应用序列特异引物PCR法对广西壮族HLA－DQA_1进行基因分型

应用序列特异引物多聚酶链反应（ＰＣＲ）方法对８２名无血缘关系的广西壮族健康人的ＨＬＡ－ＤＱＡ＿１进行基因分型。共检出７种ＤＱＡ＿１等位基因，以ＤＱＡ＿１＊０３０１的频率最高，达３１％，其次为ＤＱＡ＿１＊０１０４，０１０２和０５０１，检出率分别为２４．３％，１６．９％和１１．７％。未检出的等位基因有ＤＱＡ＿１＊０２０１，０３０２和０６０１。结果表明，壮族的ＨＬＡ－ＤＱＡ＿１等位基因频率分布除与中国南方人相似外，尚有其特点。序列特异引物ＰＣＲ方法不需要放射性同位素，简便快速、准确可靠的ＨＬＡ－ＤＱＡ＿１基因分型新方法。     

支气管哮喘HLA—DRB1等位基因研究

目的：研究山西汉族支气管哮喘患者的ＨＬＡ－ＤＲＢ１等位因基的频率。方法：采用顺序特异引物聚合酶链反应（ＰＣＲ／ＳＳＰ）技术检测山西汉族６４例支气管哮喘患者ＨＬＡ－ＤＲＢ１等位基因频率,并与山西正常人群进行比较分析。结果：支气管哮喘组ＨＬＡ－ＤＲＢ１＊１５０１／１５０２基在频率明显增高（Ｐ〈０．０５）,Ｏ ２３．４４％;其它等位基因频率在两组间无显著差异。结论：在山西汉族人群中ＨＬＡ－ＤＲＢ１＊１５     

用序列特异性引物的PCR方法分析慢性淋巴细胞性甲状腺炎患者…

慢性淋巴细胞性甲状腺炎（ＣＬＴ）是一种器官特异性自身免疫性疾病，其遗传易感性与ＨＬＡ－Ⅱ类基因具有相关性，本研究用序列特异性引物的ＰＣＲ（ＰＣＲ－ＳＳＰ）方法，分析２６名由病理证实的ＣＬＴ及正常对照２０例外周血白细胞基因组ＤＮＡ的ＭＨＣ－ＤＱＡ１位点的基因多态性分布，发现两组间有明显不同，其中ＤＱＡ１＊０３０１的等位基因频率显著高于对照组（Ｐｃ小于０．０５）ＤＱＡ１＊０３０１／０３０１的纯合子频率     

两个糖尿病家庭HLA—DQA1和—DQB1等位基因比较

糖尿病是一种多病因的疾病，具有遗传因素的作用。胰岛素依赖型糖尿病（ＩＤＤＭ）的遗传与ＨＬＡ－ＤＱ基因具有高度相关性。本文通过对ＭＯＤＹ和ＩＤＤＭ两个糖尿病家庭成员的ＤＮＡ进行ＨＬＡ－ＤＱＡ１和ＤＱＢ１基因ＰＣＲ扩增，以Ｂｉｏ－１１－ｄＵＴＰ标记核苷酸探针杂交分析，证实：１，ＭＯＤＹ的遗传与ＨＬＡ－ＤＱ基因无关联。２．ＩＤＤＭ的遗传不仅与ＨＬＡ－ＤＱ基因高度相关而且具有环境因素作用。３．易感基因之间     

微量聚合酶链反应对人类白细胞抗原的基因分型

目的 探讨应用于移植的人类白细胞抗原（ＨＬＡ）二类基因（ＤＲＢ／ＤＱＢ）快速分型新技术。方法 采用快速ＤＮＡ抽提技术,建立了ＨＬＡ＿ＤＲＢ／ＤＱＢ微量序列特异性引物聚合酶链反应基因分型方法,对１４２份供受者ＤＮＡ进行ＨＬＡ－ＤＲＢ／ＤＱＢ基因分型,并与单克隆抗体一叔法ＨＬＡ血清学分型技术进行对比研究。结果 应用微量ＰＣＲ－ＳＳＰ方法共检出１３种ＤＲＢ１等位基因和 ＤＱＢ１等位基因,与血清学分型结果     

广西壮族人HLA-DQB1等位基因与β地中海贫血的相关性

目的：探讨ＨＬＡ抗原与β地中海贫血（地贫）的相关性。方法：应用聚合酶链反应序列特异引物（ＰＣＲＳＳＰ）方法对６４名随机抽样的，无血缘关系，三代以上均为壮族并三代以上居住在广西，籍贯分布广西各地，均在本实验室经基因诊断证实为β地贫的患者进行ＨＬＡＤＱＢ１基因分型。结果：发现ＨＬＡＤＱＢ１０６０４等位基因在该群体中频率为１２．５％，对照组为１．４％；其相对危险度为９．９，与对照组比较，有非常显著差异（显著性检验χ２＝２０．７８，Ｐ＜０．００５）。结论：提示ＨＬＡＤＱＢ１０６０４等位基因与广西壮族居民β地贫的易感性有关联     

ICAM—1,HLA—ABC,HLA—DR在乙型肝炎肝细胞表达的意义

为进一步探讨ＨＬＡ－ＡＢＣ,ＨＬＡ－ＤＲ,ＩＣＡＭ－１在乙型肝炎肝细胞损伤中的作用,利用标记的链菌素亲生物蛋白（ＬＳＡＢ）法对９８例乙型肝炎肝穿组织进行ＨＬＡ－ＡＢＣ,ＨＬＡ０－ＤＲ,ＩＣＡＭ－１检测。结果显示ＨＬＡ－ＡＢＣ,ＩＣＡＭ－１在乙型肝炎肝细胞存在广泛表达,且与肝脏病变程度有关,ＨＬＡ－ＤＲ也有一定程度表达,其阳性率分别在８５．７％、８３．７％、２６．５％。阳性表达多位于肝细胞炎性病变或     

HLA的PCR—SSP分型技术

ＰＣＲ－ＳＳＰ是采用ＰＣＲ技术，针对被检基因设计一系列具有等位基因多态性的序列特异上物扩增被检标本，分析ＰＣＲ产物判定ＨＬＡ型别，ＨＬＡ－ＤＲＩ￣ＤＲ１８可以采用１９对引物检定，采用两步法以７９对引物可以检定ＤＲ全部基因型。ＨＬＡ－ＤＱ采用２０条引物不同组合，陈检定与血清学型别一致的特异性还可分析部份基因型；以２２对引物则可检定ＤＱＢ１全部基因型。ＰＣＲ－ＳＳＰ技术比ＰＣＲ－ＳＳＯＰ及ＰＣＲ－ＲＥ     

急性非淋巴细胞白血病与HLA-DR抗原表达关系的研究

应用免疫酶标染色法检测了５７例急性非淋巴细胞白血病（ＡＮＬＬ）患者的ＨＬＡ－ＤＲ和其它细胞免疫类型，其中３８例（６６７％）表达ＨＬＡ－ＤＲ抗原，表达ＨＬＡ－ＤＲ抗原的ＡＮＬＬ常伴有ＣＤ７的表达，而较成熟的髓系细胞表面标记ＣＤ１５则不表达，ＨＬＡ－ＤＲ＋的ＡＮＬＬ与ＦＡＢ亚型Ｍ１、Ｍ５ａ有密切关系。ＨＬＡ－ＤＲ－组缓解机会大于ＨＬＡ－ＤＲ＋组（Ｐ＜００５），检测ＨＬＡ－ＤＲ抗原不仅有利于ＡＮＬＬ的诊断而且有助于判断预后。     

应用PCR-RFLP技术对HLA-DRB1*04位点进行基因分型

目前对ＨＬＡ－ＤＲＢ１等位基因分型，应用较多方法是ＰＣＲ－ＳＳＯＰ法，其优点是结果准确可靠，缺点是需合成许多探针，有放射性辐射，操作复杂及耗时长。为了探索快速、简便、精确的ＤＲＢ１＊０４等位基因分型方法，笔者对Ｏｔａ等［１］的方法加以改进，用ＰＣＲ－...     

HLA—DQA反相杂交法分型与多聚酶链反应—单链构象多态性配型的…

为了验证多聚酶链反应－单链构象多态性方法在骨髓移植型中的可靠性和准确性，采用掺入生物素的多聚酶链反应对ＨＬＡ－ＤＱＡ位点基因进行特异性扩增。将所选区分ＨＬＡ－ＤＱＡ位点等位基因的特异性探针点于尼龙膜上，用标记的扩增产物与膜上探针杂交，并用碱性磷酸酶显色法杂交信号，确定待测标本的基因型。     

肾移植HLA-DR血清学分型与PCR-SSP基因分型的比较

目的：比较肾移植供受体ＨＬＡ－ＤＲ血清学分型与ＰＣＲ－ＳＳＰ基因分型方法的差异,以探讨两种方法的优缺点。方法：对已作ＨＬＡ－ＤＲ标准血清学分型的供受体标本,用ＰＣＲ－ＳＳＰ基因分型法作ＨＬＡ－ＤＲ抗原分型。结果：血清学法耗时８０ｍｉｎ,ＰＣＲ－ＳＳＰ法耗时１４５ｍｉｎ;血清学方法误差率为１１．５％（受者１５．１％,供者８．７％）。结论：ＰＣＲ－ＳＳＰ法作ＨＬＡ－ＤＲ分型具有准确、简便、快速等优点。     

Raji细胞免疫酶抑制法检测血清抗HLA—DR抗体

本研究利用Ｒａｊｉ细胞表面具有表达组织相容性抗原ＤＲ（ＨＬＡ－ＤＲ）特点，以及被检血清中抗ＨＬＡ－ＤＲ抗体与抗人ＨＬＡ－ＤＲ单克隆抗体（ＭｃＡｂ）竞争结合Ｒａｊｉ细胞表面ＨＬＡ－ＤＲ抗原的特征，建立检测血清抗ＨＬＡ－ＤＲ抗体的Ｒａｊｉ细胞免疫酶抑制法。对７２例系统性红斑狼疮（ＳＬＥ）患者和１１３例健康者血清检测结果表明：ＳＬＥ患者和健康者血清中抗ＨＬＡ－ＤＲ抗体阳性率分别为３９．０％和１．８％。此     

HLA逆向杂交基因分型技术

逆向杂交是近年用于ＨＬＡ基因分型的技术，它是半一组具有等位基因特异性的探针固定在膜条上，在严格条件下与样本ＤＮＡ杂交分析其多态性。该方法简便，快速，２小时可完成实验，已用于ＨＬＡ－ＤＰ，ＤＲ，ＤＱ等位基因多态性分析，优于传统的寡核苷酸探针杂交技术。     

Raji细胞免疫酶抑制法检测血清抗HLA－DR抗体

本研究利用Ｒａｊｉ细胞表面具有表达组织相容性抗原ＤＲ（ＨＬＡ一ＤＲ）特点，以及被检血清中抗ＨＬＡ一ＤＲ抗体与抗人ＨＬＡ一ＤＲ单克隆抗体（ＭｃＡｂ）竞争结合Ｒａｊｉ细胞表面ＨＬＡ一ＤＲ抗原的特征，建立检测血清抗ＨＬＡ一ＤＲ抗体的Ｒａｊｉ细胞免疫酶抑制法。对７２例系统性红斑狼疮（ＳＬＥ）患者和１１３例健康者血清检测结果表明：ＳＬＥ患者和健康各血清中抗ＨＬＡ一ＤＲ抗体阳性率分别为３９．０％和１．８％。此法特异性强、重复性好（阳性血清ＣＶ为４．７％，阴性血清ＣＶ为０％），抗体涌度范围１：５～１：４０。     

急性非淋巴细胞白血病与HLA—DR抗原表达关系的研究

应用免疫酶标染色法检测了５７例急性非淋巴细胞白血病患者的ＨＬＡ－ＤＲ和其它细胞免疫类型，其中３８例，表达ＨＬＡ－ＤＲ抗原，表达ＨＬＡ－ＤＲ的的ＡＮＬＬ常伴有ＣＤ７的表达，而较成熟的髓系细胞表面标记ＣＤ１５则不表达，ＨＬＡ－ＤＲ＾＝的ＡＮＬＬ与ＦＡＢ亚型Ｍ１，Ｍ５ａ有密切关系。     

HLA-DQA反相杂交法分型与多聚酶链反应－单链构象多态性配型的比较

为了验证多聚酶链反应－单链构象多态性方法在骨髓移植配型中的可靠性和准确性，采用掺入生物素的多聚酶链反应对ＨＬＡ－ＤＱＡ位点基因进行了特异性扩增。将所选区分ＨＬＡ－ＤＱＡ位点等位基因的特异性探针点于尼龙膜上，用标记的扩增产物与膜上探针杂交，并用碱性磷酸酶显色法检测杂交信号，确定待测标本的基因型。对２０对异基因骨髓移植的供、受者进行ＨＬＡ－ＤＱＡ位点的基因分型，并与多聚酶链反应－单链构象多态性配型作比较。结果表明，２０对供、受者的多聚酶链反应－单链构象多态性配型结果与该反相杂交法基因分型结果一致。多聚酶链反应－单链构象多态性方法是一种骨髓移植的供、受者配型，快速可靠的方法     

特发性血小板减少性紫癜患儿T细胞Ia抗原表达的研究

特发性血小板减少性紫癜患儿Ｔ细胞Ｉａ抗原表达的研究刘秋玲，高效曾，杨惠蓉，田增爵Ｉａ抗原是一组与免疫反应有关的抗原（包括ＨＬＡ－ＤＲ、ＨＬＡ－ＤＱ及ＨＬＡ－ＤＰ抗原）。Ｉａ抗原在Ｔ细胞上的表达是Ｔ细胞被选择性活化的一个标志￣［１］。已证明许多自身免疫...     

严重药物不良反应分子标志物 ＨＬＡ Ｂ ５８：０１、ＨＬＡ Ｂ １５：０２ 和 ＨＬＡ Ａ ３１：０１ 在山东汉族人群中的分布

目的 调查山东汉族人群 ＨＬＡ Ｂ ５８：０１、ＨＬＡ Ｂ １５：０２ 和 ＨＬＡ Ａ ３１：０１ 等位基因携带率和等位基因频率，指导患者 临床用药，并评估进行临床基因筛查的必要性。方法 调查山东省骨髓库具有 ＨＬＡ Ａ、ＨＬＡ Ｂ 位点高分辨数据的汉族人群样 本，统计 ＨＬＡ Ｂ ５８：０１、ＨＬＡ Ｂ １５：０２ 和 ＨＬＡ Ａ ３１：０１ 等位基因携带率和等位基因频率，并按照志愿者籍贯进行分组，归为 １４ 个地市。结果 山东汉族人群中，ＨＬＡ Ｂ ５８：０１、ＨＬＡ Ｂ １５：０２、ＨＬＡ Ａ ３１：０１ 等位基因携带率分别为 ８．６５％、３．０３％和 ７．３％。日照、东营、临沂地区 ＨＬＡ Ｂ ５８：０１ 等位基因携带率达 １０％以上；枣庄、滨州和济南地区 ＨＬＡ Ａ ３１：０１ 等位基因携带 率达 ８％以上；聊城、济南、淄博地区 ＨＬＡ Ｂ １５：０２ 等位基因携带率分别为 ３．９６％、３．８４％和 ３．７７％。结论 山东地区汉族人群 患者在使用别嘌醇和卡马西平药物之前进行 ＨＬＡ Ｂ ５８：０１ 和 ＨＬＡ Ａ ３１：０１ 基因筛查是有必要的，ＨＬＡ Ｂ １５：０２ 等位基因 携带率虽较低，但有条件的地区可以在开展用药前进行基因筛查，以减少严重药物不良反应的发生。     

特异性反义寡核苷酸抑制白血病细胞株HLA－DPB_1基因表达

反义寡核苷酸可以特异性地抑制基因表达，将ＨＬＡ－ＤＰＢ＿１特异性反义寡核苷酸加入细胞培养基中，对ＨＬ－６０和Ｋ５６２白血病细胞株由γ－干扰素诱导的ＨＬＡ－ＤＰＢ＿１表达有特异性抑制作用。当反义寡核苷酸浓度在４０μｇ／ｍｌ时，１小时后即出现ＨＬＡ－ＤＰＢ＿１基因表达抑制现象，持续时间达４８小时，７２小时后表达又逐渐恢复；反义寡核苷酸抑制基因表达有很高的特异性，在ＨＬＡ－ＤＰＢ＿１表达完全被封闭的情况下，与它链锁紧密的ＤＱＢ＿１、ＤＲＢ＿１表达依然如常。另外，不同浓度的反义寡核苷酸，从５μｇ／ｍｌ到６０μｇ／ｍｌ，对两种细胞株￣３Ｈ－ＴｄＲ掺入无明显影响，说明它对细胞生长影响不大。