抗凋亡基因bcl－2在急性白血病骨髓与细胞株中的转录水平表达

采用原位杂交方法检测了急性白血病骨髓活检标本及细胞株中ｂｃｌ－２基因表达水平。结果２２例白血病患者骨髓中２１例（包括髓系和淋巴系）存在ｂｃｌ－２ｍＲＮＡ高表达；６种白血病细胞株中５种ｂｃｌ－２ｍＲＮＡ阳性（Ｍｏｌｔ－４例外），它们分别为ＣＥＭ、Ｒａｊｉ、ＨＬ－６０、Ｕ９３７及Ｋ５６２。表明造血系统肿瘤中广泛存在ｂｃｌ－２基因转录水平激活，其基因产物可能通过抑制细胞凋亡过程而影响急性白血病细胞的生物学特性。     

小儿急性淋巴细胞白血病bcl-2和c-myc转录水平表达及其意义

采用原位分子杂交方法，检测了５４例小儿急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）的ｂｃｌ－２ｍＲＮＡ和ｃ－ｍｙｃｍＲＮＡ表达水平，并与患儿临床表现进行对比分析。结果表明：小儿ＡＬＬｂｃｌ－２ｍＲＮＡ和ｃ－ｍｙｃｍＲＮＡ表达与非白血病对照组比较普遍增高，呈显著性差异（Ｐ＜００１）；ｂｃｌ－２ｍＲＮＡ与ｃ－ｍｙｃｍＲＮＡ表达水平呈明显相关（ｒ＝０８０４８，Ｐ＜００１）；两者的表达水平表明复发病例明显高于初诊病例；高危型明显高于普危型（Ｐ＜００１）。结果提示：ｂｃｌ－２和ｃ－ｍｙｃ基因的异常表达在小儿ＡＬＬ的发生发展过程中起重要作用。综合分析ｂｃｌ－２和ｃ－ｍｙｃ基因表达情况可作为评价小儿ＡＬＬ病情和恶性程度的重要指标，也可作为判断预后的指标。     

筑巢式PCR检测白血病微量残留bcr／ablmRNA

采用逆转录－筑巢式聚合酶链反应（ｎｅｓｔｅｄＰＣＲ）技术检测３３例不同临床阶段的慢性粒细胞白血病（ＣＭｕ及１８例急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）患者的ｂｃｒ／ａｂｌｍＲＮＡ。结果：３３例ＣＭＬ中３１例阳性，其中２１例表达ｂｃｒｅｘｏｎ３／ａｂｌｅｘｏｎ２ｍＲＮＡ，７例表达ｂｃｒｅｘｏｎ２／ａｂｌｅｘｏｎ２ｍＲＮＡ，２例同时表达这两种ｍＲＮＡ。在１８例ＡＬＬ中阳性６例，其中４例表达ｈｒｅｘｏｎ３／ａｂｌｅｘｏｎ２ｍＲＮＡ，２例表达ｂｃｒｅｘｏｎ３／ａｂｌｅｘｏｎ２＋ｂｃｒｅｘｏｎｌ／ａｂｌｅｘｏｎ２ｍＲＮＡ。本实验的敏感度达１０￣（－６）～１０￣（－７）水平，有助于临床上白血病微量残留病的早期诊断。     

bcl—x和bcl—2基因在急性白血病患者的表达及其临床意义

观察凋亡调控基因ｂｃｌ－ｘ和ｂｃｌ－２在急性白血病患中的表达,探索ＡＬ的病理和化疗反应的分子机制。方法应用半定量逆转录－聚合酶链反应技术检测ｂｃｌ－ｘ和ｂｃｌ－２在３４例ＡＬ患中ｍＲＮＡ水平的表达。结果抑凋亡基因ｂｃｌ－ｘＬ和ｂｃｌ－２在ＡＬ细胞中的表达比在完全缓解和正常对照组骨髓细胞中的表达明显增高（Ｐ〈０．０１）,同时在复发患ＡＬ细胞中的表达水平分别是初治患的１．８倍和１．９倍（Ｐ〈０     

bcl—2基因表达在慢性粒细胞白血病急变中的意义

目的探讨ｂｃｌ２基因表达在慢性粒细胞白血病（ＣＭＬ）急变中的生物学意义。方法采用碱性磷酸酶抗碱性磷酸酶免疫复合物方法和地高辛标记探针原位杂交技术检测各期ＣＭＬ患者６０例新鲜骨髓标本中ＢＣＬ２蛋白和ｂｃｌ２ｍＲＮＡ的表达,并对其中１９例标本进行流式细胞术分析骨髓细胞凋亡率及细胞周期。结果初诊和治疗后ＣＭＬ中ｂｃｌ２基因表达相近,但明显低于急变时。ｂｃｌ２ｍＲＮＡ表达与蛋白表达基本一致。ｂｃｌ２基因高表达与ＣＭＬ患者外周血血红蛋白、血小板、幼稚细胞及骨髓不成熟细胞比例相关。加速／急变期ＣＭＬ细胞凋亡率明显低于慢性期,但细胞周期无明显变化。结论ＣＭＬ急变时ｂｃｌ２基因表达增高,骨髓细胞凋亡率降低,这些现象部分地阐明了ＣＭＬ急变预后不良的机制,也为ＣＭＬ急变的早期诊断和治疗提供了实验依据。     

氧化砷诱导早幼粒细胞白血病细胞凋亡及其分子机制的初步研究

目的：了解氧化砷（Ａｓ２Ｏ３）治疗急性早幼粒细胞白血病（ＡＰＬ）的细胞和分子机制。方法：以早幼粒细胞白血病细胞株ＮＢ４细胞等为研究对象，利用流式细胞仪，ＤＮＡ电泳，Ｎｏｒｔｈｅｒｎ、Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹，免疫组化等手段，观察Ａｓ２Ｏ３对ＡＰＬ的作用。结果：Ａｓ２Ｏ３能显著诱导ＮＢ４细胞凋亡，而不影响ＨＬ－６０和Ｕ９３７的生长和存活。氧化砷能有效降低ＮＢ４细胞中ｂｃｌ－２基因的表达，而对其它几种凋亡相关基因（包括ｐ５３、ｃ－ｍｙｃ、ｂａｘ和ｂｃｌ－ＸＬ）的ｍＲＮＡ水平无影响。结论：这可能是Ａｓ２Ｏ３诱导ＮＢ４细胞凋亡的分子机制之一。     

bcl－2蛋白对T淋巴细胞白血病细胞株CEM程序性死亡的调控作用

为探讨ｂｃｌ－２蛋白对足叶乙甙触发Ｔ淋巴细胞白血病细胞株ＣＥＭ程序性死亡的调控作用，采用脂质体Ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ法，将ｂｃｌ－２基因逆转录病毒载体转入人Ｔ淋巴细胞白血病细胞株ＣＥＭ中，并使其稳定、高效地表达。结果，经足叶乙甙处理后，高表达ｂｃｌ－２蛋白的ＣＥＭ细胞产生梯状ＤＮＡ的量低于对照（Ｐ＜０．０５）。这表明高水平ｂｃｌ－２蛋白对白血病细胞程序性死亡过程可能具有较强的抑制效应。     

bcl—2蛋白对T淋巴细胞白血病细胞株CEM程序性死亡的调控作用

为探讨ｂｃｌ－２蛋白对足叶乙甙触发Ｔ淋巴细胞白血病细胞株ＣＥＭ程序性死亡的调控作用，采用脂质体Ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ法，将ｂｃｌ－２基因逆转录病毒载体转入人Ｔ淋巴细胞白血病细胞株ＣＥＭ中，并使其稳定、高效地表达。结果，经足叶乙甙处理后，高表达ｂｃｌ－２蛋白的ＣＥＭ产生梯状ＤＮＡ的量低于对照（Ｐ〈０．０５）。这表明高水平ｂｃｌ－２蛋白对白血病细胞程序性死亡过程可能具有较强的抑制效应。     

逆转录病毒介导的反义bcl-2序列促进足叶乙甙诱导的白血病细胞凋亡

目的：探讨逆转录病毒介导的反义ｂｃｌ２序列对细胞凋亡的诱导作用。方法：ＰＡ３１７细胞包装逆转录病毒，病毒转导Ｊｕｒｋａｔ细胞后用ＲＴＰＣＲ及Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹法检测ｂｃｌ２ｍＲＮＡ及蛋白表达水平；用流式细胞仪计数及ＤＮＡ电泳检测细胞凋亡。结果：转染反义ｂｃｌ２序列可使内源性ＢＣＬ２蛋白表达下降，提高白血病细胞株对足叶乙甙（Ｖｐ１６）的敏感性，促进细胞凋亡。结论：反义ｂｃｌ２序列能促进Ｖｐ１６诱导的白血病细胞凋亡，为ｂｃｌ２反义技术治疗白血病的临床应用提供了实验依据。     

抗bcl—2核酶在HL—60细胞中的表达及促进其凋亡的研究

为消除白血病细胞中ｂｃｌ－２基因对细胞凋亡的抑制作用开辟白血病基因治疗的途径。将合成的针对ｂｃｌ－２ｍＲＮＡ的“锤头型”核酶基因定向克隆于真核表达本ＰＤＯＲ－ｎｅｏ，构ｐＤＯＲ－ＲＺ重组体。通过脂质体Ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ介导的ＤＮＡ转染法，把ｐＤＯＲ－ＲＺ导入ＨＬ－细胞。     

bcl—XL在急性髓系白血病细胞的表达及化疗敏感性的关系

目的：探讨急性髓系白血病（ＡＭＬ）细胞凋亡径路的特征及调控模式。方法：运用流式细胞仪（ＦＡＣＳ）、ＤＮＡ电泳、Ｎｏｒｔｈｅｒｎ ｂｏｌｔ分析技术，观察了化疗药物足叶乙甙（Ｖｐ１６）作用于原代ＡＭＬ细胞前后，ｂｃｌ－Ｘ１表达与凋亡的敏感性、临床特征、预后的关系。结果：绝大部分ＡＭＬ高表达ｂｃｌ－Ｘ１ｍＲＮＡ病例经Ｖｐ１６处理后，其ｂｃｌ－Ｘ１虽然下调，但仍维持较高水平，并对凋亡诱导不敏感，与高白细胞     

小儿急性淋巴细胞白血病bcl-2蛋白表达与化疗敏感性的关系

采用免疫组化方法。检测了３８例小儿急性淋巴细胞白血病在诱导化疗前的ｂｃｌ－２蛋白表达水平，结合诱导化疗四疗程后的治疗反应分析。结果表明：化疗未缓解病例ｂｃｌ－２蛋白表达水平明显高于化疗缓解病例，提示ｂｃｌ－２蛋白表达水平与小儿急性淋巴细胞白血病对诱导化疗的敏感性关系密切，鉴于ｂｃｌ－２蛋白可阻止白血病细胞凋亡，促进其增殖，增加白血病的恶性程度，从而影响化疗效果。作者认为将ｂｃｌ－２蛋白表达水平作为体内判断小儿急性淋巴细胞白血病化疗敏感性的指标，有利于临床合理选用恰当的化疗方案。     

MDM2基因在急性白血病中作用的研究

目的：分析ＭＤＭ２基因ｍＲＮＡ表达增高的原因。方法：用Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹杂交、点杂交和逆转录－多聚酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）的方法研究４１例不同类型急性白血病和两个相关的白血病细胞系ＭＤＭ２基因的扩增和ｍＲＮＡ表达。结果：发现５１．２％的患者ＭＤＭ２基因的ｍＲＮＡ表达水平明显增高，所有患者及两个细胞系均未发现有ＭＤＭ２基因扩增。结论：可能在急性白血病中ｐ５３基因可由于ＭＤＭ２基因ｍＲＮＡ的过度表达而抑制其蛋白的生物活性。ＭＤＭ２基因ｍＲＮＡ表达水平与急性白血病的ＦＡＢ分型以及患者的染色体核型无明显相关性，可能与疾病的预后有关。     

bcl—2,bax蛋白在急性髓系白血病中的表达及意义

ｂｃｌ－２、ｂａｘ蛋白在急性髓系白血病中的表达及意义周剑锋陈燕李崇渔乐蓓蓓向建平喻东姣邹萍王辨明ｂｃｌ－２是一种抗凋亡基因，高表达时可阻抑细胞凋亡的发生。ｂｃｌ－２基因家族的同源基因ｂａｘ可拮抗ｂｃｌ－２的抗凋亡效应。为观察血液系统恶性肿瘤发病中细胞...     

35例急性白血病细胞IL—2受体α的基因表达的检测分析

为研究ＩＬ－２受体α链基因在急性白血病（ＡＬ）细胞的表达，对１９例ＡＬＬ和１６例ＡＭＬ患者治前白血病细胞用逆转录＝聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）及芝光素标记单抗ＩＬ－２Ｒ１流式细胞分析，分别进行了ＩＬ－２Ｒα基因ｍＲＮＡ和蛋白质水平表达的检测。３５例ＡＬ患者白血病细胞ＩＬ－２ＲαｍＲＮＡ和Ｐ阳性表达者分别为５例和１４例，前者阳性表达明显高于后者，１４例ＡＬ患者白血病细胞ＩＬ－２ＲαｍＲＮＡ表达阳性，     

GATA—2与免疫球蛋白重链胚系基因Cμ在白血病细胞中的表 …

应用逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）对不同类型白血病患者骨髓（ＢＭ）或外周血（ＰＢ）细胞ＧＡＴＡ－２和ＩｇＨ胚系基因ＣμｍＲＮＡ的表达进行检测，探讨ＧＡＴＡ－２与ＩｇＨ胚系基因Ｃμ在白血病细胞中的表达与共表达及意义。在正常人ＢＭ和ＰＢ细胞中未检测到ＧＡＴＡ－２和ＩｇＨ胚系基因Ｃμ。在急性髓性白血病（ＡＭＬ）和急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）以及慢怀粒细胞白血病慢性期（ＣＭＬ－ＣＰ）ＧＡＴＡ－２检出     

抗bcl－2核酶在HL－60细胞中的表达及促进其凋亡的研究

为消除白血病细胞中ｂｃｌ－２基因对细胞凋亡的抑制作用，开辟白血病基因治疗的途径。将合成的针对ｂｃｌ－２ｍＲＮＡ的“锤头型”核酶（Ｒｉｂｏｚｙｍｅ，ＲＺ）基因定向克隆于真核表达载体ｐＤＯＲ－ｎｅｏ，构成ｐＤＯＲ－ＲＺ重组体。通过脂质体Ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ介导的ＤＮＡ转染法，把ｐＤＯＲ－ＲＺ导入ＨＬ－６０细胞。用Ｓｏｕｔｈ－ｅｒｎ印迹，ＲＮＡ斑点杂交法观察ＲＺ基因在ＨＬ－６０细胞内表达，并通过电镜、流式细胞仪（ＦＣＭ），光镜和ＤＮＡ电泳观察ＲＺ对ＨＬ－６０细胞的影响。结果：①ＲＺ在转染ＨＬ－６０后７２小时得以表达，细胞内ｂｃｌ－２蛋白合成受到抑制。②在ＦＣＭ图谱上可见到明显的凋亡峰，形态观察ＲＺ处理的ＨＬ－６０细胞呈典型的凋亡形态。③足叶乙甙（促凋亡）敏感性试验表明，与未转染的细胞和转染空载体ｐＤＯＲ－ｎｅｏ的细胞相比，转染ｐＤＯＲ－ＲＺ的细胞ＤＮＡ电泳易出现梯状条带。结果说明ＲＺ基因通过逆转录病毒表达载体导入ＨＬ－６０细胞后可成功地表达并抑制ＨＬ－６０细胞ｂｃｌ－２蛋白的合成，并促进ＨＬ－６０细胞凋亡     

逆转录病毒介导的反义bcl—2序列促进足叶乙甙诱导的白血病？…

探讨逆转录病毒介导的反义ｂｃｌ－２序列对细胞凋亡的诱导作用,方法：ＰＡ３１７细胞包装逆转录病毒,病毒转导Ｊｕｒｋａｔ细胞后用ＲＴ－ＰＣＲ及Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹法检测ｂｃｌ－２ ｍＲＮＡ及蛋白表达水平;用流式细胞仪计数及ＤＮＡ电泳检测细胞凋亡。     

bcl-X_L在急性髓系白血病细胞的表达及与化疗敏感性的关系

目的：探讨急性髓系白血病（ＡＭＬ）细胞凋亡径路的特征及调控模式。方法：运用流式细胞仪（ＦＡＣＳ）、ＤＮＡ电泳、Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ分析技术，观察了化疗药物足叶乙甙（Ｖｐ１６）作用于原代ＡＭＬ细胞前后，ｂｃｌ－ＸＬ表达与凋亡的敏感性、临床特征、预后的关系。结果：绝大部分ＡＭＬ高表达ｂｃｌ－ＸＬｍＲＮＡ病例经Ｖｐ１６处理后，其ｂｃｌ－ＸＬ虽然下调，但仍维持较高水平，并对凋亡诱导不敏感，与高白细胞数、髓外浸润等不良预后特征相关，化疗后不易缓解，处于长期缓解中的病例经Ｖｐ１６处理后，ｂｃｌ－ＸＬ亦表达下调，但凋亡率远低于ＡＭＬ细胞。结论：ｂｃｌ－ＸＬ高表达与ＡＭＬ的发生、维持和化疗耐药性相关，ｂｃｌ－ＸＬ高表达下调是凋亡启动的基础，但本身不足以引致凋亡。     

35例急性白血病细胞IL-2受体α基因表达的检测分析

为研究ＩＬ２受体α链（ＩＬ２Ｒα，Ｐ５５）基因在急性白血病（ＡＬ）细胞的表达，对１９例ＡＬＬ和１６例ＡＭＬ患者治前白血病细胞用逆转录—聚合酶链反应（ＲＴＰＣＲ）及荧光素标记单抗ＩＬ２Ｒ１流式细胞分析，分别进行了ＩＬ２Ｒα基因ｍＲＮＡ和蛋白质水平表达的检测。３５例ＡＬ患者白血病细胞ＩＬ２ＲαｍＲＮＡ和Ｐ５５阳性表达者分别为２５例（２５／３５，７１４％）和１４例（１４／３５，４０％），前者阳性表达明显高于后者（ｐ＜００２５）。１４例ＡＬ患者白血病细胞ＩＬ２ＲαｍＲＮＡ表达阳性，而Ｐ５５水平无表达；３例ＡＭＬ细胞表面Ｐ５５阳性却无ｍＲＮＡ表达。本研究显示，ＡＬ患者白血病细胞ＩＬ２Ｒα基因阳性表达十分常见，ｍＲＮＡ和蛋白质水平表达并非一致，ｍＲＮＡ水平表达率明显高于蛋白质水平表达率。