间歇低氧选择性激活内皮细胞转录因子-kB核内转位的研究

目的：探讨间歇低氧，再氧合（IH／ROX）和持续低氧（CH）条件下的内皮细胞转录因子（NF）-kB核内转位情况及其诱导的炎症损伤。方法：在细胞培养舱中程控产生预置的IH／ROX和CH暴露条件，将人脐静脉内皮细胞可传代细胞株ECV304暴露于该环境；采用酶联免疫吸附法测定内皮细胞核／质抽提物中NF—kB的光密度标化水平和培养基中白细胞介素（IL）-6的浓度。结果：在IH／ROX循环时，内皮细胞实际动脉O2分压的暴露条件为（76．28±1．29）mmHg～（54．94±1．05）mmHg，可以模拟睡眠呼吸暂停时内皮细胞暴露条件。IH组核内NF—kB的光密度标化水平明显高于低氧累计时间和程度相同的CH组（P〈0．01）；无论核内NF—kB水平还是培基IL-6浓度，CH累加IH组均低于IH组（均P〈0．01）；经过120min恢复，IH组核内NF—kB仍未恢复至对照组水平（P〈0．01），而CH组核内NF—kB水平始终没有明显变化（P〉0．05）；胞浆NF—kB水平在各组间差异无统计学意义（均P〉0．05）。结论：IH／ROX暴露时，是ROX时相而非IH时相导致NF—kB总含量增加且核内转位，诱导炎症产生，其程度明显强于CH；即使IH暴露结束以后，炎症反应基础在相当长时间内仍持续存在。     

间歇低氧选择性激活内皮细胞转录因子-κB核内转位的研究

目的:探讨间歇低氧,再氧合(IH/ROX)和持续低氧(CH)条件下的内皮细胞转录因子(NF)-κB核内转位情况及其诱导的炎症损伤.方法:在细胞培养舱中程控产生预置的IH/ROX和CH暴露条件,将人脐静脉内皮细胞可传代细胞株ECV304暴露于该环境;采用酶联免疫吸附法测定内皮细胞核,质抽提物中NF-κB的光密度标化水平和培养基中自细胞介素(IL)-6的浓度.结果:在IH/ROX循环时,内皮细胞实际动脉O2分压的暴露条件为(76.28±1.29)mm Hg-(54.94±1.05)mm Hg,可以模拟睡眠呼吸暂停时内皮细胞暴露条件.IH组核内NF-κB的光密度标化水平明显高于低氧累计时间和程度相同的CH组(P<0.01);无论核内NF-κB水平还是培基IL-6浓度,CH累加IH组均低于IH组(均P<0.01);经过120min恢复,IH组核内NF-κB仍未恢复至对照组水平(P<0.01),而CH组核内NF-κB水平始终没有明显变化(P>0.05);胞浆NF-κB水平在各组间差异无统计学意义(均P>0.05).结论:IH/ROX暴露时.是ROX时相而非IH时相导致NF-κB总含量增加且核内转位,诱导炎症产生,其程度明显强于CH;即使IH暴露结束以后,炎症反应基础在相当长时间内仍持续存在.     

睡眠呼吸暂停模式间歇低氧对心脑血管的影响

阻塞性睡眠呼吸暂停（OSA）的特点是睡眠期间反复发生气道阻塞导致间歇性低氧（IH）、高碳酸血症、睡眠片段化和胸内压改变。其中,IH与高血压、动脉粥样硬化、冠心病、心律失常、脑卒中、心衰和猝死等病理生理过程相关。OSA模式下IH会导致代谢调节异常、内皮功能障碍、系统性炎性反应、氧化应激反应及神经体液的变化,可增加心血管疾病的风险。本文主要描述了目前对IH导致各种心血管疾病的发病机制的理解。     

高糖对体外培养的人脐静脉内皮细胞中c-fos的影响研究

目的观察高糖作用人脐静脉内皮细胞时c—fos基因mRNA和蛋白的表达的变化。方法提取并体外培养人脐静脉内皮细胞,分别加入不同浓度葡萄糖（5．5mmol/L、11mmol/L、22mmol/L、44mmol/L）并分别作用不同时间,应用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）检测c—fos基因mRNA的表达,免疫细胞化学检测c—fos蛋白表达。结果经高糖处理的人脐静脉内皮细胞中,c—fos基因mRNA的转录水平明显高于对照组（P〈0．05或P〈0．01）。但是脐静脉内皮细胞经22mmol/L葡萄糖作用1h,c—fos基因的mRNA水平不再升高,而呈下降趋势（P〈0．05）。经22mmol/L葡萄糖作用2h后,c—fns蛋白表达达到最高峰。结论高糖能引起脐静脉内皮细胞c—fosmRNA和蛋白表达增高。     

慢性间歇低氧诱发大鼠高血压模型的建立

目的:观察间歇低氧对大鼠尾动脉收缩压的影响及胸主动脉、肾小动脉病理变化。方法:16只SD雄性大鼠随机分为间歇低氧组(IH)和空白对照组(UC),每组8只,IH大鼠置于间歇低氧舱中,7 h·d~(-1),给予循环充入氮气和空气,每次循环为8 min,间歇缺氧舱内氧浓度波动于8．5%～21%,UC大鼠不予任何特殊处理。分别于实验前及实验d7,14,21．28测量大鼠尾动脉收缩压。d28处死大鼠,取标本观察胸主动脉与肾小动脉病理改变。结果:IH大鼠尾动脉收缩压逐渐升高,从第2周开始显著升高,第2,3,4周时其收缩压分别升高了13．75mmHg (P＜0．01)．22．25mmHg(P＜0．01)和29．87 mmHg(P＜0．01)。实验后两组大鼠之间比较,第1周收缩压无显著差异,第2周后IH大鼠较UC大鼠收缩压明显升高(P＜0．05或P＜0．01)。d28两组大鼠胸主动脉未见明显病理改变,但IH大鼠肾小动脉血管壁在d 28时较UC大鼠明显增厚,并有部分出现肾小动脉硬化。结论:慢性间歇低氧可导致大鼠持续性血压升高,提示阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)引起的长期夜间反复低氧是OSAHS患者高血压发生的重要原因,此模型的建立为OSAHS致高血压机制的深入研究提供了可行手段。     

不同模式间歇低氧对大鼠血糖、血清胰岛素及胰腺组织Caspase-3活性及其表达的影响

目的 探讨两种模式间歇低氧对大鼠血糖、胰岛素及胰腺组织Caspase-3活性及其表达的影响。方法 将63只SD大鼠随机分为常氧对照组、间歇低氧1组(高频轻度)、间歇低氧2组(低频重度),3组又各自随机分为暴露1、2、4周组,每组7只。3个暴露4周组分别于0周及暴露1、2、4周检测空腹血糖;3组大鼠分别于暴露1、2、4周检测胰岛素水平,胰腺组织Caspase-3活性及其mRNA和蛋白表达水平。结果 间歇低氧1组暴露4周组血糖从暴露2周开始升高,暴露4周与暴露2周比较差异无统计学意义(P>0.05);间歇低氧2组暴露4周组血糖从暴露1周即出现升高,随着暴露时间的延长进行性增高,暴露4周较间歇低氧1组暴露4周增高(P<0.05)。间歇低氧1组血清胰岛素水平呈缓慢上升趋势,暴露4周高于常氧对照组(P<0.01);间歇低氧2组血清胰岛素从暴露1周即开始增高,暴露2周达高峰,暴露4周下降至常氧对照组水平。间歇低氧2组胰腺组织Caspase-3活性及其mRNA和蛋白表达水平随暴露时间的延长呈进行性增高(P<0.05,P<0.01)。结论 低频重度间歇低氧模式对胰腺组织的损害较高频轻度间歇低氧模式严重,且呈进行性加重。     

间歇低氧的大鼠模型体内的氧化应激、炎症反应导致代谢紊乱发生的机制

目的探讨慢性间歇低氧大鼠体内的氧化应激、炎症反应导致代谢紊乱发生的机制。方法建立慢性间歇低氧的大鼠模型,模拟阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征（obstructive sleep apneahypopnea syndrome,OSAHS）睡眠中发生的慢性低氧、再氧合病理生理过程。将50只雄性SD大鼠,分为慢性间歇低氧组（40只）和空白对照组（10只）。将慢性间歇低氧组的大鼠放入自制的间歇低氧动物舱内,提供间歇低氧（最低吸入氧浓度6%～7%,最高吸入氧浓度20%～21%,各维持时间5～7 s）;将空白对照组大鼠置于相同规格的间歇低氧动物舱内,给予空气脉冲供气。间歇低氧刺激总时间：8 h/d（9AM～5PM）,持续12周。实验结束后,酶联免疫吸附测定法（ELISA法）测定大鼠血清丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）和hs-CRP水平;并检测代谢紊乱相关指标如空腹血糖、甘油三酯（TG）、胆固醇（CHOL）、大鼠尾动脉血压,每一个指标作为一个危险因素,没有危险因素的为正常组,仅有1个危险因素的为低危组,有2个危险因素的为高危组,有3个危险因素的为代谢综合征组（MS组）。结果根据危险因素,将慢性间歇低氧组的大鼠分为正常组,低危组,高危组,代谢综合征组。随着间歇缺氧的时间延长,发生代谢紊乱的危险因素逐渐增加,超氧化物歧化酶（SOD）活性降低,丙二醛（MDA）、hs-CRP的水平逐渐增高,与空白对照组比较差异有统计学意义（P〈0.05）。结论间歇缺氧模型大鼠体内氧化应激存在,导致慢性低度炎症反应,可能是导致阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征患者发生代谢紊乱的重要机制。     

重度阻塞性睡眠呼吸暂停的影响因素分析

目的 分析重度阻塞性睡眠呼吸暂停(OSA)的影响因素。方法 根据睡眠呼吸暂停低通气指数(AHI),218例OSA患者分为轻中度组(AHI 5～30次/小时,93例)和重度组(AHI>30次/小时,125例)。比较两组的临床资料和睡眠监测结果,分析其与AHI的相关性和重度OSA的影响因素,采用ROC曲线分析相关指标对重度OSA的预测价值。结果 重度组BMI、Epworth嗜睡量表(ESS)评分和有吸烟史、打鼾、晨起头痛、晨起口干、夜梦增多、高血压和脑梗死的患者比例高于轻中度组(P<0.05)。两组平均血氧饱和度(MSaO₂)、最低血氧饱和度(LSaO₂)、血氧饱和度低于90%占总睡眠时间的百分比(TS90)、最长呼吸暂停时间和AHI比较差异均有统计学意义(P<0.01)。Spearman相关性分析显示,AHI与BMI、ESS评分、TS90和最长呼吸暂停时间呈正相关(r=0.857、0.315、0.472和0.534,P<0.01),与MSaO₂和LSaO₂呈负相关(r=―0.4...     

肺通气功能障碍对OSAHS患者睡眠中间歇性低氧的影响

目的 探讨肺通气功能障碍对阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)患者睡眠中间歇性低氧的影响.方法 选取2019年7月至2020年12月该院行多导睡眠监测的40例OSAHS患者,根据通气功能障碍类型将患者分为RVD组(19例)和OVD组(21例).比较2组睡眠中氧降速率、复氧速率、低氧时间指数、最低指尖氧饱和度(S...     

阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征患者体内氧化应激状态分析

目的探讨阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)患者体内氧化应激状态。方法OSAHS轻、中、重组共70例,对照组25例进行多导睡眠仪监测(PSG);采集受试者当天睡前及次日晨起空腹静脉血,OSAHS重度组尚需采集nCPAP治疗1个月后清晨空腹静脉血,检测血清中丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)含量。结果OSAHS各组与对照组晨起血清MDA含量及晨起血清GSH含量比较差异有统计学意义(P均<0.05);进一步分析OSAHS组血清MDA与GSH含量呈负相关(r=-0.81,P<0.05),晨起血清MDA与患者睡眠呼吸暂停低通气指数(AHI)呈正相关(r=0.657,P<0.05),与最低SpO2、平均SpO2呈负相关(r分别为-0.576、-0.682,P均<0.05),晨起血清GSH与患者AHI呈负相关(r=-0.583,P<0.05),与最低SpO2、平均SpO2呈正相关(r分别为0.657、0.683,P均<0.05);OSAHS各组睡前血清MDA含量较晨起降低,但仍高于对照组,OSAHS各组睡前血清GSH含量较晨起升高,但仍低于对照组,差异有统计学意义(P均<0.05);经nCPAP治疗后重度组患者晨起血清MDA含量降低,晨起血清GSH含量升高,与对照组比较差异无统计学意义(P均>0.05)。结论OSAHA患者体内存在持续氧化应激状态,随着病情严重程度而加重;经nCPAP治疗4周后,氧化应激状态可恢复正常水平。     

阻塞性睡眠暂停低通气综合征氧化应激与肝损害的关系

探讨氧化应激对于阻塞性睡眠暂停低通气综合征（OSAHS）患者发生慢性肝脏损害的影响。选取2011年5月至2013年5月因打鼾及睡眠障碍就诊于呼吸科门诊的30例患者,均进行多道睡眠图(PSG),确诊为阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征。监测30例OSAHS患者和15例健康对照者血清谷丙转氨酶（ALT）、血清天冬氨酸氨基转移酶（AST）、丙二醛（MDA）水平,并监测患者体质量指数、呼吸暂停低通气指数(AHI)、血氧饱和度＜90%的时间(sIT90)、平均血氧饱和度(MSaO2)、最低血氧饱和度(LSaO2)等睡眠指标。OSAHS患者根据AHI分为中度14例、重度16例。OSAHS患者与健康对照组比较血清ALT、AST、MDA水平明显升高 (P＜005)。OSAHS患者血清ALT、AST水平与MSaO2呈负相关,与MDA呈正相关(相关系数分别为-0137、0115,P＜005),OSAHS患者的血清MDA水平与sIT90呈正相关（相关系数为0135）。16例重度OSAHS患者经CPAP治疗2个月后血清ALT、AST、MDA明显降低(P＜005)。间歇缺氧导致氧化性应激产物如MDA增加,MDA水平与睡眠呼吸暂停低通气综合征患者肝损害存在正相关,CPAP治疗后改善间断缺氧状态,进而改善肝损害。     

间歇性低氧相关组织因子表达在儿童睡眠呼吸暂停综合征的临床生物学意义

[摘要]目的:探讨间歇性低氧相关组织因子在儿童睡眠呼吸暂停综合征中表达的相关性及临床生物学意义,为探索儿童睡眠呼吸暂停综合征细胞乏氧代谢损伤机制提供分子病理学基础。方法:以正常儿童群体为对照,采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测对氧磷酶2、白三烯等低氧相关组织因子在儿童睡眠呼吸暂停综合征睡眠状态及清醒状态中的差异。结果:对氧磷酶2与白三烯的表达在正常儿童、睡眠呼吸暂停综合征患儿中存在明显差异(P<0.05);在清醒状态与睡眠状态呼吸暂停综合征患儿中比较差异无统计学意义(P>0.05);其表达水平与OSAS分级呈正相关,r分别为0.78和0.66(P<0.05)。 结论:对氧磷酶2和白三烯与儿童睡眠呼吸暂停综合征呼吸暂停低通气(AHI)分级相关,并可作为独立因子辅助其诊断及分级。     

T 淋巴细胞在OSAS 促动脉粥样硬化中作用的研究进展

摘要： 阻塞性睡眠呼吸暂停综合征 （OSAS） 是促进动脉粥样硬化的独立危险因素, OSAS 可诱导系统炎症、 氧化应激及血管内皮细胞的功能障碍等, 进而导致动脉粥样硬化的发生与进展。氧化应激和系统炎症能够激活 T 淋巴细胞, 增加淋巴细胞对血管内皮细胞的毒性, 加速炎症/免疫反应, 参与动脉粥样硬化的进展。免疫系统的激活是炎症/ 免疫反应导致动脉粥样硬化的早期步骤, 本文以 T 淋巴细胞为例, 综述 OSAS 促进动脉粥样硬化发生发展的淋巴细胞基础与机制。     

Influence of Intermittent Hypoxia on Myocardial and Hepatic P-glycoprotein Expression in a Rodent Model

Study Objective. Patients with obstructive sleep apnea who receive drug therapy for cardiovascular disease may experience resistant hypertension, arrhythmias, or more severe heart failure, and many of the drugs used to treat these conditions are substrates for P-glycoprotein (P-gp) transporters. Therefore, we sought to determine if intermittent hypoxia, which mimics obstructive sleep apnea, would upregulate myocardial and hepatic P-gp expression and Abcb1a and Abcb1b messenger RNA (mRNA) expression (genes that encode for P-gp) in an animal model. Design. Prospective, randomized, blinded, parallel-design animal study. Setting. University research laboratory. Animals. Thirty adult, male Sprague-Dawley rats. Intervention. Rats were assigned to either 2 weeks of intermittent hypoxia exposure similar to sleep apnea (12 rats) or no hypoxia exposure (controls, 18 rats). Measurements and Main Results. After intermittent hypoxia or normoxia exposure, the rats were anesthetized. Heart and liver were harvested, and small samples were taken from the left ventricle (heart) and the liver for analysis. Expression of P-gp was measured by Western blotting, whereas Abcb1a and Abcb1b mRNA expression was assessed by real-time polymerase chain reaction. Band density of myocardial (but not hepatic) P-gp expression (standardized by β-actin) was significantly higher in hypoxic rats than in control rats (p=0.03). Quantitative polymerase chain reaction revealed that myocardial and hepatic Abcb1a and myocardial Abcb1b mRNA expression were significantly increased in hypoxic rats compared with controls (p<0.05). Conclusion. Myocardial P-gp expression and myocardial and hepatic Abcb1a mRNA expression were significantly increased after 2 weeks of intermittent hypoxia. Hypoxia-induced increases in P-gp expression may partially explain drug-resistant cardiovascular disease in patients with obstructive sleep apnea.     

Protective Effect of Nebivolol against Oxidative Stress Induced by Aristolochic Acids in Endothelial Cells

Aristolochic acids (AAs) are powerful nephrotoxins that cause severe tubulointerstitial fibrosis. The biopsy-proven peritubular capillary rarefaction may worsen the progression of renal lesions via tissue hypoxia. As we previously observed the overproduction of reactive oxygen species (ROS) by cultured endothelial cells exposed to AA, we here investigated in vitro AA-induced metabolic changes by ¹H-NMR spectroscopy on intracellular medium and cell extracts. We also tested the effects of nebivolol (NEB), a β-blocker agent exhibiting antioxidant properties. After 24 h of AA exposure, significantly reduced cell viability and intracellular ROS overproduction were observed in EAhy926 cells; both effects were counteracted by NEB pretreatment. After 48 h of exposure to AA, the most prominent metabolite changes were significant decreases in arginine, glutamate, glutamine and glutathione levels, along with a significant increase in the aspartate, glycerophosphocholine and UDP-N-acetylglucosamine contents. NEB pretreatment slightly inhibited the changes in glutathione and glycerophosphocholine. In the supernatants from exposed cells, a decrease in lactate and glutamate levels, together with an increase in glucose concentration, was found. The AA-induced reduction in glutamate was significantly inhibited by NEB. These findings confirm the involvement of oxidative stress in AA toxicity for endothelial cells and the potential benefit of NEB in preventing endothelial injury.     

五味子木脂素缓解AngⅡ诱导人脐静脉内皮细胞氧化应激损伤的研究

目的 考察五味子木脂素缓解血管紧张素Ⅱ（angiotensin Ⅱ,AngⅡ）诱导的人脐静脉内皮细胞（human umbilical veinendothelial cells,HUVEC）氧化应激损伤,并探究其内在机制。方法 HUVEC分别于一定浓度梯度的五味子乙素（schisandrin B,Sch B）、五味子丙素（schisandrin C,Sch C）共孵育24 h,利用CCK8确定药物作用浓度; Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡变化情况; DCFH-DA和DHE探针检测胞内活性氧表达情况;采用RT-qPCR检测Bax、Bcl-2 mRNA水平,抗氧化蛋白核因子E2相关因子（Nrf-2）、血红素氧合酶-1（HO-1）和醌氧化还原酶（NQO-1）的mRNA表达情况;采用Western blotting检测Bax、Bcl-2、Nrf-2和Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1（Keap-1）的表达情况;利用特异性的siRNA构建低表达Nrf-2的HUVEC,探究五味子木脂素是否靶向Nrf-2缓解Ang II诱导氧化应激损伤。结果 Sch B（50 μmol·L^-1）和Sch C（26 μmol·L^-1）作用于AngⅡ诱导的HUVEC损伤模型中,发现Sch B、Sch C可通过调控抗氧化轴Nrf-2/Keap-1,抑制细胞凋亡（P < 0.01或P < 0.001）和ROS水平（P < 0.05）,促进HO-1（P < 0.05）、NQO-1（P < 0.05）等抗氧化酶的表达,并有效缓解H₂O₂诱导的氧化应激损伤。在特异性沉默Nrf-2的HUVEC中,发现Sch B、Sch C可靶向Nrf-2激活下游抗氧化酶（NQO-1、HO-1）的表达,缓解AngⅡ诱导的氧化应激损伤。结论 Sch B、Sch C可通过调控Nrf-2/Keap-1抗氧化通路缓解AngⅡ诱导的HUVEC氧化应激损伤。     

阻塞性睡眠呼吸暂停患者外周血内皮祖细胞及 促血管生成因子水平研究

摘要： 目的 观察阻塞性睡眠呼吸暂停 （OSA） 患者外周血内皮祖细胞 （EPC） 不同亚族和促血管生成因子水平的变化, 探讨不同程度 OSA 患者外周血 EPC 对血管修复的可能性。方法 选取 90 例 OSA 患者和 30 例健康志愿者 (对照组), 根据睡眠呼吸暂停低通气指数(AHI)将 90 例 OSA 患者均分为轻、 中、 重度 OSA 组。密度梯度离心法提取单个核细胞, 依据乙醛脱氢酶(ALDH)活性对 EPC 进行分选, 流式细胞仪联合 CD133、 CD34、 含激酶域插入片段受体 (PE-KDR)相应细胞表面标志物测定 CD133+ KDR+ EPC 及 CD133+ CD34+ EPC、 CD34+ KDR+ EPC、 ALDHlo CD34+ KDR+ EPC 的水平。酶联免疫吸附试验(ELISA)测定患者外周血低氧诱导因子-1α(HIF-1α), 血管内皮生长因子(VEGF)及基质细胞衍生因子-1α(SDF-1α)的水平。结果 对于外周血 CD133+ KDR+ EPC、 CD133+ CD34+ EPC、 CD34+ KDR+ EPC 水平, 重度 OSA 组>中度 OSA 组>轻度 OSA 组>对照组 （均 P < 0.05）; 轻、 中度 OSA 组的外周血 ALDHlo CD34+ KDR+ EPC 水平高于对照组, 重度 OSA 组低于其他 3 组 （均 P < 0.05）; 血清 HIF-1α、 VEGF 均是重度 OSA 组>中度 OSA 组>轻度 OSA 组>对照组, SDF-1α水平为重度 OSA 组<中度 OSA 组<轻度 OSA 组<对照组 （均 P < 0.05）。结论 OSA 患者可能都会诱导动员并招募大量无效 EPC, 其数量庞大, 但直接参与修复内皮的 ALDHlo CD34+ KDR+ EPC 并未增加, 尤其对于重度 OSA 患者甚至有可能减少, OSA 减弱了修复内皮的可能性, 加重了内皮损伤, 从而增加心血管事件的发生风险。     

人骨髓来源内皮前体细胞体外培养和鉴定的研究

目的:明确人骨髓单个核细胞中是否存在内皮前体细胞(EPCs),探讨从人骨髓中分离、培养EPCs的方法及体外进行EPCs的鉴定。方法:采集正常人骨髓单个核细胞进行体外培养,应用流式细胞术进行内皮细胞表面标记物检测,应用免疫荧光术对培养细胞进行内皮细胞功能特性检测。结果:人骨髓单个核细胞经体外培养,收获细胞可以表达内皮细胞的特异性抗原,包括CD34、VWF、KDR等,并显示出能摄取乙酰化低密度脂蛋白(ac-LDL),结合荆豆凝集素(UEA-1)等内皮细胞的特性。结论:人骨髓中存在具有内皮细胞潜能的EPCs,其具有内皮细胞的表型特征和功能,有希望作为种子细胞用于冠心病的血管新生治疗。     

血小板微颗粒对人脐静脉内皮细胞VEGF表达的影响

目的:探讨血小板微颗粒( PMPs)影响内皮细胞血管内皮生长因子(VEGF)释放的可能机制及其临床意义.方法:常规培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs)CRL-1730,配制不同干预浓度的PMPs与HUVECs共培养不同时间,应用半定量逆转录聚合酶链反应技术测定内皮细胞VEGF、VEGFⅡ型受体Fh/KDR、磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)以及胞外信号调节激酶(ERK)mRNA的表达水平.结果:(1)VEGF mRNA的表达水平在0mg/L组高于PMPs10、30、50、100 mg/L干预组(均P＜0.05),VEGFⅡ型受体Flt/KDR mRNA表达水平在0mg/L组低于PMPs10、30、50、100 mg/L(均P＜ 0.05).ERK mRNA表达水平在PMPs50mg/L组高于0mg/L组(P=0.004),PI3K mRNA表达水平在PMPs100 mg/L组高于0 mg/L组(P=0.004).(2)50 mg/L PMPs干预细胞,VEGF mRNA的表达水平在0h组高于4h、24 h组(P＜0.05),KDR mRNA的表达水平在0h组低于4h、24h组(均P＜0.05),PI3K mRNA的表达水平在0h组低于24 h组(P=0.004).结论:PMPs可能通过VEGF受体,激活其下游信号转导通路,发挥促进血管和血管发生为基础的生物学效应.