结论:p16蛋白缺失程度与子宫内膜癌组织学分级和临床分期呈正相关;p16蛋白缺失程度与p16基因缺失和甲基化有关。