4种不同结核分枝杆菌检测方法对结核病的诊断价值比较

目的 利用基因芯片法、金标法检测结核抗体、抗酸染色涂片法及结核菌素试验等方法进行结核分枝杆菌的检测诊断比较,以评价不同方法在结核病诊断中的临床应用价值.方法 用基因芯片法、金标法检测结核抗体、抗酸染色涂片法及结核菌素试验对172例临床病例或临床标本进行同步检测;比较各方法的检出率、灵敏度及特异度的指标.结果 基因芯片法、金标法、抗酸染色法及结核菌素试验检测结核分枝杆菌的阳性率分别为36.0%、50.6%、11.6%和75.6%;4种方法的灵敏度分别为81.6%、73.7%、26.3%和88.2%;特异度分别为100.0%、67.7%、100.0%和34.4%.结论 基因芯片法与金标法、抗酸染色法及结核菌素试验比较,具有简便、快速、敏感性高和特异性强等优点,是临床结核病快速诊断的有效检测方法.     

基因芯片检测系统在分枝杆菌属鉴定及耐药性分析的临床应用

目的探讨基因芯片检测系统在分枝杆菌属鉴定及耐药性分析的临床应用价值,以及不同类型标本检出率的差异。方法应用基因芯片技术,对患者的痰液、脓液、胸腹水、脑脊液等标本进行分枝杆菌属DNA检测,进一步对结核分枝杆菌阳性标本进行耐药性分析。结果 900份临床样本的鉴定结果总阳性率为10.6%,洗肉水、穿刺物、脓液等阳性率较高;进一步对40份结核阳性标本进行耐利福平基因rpoB及耐异烟肼kat Gi、nhA基因检测,共有9例检测到了突变的耐药基因。结论基因芯片检测系统可以直接进行分枝杆菌属鉴定及耐药性分析,适用于不同类型标本,简便快速,灵敏度高,特异性好。     

rRNA扩增直接检测艾滋和结核共感染的结核分枝杆菌的初步研究

目的 建立一种快速、准确、简便的检测结核分枝杆菌的方法.方法 应用间接转录扩增技术,以结核分枝杆菌特异性rRNA为扩增目标,扩增片段被特异性DNA探针结合（杂交）,再经杂交保护分析法筛选,最后以化学发光仪检测被标记的rRNA.用该法检测62例临床标本.结果 62 例艾滋合并结核患者痰标本检出阳性9例.结论 rRNA扩增直接检测结核分枝杆菌方法作为结核病诊断的一项新的分子生物学检测方法,具有重要的临床应用价值.     

基因芯片技术在泌尿系统结核诊断中的应用

目的 引入一种新方法对尿液中的结核分枝杆菌进行检测.方法 留取患者24 h尿液标本,离心,收集沉淀,并从中提取DNA,用晶芯分枝杆菌菌种鉴定试剂盒对样本DNA进行检测.结果 5例尿液中的结核分枝杆菌可以被基因芯片检测出,用以辅助抗痨治疗.结论 用基因芯片方法对尿液中的结核分枝杆菌进行快速检测是可行的.     

荧光PCR探针熔解曲线法检测结核分枝杆菌耐利福平突变研究

目的对荧光PCR熔解曲线法检测结核分枝杆菌耐利福平突变方法进行临床研究,评价检测能力及在国境口岸的应用价值。方法应用荧光PCR熔解曲线法检测结核病人临床分离结核分枝杆菌,以传统药物敏感性试验为标准,获得该方法的灵敏性、特异性。结果对347例结核病人临床分离培养样本,传统药物敏感性试验检出271例利福平敏感标本,76例利福平耐药标本。荧光PCR熔解曲线法检出269例利福平敏感标本,78例利福平耐药标本,灵敏性为93.42%,特异性为97.42%,符合率为96.54%。结论荧光PCR熔解曲线法检测速度快速、灵敏度高、特异性强,可用于结核分枝杆菌利福平耐药突变的快速检测,适于国境口岸对耐多药结核病的快速筛查。     

线性探针检测技术对痰标本中耐药结核分枝杆菌快速检测的应用评价

目的评价线性探针检测技术(LPAs)直接从痰标本中检测结核分枝杆菌复合群及其对耐多药结核病的快速检测。方法连续收取193例临床涂片抗酸染色阳性的痰标本,直接用LPAs法从痰标本中进行结核分枝杆菌复合群及其对利福平和异烟肼耐药性的检测,结果与MGIT960系统药物敏感性试验以及利福平、异烟肼耐药相关基因rpoB、katG、inhA和ahpC的基因测序结果进行比较,评价线性探针检测技术从痰标本中检测耐药结核分枝杆菌的灵敏度、特异度和符合率。统计学分析采用kappa检验。结果 LPAs法对涂阳痰标本结核分枝杆菌复合群检测的灵敏度为100.0%,耐利福平、耐异烟肼和耐多药结核分枝杆菌复合群检测的灵敏度分别为96.0%(48/50)、92.8%(64/69)和90.0%(45/50),特异度分别为99.3%(142/143)、100.0%(124/124)和99.3%(142/143),符合率分别为98.4%(190/193)、97.4%(188/193)和96.9%(187/193)。结论 LPAs法能够直接从涂阳痰标本中检测耐多药结核分枝杆菌,对耐利福平和耐异烟肼菌株具有较高的灵敏度和特异度,与MGIT960系统药物敏感性试验结果的一致性较好,能够明显缩短从样本接收到得到药物敏感性试验结果的报告周期,为临床准确、快速地诊断耐多药结核病提供可靠的实验室依据,有利于耐药结核病的早期诊断。     

结核分枝杆菌插入序列6110DNA实时定量检测及其对结核病诊断价值的探讨

目的　建立一种实时定量检测结核分枝杆菌插入序列 6110 (IS6110 )DNA的方法 ,并探讨其在结核病诊断中的价值。方法　采用Taqman技术和Lightcycler定量PCR仪对结核分枝杆菌IS6110DNA进行实时定量检测。结果　对 2 13例临床送检的各类标本进行检测 ,3 2例阳性 ,阳性率为 15 0 2 %,阳性标本的定量结果范围为 3 1～ 7 2× 10 6copies/ml,对结核病诊断的灵敏度为82 76%,特异性为 95 65 %。结论　结核分枝杆菌IS6110DNA实时定量检测是一种快速有效的结核病诊断的方法     

基因芯片技术在雅安市结核分枝杆菌耐药检测中的应用

目的评价基因芯片技术在雅安市结核分枝杆菌耐药检测工作中的应用价值。方法收集2016-06/2018-11雅安市结核病可疑患者痰培养分离株190株进行基因芯片菌种鉴定、耐药检测和比例法药敏试验。以比例法药物敏感试验为金标准,分析基因芯片技术检测结核分枝杆菌对利福平、异烟肼和耐多药诊断的敏感度、特异度、正确指数。采用McNemar检验比较两方法有无差异;采用Kappa检验比较两方法的一致性。两方法有差异的部分样本用基因测序的方法进行比对。结果基因芯片技术进行菌种鉴定,190株分离株中,有186株为结核分枝杆菌,4株为非结核分枝杆菌。以传统比例法药敏试验为金标准,186株结核分枝杆菌对利福平检测的敏感度和特异度为90.0%和96.6%,正确指数为0.866;对异烟肼检测的敏感度和特异度分别为89.5%和99.4%,正确指数为0.889;对耐多药的敏感度和特异度分别75.0%和99.4%,正确指数0.744。两种检测方法比较差异均无统计学意义(McNemar检验,P值分别为0.125、1.000和1.000)。两种检测方法具有较高的一致性(Kappa值分别为0.701、0.910、0.792)。基因芯片技术检测利福平耐药相关rpoB基因突变率最高的位点为531;异烟肼耐药相关katG基因主要突变位点为315。结论基因芯片技术与比例法药敏试验具有较好的一致性,灵敏度高、特异性好,是一种值得推广的耐药结核病诊断方法,在地市级结核病检测中具有重要的应用价值。     

基因芯片法菌种鉴定技术在非结核诊断中的应用

目的应用基因芯片法菌种鉴定技术研究丽水地区非结核分枝杆菌分布情况,探讨其在临床非结核诊断中的应用价值。方法应用基因芯片法菌种鉴定技术检测84例改良罗氏法阳性的分枝杆菌,比较2种方法菌种鉴定的一致率,并记录具体菌型。结果 84株PNB阳性菌株菌种鉴定后获得7株结核复合群和77株非结核分枝杆菌,种群分布达8种,最常见的是胞内分枝杆菌,占71.4%。传统罗氏培养方法和基因芯片法菌种鉴定共有77例检测结果一致,一致率为91.7%。鸟分枝杆菌、龟-脓肿分枝杆菌、堪萨斯分枝杆菌、戈登分枝杆菌、马赛分枝杆菌对异烟肼、利福平、链霉素、乙胺丁醇全部耐药,胞内分枝杆菌对异烟肼、利福平、链霉素全部耐药,对乙胺丁醇耐药率为91.7%。结论丽水地区分枝杆菌中以胞内分枝杆菌、龟-脓肿分枝杆菌、鸟分枝杆菌为主。开展NTM菌种鉴定对鉴别诊断和有效治疗有重要意义。     

分子信标荧光定量PCR法在结核病临床诊断中的应用

[目的]评价分子信标荧光定量PCR法检测临床标本中结核分枝杆菌的应用价值.[方法]分别采用分子信标荧光定量PCR法、抗酸染色法和集菌培养法检测272例肺结核临床标本,比较3种方法的检出率,分析有无差异.[结果]分子信标荧光定量PCR法的检出率显著高于抗酸染色法和集菌培养法,阳性率分别为66.91%、10.75%和43.01%.[结论]分予信标荧光定量PCR法检测临床样本中结核分枝杆菌具有快速、敏感和特异性高的特点,可为结核病的临床诊断提供一种快速、准确的病原学诊断手段,具有重要的临床意义.