MDM2和p53基因蛋白在急性白血病细胞中表达及与化疗反应的关系

目的：研究人急性白血病（ＡＬ）细胞ＭＤＭ２及ｐ５３基因蛋白表达水平、它们的相互关系及对ＡＬ化疗反应预测的价值。方法：免疫组化方法检测ＭＤＭ２及ｐ５３蛋白。结果：①４６例ＡＬ细胞ＭＤＭ２蛋白阳性率为７１．７％，ｐ５３蛋白阳性率为２１．７％，无细胞类型不同的差别（Ｐ＞０．０５），复发难治组比初发未治组约高１倍；②ＭＤＭ２与ｐ５３蛋白呈反向表达者多见，以ＭＤＭ２（＋），ｐ５３（－）方式表达（６７．４％）高于同向方式表达（１５．２％）（Ｐ＜０．０１）；③ＭＤＭ２蛋白阴性者骨髓缓解（ＢＭＲ）率（６９．２％）高于阳性者（３３３％）（Ｐ＜０．０５），两种蛋白不同表达关系对化疗效应有影响；④ＡＬ患者４例中２例化疗后ＭＤＭ２蛋白转阴性，获ＢＭＲ，另２例则反之。结论：人ＡＬ细胞ＭＤＭ２蛋白阳性率高，ｐ５３蛋白阳性率低；在同一ＡＬ细胞中两者多呈反向表达，且不同表达方式对化疗有影响；在ＡＬ细胞中确实存在ＭＤＭ２（＋），ｐ５３（－）表达方式。ＭＤＭ２蛋白，特别是ＭＤＭ２蛋白与ｐ５３蛋白联检可能预测ＡＬ细胞对化疗的敏感性     

骨髓增生异常综合征p53基因突变的临床意义

骨髓增生异常综合征ｐ５３基因突变的临床意义江继发潘祥林朱平王正起王应福王岩我们采用多聚酶链反应－单链构象多态性（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）分析方法检测了６７例骨髓增生异常综合征（ＭＤＳ）患者的ｐ５３基因点突变，结合向白血病转化，观察该基因在转变中相对危险性和...     

MDM2基因在急性白血病中作用的研究

目的：分析ＭＤＭ２基因ｍＲＮＡ表达增高的原因。方法：用Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹杂交、点杂交和逆转录－多聚酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）的方法研究４１例不同类型急性白血病和两个相关的白血病细胞系ＭＤＭ２基因的扩增和ｍＲＮＡ表达。结果：发现５１．２％的患者ＭＤＭ２基因的ｍＲＮＡ表达水平明显增高，所有患者及两个细胞系均未发现有ＭＤＭ２基因扩增。结论：可能在急性白血病中ｐ５３基因可由于ＭＤＭ２基因ｍＲＮＡ的过度表达而抑制其蛋白的生物活性。ＭＤＭ２基因ｍＲＮＡ表达水平与急性白血病的ＦＡＢ分型以及患者的染色体核型无明显相关性，可能与疾病的预后有关。     

儿童急性白血病p53基因产物的定量研究

儿童急性白血病ｐ５３基因产物的定量研究张宝玺郭稳捷张建辉任秉钧李顺义左连富人类大多数肿瘤有ｐ５３基因产物即ｐ５３蛋白的过度表达，其阳性表达与肿瘤恶性程度和预后密切相关。本文应用流式细胞术对ｐ５３蛋白的表达进行定量分析，以探讨ｐ５３蛋白在儿童急性白血病...     

慢性髓细胞白血病中MDM2基因表达的研究

慢性髓细胞白血病中ＭＤＭ２基因表达的研究孟庆祥晁恒军王立王建祥郝玉书钱林生李建波李克ＭＤＭ２基因是ｐ５３基因的拮抗基因，人类ＭＤＭ２基因定位于１２号染色体（１２ｑ１３－１４），编码分子量为９万的多肽，该多肽与ｐ５３蛋白结合，使后者失去抑制肿瘤发生发展...     

以PCR—SSCP分析和核苷酸序列直接测定技术检测人类白血病p53…

以多聚酶链反应－单链构象多态性（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）分析（技术研究）３６例不同类型的白血病ｐ５３抗癌基因点突变，结果在１４例淋巴细胞白血病中发现３例有ｐ５３基因片段的泳动变位。进一步对其中的１例急性淋巴细胞白血病进行核苷酸序列直接测定，显示在第７外显子的２５７位编码子核工本酸由ＣＴＧ突变为ＣＡＧ、氨基酸由天冬氨酸突变为缬氨酸，２２例髓系白 血病未发现有ｐ５３基因的点突变。结果提示ｐ５３抗癌基因点突变     

以PCR－SSCP分析和核苷酸序列直接测定技术检测人类白血病p53基因点突变

以多聚酶链反应－单链构象多态性（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）分析（技术研究）３６例不同类型的白血病ｐ５３抗癌基因点突变，结果在１４例淋巴细胞白血病中发现３例有ｐ５３基因片段的泳动变位。进一步对其中的１例急性淋巴细胞白血病进行核苷酸序列直接测定，显示在第７外显子的２５７位编码子核昔酸由ＣＴＧ突变为ＣＡＧ、氨基酸由天冬氨酸突变为缀氨酸。２２例髓系白血病未发现有ｐ５３基因的点突变。结果提示ｐ５３抗癌基因点突变导致功能失活在淋巴细胞白血病的发病中可能起一定的作用。     

急性髓系白血病细胞p16基因结构及转录水平表达

目的：了解ｐ１６基因在急性髓系白血病（ＡＭＬ）发病中的意义。方法：用聚合酶链反应－单链ＤＮＡ构象多态性、Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ方法分析１６例ＡＭＬ细胞ｐ１６基因结构及转录水平表达。结果：１６例均无ｐ１６基因的缺失、突变。初治和复发的１２例ＡＭＬ的ｐ１６ｍＲＮＡ表达水平明显低于４例长期缓解者及正常对照。１例ｐ５３基因突变ＡＭＬ的ｐ１６ｍＲＮＡ有明显升高。结论：ｐ１６基因在ＡＭＬ发病中可能不占重要地位，而在ＡＭＬ病态造血的维持中起一定作用，在ｐ５３突变时其表达反馈性升高，显示一种反馈环路失衡，提示在研究单个基因的基础上观察细胞周期检测点功能具有重要意义。     

50例白血病P53基因点突变的检测

用银染ＰＣＲ－ＳＳＣＰ方法检测５０例不同类型的白血病Ｐ５３基因点突变,结果２５例髓系白血病中２例有Ｐ５３基因点突变且均为ＡＭＬ－Ｍ２ａ型,１１例淋巴细胞白血病中２例有Ｐ５３基因点突变,都是Ｂ系淋巴细胞白血病。４例Ｐ５３基因点突变患者,一般情况差,对化疗不敏感,预后不佳。结果显示：Ｐ５３基因点突变导致功能失活在白血病发病过程中起一定作用并可作为判断预后的参考指标。     

结直肠癌p53基因点突变和蛋白表达的研究

目的了解中国人结直肠癌ｐ５３基因的突变谱，探讨聚合酶链反应－单链构象多态（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）银染技术用于研究结直肠癌中ｐ５３基因突变的可行性。方法应用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ银染技术检测４１例结直肠癌ｐ５３基因突变，以ＡＢＣ免疫组织化学染色检测结直肠癌Ｐ５３蛋白的表达。结果３４％（１４／４１）的病例显示有ｐ５３基因突变，其中外显子５，６，７和８各有４，１，５和４例突变。２０例有Ｐ５３蛋白异常表达，阳性率为４９％。结论导致Ｐ５３蛋白异常堆积的ｐ５３基因突变是结直肠癌的一种常见的分子结构改变，可能在结直肠癌的发生和发展中起着重要的作用。ＰＣＲ－ＳＳＣＰ银染技术是一简便、快速、有效的检测基因点突变的方法     

急性白血病及骨髓增生异常综合征患者p15基因甲基化模式改变及其意义

ｐ15基因是位于染色体 9ｐ2 1的一个抑癌基因 ,其编码产物ｐ15蛋白可抑制细胞周期素依赖性激酶ＣＤＫ4 6 ,使Ｒｂ蛋白磷酸化受阻 ,从而阻止细胞由Ｇ1 期进入Ｓ期。ｐ15基因的失活可导致细胞增殖失控 ,与某些肿瘤的发生有关[1 ] 。但近年研究发现 ,在某些恶性血液病 ,如急性白血病 (ＡＬ)中 ,ｐ15基因失活的主要原因并非基因缺失或突变 ,而是启动子区的异常高甲基化[2 4] ;有显著白血病转化倾向的骨髓增生异常综合征 (ＭＤＳ)中亦发现ｐ15基因甲基化异常[5,6] 。为探讨ｐ15基因甲基化异常与ＡＬ发病及ＭＤＳ向白血病转化的关系 ,我们采用甲…     

肿瘤抑制基因p53·p16与脑肿瘤

目的：探索肿瘤抑制基因ｐ５３、ｐ１６变异在脑肿瘤发病中的意义。方法：对２３例脑肿瘤病人原发肿瘤标本用免疫组化ＬＳＡＢ法行肿瘤抑制基因ｐ５３、ｐ１６蛋白检测。结果：星形细胞瘤Ⅰ级９例，ｐ１６蛋白４例表达３０％以下，５例不表达，ｐ５３蛋白３例表达３０％以下，６例不表达；Ⅱ～Ⅳ级７例，ｐ１６蛋白１例表达３０％以下，６例不表达，ｐ５３蛋白４例表达３０％～６０％，３例不表达；脑膜瘤、垂体腺瘤７例，ｐ１６蛋白３例表达３０％以下，４例不表达，ｐ５３蛋白２例表达３０％以下，５例不表达；结论：ｐ５３、ｐ１６蛋白缺失、变异是肿瘤发生的重要原因之一，ｐ５３变异主要见于恶性胶质细胞瘤，偏良性的胶质细胞瘤和脑膜瘤、垂体瘤，ｐ５３蛋白轻度阳性表达，提示肿瘤可能处于早期恶性变过程中。ｐ１６蛋白缺失多见于恶性胶质瘤，也见于部分良性肿瘤。     

采用甲基化特异性聚合酶链反应研究急性白血病p15基因CpG岛甲基化

目的　探讨ｐ１５ 基因ＣｐＧ岛甲基化作为各型急性白血病通用的基因标志物的可行性。方法　采用甲基化特异性聚合酶链反应（ＭＳＰ）法检测４０ 例初治或复发急性白血病、５ 例完全缓解期白血病及８ 例（ 份） 正常骨髓的ｐ１５ 基因ＣｐＧ岛甲基化,并对ＭＳＰ产物进行序列测定。结果　急性白血病患者ｐ１５ 基因ＣｐＧ岛甲基化阳性率为８０％ ,ＡＭＬ与ＡＬＬ的阳性率（分别为８３％ 和７３％） 差异无显著性;５ 例完全缓解期白血病患者中１ 例ｐ１５ ＣｐＧ岛甲基化阳性（该例患者不久白血病复发）;正常骨髓８ 例均为阴性,表明ｐ１５ ＣｐＧ岛甲基化为白血病细胞所特有;ＭＳＰ产物测序结果与理论结果相符合,ＭＳＰ敏感度可达１０ －３。结论　ｐ１５ ＣｐＧ岛甲基化在各型急性白血病中均有很高的发生率,可以作为各型急性白血病通用的微量残留病（ＭＲＤ） 指标;白血病完全缓解期ｐ１５ ＣｐＧ 岛甲基化仍为阳性可能预示着复发;ＭＳＰ法ＤＮＡ需要量极少,不需要有特异性酶切位点,无同位素污染,对标本要求不高,敏感度高,是甲基化研究的一个简便、敏感、特异的新手段。     

胃粘膜病变患者幽门螺杆菌感染与癌基因表达的关系 (附121例资料分析)

目的：探讨幽门螺杆菌（Ｈｐ）感染与ｒａｓ原癌基因产物ｐ２１（ｒａｓｐ２１）蛋白和ｐ５３癌基因产物突变型ｐ５３蛋白表达的关系。方法：应用免疫组织化学方法，检测慢性浅表性胃炎（ＣＳＧ）３０例、胃粘膜不全结肠型肠化生（ＩＣＭ）２５例、异型增生２９例、胃癌３７例的活检标本。结果：ＩＣＭ组、异型增生组和胃癌组的Ｈｐ感染率均明显高于ＣＳＧ组（Ｐ＜０．０５）。ｒａｓｐ２１及突变型ｐ５３蛋白的阳性表达率在ＣＳＧ组均为０，而在异型增生组和ＩＣＭ组的表达均明显低于胃癌组（４５％和３８％、３２％和３２％对６０％和７０％），Ｐ＜０．０５，Ｐ＜０．０１；其中胃癌、异型增生及ＩＣＭ组中的Ｈｐ阳性组的ｒａｓｐ２１及突变型ｐ５３蛋白表达阳性率均明显高于Ｈｐ阴性组（Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１）。经根除Ｈｐ治疗后，Ｈｐ根除者的ｒａｓｐ２１及突变型ｐ５３蛋白表达由阳性转为阴性的例数比Ｈｐ未根除者多（Ｐ＜０．０５，Ｐ＜０．０１）。结论：Ｈｐ感染可能参与了ｒａｓ癌基因的激活和ｐ５３抑癌基因的突变，这可能是其致癌机制之一。     

肿瘤抑制基因p53.p16与脑肿瘤

探索肿瘤抑制基因ｐ５３、ｐ１６变异在脑肿瘤发病中的意义。方法２３例脑肿瘤病人原发肿瘤标本用免疫组化ＬＳＡＢ法行肿瘤抑制基因Ｐ５３Ｐ１６蛋白检测。结果：星形细胞瘤Ⅰ级９例，ｐ１６蛋白４例表达３０％以下，５例不表达，ｐ５３蛋白３例表达３０％以下。     

外源性野生型p53基因在HL60－n细胞表达的意义

为研究外源性野生型ｐ５３基因在白血病细胞表达的意义，采用重组逆转录病毒载体介导的人野生型ｐ５３ｃＤＮＡ转移ＨＬ６０－ｎ细胞。结果发现外源性野生型ｐ５３基因可以诱导ＨＬ６０－ｎ细胞死亡，死亡细胞呈凋亡的形态学特征。流式细胞仪分析显示野生型ｐ５３基因诱导ＨＬ６０－ｎ细胞死亡不伴有细胞周期Ｇ１期的生长阻滞。ＮＢＴ还原试验还提示野生型ｐ５３基因无诱导ＨＬ６０－ｎ细胞分化的作用。这些结果阐明了野生型ｐ５３基因抑制白血病细胞生长的部分机制     

肝细胞癌p53基因杂合缺失的检测

目的建立快速、简便及敏感的ｐ５３基因杂合缺失的检测方法。方法采用聚合酶链反应－限制性片段长度多态性（ＰＣＲ－ＲＦＬＰ）技术对２８例肝细胞癌ｐ５３基因外显子４和内含子６的杂合缺失进行检测。结果发现２８例肝细胞癌患者肝组织外显子４上存在较高的ＢｓｔＵＩ酶切位点多态性（６１％），肝细胞癌杂合缺失率为５３％；而内含子６上ＭｓｐⅠ酶切位点多态性低，不适于分析肝细胞的杂合缺失。结论杂合缺失是肝细胞癌ｐ５３基因失活的重要机制；ＰＣＲ－ＲＦＬＰ技术检测ｐ５３基因杂合缺失方法简单、快速经济，值得推广     

采用甲基化特异性聚合酶链反应研究急性白血病p15基因CpG？…

目的 探讨ｐ１５基因ＣｐＧ岛甲基化作为各型急性白血病通用的基因标志物的可行性。方法 采用甲基化特异性聚合链反应（ＭＳＰ）法检测４０例初治或复发急性白血病、５例完全缓解白血病及８例（份）正常骨髓的ｐ１５基因ＣｐＧ岛甲基化,并对ＭＳＰ产物进行序列测定。结果 急性白血病患ｐ１５基因ＣｐＧ岛甲基化阳性率为８０％,ＡＭＬ与ＡＬＬ的阳性率（分别为８３％和７３％）差异无显性;５例完全缓解期白血病患中１例ｐ     

外源性野生型p53基因在HL60—n细胞表达的意义

为研究外源性野生型ｐ５３基因在白血病细胞表达意义，采用重组逆转录病毒载体介导的人野生型ｐ５３ｃＤＮＡ转移ＨＬ６０－ｎ细胞。结果发现外源性野生型ｐ５３基因可以诱导ＨＬ６０－ｎ细胞死亡，死亡细胞呈凋亡的形态学特征。     

c—myc,P53基因表达缺陷与白血病细胞生物学行为障碍

ｃ－ｍｙｃ，ｐ５３基因是调失细胞增殖，分化和凋亡的重要基因，其表达缺陷与白血病细胞的增殖，分化和凋亡密切相关，在白血病发生及演变过程中重要作用，本文对ｃ－ｍｙｃ，Ｐ５３基因“操纵”白血病细胞生物学行为中的相互作用及联系的研究进展予以介绍。