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1.
ⅡCD34抗原表达与对化疗药物的敏感性 总被引:3,自引:0,他引:3
体外细胞毒法(四唑盐法)检测36例急性髓系白血病(AML)细胞对阿糖胞苷(Ara-C)、高三尖杉酯碱(HHr)、柔红霉素(DNR)、阿克拉霉素(Acla)、长春新碱(VCR)、足叶乙甙(VP-16)的敏感性,同时用碱性磷酸酶抗碱性磷酸酶(APAAP)法检测其CD_(34)抗原,并与临床化疗疗效比较。发现Ara-C、HHr、VP-16中敏组CD_(34)抗原的表达较高敏组高(P<0.05),DNR、Acla、VCR耐药组较中敏组高,差异亦显著(P<0.05),六种化疗药物耐药组CD_(34)抗原的表达均较高敏组高(P<0.05)。诱导化疗第一疗程后骨髓原始细胞减少指数(MBDI)值<40组,40~60组及>60组组间CD_(34)抗原的表达差异显著(P<0.05)。AML化疗完全缓解,部分缓解与未缓解组组间CD_(34)抗原表达差异亦显著(P<0.05)。复发患者CD_(34)抗原的表达较初诊者高(P<0.05)。CD_(34)阳性白血病细胞对化疗药物具有抗药性,除因其处于静止期(G_0期)外,可能与多药耐药基因(MDR1)的高水平表达有关。 相似文献
2.
重组人造血干细胞因子基因在人造血干/祖细胞的转移和表达 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:拓展造血干细胞因子(SCF)的研究和基因治疗途径。方法:利用基因重组技术,构建了编码可溶性人SCF基因的逆转录病毒载体pLXSN-SCF,应用脂质体lipofectin基因转移法将重组质粒导入Ψ2和PA317病毒包装细胞,经G418选择性培养基筛选,获得产重组病毒的包装细胞PA317/SCF,其病毒效价为(2.4~8.5)×105CFU/ml,继而感染人造血干/祖细胞。应用多聚酶链反应、APAAP免疫组化染色和化学发光-直接酶标法检测人SCF基因在细胞中转移和表达。结果:逆转录病毒载体介导的rhSCF基因在人造血干/祖细胞中获得有效转移和表达。结论:为进一步研究SCF的生物学特性及开展干细胞移植等提供了一定的途径。 相似文献
3.
重组人单链白细胞介素12融合基因的构建、真核表达及生物学活性测定 总被引:3,自引:0,他引:3
目的 探讨用生物学技术获取具有生物学活性的重组人白细胞介素12(rhIL-12)的方法。方法 从经佛波醇酯(PDBu)刺激的EB病毒转化的人B淋巴母细胞株NC-37中提取mRNA,经逆转录-聚合酶链反应分别获得hIL-12p40和p35亚单位编码序列的cDNA,运用重组聚合酶链反应技术。将两段基因通过多肽接头(Gly4Ser)3DNA序列连接后进行基因重组,构建了重组人单链IL-12融合基因(rh-scIL-12)。进一步将rhscIL-12融合基因插入pcDNA3.1(+)真核表达载体中,构建rhscIL-12真核表达载体「pcDNA3.1(+)-rhscIL-12」,转染COS-7细胞,结果 经G418筛选获COS-rhscIL-12融合蛋白稳定表达株,Western blot显示该融合蛋白相对分子质量为7 相似文献
4.
目的:研究登革病毒E基因免疫的可行性,方法:用脂质体转染法将构建的E基因重组真核表达质粒pcDNA3-E导入小鼠成纤维细胞NIH3T3细胞,SDS_PAGE和蛋白质印迹实验检测E基因的体外表达,然后将重组真核表达质粒经肌肉注射免疫BABL/c小鼠,检测其诱发特异性体液和细胞应答水平。结果:重组真核表达质粒,pcDNA3-E在小鼠体内诱发一一定水平的体液和细胞免疫应答,且持续时间较长,结论:登革病毒 相似文献
5.
目的:探讨组织相容性抗原Ⅱ类(MHC-Ⅱ)基因反义RNA是否可调控脐血细胞MHC-Ⅱ类基因的表达及降低脐血细胞的免疫原性和脐血细胞移植时发生移植物抗宿主反应(GVHR)的程度。方法:应用分子克隆技术构建了含人HLA-DRβ基因的逆转录病毒表达载体,经过狭缝杂交、电泳、酶切分析鉴定,获得了HLA-DRβ基因反义RNA重组体,用lipofectin(脂质体)将重组体导入包装细胞PA317。结果:产重组病毒的细胞PA317的病毒滴度可达1×105cfu/ml。用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)可从转染的脐血干细胞中扩增出DR-β基因cDNA,说明反义RNA重组体目的基因已有效表达。用流式细胞仪测定转染的脐血细胞HLA-DR抗原阳性细胞率为28%(对照组为45%),其抑制率为38.2%。结论:导入脐血干细胞的HLA-DR基因反义RNA重组体成功地降低了其HLA-DR抗原的表达程度,为临床上降低脐血移植的GVHR提供了理论依据和实验基础。 相似文献
6.
HCV结构区重组质粒构建,蛋白表达及小鼠对重组质粒抗体 … 总被引:2,自引:0,他引:2
为进行HCV-DNA疫苗实验研究,通过分子克隆技术构建了HCV-DNA重组质粒(含有HCV结构区基因片段1693bp,OkamotoII型)将其转染到Hela细胞中,蛋白抽提物经SDS-PAGE表明,重组质粒能表达约110KD的融合蛋白,经Westernblot证实该融合蛋白为特异性的HCV结构区蛋白。用核酸免疫方法,将构建的重组质粒注射BALB/c小鼠,经ELISA检测到免疫鼠能产生特异性抗体。 相似文献
7.
急性髓系白血病细胞CD34抗原表达的研究:Ⅰ表达特点和临床意义 总被引:15,自引:0,他引:15
对56例初发急性髓系白血病(AML)细胞CD_(34)抗原的表达作了检测,分析了CD_(34)抗原表达与临床表现及化疗疗效的关系。结果显示,AML细胞的CD_(34)表达率存在很大差别,从1%~85%;56例AML中CD_(34)阳性表达病例为23例,占41.1%。CD_(34)抗原表达与FAB形态学分型无关,但M_3型的表达阳性率明显低于M_1、M_2型。CD_(34) ̄+病例组与CD_(34) ̄-病例组在年龄、性别及初发时白细胞总数、血红蛋白浓度、血小板计数等均无明显差异;在诱导化疗疗效上,CD_(34) ̄+组完全缓解率为43.5%,明显低于CD_(34) ̄-组的72.7%。研究结果提示,AML细胞在CD_(34)抗原的表达上存在异质性;并具有一定的预后判断价值,建议对CD_(34) ̄+病例施行更为有效的、可能需与CD_(34_ ̄-病例不同的化疗。 相似文献
8.
家兔脑缺血再灌注损伤机制的研究 总被引:2,自引:0,他引:2
用家兔四动脉闭塞法建立急性完全性脑缺血后给予再灌注,观察缺血前后及再灌注后脑组织部分电解质和含水量、脑组织和血液丙二醛(MDA)、环核昔酸(cAMP、cGMP)、血栓烷B_2(TxB_2)、6-酮-前列腺素F_(1α)(6-keto-PGF_(1α)含量、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱苷肽过氧化物酶(GSH-Px)活性改变。结果:再灌注后实验组脑组织Ca ̄(2+)、MDA、TxB_2和cAMP较对照组升高(P<0.05),GSH-Px活性、6-keto-PGF_(1α)含量降低(P<0.05);实验组血液中cAMP含量高于对照组(P<0.05)。提示脑组织Ca ̄(2+)过载、氧自由基增多、cAMP/cOMP和PGI_2/TXA_2比值异常在脑缺血再灌注损伤中起着重要的作用。 相似文献
9.
用造血因子体外培养5例正常人和15例急性髓细胞白血病(AML)患者的骨髓单个核细胞,同时用碱性磷酸酶抗碱性磷酸酶法(APAAP)检测培养0,5,10天时两组造血干、祖细胞和髓系分化阶段标志抗原(CD34、CD38、CD13、CD11b、CD15)表达的变化,研究AML细胞抗原分化途径和阻滞点。结果显示AML细胞虽然在培养0~5天能沿正常髓系分化途径分化成熟,但培养6~10天间AML细胞则不能象正常骨髓细胞一样继续分化成熟,表现在CD34+、CD38+、CD13+细胞持续升高。证明AML细胞自身存在独特的调控失常机制 相似文献
10.
摘要:目的 分析南宁市先天性甲状腺功能减退症壮族患儿促甲状腺激素受体(TSHR)基因突变及其特点。方法 以 21 例患
有先天性甲状腺功能减退症的壮族患儿及其父母为研究对象。提取患儿及其父母的外周血 DNA,采用荧光定量 PCR 扩增
TSHR 基因所有 12 个外显子、外显子-内含子交界区以及 3′端和 5′端非翻译区,利用第一代测序法对基因扩增产物进行测序
并进行分析。结果 21 例患儿中的 12 例存在 TSHR 基因突变,分别为 c.C805A(p.R269S)纯合突变 6 例,c.C154A(p.P52T)和 c.C805A(p.R269S)复合杂合突变 1 例,c.C805A(p.R269S)杂合子复合 c.G2181C(p.E727D)纯合突变 1 例,c.C805A(p.R269S)
杂合子突变 4 例。40 例父母中存在的 TSHR 位点基因突变分别为 c.C154A(p.P52T)1 例,c.G2181C(p.E727D)9 例,c.C805A
(p.R269S)24 例。结论 先天性甲状腺功能减退症患儿的发病与父母 TSHR 基因具有遗传相关性,新发现的 c. C805A
(p.R269S)基因突变位点可能是壮族人群遗传性先天性甲状腺功能减退症的主要突变位点 相似文献