白细胞介素6基因转移的白血病细胞体内诱导小鼠免疫功能的实验研究

作者观察了人白细胞介素６（ＩＬ－６）基因转移的、能高分泌ＩＬ－６的ＦＢＬ－３红白血病细胞对机体抗肿瘤免疫功能的影响。结果发现，高分泌ＩＬ－６的红白血病细胞接种到小鼠体内后，能显著提高小鼠脾脏的细胞毒性Ｔ淋巴细胞、ＮＫ活性及ＩＬ－２诱导的ＬＡＫ活性，小鼠脾细胞诱生的ＩＬ－２、肿瘤坏死因子和粒－巨噬细胞系集落刺激因子水平亦增高，腹腔巨噬细胞杀伤活性明显增强。结果表明，高分泌ＩＬ－６的ＦＢＬ－３红白血病细胞体内接种后能显著地增强机体的抗肿瘤免疫功能。研究结果为白血病的生物治疗以及ＩＬ－６基因转移的新型瘤苗的应用研究提供了实验依据。     

白细胞介素6基因转染的白血病细胞克隆株的建立及其生物学特性的观察

作者将人白细胞介素６（ＩＬ－６）基因转染至ＦＢＬ－３红白血病细胞，建立了高分泌ＩＬ６的ＦＢＬ－３细胞克隆株，并观察了其生物学特性。采用磷酸钙ＤＮＡ共沉淀法将ＩＬ－６表达载体ＢＣＭＧＮｅｏ－ＩＬ－６转移至ＦＢＬ－３细胞中，通过Ｇ４ｌ８抗性筛选、有限稀释法和上清中ＩＬ－６活性的测定，从多株阳性克隆中筛选到一株高分泌ＩＬ－６（２２５．６Ｕ／ｍｌ）的克隆株。体外观察表明，ＩＬ－６基因转染的ＦＢＬ－３细胞体外生长能力、集落形成能力均减弱，且其生长抑制程度与分泌ＩＬ－６水平呈正相关。给小鼠皮下接种后肿瘤结节形成率降低，生长速度减慢，荷瘤小鼠存活期延长。以上结果表明，ＩＬ－６基因转染的ＦＢＬ－３细胞致瘤性下降，这为将该细胞制备成新型瘤苗治疗白血病打下了基础。     

白细胞介素6基因转染的白血病细胞克隆株的建立及其生物学…

作将人白细胞介素６（ＩＬ－６）基因转汾至ＦＢＬ－３红白血病细胞，建立了高分泌ＩＬ－６的ＦＢＬ－３细胞克隆株，并观察了其生物学特性，采用磷酸钙ＤＮＡ共沉淀法将ＩＬ－６表达载体ＢＣＭＧＮｅｏ－ＩＬ－６转移至ＦＢＬ－３细胞中，通过Ｇ４１８抗性筛选，有限稀释法和上清中ＩＬ－６活性的测定，从多株阳性克隆中筛选到一株高分泌ＩＬ－６的克隆株，体外观察表明，ＩＬ－６基因转染的ＦＢＬ－３细胞体外生长能力，集落形成     

白细胞介素2基因和白细胞介素3基因共转染白血病瘤苗的抗白…

目的：研究白细胞介素２（ＩＬ－２）和白细胞介素３（ＩＬ－３）基因共转染的白血病细胞瘤苗对白血病的小鼠的治疗效果。方法：用ＩＬ－２重组腺病毒（Ａｄ－ＩＬ－２）和（或）ＩＬ－３重组腺病毒转染红白轿病细胞株ＦＢＬ－３，＾６０Ｃｏ射后制备成瘤苗对实验性白血病小鼠进行治疗，观察肿瘤生长，小鼠生存期及治疗后小鼠腹腔巨噬细胞，ＮＫ细胞，诱导杀伤性Ｔ淋巴细胞（ＣＴＬ）杀伤活性，并与低剂量环磷酰胺合用，观察其抗肿瘤     

IL—6基因转染的白血病细胞不同条件下小鼠体内外分泌IL—6水…

为了解白细胞介素６（ＩＬ－６）基因转染的高分泌ＩＬ－６的ＦＢＬ－３红白血病细胞（ＦＢＬ－３－ＩＬ－６）株体内外的生物学特性，动态观察在不同剂量＾６０Ｃｏγ射凰其ＩＬ－６的分泌水平，同时动态观察经腹腔、局部皮下注射途径将其移植入Ｃ５７ＢＬ／６小鼠体内后，血清和局部细胞培养上清液中ＩＬ－６含量。结果表明，ＦＢＬ－３－ＩＬ－６细胞以８Ｇｙ照射剂量为制备瘤苗的最佳照射剂量。照射后２周内一直保护较高水平的Ｉ     

IL-6基因转染的白血病细胞不同条件下小鼠体内外分泌IL-6水平的研究

为了解白细胞介素６（ＩＬ－６）基因转染的高分泌ＩＬ－６的ＦＢＬ－３红白血病细胞（ＦＢＬ－３－ＩＬ－６＋）株体内外的生物学特性，动态观察在不同剂量６０Ｃｏγ射线照射后其ＩＬ－６的分泌水平，同时动态观察经腹腔、局部皮下注射途径将其移植入Ｃ５７ＢＬ／６小鼠体内后，血清和局部细胞培养上清液中ＩＬ－６含量。结果表明，ＦＢＬ－３－ＩＬ－６＋细胞以８Ｇｙ照射剂量为制备瘤苗的最佳照射剂量，照射后２周内一直保持较高水平的ＩＬ－６分泌量。体内移植时，经腹腔途径注入后可测得一定浓度的血清ＩＬ－６，皮下注入时注射局部细胞培养上清中亦有一定水平的ＩＬ－６。为将该细胞作为治疗白血病瘤苗及其注射间隔时间提供了实验依据。     

白细胞介素2基因和白细胞介素3基因共转染白血病瘤苗的抗白血病作用的实验研究

目的：研究白细胞介素２（ＩＬ－２）和白细胞介素３（ＩＬ－３）基因共转染的白血病细胞瘤苗对白血病小鼠的治疗效果。方法：用ＩＬ－２重组腺病毒（Ａｄ－ＩＬ－２）和（或）ＩＬ－３重组腺病毒（Ａｄ－ＩＬ－３）转染红白血病细胞株ＦＢＬ－３，６０Ｃｏ照射后制备成瘤苗对实验性白血病小鼠进行治疗，观察肿瘤生长，小鼠生存期及治疗后小鼠腹腔巨噬细胞、ＮＫ细胞、诱导杀伤性Ｔ淋巴细胞（ＣＴＬ）杀伤活性，并与低剂量环磷酰胺（ＣＴＸ）合用，观察其抗肿瘤作用。结果：用ＩＬ－２或ＩＬ－３基因转染瘤苗治疗的白血病小鼠肿瘤生长明显减缓，生存期显著延长（Ｐ＜０．０５），用联合转染ＩＬ－２和ＩＬ－３基因的瘤苗治疗较单独转染ＩＬ－２或ＩＬ－３基因的瘤苗治疗效果更佳，与低剂量ＣＴＸ合用后抗肿瘤效果最佳。治疗后小鼠腹腔巨噬细胞、ＮＫ细胞、ＣＴＬ细胞杀伤活性显著增强。结论：ＩＬ－２、ＩＬ－３基因转染的瘤苗能够有效地通过诱导机体抗肿瘤免疫功能而发挥抗肿瘤作用，与低剂量ＣＴＸ合用后，抗肿瘤效果更佳。     

肿瘤坏死因子对急性白血病LAK细胞抗肿瘤活性的增强作用

采用基因重组肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）与白细胞介素２（ＩＬ－２）联合诱导急性白血病患者外周血单个核细胞，结果表明：ＴＮＦ（５００Ｕ／ｍｌ）单独不能诱导出ＬＡＫ细胞活性，也不能进一步提高最适剂量ＩＬ－２（１０００Ｕ／ｍｌ）诱导的ＬＡＫ细胞活性，但能显著增强亚适剂量ＩＬ－２（１０～１００Ｕ／ｍｌ）诱导的ＬＡＫ细胞活性。抗ＴＮＦ单抗和抗ＩＬ－２受体β链（Ｐ＿（７５））单抗能显著抑制ＴＮＦ／ＩＬ－２对ＬＡＫ细胞活性的协同诱导作用。ＴＮＦ与ＬＡＫ细胞联合可显著增强对白血病细胞的杀伤活性。     

IL—2基因修饰增强白血病抗原冲击的树突状细胞诱导的抗肿瘤？…

目的 研究腺病毒介导的白细胞介素（ＩＬ）２基因修饰能否使抗原冲击的树突状细胞（ＤＣ）在体内诱导出更强的抗肿瘤免疫反应。方法 用小鼠粒－巨噬细胞击落刺激因子（ｍＧＭ－ＣＳＦ）和ｍＩＬ－４扩增上鼠骨髓ＤＣ在ＦＢＬ－３红白血病细胞冻融抗原冲击的同时转染ＩＬ－２腺病毒。观察其体外分泌ＩＬ－２的水平,刺激Ｔ细胞增殖的能力,其体内皮下免疫后小鼠引流淋巴结细胞数和组分的变化以及主艉地产生细胞毒性Ｔ淋巴细胞（ＣＴ     

人白细胞介素6基因转移的成纤维细胞对自然杀伤活性的增强作用

应用磷酸钙共沉淀法将人白细胞介素６（ＩＬ－６）基因转入成纤维细胞ＨＩＨ３Ｔ３，经Ｇ４１８抗性筛选和有限稀释法，从１２株阳性细胞克隆中选出一株高分泌ＩＬ－６克隆（代号为Ｔ６．６）。Ｔ６．６培养上清能显著增强自然杀伤（ＮＫ）活性，当与ＩＬ－２合用时增强效果更佳，抗ＩＬ－６单抗能阻断这种增强作用。将Ｔ６．６大量扩增后植入小鼠腹腔，４８小时后血清中可检测出较高水平的ＩＬ－６，且脾细胞ＮＫ活性比对照组显著升高。实验结果表明，人ＩＬ－６基因转移的成纤维细胞在体内、外均能显著增强ＮＫ活性，提示成纤维细胞介导的ＩＬ－６基因疗法可应用于抗肿瘤、抗感染和造血功能重建等。     

GM—CSF基因修饰,抗原预激的树突状细胞体内诱导白血病细胞分化？…

目的：探讨树突状细胞在肿瘤治疗过程中的作用及机制。方法：以小鼠ＦＢＬ－３红白血病细胞皮下接种Ｃ５７ＢＬ／６小鼠建立荷瘤模型，采用流式细胞仪分析和透射电镜等技术，观察了粒－巨噬细胞集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）基因修饰的抗原预激的树突状细胞体内治疗作用。结果：采用ＧＭ－ＣＳＦ基因修饰的抗原预激的树突状细胞治疗，可以明显抑制白血病细胞生长；白血病细胞表达ＣＤ３４水平增加，同时ＭＨＣ－Ⅱ，Ｂ７－１，Ｂ７－     

白血病细胞膜相关因子（MAF—J6—1）单克隆抗体的制备及性质

用部分纯化的白血病细胞膜相关因子（ＭＡＦ－Ｊ６－１）对ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠脾细胞进行体外免疫，然后与ＳＰ２／０小鼠骨髓瘤细胞融合获杂交瘤，经３次再克隆得到能产生ＭＡＦ－Ｊ６－１单克隆抗体（单抗）的杂交瘤细胞系。用ＡＢＣ免疫酶标法检测，该单抗在Ｊ６－１细胞上产生强阳性反应，并与ｒｈ－Ｍ－ＣＳＦ单抗对ＭＡＦ－Ｊ６－１及ｒｈ－Ｍ－ＣＳＦ产生交叉中和反应。ＭＡＦ－Ｊ６－１单抗还对Ｊ６－２、ＪＣＬ、Ｋ５６２等细     

白血病细胞膜相关因子（MAF－J6－1）单克隆抗体的制备及性质

用部分纯化的白血病细胞膜相关因子（ＭＡＦ－Ｊ６－１）对ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠脾细胞进行体外免疫，然后与ＳＰ２／０小鼠骨髓瘤细胞融合获杂交瘤，经３次再克隆得到能产生ＭＡＦ－Ｊ６－１单克隆抗体（单抗）的杂交瘤细胞系。用ＡＢＣ免疫酶标法检测，该单抗在Ｊ６－１细胞上产生强阳性反应，并与ｒｈ－Ｍ－ＣＳＦ单抗对ＭＡＦ－Ｊ６－１及ｒｈ－Ｍ－ＣＳＦ产生交叉中和反应。ＭＡＦ－Ｊ６－１单抗还对Ｊ６－２、ＬＣＬ、Ｋ５６２等细胞系呈膜阳性反应，对白血病患者骨髓中部分原始和幼稚的单核、粒细胞呈阳性反应。在２４例被检测的白血病患者中，有三例呈强阳性反应，ＭＡＦ－Ｊ６－１可用作研究ｍ－Ｍ－ＣＳＦ与白血病关系的工具。     

骨髓基质细胞对人多发性骨髓瘤细胞系自分泌白细胞介素6诱…

研究了小鼠骨髓基质细胞对诱导人白细胞介素６（ＩＬ－６）依赖性多发性骨髓瘤（ＭＭ）细胞自分泌ＩＬ－６的作用。结果表明：人ＭＭ细胞系ＸＧ－１培养上清（ＳＮ１）没有可检测水平ＩＬ－６活性；小鼠骨髓基质细胞系ＭＦ－Ｌ培养上清（ＳＮ２）仅有低水平ＩＬ－６活性（１００Ｕ／ｍｌ）；ＸＧ－１细胞和ＭＦ－Ｌ细胞／上清共同培养上清（ＳＮ３，ＳＮ４）均含极高的ＩＬ－６活性（１０５０Ｕ／ｍｌ），并可被ＩＬ－６单抗ＢＥ－８     

骨髓基质细胞对人多发性骨髓瘤细胞系自分泌白细胞介素6诱导作用的研究

研究了小鼠骨髓基质细胞对诱导人白细胞介素６（ＩＬ－６）依赖性多发性骨髓瘤（ＭＭ）细胞自分泌ＩＬ－６的作用。结果表明：人ＭＭ细胞系ＸＧ－１培养上清（ＳＮ＿１）没有可检测水平ＩＬ－６活性；小鼠骨髓基质细胞系ＭＦ－１培养上清（ＳＮ＿２）仅有低水平ＩＬ－６活性（１００Ｕ／ｍｌ）；ＸＧ－１细胞和ＭＦ－Ｌ细胞／上清共同培养上清（ＳＮ＿３，ＳＮ＿４）均含极高的ＩＬ－６活性（１０５０Ｕ／ｍｌ），并可被ＩＬ－６单抗ＢＥ－８特异性中和，而且不同浓度的ＳＮ＿３，ＳＮ＿４可以促进其他依赖外源性ＩＬ－６的人ＭＭ细胞系（ＸＧ－２，４，６）生长。鉴此证实了小鼠骨髓微环境基质细胞可以诱导ＭＭ细胞自分泌ＩＬ－６，后者可促进ＭＭ细胞生长。     

FLT3配基—FL研究进展

ＦＬＴ３配基（ＦＬ）是一种新近发现的与造血调控密切相关的细胞因子。在体外单独ＦＬ对造血的调控作用有限，但ＦＬ可与ＩＬ－３，Ｇ－ＣＳＦ，ＣＳＦ－１，ＧＭ－ＣＳＦ，ＳＣＦ及ＩＬ－６协同促进骨髓及脐血ＣＤ３４＾＋细胞形成粒－巨噬细胞集落，粒细胞集落或巨噬细胞集落；可与ＳＣＦ，ＩＬ－７或ＩＬ－１１协同促进Ｂ淋巴祖细胞的增殖与分化。ＦＬ有望用作造血干祖细胞体外扩增的辅助因子，在临床上用作造血细胞动员剂、免疫     

α 干扰素联合白细胞介素2对淋巴细胞中穿孔素和颗粒酶表达的影响

目的：研究α干扰素（ＩＦＮ－α）对白细胞介素２（ＩＬ－２）激活的淋巴细胞中穿孔素和颗粒酶表达的影响。方法：４小时标准５１Ｃｒ释放实验检测ＮＫ和ＬＡＫ活性，ＡＢＣ酶标法检测颗粒酶Ｂ的表达，溶血法测定穿孔素活性，ＢＬＴ法测定颗粒酶Ａ的表达。结果：ＩＦＮ－α能增强ＩＬ－２诱导的外周血淋巴细胞中ＮＫ和ＬＡＫ细胞活性。ＩＬ－２和ＩＦＮ－α分别作用于淋巴细胞１天即可增加穿孔素活性，二者联合可使活性进一步增强（Ｐ＜０．０５），于培养第３天，ＩＬ－２和联合组的穿孔素仍有高表达，但ＩＦＮ－α组则下降至对照组水平。ＩＦＮ－α和ＩＬ－２单独或联合对淋巴细胞颗粒酶Ａ和Ｂ的表达无影响。结论：ＩＦＮ－α增加ＩＬ－２激活淋巴细胞的细胞毒作用可能与其增加淋巴细胞穿孔素表达相关。     

干扰素α和白细胞介素2联合激活的白血病骨髓对K562细胞的杀…

评价于干扰素α和白细胞介素２联合激活的白血病缓解期骨髓对白血病细胞的杀伤作用。方法：半固体集浇培养法。结果：ＩＵＬ－２激活３天的白血病缓解髓对Ｋ５６２细胞有杀伤作用，杀伤对数级达０．１３－２．３０。ＩＮＦα可明显增强ＩＬ－２激活骨髓的杀伤作用，其对Ｋ５６２细胞的杀伤率可进一步提高，达０．３０〉３．１５对数级，ＩＬ－２和ＩＮＦα联合对骨髓ＣＦＵ－ＧＭ和Ｋ５６２细胞无明显抑制作用，小剂量ＩＬ－２与ＩＦ     

人骨髓瘤细胞Sko-007中的白细胞介素6信号转导途径研究

目的 研究人骨髓瘤细胞系Ｓｋｏ－００７中的白细胞介素６（ＩＬ－６）信号转导途径。方法 采用凝胶阻滞电泳和免疫常常方法观察ＩＬ－６刺激前后Ｓｋｏ－００７细胞中ＩＬ－６相关转录因子ＳＴＡＴ３、ＮＦ－ＩＬ－６、ＮＦ－ｋＢ和参与ＩＬ－６信号转导功能的蛋白激酶ＥＲＫ、ＪａｋＩ的诱导活化状态并确定该细胞中的ＩＬ－６信号转导通路。结果 转录因子ＳＴＡＴ３、ＮＦ－ＩＬ－６和蛋白激酶ＥＲＫ、Ｊａｋｌ都能在Ｓｋｏ－０     

干扰素α和白细胞介素2联合激活的白血病骨髓对K562细胞的杀伤作用

目的：评价干扰素α（ＩＦＮα）和白细胞介素２（ＩＬ－２）联合激活的白血病缓解期骨髓对白血病细胞（Ｋ５６２细胞）的杀伤作用。方法：半固体集落培养法。结果：ＩＬ－２激活３天的白血病缓解期骨髓对Ｋ５６２细胞有杀伤作用，杀伤对数级达０．１３～２．３０。ＩＦＮα可明显增强ＩＬ－２激活骨髓的杀伤作用，其对Ｋ５６２细胞的杀伤率可进一步提高，达０．３０～＞３．１５对数级，ＩＬ－２和ＩＦＮα联合对骨髓ＣＦＵ－ＧＭ和Ｋ５６２细胞无明显抑制作用。小剂量ＩＬ－２与ＩＦＮα两者联合比它们单独作用于已激活骨髓杀伤Ｋ５６２细胞的能力更强。结论：ＩＦＮα能增强ＩＬ－２激活的白血病缓解期骨髓对Ｋ５６２细胞的杀伤作用；持续加小剂量ＩＬ－２和ＩＦＮα能更有效地维持激活骨髓对Ｋ５６２细胞的杀伤效能