腺病毒载体介导的PML生长抑制因子对前列腺癌细胞生长和致瘤能力的抑制效果

为探讨用腺病毒载体携带ＰＭＬ（ＰｒｏｍｙｅｌｏｃｙｔｉｃＬｅｕｋｅｍｉａ）基因作为前列腺癌基因治疗的可能性，应用重组人携带ＰＭＬ基因腺病毒（ＡｄＰＭＬ）感染培养的前列腺癌细胞，观察表达ＰＭＬ蛋白的癌细胞与对照组癌细胞的体外生长和裸鼠体内致瘤能力变化，对荷瘤裸鼠瘤体周围注射ＡｄＰＭＬ，观察治疗组和对照组肿瘤生长的变化。结果显示，感染ＡｄＰＭＬ的前列腺癌细胞体外生长和裸鼠体内致瘤能力明显下降，荷瘤裸鼠瘤体周围注射ＡｄＰＭＬ后肿瘤生长速度明显减慢。证实了ＰＭＬ是一种生长抑制因子，提示其可能被应用于前列腺癌的基因治疗研究     

PML生长抑制因子在前列腺癌组织中的表达及其意义

应用免疫组化方法检测了４０例不同分化程度的前列腺癌组织中早幼粒细胞白血病基因（ＰＭＬ）蛋白的表达变化。结果显示：ＰＭＬ蛋白在癌组织中的表达总水平较其周围的非癌组织中明显减弱，而低分化和未分化癌组织中的表达总水平又较高、中分化癌组织明显减弱，其中一些呈浸润生长的低分化癌组织ＰＭＬ蛋白表达甚至消失。提示ＰＭＬ蛋白表达变化可能和前列腺癌的分化、浸润转移有关。     

腺病毒载体介导的PML生长抑制因子对前列腺癌细胞生长和致瘤能力的 …

为探讨用腺病毒载体携带ＰＭＬ基因作为前列腺癌基因治疗的可能性，应用重要组人携带ＰＭＬ基因腺癌感染培养的前列腺癌细胞，观察表达ＰＭＬ蛋白的癌细胞与对照组癌细胞的体外生长的裸鼠生长和裸鼠体内致瘤能力变化，对荷瘤裸鼠瘤体周围注射Ａｄ－ＰＭＬ，观察治疗组和对照组肿瘤生长的变化。结果显示，感染Ａｄ－ＰＭＬ后肿瘤生长速度明显减慢。证实了ＰＭＬ是一种生长抑制因子，提示其可能被应用于前列腺癌的基因治疗研究 。     

RNAi沉默STAT3基因对人前列腺癌PC3细胞裸鼠移植瘤生长的抑制作用

目的 探讨pSilencer1．0-U6-siRNA-STAT3重组质粒对人前列腺癌细胞PC3裸鼠移植瘤生长的抑制作用。方法 采用裸鼠前列腺癌模型模拟siRNA—STAT3基因治疗实验，观察siRNA—STAT3重组质粒的抗瘤疗效，Western blot法检测重组质粒对STAT3基因表达的影响，HE及Tunel染色方法观察肿瘤组织形态及细胞凋亡情况。结果 肿瘤接种后第49天重组质粒组肿瘤体积为（391±56）mm^3，盐水对照组为（1111±182）mm^3，空质粒对照组为（981±169）mm^3，与对照组相比，差异有统计学意义（P〈0．01）；重组质粒抑制瘤体内STAT3及pTyr-STAT3基因表达率分别为77％及68％，与对照组比较，差异有统计学意义（P〈0．01）。HE染色证实重组质粒组出现大片细胞核固缩、破碎等凋亡征象，Tunel染色显示癌组织出现大量细胞凋亡。结论 pSilencer1．0-U6-siRNA-STAT3重组质粒能明显抑制人前列腺癌细胞PC3裸鼠移植瘤的生长，具有良好的应用前景。     

E-cadherin在前列腺癌细胞中的表达及与预后的关系

目的　探讨上皮细胞粘附因子Ｅｃａｄｈｅｒｉｎ 在前列腺癌组织中的表达及其与前列腺癌预后的关系。　方法　采用免疫组织化学染色法检测４２ 例前列腺癌标本Ｅｃａｄｈｅｒｉｎ 的表达。　结果　４０ ．５ ％ 表达阳性，４２ ．８ ％ 表达不同程度下降，１６．７ ％ 表达阴性。肿瘤恶性程度越高，其表达异常所占比率越高。确诊时即已发现肿瘤转移和随访中相继出现转移的患者Ｅｃａｄｈｅｒｉｎ 表达下降比率均高于全组，分别为８３ ．３ ％ 和７７ ．７％ 。　结论　Ｅｃａｄｈｅｒｉｎ 在前列腺癌组织中表达异常的比率随着肿瘤分级的升高而增加，Ｅｃａｄｈｅｒｉｎ 的表达状况对前列腺癌的预后有一定参考价值     

带PSA启动子的hytk基因在前列腺癌细胞中的表达

目的　构建人前列腺组织特异性的hytk基因治疗载体并探讨其临床意义。 　方法　将PSA启动子序列替代含hytk基因的真核表达载体tgCMV/hytk中的CMV启动子序列 ,应用Fu GENETM6系统转染前列腺癌细胞株并检测hytk基因的表达情况 ,MTT法检测GCV(丙氧鸟苷 )的毒性作用。　结果　成功获得带PSA启动子的真核表达载体tgPSA/hytk ,PCR、RNADotBlotting及WesternBlotting检测显示hytk基因仅在PSA阳性前列腺癌细胞株LNCaP细胞中表达 ,且转染hytk基因的LNCaP细胞对GCV敏感。　结论　含有PSA启动子的hytk真核表达载体是前列腺癌基因治疗的新型、理想候选载体     

转移抑制基因Kai1在前列腺癌中的表达

目的了解转移抑制基因Ｋａｉ１蛋白在前列腺癌（ＰＣａ）中的表达。方法采用免疫组化ＬＳＡＢ法分别测定５例正常前列腺、１０例前列腺增生症（ＢＰＨ）和３４例ＰＣａ（均为腺癌,临床Ｃ期或Ｄ期）新鲜前列腺组织中Ｋａｉ１蛋白的表达。结果Ｋａｉ１蛋白分布在腺上皮细胞膜的细胞与细胞连接部,正常前列腺和ＢＰＨ的Ｋａｉ１蛋白染色连续均匀一致,而在ＰＣａ则染色分布不连续,并且染色强度较ＢＰＨ明显降低,差异有显著性（Ｐ＜０．０１）。癌细胞Ｋａｉ１蛋白染色强度与病理分级呈负相关（Ｐ＜０．０５）,与临床分期无相关（Ｐ＞０．０５）。结论Ｋａｉ１蛋白表达下降可能预示ＰＣａ转移,成为临床判断ＰＣａ预后的分子指标。     

前列腺癌特异性基因DD3在前列腺癌患者外周血中表达的意义

目的探讨前列腺癌特异性基因DD3在前列腺癌患者外周血中表达及临床意义.方法采集44例中晚期前列腺癌（PCa）患者、20例良性前列腺增生（BPH）患者及18例健康男子外周血,分离单个核细胞,提取总RNA.RT-PCR琼脂糖电泳法检测DD3 mRNA,以β-actin为内参照,以出现311-bp和184 bP片段为DD3 mRNA阳性,仅出现184 bp片段为DD3 mRNA阴性. 结果 20例BPH患者和18例健康青年男子外周血标本中均无DD3 mRNA表达,44例PCa血标本中DD3mRNA表达13例（29.5%）.B期、C期及D期患者DD3 mRNA阳性率分别为0%（0/3）、18%（2/11）及37%（11/30）,各期之间差异无统计学意义（P＞0.05）.PCa伴骨转移患者外周血中DD3 mRNA阳性率为44%（10/22）,而无骨转移者其阳性率为14%（3/22）,组间差异有统计学意义（P＜0.05）.PCa未治疗组、去势治疗组的DD3 mRNA阳性率分别为64%（7/11）、18%（6/33）,组间差异有统计学意义（P＜0.01）.结论 PCa患者外周血中可检测到DD3 mRNA表达,DD3 mRNA可望作为诊断PCa血行转移和治疗监测的良好标志物.     

前列腺癌中P53基因突变及蛋白表达的研究

运用免疫组织化学ＬＳＡＢ法（链菌素－生物素标记法），结合ＰＣＲ－ＲＦＬＰ（ＰＣＲ限制性片段长度多态）、ＰＣＲ－ＳＳＣＰ（ＰＣＲ单链结构多态）技术，探讨了３４例前列腺癌穿刺标本中Ｐ５３蛋白表达及基因（５～８外显子）突变情况，发现３４例前列腺场中７例有Ｐ５３蛋白表达阳性，阳性率为２０．６％。２０例前列腺良性增生及１０例正常前列腺组织中Ｐ５３蛋白表达均为阴性（Ｐ＜０．０５），在前列腺癌高、中分化组及前列腺癌低、未分化组Ｐ５３蛋白表达阳性率分别为５．３％及４０％（Ｐ＜０．０５），在ＰＣＲ－ＲＦＬＰ中提示１例前列腺癌中有Ｐ５３突变，ＰＣＲ－ＳＳＣＰ中提示３例Ｐ５３基因突变（５～６外显子），一例无Ｐ５３基因扩增产物，高度怀疑为Ｐ５３基因的缺失，３４例前列腺癌中，ＣＴ及骨扫描提示有转移者为１０例，其中５例为Ｐ５３蛋白表达阳性，阳性率５０％，与非转移组阳性率比较Ｐ＜０．０５。本研究表明Ｐ５３基因突变参与前列腺癌的发生发展过程，与其转移的生物学行为关系密切。分析了以上不同方法在检测Ｐ５３基因突变中的价值。     

前列腺增生和癌变组织中碱性成纤维细胞生长因子的表达及其临床意义

为了探讨碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）在前列腺组织中表达、分布情况及临床意义，应用免疫组化方法检测１４例正常前列腺（ＮＰ）、５６例前列腺增生症（ＢＰＨ）和３３例前列腺癌（Ｐｃａ）组织中ｂＦＧＦ的分布和表达。结果显示：ＢＰＨ中ｂＦＧＦ阳性率为６４３％，主要分布于间质细胞核，部分间质细胞浆、少数腺上皮细胞浆也见阳性染色；Ｐｃａ中ｂＦＧＦ阳性表达位于癌细胞浆，阳性率为８４８％，但ｂＦＧＦ表达强度与Ｐｃａ的病理分级、临床分期无明显关系；正常前列腺组织中ｂＦＧＦ表达均为阴性，三者之间阳性率差异有显著意义，表明ｂＦＧＦ参与ＢＰＨ、Ｐｃａ发生过程。     

前列腺肿瘤中雄激素受体基因突变的研究

为了探讨雄激素受体基因突变与前列腺癌和前列腺增生症发生发展的关系，采用多聚酶链反应单链构象多态分析技术对未经治疗的２０例前列腺癌和２０例前列腺增生症组织中雄激素受体基因第８外显子突变情况进行检测。结果：在２例晚期前列腺癌和１例前列腺增生症组织中检出雄激素受体基因第８外显子突变，２例晚期前列腺癌患者经内分泌治疗后均在９个月内复发。结果认为：前列腺癌中雄激素受体基因突变可能是不常见的，但雄激素受体基因突变与前列腺癌对内分泌治疗产生抵抗关系密切；对雄激素受体基因突变与前列腺增生症的关系有必要作进一步研究。     

p16基因修饰的小鼠肾癌细胞体内致瘤性观察

目的　探讨 p16基因修饰后小鼠肾癌细胞体内致瘤性的变化。　 方法　将携带 p16基因腺病毒体外转染的小鼠肾癌Renca细胞 ,p16基因修饰的肾癌细胞、野生型肾癌细胞及对照基因LacZ修饰的肾癌细胞分别接种于小鼠皮下 ,观察肿瘤生长情况及小鼠存活时间 ,每组 10只小鼠。　结果　经p16基因修饰的肾癌细胞在小鼠体内出现肿瘤的时间在Adp16基因实验组比野生型对照组及AdLacZ对照组晚 5天 ,且肿瘤生长缓慢 (P <0 0 5 )。小鼠存活时间 :野生型对照组为 (2 7.0±2 2 )d ,AdLacZ组为 (2 9.0± 2 .5 )d ,Adp16基因实验组为 (5 2 .0± 3 .4)d ,并有 3只小鼠长期存活。肿瘤局部 p16蛋白表达测定显示p16基因已转入肿瘤细胞 ,并在癌体内有效表达。　 结论　p16基因的导入能降低小鼠肾癌细胞的体内致瘤性 ,显著延长荷瘤小鼠的存活期。     

人抑癌基因PTEN对前列腺癌细胞系生物学行为的影响

目的　探讨外源性人抑癌基因PTEN表达对前列腺癌细胞系LNCaP、DU 14 5细胞增殖和侵袭转移能力的影响。　方法　利用携带人PTEN基因的可调控性腺病毒 (Ad PTEN ) ,体外转染人前列腺癌细胞系LNCaP、DU 14 5,RT PCR、Westernblot检测目的基因不同水平的表达 ,通过细胞生长试验、流式细胞仪分析技术以及Boyden小室法检测LNCaP、DU 14 5转染前后细胞增殖、细胞周期、细胞凋亡和细胞体外侵袭力的变化。　结果　转染Ad PTEN后LNCaP、DU 14 5细胞的PTEN表达由阴性转为阳性 ,转染后对LNCaP、DU 14 5细胞生长有抑制作用 ,阻滞于G0 ～G1期 ,早期细胞凋亡率增加 ,LNCaP细胞 (6.89± 0 .51) % ;DU14 5细胞 (5.44± 1.13 ) % ,与对照组相比差异有显著性 ,Boyden小室法检测转染后体外侵袭力受到明显抑制。 　结论　重组腺病毒介导的人PTEN基因在体外对前列腺癌细胞系LNCaP、DU 14 5的细胞增殖和体外侵袭力有明显抑制作用 ,可望作为前列腺癌基因治疗的有效工具     

急性早幼粒细胞白血病基因生长抑制因子在前列腺癌和前列腺增生组织中的表达及意义

目的：探讨急性早幼粒细胞白血病基因(PML)在人类前列腺癌(PCa)组织、癌周围组织以及前列腺增生症(BPH)前列腺组织中的表达及意义。方法：应用免疫组化方法检测23例PCa标本、38例BPH组织标本中PML的表达情况。结果：BPH组织中阳性表达共35例，弱阳性表达2例，总阳性表达率97．37％，PCa组织中阳性表达l例，弱阳性表达8例，总阳性表达率39．13％，两者差异有显著性意义(P＜0．05)。PML在癌组织中表达比癌旁组织中表达明显降低(P＜0．05)。而PML在癌旁组织和增生组织中表达基本一致。结论：PML在人类PCa组织中比良性BPH组织中表达明显减弱，而且与PCa的病理分级有关。提示PML可能是一种广谱的生长抑制因子和转录抑制因子，它的表达减弱或丢失可能与肿瘤的发生、发展及转移有关。     

nm23基因在前列腺癌中的表达与癌转移的关系

应用ＬＳＡＢ免疫组织化学染色方法，研究转移抑制基因ｎｍ２３表达产物二磷酸核苷激酶（ＮＤＰＫ）在前列腺癌中的表达及其意义。结果表明，ＮＤＰＫ／ｎｍ２３在前列腺癌中有较高的表达，阳性率为５００％（２０／４０）。无前列腺癌转移者其阳性率为６６７％（１２／１８），有前列腺癌转移者其阳性率为３６４％（８／２２），两者比较差异有显著性（Ｐ＜００５），并与前列腺癌分化程度和临床分期有显著相关。因此，ｎｍ２３基因可能在前列腺癌形成及转移过程中起不同的调节作用，其表达程度与前列腺癌转移呈负相关，有可能成为评价前列腺癌病人预后的一项新指标。