采用白桂木凝集素-HRP测定唾液SIgA方法的建立

目的 建立白桂木凝集素－ＨＰＲ夹心法检测唾液中分泌型ＩｇＡ（ＳＩｇＡ）。方法 制备ＡＨＬ－ＨＲＰ作为酶标凝集素，ＡＨＬ为包被物，确定最适包被浓度及ＡＨＬ－ＨＲＰ工作稀释度，夹心酶联检测ＳＩｇＡ，进行检出限、精密度、准确性等实验并制备标准曲线，初步测定７１例正常人唾液ＳＩｇＡ含量。结果 ＡＨＬ－ＨＲＰ夹心法检测ＳＩｇＡ标准曲线线性检测范围５～３３７ｍｇ／Ｌ。本法测定７１例健康人唾液ＳＩｇＡ含量为（５     

采用酶标凝集素检测特异的糖蛋白

红桂木凝集素和木菠萝凝集素经过碘酸钠法标记辣根过氧化物酶得到ＡＬＬ－ＨＲＰ和Ｊａｃａｌｉｎ－ＨＲＰ的酶标复合物。通过对１６种蛋白质进行检测，发现这两种凝集素均与胃蛋白酶，β－乳球蛋白结合（ＡＬＬ还可与牛血清白蛋白结合），其中与胃蛋白酶的结合最强，糖抑制试验表明半乳糖，棉子糖均可抑制两种凝集素对胃蛋白酶的作用。利用ＡＬＬ－ＨＲＰ酶联法检测１５例正常人胃液中的胃蛋白酶，酶含量为（１．２２５±０．７９５     

红桂木凝集素结合蛋白在肾病尿液检测中的意义

目的 :建立检测尿液中 AL L 结合蛋白的夹心酶联免疫法。方法 :采用红桂木凝集素 (AL L)为包被物 ,确定最适包被浓度及酶标记红桂木凝集素 (AL L- HRP)工作稀释度 ,检测尿液中 AL L 结合蛋白 (U- L BP)。结果 :本法测定几种疾病的尿 U-L BP/ Cr(g/ mol) ,以 SL E肾病为最高 (44 .0 6± 32 .4 7) ,其次是急性肾炎 (38.0 7± 2 6 .13) ,肾病综合征 (32 .5 7± 2 0 .33) ,血尿(2 5 .30± 14 .6 2 ) ,慢性肾炎 (18.0 3± 13.70 ) ,其它内科疾病 (8.19± 5 .6 2 ) ,与正常对照组相比 ,均有显著性差异 (P <0 .0 1)。结论 :AL L- HRP酶联法检测 U- L BP方法简便 ,结果稳定 ,可望在临床上推广使用     

红桂木凝集素糖蛋白的特征及其糖肽键性质的分析

目的 探讨红桂木凝集素（Ａｒｔｏｃａｒｐｕｓ Ｌｅｎｇｎｓｎｅｎｓｉｓ Ｌｅｃｔｉｎ,ＡＬＬ）的糖蛋白特征及其糖肽键类型。方法 经Ｇａｌ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ６Ｂ亲和柱层析,从红桂木种子纯化获红桂木凝集素。以链霉蛋白酶将ＡＬＬ降解,Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ－２５层析,分离得糖肽,用化学及物理方法分析单糖组成,以β－消除反应及凝集素结合试验分析糖肽键类型。结果 ＡＬＬ和糖肽均含氨基半乳糖、葡萄糖、甘露糖、     

不同胃液胃蛋白酶含量及活性的测定

目的：探讨红桂木凝集素用于胃液胃蛋白酶定量的可行性；证实胃蛋白酶在胃部疾病中的作用。方法：将红桂木凝集素（ＡＬＬ）标记上辣根过氧化物酶（ＨＲＰ），用夹心酶联法测定不同胃病患者胃液中胃蛋白酶的含量，并用改良安宋氏法测定其相应的酶活性。结果：正常组（１６例）、胃炎组（３２例）、十二指肠溃疡组（３２例）、胃溃疡组（２１例）及胃癌组（５例）中胃蛋白酶的含量及其活性均无显著性差异，但胃液ｐＨ值〈３的酶含量要     

红桂木,白桂木和木菠萝种子凝集素生物学性质的比较分析

对白桂木、红桂木和木菠萝三种种子内凝集素的生物学性质进行比较分析。结果显示，三种植物种子凝集素（ＡＨＬ、ＡＬＬ和Ｊａｃａｌｉｎ）的生物学性质十分相似，对红细胞凝集作用的顺序是人〉大鼠〉小鼠〉牛〉猪，不凝集山羊和鸡等血的红细胞。凝集素凝集红细胞活性受Ｎ－乙酰半乳糖胺和Ｄ－半乳糖抑制。对温度作用较敏感。在ｐＨ４．５￣９．５范围内，ｐＨ改变不影响凝集活力。与ＰＨＡ（对照）比较，促淋转率接近，但促淋转凝集     

幽门螺杆菌粪便抗原检测——一种新的非侵入性检查

目的：了解幽门螺杆菌粪便抗原捡测方法(Helicobacter pylori stool Antigen HpSA)的准确性与可靠性。方法：采用酶联免疫分析“双抗体夹心法”对303例因上消化道症状而进行胃镜检查的患的粪便标本进行幽门螺杆菌捡测,以快速尿素酶试验,组织学染色和培养捡测Hp,以三项检查中至少两项阳性或Hp培养捡测阳性判定为Hp感染作为“金标准。结果：“金标准”诊断Hp感染阳性182例,阴性121例。“金标准”阳性的182例中176例HpSA检测阳性,阴性的121例中100例HpSA检测阴性,HpSA敏感度为96．7％(176／182),特异度为82．6％(100／121)。结论：HpSA检测是一种简便易行,准确性高的非侵人性诊断Hp的方法,值得临床进一步推广。     

红桂木凝集素对树突状细胞生长的影响

目的研究红桂木凝集素(ALL)对人外周血单核细胞来源的树突状细胞生长的影响。方法取健康人外周血分离单个核细胞,分别给予重组人粒细胞-巨噬细胞因子(rhGM-CSF)、重组人白细胞介素-4(rhIL-4)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和不同浓度的ALL进行培养。用倒置显微镜观察其形态;CCK-8法检测细胞增殖;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测TNF-α、IL-12/P70水平;流式细胞仪检测细胞表型。结果不同浓度的ALL均能显著促进树突状细胞增殖,并促进IL-12/P70和TNF-α分泌,随着浓度的增加增殖率、IL-12/P70和TNF-α水平逐渐提高(P<0.05)。结论 ALL能有效促进人外周血单核细胞来源的树突状细胞的成熟及增殖。     

Effects of Artocarpus Lingnanensis Lectin on the Growth of Dendritic Cell

目的 研究红桂木凝集素(ALL)对人外周血单核细胞来源的树突状细胞生长的影响.方法 取健康人外周血分离单个核细胞,分别给予重组人粒细胞-巨噬细胞因子(rhGM-CSF)、重组人白细胞介素-4(rhIL-4)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和不同浓度的ALL进行培养.用倒置显微镜观察其形态;CCK-8法检测细胞增殖;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测TNF-α、IL-12/P70水平;流式细胞仪检测细胞表型.结果 不同浓度的ALL均能显著促进树突状细胞增殖,并促进IL-12/P70和TNF-α分泌,随着浓度的增加增殖率、IL-12/P70和TNF-α水平逐渐提高(P＜0.05).结论 ALL能有效促进人外周血单核细胞来源的树突状细胞的成熟及增殖.     

白桂木凝集素、红桂木凝集素和Jacalin对人外周血中淋巴细胞激活的研究

以不同浓度的凝集素作为刺激剂，研究人外周血中的淋巴细胞的激活效应。结果白桂木凝集素促淋转浓度为１．２μｇ／ｍｌ，转化串７６％；红桂木凝集素和Ｊａｃａｌｉｎ的促淋转浓度为０．３μｇ／ｍｌ，转化率分别是６７％和８０％。在相同的条件下，对照ＰＨＡ的促淋转浓度是１６８μｇ／ｍｌ。几种凝集素的促转高峰均在７２ｈ出现。     

一种新的测定内毒素显色基质堂试验法

报道一种新型显色基质Boc-Leu-Gly-Arg-DEAA的合成和应用该基质建立的鲎试验法.测定游离显色基质DEAA与1-萘酚-2-磺酸缩合后形成的蓝色物质的吸收度与内毒素浓度的关系.实验表明,蓝色物质在675nm波长处的吸收度与内毒素的浓度在一定范围内呈线性关系.该法比凝胶鲎试验法的灵敏度高10倍,一般能检测0.006EU/ml的内毒素,若延长保温反应时间可检测含量低至0.002EU/ml的内毒素.测定样品的组内误差为4.8%,组间误差为6.8%.在测定病人血浆中的内毒素时不受任何病人血浆色泽的干扰,故特别适用于临床.     

儿童龋齿与唾液SIgA IgG C_3 C_4转铁蛋白及铁蛋白关系分析

本文报告了138例3～6岁幼儿园儿童龋患情况,同时测定了唾液SIgA、IgG、C3、C4、转铁蛋白及铁蛋白含量。结果为:平均龋患率为60.86％,4岁以上小儿龋患率(66.95％)明显高于4岁以下小儿(34.78％),X~2=7.880,P<0.01,差异有非常显著意义。平均龋均3.55,高于国内多数报道。唾液中所测各项物质含量龋患儿组稍低于正常儿组,但差异无显著意义,P>0.05。对其可能原因进行了分析。认为自然免疫对龋齿的发生及预防作用尚不能定论,值得进一步研究。     

动物原代细胞彗星试验敏感性筛选

目的：筛选一种动物原代敏感细胞用于彗星试验，使该试验能更广泛地对环境样品的遗传毒性进行监测。方法：用重铬酸钾(K2CrO7)和过氧化氢(H2O2)作为受试物对小鼠的肝、脾、肾细胞进行彗星试验，观察K2CrO7和H2O2对这3种细胞造成的DNA损伤来判断细胞的敏感性。结果：以K2CrO7染毒的彗星试验中肝细胞的检测阈值(10nmol／L)低于为脾和肾(100nmol／L)，以H2O2染毒的彗星试验中，在相同浓度下肝细胞迁移长度最长。结论：肝细胞具有敏感性高、自身活化能力强、取材方便、耗时短等优点，可以作为一种检测细胞应用于彗星试验对环境样品进行遗传毒性监测。     

普通轮状病毒Wa的空斑实验

用胰酶预先处理轮状病毒,琼脂层中加入二异氨乙基葡聚糖时,Wa能在MA_(104)细胞上形成空斑。与猴的轮状病毒SA_(11)相比,两者空斑的形态和大小相似,但Wa形成空斑要求条件较高,且空斑出现较迟。     

放射受体分析法检测血清中桥哌酯的浓度

应用~3H-二苯羟乙酸奎宁酯与桥哌酯竞争结合M受体的原理,建立了一种检测血清中桥哌酯浓度的放射受体分析法。该方法最低检测浓度为5 ng/ml,样品的平均回收率为 86.61±6.46％,且简便易行,专一性好并与药理活性相结合,灵敏度高,所用生物样品量少(0.1ml血清),适合用于多种抗胆碱类药物的检测及药代动力学的研究。并用此方法观察了小鼠静脉注射桥哌酯后的药代动力学。     

斑点免疫结合试验直接检测末梢血甲胎蛋白的研究和应用

目的：探讨建立一种方便使用、检测人末血甲胎蛋白（ＡＦＰ）的方法。方法：用斑点免疫结合试验（ＤＩＢＡ）直接检测人末梢血（全血）ＡＦＰ。结果：ＤＩＢＡ检测的条件在３７℃或室温,孵育时间为１０ｍｉｎ×２时,敏感度达２５μｇ／Ｌ。用此法和放射免疫上癌病人９０例的末梢血和血清ＡＦＰ,结果符合率为９６．６７％,以ＡＦ５０μｇ／Ｌ判为阴性,两结果的阳性符合率达１００％,并用此法检测普查的的正常人群１２００例,检     

一种抗癌药物的体外筛选方法—MTT比色分析法

本文主要介绍一种国外目前研究十分活跃的ＭＴＴ法，由于它不涉及使用同位素，操作简单，快速、准确，适用于基层单位，是肿瘤学，免疫学研究极为简便的方法。     

血清1,25双羟维生素D浓度测定的临床应用

本文报告用本实验室建立的HPLC-放射受体法测定28例慢性肾衰患者、27例甲亢患者、27例四川黔江氟骨症患者及24例当地正常人、孕妇和新生儿脐带血以及某些内分泌系统疾病患者血清1.25双羟维生素D浓度的结果,并对其临床意义进行了讨论。     

小鼠脾细胞替代人淋巴细胞的E花结试验

目的 :探讨以小鼠脾细胞代替人外周血淋巴细胞进行 E玫瑰花结试验实验教学的可行性。方法 :以 0 .41 ml5% SRBC免疫昆明系小鼠 ,4天和 2 1天后制备脾细胞悬液 ,常规方法进行 E玫瑰花结试验。结果 :经 SRBC免疫 4天和 2 1天后 ,与 SRBC混合反应 1 0 min与 1 2 0 min的小鼠脾细胞特异性 E玫瑰花结形成百分率无显著性差异 (P>0 .0 5) ,达 2 8.64± 4.48%至34.38± 7.2 5% ,其形态、大小、染色与人外周血 T细胞 E玫瑰花结相近。结论 :小鼠免疫脾细胞 E玫瑰花结试验可代替人外周血淋巴细胞 E玫瑰花结试验用于实验教学 ,有关实验结果可反映实验动物的特异性体液和细胞免疫功能     

酶联免疫吸附试验检测人血清弓形体IgG、IgM抗体的研究

对ELISA检测人血清弓形体IgG、IgM抗体进行了研究。450份孕妇血清中,ELISA阳性率显著高于IHA;抗体滴度分析,ELISA一般高于IHA2～10倍。25份ELISA IgG抗体阳性血清,TFA检出19份;3份IgM抗体阳性和2份IgG、IgM抗体均阳性血清,IFA分别检出2份。2份阴性和4份含不同抗体滴度的阳性血清于第一次测定后,第7天和第21天测定的阴、阳性结果一致,OD值变异系数为2.43～16.52%。39份阳性血清抗体滴度与OD值呈直线比例关系(r=0.991,p<0.0005)。结果表明,ELISA用于弓形体感染的血清学诊断具有较好的实用性。