紫杉醇脂质体腹腔给药对S180腹水瘤小鼠的疗效

目的:比较紫杉醇脂质体与紫杉醇注射液对S180腹水瘤小鼠的肿瘤抑制效果.方法:采用逆向蒸发法及超声法制备紫杉醇脂质体,以激光粒度散射仪测定粒径,以反向高效液相法测定脂质体中紫杉醇药物含量.采用S180细胞昆明鼠腹腔内注射形成腹水瘤模型,肿瘤种植24 h后随机分成4组,分别为空白对照组、空白脂质体组、紫杉醇注射液组、紫杉醇脂质体组.每组5只,其中两组分别以紫杉醇脂质体和紫杉醇注射液腹腔注射,其他2组分别给予生理盐水和空白脂质体腹腔注射,共给药4次,给药间隔72 h.结果:紫杉醇脂质体平均粒径为(282.40±8.94)nm,药物包封率为91%.肿瘤种植14天后,空白对照组、空白脂质体组、紫杉醇注射液组小鼠形成大量腹水,腹膜、肝脏广泛转移;紫杉醇脂质体组仅形成少量腹水,腹膜、肝脏未见转移.结论:紫杉醇脂质体腹腔内给药可以明显抑制腹水形成,有效抑制腹腔转移.     

恩度联合顺铂治疗恶性腹腔积液的疗效及安全性评估

目的评估恩度联合顺铂治疗恶性腹腔积液的疗效及增效机制。方法建立小鼠H22肿瘤腹水模型,随机分为生理盐水组、单独恩度组(10 mg/kg/d)、单独顺铂组(2.5 mg/kg/5 d)和恩度顺铂联合组1(每日给予恩度)、联合组2(隔日给予恩度),每组18只。治疗结束后每组取6只动物腹水样品进行蛋白浓度、红细胞数量、肿瘤细胞数量、肿瘤细胞凋亡比例测定,其余小鼠观察各组荷瘤寿命,以对照组基本死亡为实验结束的节点。结果 (1)与生理盐水组相比,恩度、顺铂单独或联合处理组给药期间体质量、腹围增长速度和腹水量均显著降低(P0.01),其中联合组小鼠体质量、腹围增长速度和腹水量显著低于单纯恩度或顺铂组小鼠(P0.01)。(2)联合组2小鼠腹水中红细胞含量显著低于生理盐水组、单纯恩度组和单纯顺铂组(P0.01)。生理盐水组小鼠腹水中肿瘤细胞数量显著高于恩度、顺铂单独或联合处理组(P0.01)。生理盐水组小鼠腹水中肿瘤细胞凋亡率显著低于单纯顺铂组、联合组1和联合组2(P0.01),但与单纯恩度组相比差异无统计学意义。(3)Logrank分析显示恩度联合顺铂对于小鼠的生存时间有显著延长作用(P0.01)。结论恩度和顺铂联用具有协同作用,可有效抑制小鼠腹水产生,减少腹水中红细胞渗透率,延长小鼠生存期;其中每日给予恩度效果优于隔日给予。     

TNP-470和DDP联用对小鼠腹水瘤腹水生成的抑制作用

目的:为了验证0-(氯乙酰-氨甲酰基)烟曲霉醇(TNP-470)和顺铂(DDP)联用的增效作用.方法:将64只615小鼠腹腔内接种腹水瘤细胞株后,随机分为4组,然后腹腔内分别注射生理盐水(第1组),DDP(第2组),TNP-470(第3组)及联合用药(第4组),观察瘤细胞株对各组小鼠的腹水生成,瘤细胞数,存活率及生存时间.结果:DDP,TNP-470及联合用药组与生理盐水对照组相比可显著抑制615小鼠腹水的生成,减少瘤细胞数量,延长生存期(P<0.05);联合用药组与其它3组比较在瘤细胞计数和瘤细胞存活率方面均有显著性差异(P<0.05);在小鼠存活率及生存时间方面,联合用药组延长最明显;在用药过程中,联合用药组可引起体重下降,但停止用药后体重又可逐渐得到恢复.结论:TNP-470,DDP对小鼠腹水瘤腹腔种植后腹水的生成都有明显的抑制作用;TNP-470和DDP联用能起增效作用;体重下降这一副作用是可逆的.     

TNP-470对小鼠腹水瘤腹水生成的影响

[目的]研究血管生成抑制剂TNP-470对小鼠腹水瘤细胞腹腔种植的影响。[方法]80只615小鼠腹腔内接种腹水瘤细胞株后，随机分为5组，然后分别腹腔内注射生理盐水（第1组），DDP（第2组）及不同剂量的，TNP-470（第3、4、5组），观察瘤细胞株对各组小鼠的腹水生成，瘤细胞数及生存时间；透射电镜观察TNP-470作用后腹腔内肿瘤细胞的形态学变化。[结果]与生理盐水对照组相比，DDP、不同剂量的TNP-470可显著抑制615小鼠腹水的生成，减少瘤细胞数量，延长生存期，DDP组、TNP-470低剂量组、TNP-470中剂量组、TNP-470高剂量组生存时间分别为26．25、19．75、28．38、21．25d，与对照组生存时间14．88d相比，有显著性差异（P〈0．05），且中剂量TNP-470可使小鼠寿命明显延长，平均可达28．38d。[结论]TNP-470能抑制小鼠腹水瘤腹腔种植及腹水生成，不同程度的延长生存期。     

5-氟尿嘧啶固体脂质纳米粒对S180腹水瘤小鼠的抑瘤作用

目的:研究5-氟尿啼啶同体脂质纳米粒(5-FU-SLN)腹腔内化疗对S180腹水瘤小鼠的抑瘤作用.方法:昆明种小鼠S180腹水瘤模型建立后.随机分为生理盐水对照组、空白固体脂质纳米粒组(Blank-SLN组)、5-FU溶液组及5-FU-SLN组,每组20只,连续7 d腹腔给药,隔天测量体质量和腹围.给药结束后,颈椎脱臼处死各组半数小鼠,测量腹水量,台盼蓝染色计算瘤细胞总数和瘤细胞存活率,肝脏做常规切片进行病理检查.剩余小鼠统计生存时间,计算生命延长率.结果:给药结束,各组小鼠体质量(F=8.222,P＜0.001)、腹围(F=9.208,P＜0.001)、腹水量(F=18.018,P＜0.001)、瘤细胞数(F=18.822,P＜0.001)、瘤细胞存活率(F=231.490.P＜0.001)及生存时间(F=60.119,P＜0.001)相比较,差异均有统计学意义.与5-Fu溶液组相比,5-FU-SLN组小鼠体质量有所增加、腹嗣减小、腹水量减少、瘤细胞总数减少、细胞存活率降低、平均生存时间延长(P均＜0.05).肝脏病理切片观察结果显示5-FU-SLN组小鼠肝脏趋于正常,肿瘤细胞较少在腹腔内转移,而其他3组小鼠的肝脏细胞均有不同程度的变性、坏死,肝脏中有肿瘤细胞转移.结论:5-FU-SLN腹腔化疗延长了荷瘤小鼠生存期,对腹腔内肿瘤细胞的抑制作用较持久,可有效抑制腹腔内肿瘤细胞的转移.     

腹腔内应用重组人血管内皮抑制素治疗艾氏腹水瘤的实验研究

目的观察重组人血管内皮抑制素对艾氏腹水瘤( EAC)小鼠的治疗作用,并初步探讨其相关作用机制。方法采用四甲基偶氮唑蓝( MTT)法检测不同终浓度的重组人血管内皮抑制素(0、5、10、20、40μg /ml )对体外培养的EAC细胞的抑制率;利用EAC细胞建立腹水瘤小鼠模型,将54只腹水瘤小鼠随机分为3组：A组(重组人血管内皮抑制素8 mg/kg,每12 h腹腔注射1次)、B组(重组人血管内皮抑制素8 mg/kg,每24 h腹腔注射1次)、C组即对照组(生理盐水0.2 ml/只,每12 h腹腔注射1次)。详细记录小鼠腹水量、体重及生存期;酶联免疫吸附法( ELISA)检测小鼠腹水血管内皮生长因子(VEGF)及基质金属蛋白酶-2(MMP-2);并通过尾静脉注射伊文思蓝染液间接反映微血管通透性。结果体外实验显示,不同浓度的重组人血管内皮抑制素对EAC未见抑制作用;体内试验显示,重组人血管内皮抑制素组( A组和B组)小鼠的体重、腹水量及腹水中VEGF和MMP-2浓度均低于对照组,生存时间较对照组延长( P <0.05);3组小鼠血管通透性、A组与B组之间的各项指标差异无统计学意义( P>0.05)。结论腹腔内给药治疗小鼠EAC疗效较好,其作用机制可能与抑制VEGF及MMP-2的生成有关,提示重组人血管内皮抑制素在临床上治疗恶性腹水有较好的应用前景。     

鲜驴奶体内抑瘤作用的实验研究

目的研究鲜驴奶体内抑制肿瘤生长的作用。方法将120只小鼠随机分为2大组,分别于腋下和腹腔接种S180肿瘤细胞悬液造模,腋下接种为实体瘤组,腹腔接种为腹水瘤组,灌胃分低剂量组(30 ml.kg-1.d-1)、中剂量组(60 ml.kg-1.d-1)、高剂量组(120 ml.kg-1.d-1),实体瘤组连续给予鲜驴奶(受试物)2周,腹水瘤组给予至小鼠死亡,另外设立模型对照组和环磷酰胺组(CTX),CTX组腹腔注射20 mg.kg-1.d-1,隔日腹腔注射1次,共7次,模型对照组给予同体积的蒸馏水,干预结束后第1天观察肿瘤组织病理形态学,测定抑瘤率、脏器指数相关指标。结果鲜驴奶中、低剂量组对S180实体瘤小鼠的脾指数具有增高作用,鲜驴奶低和中剂量组抑瘤率分别为27.78%与50.69%(P<0.05)。高剂量组未见抑制肿瘤细胞生长作用。鲜驴奶低、中和高剂量组均可明显延长S180腹水瘤小鼠的生存时间。结论鲜驴奶具有抑制S180实体瘤生长和延长S180腹水瘤小鼠生存时间的作用。     

米托蒽醌脂质体注射液药效学研究

目的观察米托蒽醌脂质体注射液的体内抗肿瘤作用。方法建立小鼠实体型S180肿瘤模型、小鼠腹水型L1210肿瘤模型和静脉注射L1210小鼠肝转移模型,探讨米托蒽醌脂质体的抗肿瘤作用。结果米托蒽醌脂质体注射液单次以4.0、6.0 mg/kg体质量静脉注射,对实体型S180小鼠的抑瘤率分别为85.00%和88.19%,与等剂量米托蒽醌注射液组比较有显著性差异;单次以2.0、4.0、6.0、8.0 mg/kg体质量静脉注射,与空白对照组相比均可显著延长腹水型L1210肿瘤模型和肝转移模型小鼠的生存时间,且与等剂量米托蒽醌注射液组比较有显著性差异。结论相同给药剂量下,米托蒽醌脂质体注射液的体内抗肿瘤作用显著优于米托蒽醌注射液。     

重组人内皮抑素腺病毒联合顺铂对小鼠结肠癌肺转移治疗作用研究

目的观察重组人内皮抑素腺病毒(Ad-hE)联合顺铂(Cis)对小鼠结肠癌肺转移的治疗作用、不良反应,并初步探讨其作用机制,探索抗血管基因治疗联合化疗的可行性。方法 6~8周龄BALB/c小鼠每只尾静脉注射接种1×105CT26细胞,建立小鼠CT26结肠癌肺转移模型,随机分成5组,分别予Ad-hE和Cis单独及联合注射,以生理盐水及空腺病毒注射为对照,观察肿瘤抑制效应、肿瘤血管生成、肿瘤细胞凋亡情况和可能发生的毒副反应。结果与对照组相比,Ad-hE和Cis单药及联合治疗组小鼠肺转移瘤数量明显减少,且联合治疗组生存期延长。各治疗组肿瘤血管生成减少,肿瘤细胞凋亡增多,均以Ad-hE联合Cis组最明显。各组均未观察到明显不良反应。结论重组人内皮抑素腺病毒和顺铂联合应用可增强对小鼠结肠癌肺转移的抑制作用,其机理可能是通过抑制肿瘤新生血管形成和诱导肿瘤细胞凋亡而发挥抗肿瘤作用。     

软骨多糖对荷瘤小鼠免疫功能影响的初步研究

目的研究软骨多糖对荷瘤小鼠的作用，并探讨其对免疫功能的影响。方法采用小鼠肉瘤S180细胞建立动物腹水瘤模型，然后随机将小鼠分为生理盐水对照组和软骨多糖给药组，连续腹腔注射生理盐水或软骨多糖，分别测量ConA和LPS刺激下小鼠脾细胞淋巴增殖情况、外周血NK细胞的活性，及外周血单个核细胞E花环形成率。结果软骨多糖能刺激淋巴细胞增殖，明显提高NK细胞的活性，提高E花环形成率。结论软骨多糖能通过增强S180荷瘤小鼠的免疫功能而抑制肿瘤的生长。     

新型重组人血管内皮抑制素对小鼠腹水瘤的作用特点探讨

目的 探讨恩度腹腔内给药控制小鼠腹水生成的作用特点和模式.方法 利用S180和H22细胞系建立小鼠腹水瘤模型.88只ICR小鼠随机分为4组:对照组(0.9%NS)、1次/d 日恩度组(8mg/kg)、隔日1次恩度组(8mg/kg)和隔2日1次恩度组(8mg/kg).根据Evan蓝的吸光度值反应各组小鼠的腹膜渗透性;绘制各组小鼠体质量增长曲线、计算腹水体积、腹水肿瘤细胞和红细胞数;解剖小鼠,观察各组小鼠腹水生成和腹腔种植转移情况;观察生存期等指标来评价恩度对小鼠腹水瘤的疗效特点.结果 与对照组相比,1/日恩度组小鼠腹水肿瘤细胞数和红细胞数均减低(P<0.05);1/日恩度组能明显降低腹水体积和腹膜渗透性(P<0.05),并能减少小鼠腹腔脏器的种植转移,以1/日恩度组为明显.1/日恩度组小鼠的生存期长于对照组(P<0.05).结论 恩度腹腔内连续应用为本试验的最佳用药模式,本研究为恩度的临床应用方法提供实验室依据.恩度有望成为治疗恶性腹腔积液的一种新的有效药物.     

仙人掌提取物对S180荷瘤小鼠IL-2、TNF-α的影响

目的观察仙人掌提取物对S180荷瘤小鼠IL-2、TNF-α的影响。方法用S180腹水型肉瘤小鼠的腹水肿瘤细胞悬液接种小鼠左腋皮下复制肿瘤模型。造模后随机分为仙人掌提取物组、肝复乐片组、模型空白组、正常对照组。前两组分别给予仙人掌提取液、肝复乐混悬液灌胃;模空组和正常对照组以生理盐水灌胃。每次0.2 ml/10g.d-1,每天1次,连续10天。于第11天取材测定小鼠血清IL-2、TNF-α含量。结果仙人掌提取物组小鼠血清IL-2水平比模空组明显提高(P<0.01);TNF-α水平明显降低(P<0.05)。结论仙人掌提取物能提高IL-2水平,降低TNF-α水平,有抗肿瘤作用。     

rAAV2-slug-siRNA对原位胰腺癌移植瘤转移和血管生成影响的实验研究

目的:研究slug基因的RNA干扰重组腺病毒载体(rAAV2-slug-siRNA)对原位胰腺癌移植瘤的转移和血管生成的影响。方法:建立胰腺癌细胞株AsPC-1裸鼠原位胰腺癌移植瘤模型,随机分成3组,每组8只,分为空白对照组(腹腔注射生理盐水)、阴性对照组(腹腔注射rAAV2-GFP)、实验组(腹腔注射rAAV2-slug-siRNA)。10周后利用CO2麻醉法处死裸鼠,观察原位胰腺癌移植瘤的重量,抑瘤率,肝、胃肠、腹腔转移,腹水等情况,及肿瘤细胞微血管密度(MVD)。RT-PCR检测移植瘤的slug mR-NA表达,Western blot检测slug蛋白的表达。结果:胰腺癌细胞株AsPC-1裸鼠原位胰腺癌移植瘤模型建立成功,成瘤率100%。实验组原位胰腺癌移植瘤瘤重明显低于阴性对照组(P<0.05),抑瘤率为70.83%。阴性对照组诱发的裸鼠胰腺癌质地硬,肿块向四周浸润并形成癌性粘连,与阴性对照组相比,实验组腹膜、肝、毗邻脏器转移率和形成腹水率均明显下降(P<0.05)。实验组MVD明显少于阴性对照组(P<0.05),slug mRNA相对表达量(RT-PCR)和slug蛋白相对表达量(Western blot)明显低于阴性对照组(P<0.05)。结论:rAAV2-slug-siRNA可能通过抑制肿瘤血管生成而抑制原位胰腺癌移植瘤转移。     

131 I标记壳聚糖/明胶-拓扑替康载药膜对SK-OV-3腹腔荷瘤鼠的治疗效果

目的制备京尼平交联的~(131)I标记壳聚糖/明胶-拓扑替康膜,并研究复合膜对SK-OV-3荷瘤裸鼠的治疗效果,为同步放化疗载药膜剂的肿瘤治疗等相关研究提供基础。方法制备SK-OV-3腹腔荷瘤裸鼠模型,并手术植入复合膜到荷瘤裸鼠腹腔中,观察各组裸鼠的生存周期、转移瘤及血性腹水重量,考察复合膜对腹腔荷瘤裸鼠的治疗效果。结果 SK-OV-3腹腔荷瘤裸鼠经手术植入复合膜后观察各组生存天数、腹腔转移瘤及血性腹水量可知,同时应用拓扑替康及~(131)I的~(131)I+TPT组疗效优于单独使用拓扑替康或~(131)I,稍次于顺铂对照组,明显优于空白对照组。结论 ~(131)I标记的壳聚糖/明胶拓扑替康载药膜对SK-OV-3腹腔荷瘤裸鼠有一定疗效,能延长荷瘤裸鼠的生存天数并抑制腹腔转移瘤及血性腹水的形成。     

水流动力学注射介导的IL-12基因对小鼠恶性腹水的治疗作用

目的：应用水流动力学注射基因转移法转移白细胞介素12（IL-12）基因，观察其对小鼠恶性腹水的治疗效果。方法：通过小鼠腹腔注射H₂₂肿瘤细胞建立恶性腹水模型。将小鼠分为3组，接种后第3天通过水流动力学注射方法分别注射质粒pCMV-mIL-12、pCMVβ和生理盐水(NaCl)进行治疗。治疗后一定时间点取血检测血清中IL-12、干扰素-γ（IFN-γ）和一氧化氮（NO）的含量。注射后第14天各组分别处死3只小鼠，测量腹水体积，腹水细胞进行HE和AO/EB染色。其余小鼠用于观察生存期。结果：与只注射pCMVβ或生理盐水的小鼠相比，接受pCMV-mIL-12治疗的小鼠的生存时间明显延长（P<0.01），而且小鼠血清中IL-12、IFN-γ和NO水平明显升高（P<0.01或P<0.05），小鼠腹水中有活力的肿瘤细胞明显减少（P<0.01），凋亡的细胞增多（P<0.01）。结论：水流动力学注射介导的IL-12基因表达减少了恶性腹水小鼠的血性腹水生成并诱导肿瘤细胞凋亡，从而延长了小鼠生存期。     

经股动脉注射途径建立前列腺癌和乳腺癌骨转移模型

目的 探索建立高效、可靠的肿瘤骨转移动物模型的方法.方法 将C57BL/6J雄鼠随机分为4组,每组15只;BALB/c雌鼠15只,设一组.将小鼠前列腺癌细胞RM-1和乳腺癌细胞4T1-luc消化、洗涤、计数后用生理盐水重悬至1×105/mL,取100μL,经股动脉将4T1 luc细胞注射到BALB/c雌鼠,并通过活体成像检验此方法转移成瘤的特异性.将100μL相同浓度的RM-1细胞悬液分别经股动脉、髂外动脉注射C57雄鼠各15只,比较两种不同注射方式所需时间、小鼠存活率,注射21天后将下肢骨HE切片,显微镜下观察并比较两种方法建立骨转移模型的成瘤率.结果 经股动脉途径注射肿瘤细胞悬液所需的止血时间为2.53±1.75 min,经髂外动脉注射方法所需的止血时间为4.70±1.63 min(P<0.05);经股动脉注射方法的手术时间为14.67±2.16 min,经髂外动脉注射方法的手术时间为22.47±3.50 min(P<0.05);术后21 d经股动脉和髂外动脉注射组小鼠的生存率分别为93.3%和66.7%(P<0.05);采用两种方法的肿瘤转移率均为100%;分别经股动脉和髂外动脉注射生理盐水组和肿瘤细胞悬浮液组在上述3项指标无显著差异.活体成像结果显示,肿瘤特异性地转移到了股骨和胫骨中.结论 经股动脉注射方法建立肿瘤骨转移模型的手术及止血时间短、小鼠的存活率及肿瘤转移的成功率、特异性高,可作为肿瘤骨转移的新型动物模型.     

复方苦参注射液对小鼠移植性S180肉瘤血管形成抑制作用

[目的]探讨复方苦参注射液对肿瘤血管形成的抑制作用。[方法]通过建立小鼠肿瘤模型,运用免疫组化方法,观察复方苦参注射液对小鼠移植性S180肉瘤血管形成抑制作用。[结果]小鼠腹腔注射复方苦参注射液0.3,0.6g/kg,连续8d后瘤体较对照组分别减小25%,36%;瘤体微血管密度较对照组分别减小32%,40%。[结论]复方苦参注射液能够抑制肿瘤的生长,具有抑制肿瘤血管形成的作用。     

赖氨酰氧化酶对荷胃癌裸鼠肿瘤形成和转移的影响

目的观察用β-氨基丙腈(β-aminopropionitrile,BAPN)抑制赖氨酰氧化酶(lysyl oxidase,LOX)对荷胃癌裸鼠肿瘤形成和转移的影响。方法 6周龄的裸鼠,随机分为BAPN预处理组和对照组,预处理组10只,对照组15只。BAPN预处理组每天用BAPN 100mg.kg-1腹腔注射,对照组每天用相同体积的无菌PBS腹腔注射。2周后,以人胃癌细胞SGC-7901 1×107.mL-1建立荷胃癌裸鼠模型。肿瘤细胞接种4周后,比较成瘤率、瘤重和转移率。结果 BAPN预处理组平均瘤重高于对照组,P<0.05;BAPN预处理组的成瘤率和转移率与对照组的差异无统计学意义。结论用BAPN预先抑制LOX活性后,肿瘤的重量明显增加,但对原发肿瘤形成和转移未见明显作用。