硫酸软骨素酶ABC对大鼠脊髓损伤后硫酸软骨素蛋白多糖与胶质纤维酸性蛋白表达的影响

目的探讨硫酸软骨素酶ABC对严重脊髓损伤(SCI)大鼠硫酸软骨素蛋白多糖(CSPGs)及胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达的影响。方法制作大鼠脊髓横断伤模型,60只大鼠随机分为对照组10只、损伤组25只和治疗组25只。治疗组给予硫酸软骨素酶ABC髓鞘浸润治疗。用免疫荧光组织化学观察脊髓CSPGs的表达;用免疫荧光组织化学及Western-blot方法观察脊髓GFAP的表达。结果 SCI后星形胶质细胞明显活化增殖,CSPGs和GFAP的表达明显增加(P<0.05);治疗组脊髓CSPGs和GFAP的表达均较损伤组减少,差别均有统计学意义(P<0.05)。结论硫酸软骨素酶ABC能够裂解CSPGs,改善SCI区的微环境,改善GFAP蛋白的表达,是修复SCI,促进神经再生的机制之一。     

大鼠脊髓挤压伤后硫酸软骨素蛋白多糖NG2在时间和空间的变化

目的：探讨大鼠脊髓挤压伤后硫酸软骨素蛋白多糖（CSPGs ）在时间和空间的变化。方法：①采用大鼠脊髓挤压伤模型,实验动物随机分为脊髓压迫后0h、8h、24h、48h、72h、1周、2周组。对不同时间点的脊髓标本进行 HE染色;计算脊髓损伤区的实际面积;②探讨脊髓挤压伤后CSPGs在时间和空间分布的变化,并观察CS-56在损伤后的表达及其和GFAP的关系。结果：CSPGs在脊髓损伤后表现出强大的抑制作用,免疫荧光染色结果显示,CS-56表达于24h内开始升高,3d后CS-56呈环状分布于损伤区周围,GFAP有少量表达,1周时空洞逐渐出现,2周时空洞轮廓明显,CS-56充填于空洞腔内。结论：分析硫酸软骨素蛋白多糖NG2在时间和空间分布的变化有助于确定抑制其分泌的时间窗,为细胞移植治疗脊髓损伤提供一定的内环境支持。     

硫酸软骨素蛋白多糖在脊髓损伤中的研究进展

硫酸软骨素蛋白多糖（chondroitin sulfate proteoglycans,CSPGs）是中枢神经系统细胞外基质的组成部分,在中枢神经系统发育、正常维持及病理过程中都发挥着关键的作用。脊髓损伤后,损伤部位CSPGs的表达明显上调,这主要源于病变部位活化的星形胶质细胞。CSPGs的上调会限制脊髓损伤部位的轴突再生、传导和再髓鞘化,并且可以促进脊髓损伤中的炎症反应,不利于脊髓损伤后神经功能恢复。因此,抑制CSPGs可能是促进脊髓损伤后轴突再生和功能恢复的有效治疗方法。本文对CSPGs在脊髓损伤中的研究现状进行综述。     

Rho-ROCK抑制在脊髓损伤修复中的作用*

Rho信号通路在脊髓损伤的病理生理学中发挥重要作用。脊髓损伤会引发Rho信号通路上调,Rho及其下游激酶的活化触发了生长锥塌陷并显著抑制轴突再生。有研究表明Rho-ROCK信号通路能介导硫酸软骨素蛋白多糖对神经元的抑制作用,而抑制Rho信号通路能减弱这种抑制作用,因此抑制Rho信号通路能促进脊髓损伤后的神经保护及轴突再生。目前已鉴定出C3转移酶能选择性抑制Rho而不影响其它鸟嘌呤三磷酸酶活性,在脊髓损伤的小鼠模型中,C3转移酶能促进胸脊髓半切除后的轴突的生长及运动功能恢复。Rho抑制剂在动物脊髓损伤模型中的神经保护作用也得到证实,Rho抑制剂赛生灵已经在Ⅰ/Ⅱa临床试验阶段用于脊髓损伤后的干预治疗,并且获得了较好的结果。在这篇综述里,我们将简要介绍Rho信号通路及Rho-ROCK抑制在脊髓损伤治疗中的作用。     

补阳还五汤改善脊髓损伤微环境的研究进展

脊髓损伤的治疗是世界性的难题。传统复方补阳还五汤相对于激素等药物在治疗脊髓损伤方面具有整体改善的优势，能多途径、多靶点改善脊髓损伤部位的微环境。目前补阳还五汤改善损伤脊髓微环境的相关研究主要集中在改善机体自由基水平、抑制谷氨酸的兴奋性神经毒性作用、抑制硫酸软骨素蛋白聚糖和胶质纤维酸性蛋白的表达、上调神经肽P物质的表达、减少脊髓损伤后水通道蛋白-4表达、抑制血小板活化因子受体表达等方面。     

大鼠脊髓半横断损伤后硫酸软骨素蛋白多糖Aggrecan的变化

目的观察硫酸软骨素蛋白多糖Aggrecan在大鼠脊髓半横断损伤(HSCI)后的表达变化。方法 20只成年SD大鼠随机分为假手术对照组和HSCI 3、7和14 d组,建立成年大鼠HSCI(胸9～10)模型;取损伤位点头尾段胸9、胸10节段制作石蜡切片,用免疫组织化学ABC法和图像分析技术检测脊髓内Aggrecan的表达。结果 Aggrecan阳性产物主要分布于细胞外基质中,神经元和神经胶质细胞中也有分布;损伤后脊髓内Aggrecan表达较对照组明显增加。结论 HSCI后Aggrecan表达明显增加,可能参与损伤后轴突生长被抑制这一过程。     

神经生长因子促进中枢神经系统损伤后神经再生的作用机制

神经生长因子(NGF)对中枢神经系统损伤后神经再生有重要的促进作用已得到证实,目前研究认为其作用机制主要是促进突触素p38、生长相关蛋白等功能蛋白的表达,并可与硫酸软骨素蛋白多糖(CSPGs)结合、降低CSPGs对神经再生的抑制作用;控制某些蛋白的修饰如磷酸化过程以及阻断中枢神经损伤后产生的抑制再生蛋白的抑制作用等,而促进神经再生。     

电针对脊髓损伤后硫酸软骨素蛋白多糖表达的影响

目的观察电针对脊髓损伤后硫酸软骨素蛋白多糖(CSPGs)表达的影响,探讨电针对脊髓损伤修复的可能作用机制。方法将成年SD大鼠40只分为正常对照组、模型组和电针组。建立成年大鼠T9～T10段脊髓全横断损伤模型。除电针组于术后当天进行电针治疗外,3个组均分别于术后7、14、28 d取材,用免疫组织化学ABC法和图像分析技术检测脊髓内CSPGs的表达。结果术后7～28 d,与正常对照组相比模型组脊髓损伤邻近组织内CSPGs表达明显增强(P<0.05);与模型组相比,电针组脊髓损伤邻近组织内CSPGs表达明显受到抑制,差异显著(P<0.05)。结论电针能显著降低脊髓损伤后CSPGs的表达,从而减弱CSPGs对轴突再生的抑制作用,这可能是其促进脊髓损伤修复的可能机制之一。     

期刊文摘

细胞周期素依赖性激酶抑制剂olomoucine对大鼠脊髓损伤后轴突再生微环境的影响及其意义[田代实,王伟,徐运兰等.中华医学杂志,2006,86(13):901~905]探讨细胞周期素依赖激酶抑制剂olomoucine对脊髓损伤后轴突再生微环境的影响及意义。建立脊髓半切损伤模型,实验大鼠随机分为假手术组、损伤对照组和olomoucine干预组,采用Western印迹分析脊髓损伤后细胞周期相关蛋白的表达;应用免疫荧光技术检测损伤区域胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、硫酸软骨素蛋白多糖(CSPG)以及生长相关蛋白43(GAP-43)的表达;采用改良的Gale联合评分法对大鼠瘫痪后肢进行运…     

小鼠磨牙牙胚发育过程中Versican之多糖链的时空变化

目的检测versican之多糖链在小鼠磨牙牙胚发育过程中的时空变化。方法取胎龄分别为E11.5,E12.0,E13.5,E15.0,E16.5和E18.5 d的ICR胎鼠头部,常规组织学处理,制备5μm厚矢状或冠状切片,用免疫组织化学方法检测versican核心蛋白与其硫酸软骨素多糖链在下颌第一磨牙牙胚组织中的时空表达。结果从小鼠下颌第一磨牙牙胚开始发生到钟状晚期,versican核心蛋白与4-硫酸软骨素在牙源性上皮及其衍生组织共表达。在牙乳头间充质细胞中versican核心蛋白开始与6-硫酸软骨素共表达,从钟状早期4-硫酸软骨素开始在内釉细胞深层的牙乳头间充质细胞间表达,且其与6-硫酸软骨素呈互补表达模式。结论 versican之硫酸软骨素多糖链在牙胚发生过程中硫酸化模式呈现时间-空间特异性改变,这种特异性改变可能与小鼠磨牙牙胚的形态发生以及细胞增殖与分化密切相关。     

嗅鞘细胞抑制脊髓损伤后硫酸软骨素蛋白聚糖表达的实验研究

目的:探讨嗅鞘细胞(OECs)移植的治疗作用及其对影响硫酸软骨素蛋白聚糖类分子(CSPGs)表达的影响。方法:将培养的OECs移植于脊髓半横断的Wistar大鼠,移植术后对模型进行数个时间点的BBB运动功能评分,损伤即移植术后4周,对实验组和对照组动物取材,进行免疫组织化学和Western blotting检测。结果:移植后4周,实验组动物的BBB评分高于对照组动物。免疫组织化学和Western blotting检测发现,实验组动物损伤处CSPGs物质表达低于对照组动物。结论:OECs促进脊髓损伤动物运动功能恢复的作用可能与抑制CSPGs分子表达有关。     

Proteoglycan and glycosaminoglycan from human femoral head cartilage

The composition and the size of proteoglycans (PGs) and glycosaminoglycans (GAGs) from femoral head cartilage of different age were determined by caesium chloride density gradient centrifugation, sepharose chromatography and chemical analysis. The results showed that the size of PG subunits from articular cartilage decreases with increasing age. In PGs and GAGs from cartilage, uronic acid and galactosamine content decreased; the ratio of in keratin sulphate to chondroitin sulphate increased; glucosamine and hydroxyproline content decreased with age The cause of degenerative changes and the measures to prevent and treat them are discussed.     

BDNF联合chABC鞘内注射对大鼠脊髓损伤修复的影响

目的 探究脑源性神经营养因子（BDNF）联合软骨素酶（chABC）鞘内注射对大鼠脊髓损伤后运动感觉功能的影响以及脊髓组织中神经干细胞、神经元、星形胶质细胞、少突胶质细胞的影响。方法 将SD大鼠分为假手术对照组（A组）,损伤对照组（B组）,chABC治疗组（C组）,BDNF治疗组（D组）,联合治疗组（E组）,采用后肢运动功能评分法（CBS）对大鼠术后1周、2周、4周和2个月后肢运动功能进行评定,苏木精-伊红（HE）染色法观察不同时间点大鼠脊髓组织变化,免疫组化法观察各组大鼠脊髓组织神经干细胞的影响,荧光免疫组化法观察各组大鼠神经元、星形胶质细胞、少突胶质细胞的变化。结果 术前各组大鼠神经功能均正常,术后1~2周,B、C、D、E各组CBS评分降低,但各组间对比差异无统计学意义（P>0.05）;术后4周~2个月,C、D、E组CBS评分逐渐降低,低于B组,差异有统计学意义（P<0.05）。与A组相比,B组不同时间点BrdU阳性细胞数目降低,差异有统计学意义（P<0.05）。脊髓损伤后1周,C、D、E组大鼠脊髓组织BrdU阳性细胞数目与B组比较,差异无统计学意义（P>0.05）;脊髓损伤后第2~4周,C、D、E组BrdU阳性细胞数高于B组,差异有统计学意义（P<0.05）。与空白对照A组比较,B组脊髓损伤后不同时间点Nestin阳性细胞数目均减少,差异有统计学意义（P<0.05）。脊髓损伤后2周、4周、2个月,C、D、E组脊髓组织Nestin阳性细胞数高于B组,差异有统计学意义（P<0.05）。脊髓损伤后1周,A组星形胶质细胞比例逐渐降低,神经元细胞比例逐渐升高。B组细胞3种细胞比例均较低,随着时间延长,神经元细胞比例缓慢升高,星形胶质细胞比例缓慢下降。C、D、E组脊髓受损后脊髓受损后4周~2个月,C、D、E组神经元比例逐渐升高,星形胶质细胞逐渐下降,与B组比较,差异有统计学意义（P<0.05）。结论 BDNF、chABC鞘内注射后对大鼠脊髓损伤后运动、感觉功能恢复具有一定的促进作用,可能与促进神经干细胞增殖以及神经元细胞的分化有关,但两者联合后效果并不显著。     

Expression of human hepatic lipase negatively impacts apolipoprotein A-Ⅰ production in primary hepatocytes from Lipc-null mice

This study aimed to examine whether expression of human hepatic lipase（hHL） exerted an intracellular effect on hepatic production of apolipoprotein（apo） A-I.The levels of secreted and cell-associated apoA-I were contrasted between primary hepatocytes isolated from Lipc-nuW and C57BL/6 mice,and between Lipc-nuW hepatocytes transfected with either hHL-encoding or control adenovirus.An HSPG-binding deficient hHL protein（hHLmt） was used to determine the impact of cell surface binding on HL action.Accumulation of apoA-I in conditioned media of primary hepatocytes isolated from Lipc-nuW mice was increased as compared to that from C57BL/6 mice.Metabolic labeling experiments showed that secretion of ＇＇S-apoA-I from Lipc-nuW cells was significantly higher than that from C57BL/6 cells.Expression of hHL in Lipc-nuW hepatocytes,through adenovirus-mediated gene transfer,resulted in decreased synthesis and secretion of ＇S-apoA-I,but not S-apoE,as compared with cells transfected with control adenovirus.Expression of HSPG-binding deficient hHLmt in Lipc-nuW cells also exerted an inhibitory effect on apoA-I production,even though hHLmt displayed impaired exit from the endoplasmic reticulum as compared with hHL.Subcellular fractionation revealed that expression of hHL or hHLmt led to increased microsome-association of apoA-I relative to non-transfected control.Expression of hHL negatively impacts hepatic production of apoA-I.     

乙酰肝素酶的分子特性及其在生理病理过程中的作用

乙酰肝素酶是目前发现的哺乳动物细胞中唯一能切割硫酸肝素蛋白多糖侧链-硫酸乙酰肝素的内源性糖苷酶,切割影响一系列生理和病理过程。对其深入研究将有助于揭示组织修复、发育、血管形成、自身免疫及肿瘤转移等生理和病理过程。本文就乙酰肝素酶分子特性及其在生理病理过程中的作用和表达调控的研究进展进行综述。     

脊髓损伤早期一氧化氮代谢变化及其对脊髓神经功能影响的实验研究

目的探讨脊髓损伤早期NO的代谢变化情况及其与脊髓神经功能的关系。方法以大白鼠为实验动物，用Alien’s打击器打击骨髓，建立中度及重度脊髓损伤模型，测量脊髓损伤后4h、12h、24h、3d、1周、2周脊髓损伤局部及血清中NO含量，并观察NO含量变化与脊髓运动神经功能恢复情况之间的关系。结果脊髓损伤后血清NO含量无明显变化，而损伤脊髓局部的NO含量在伤后4h已明显增高，在24h后达到高峰并持续2周以上，在中度脊髓损伤情况下，脊髓运动神经功能自然逐步恢复，在重度脊髓损伤情况下，脊髓运动神经功能不能恢复，而这两种脊髓损伤情况下，伤后早期损伤局部的NO含量变化情况相似。结论脊髓损伤后，NO的代谢变化表现为损伤局部NO含量迅速升高，伤后早期损伤局部NO含量迅速升高不是脊髓继发损伤的原因。     

脊柱脊髓损伤的MRI诊断

目的提高MRI对脊柱脊髓损伤诊断重要性的认识。方法回顾分析50例脊柱脊髓损伤的MRI表现。结果粉碎骨折(4例)、压缩骨折(40例)、骨折脱位(3例)、椎间盘损伤(29例)、附件骨折(3例)、韧带断裂(1例)、脊髓受压变形(12例),脊髓信号异常(21例)。结论MRI在显示脊柱序列、脱位、骨折片突向椎管压迫脊髓以及脊柱骨折与脊髓损伤的相关性方面优于CT和X线平片。     

脊髓损伤致大鼠神经源性膀胱尿动力学变化及P2Y4的表达意义

目的探讨大鼠不同平面脊髓损伤(SCI)后神经源性膀胱尿动力学变化及P2Y4的表达意义。方法健康成年SD大鼠50只,雌雄不限,体重180-220g,随机分对照组、骶髓损伤组、骶上脊髓损伤组。建立神经源性膀胱大鼠模型。28d后,进行尿动力学检测。尿动力检测完毕后,取标本用免疫组化法检测P2Y4表达情况。结果逼尿肌漏尿点压力在骶上脊髓损伤组较对照组、骶髄损伤组升高明显;逼尿肌漏尿点压在骶髄损伤组较对照组明显下降。P2Y4在骶上脊髓损伤组的表达较对照组、骶髓损伤组升高明显;P2Y4在骶髓损伤组表达较对照组明显降低。结论大鼠骶上脊髓损伤后,逼尿肌表现为反射亢进,大鼠骶髓损伤后逼尿肌表现为反射减弱。膀胱逼尿肌中P2Y4表达增高可能是引起逼尿肌反射亢进机制之一。