容量激活性氯离子通道在低氧高二氧化碳处理的大鼠PASMCs的表达及其与MAPK通路的关系

 目的：探讨容量激活性氯离子通道（CLC3）在低氧高二氧化碳处理的大鼠肺动脉平滑肌细胞（PASMCs）中的表达变化及其与MAPK信号通路的关系。方法：酶消化法取雄性SD大鼠PASMCs进行原代培养,采用小鼠抗大鼠α-平滑肌肌动蛋白免疫荧光细胞化学法进行细胞鉴定;复制低氧高二氧化碳模型,采用免疫印迹法检测CLC3蛋白的表达;采用RT-PCR技术测定CLC3 mRNA水平的表达。结果：(1)与对照组比较,低氧高二氧化碳组PASMCs CLC3 mRNA和蛋白表达量均显著上调(均P＜001);(2)与低氧高二氧化碳组比较,ERK抑制剂U0126+低氧高二氧化碳组PASMCs CLC3 mRNA和蛋白表达量均显著下调(均P＜001);p38抑制剂SB203580+低氧高二氧化碳组PASMCs CLC3 mRNA和蛋白表达量均明显上调(均P＜001);p38激活剂茴香霉素+低氧高二氧化碳组PASMCs CLC3 mRNA和蛋白表达水平均显著下降(P＜005和P＜001)。结论：低氧高二氧化碳可上调大鼠PASMCs CLC3 mRNA和蛋白的表达;ERK1/2通路介导了低氧高二氧化碳诱导的大鼠PASMCs CLC3表达, 而p38 MAPK通路活化则下调低氧高二氧化碳诱导的CLC3 mRNA和蛋白表达。     

三七总皂苷对低氧大鼠肺动脉压和肺组织p38 MAPK表达的影响

目的:探讨三七总皂苷(PNS)对低氧大鼠p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)表达的影响,及预防低氧性肺动脉高压(HPH)的作用和机制。方法:将30只SD大鼠随机分为3组:正常对照组、低氧组和低氧+PNS组。观察各组大鼠平均肺动脉压(mPAP)、平均颈动脉压(mCAP)和右心室/(左心室+室间隔重量)比[RV/(LV+S)],免疫组化法和RT-PCR法分别检测肺小血管壁磷酸化p38 MAPK(p-p38 MAPK)蛋白和肺组织中mRNA的含量。结果:与对照组相比,低氧组大鼠mPAP、RV/(LV+S)明显升高,肺小动脉p-p38 MAPK及肺组织p38 MAPK mRNA含量显著升高(P0.05)。低氧+PNS组mPAP、RV/(LV+S)、肺小动脉p-p38 MAPK及肺组织p38 MAPK mRNA含量明显低于低氧组(P0.05)。结论:PNS具有显著预防HPH的作用,其机制可能与其降低p38 MAPK mRNA的表达有关。     

慢性低氧高二氧化碳诱导肺动脉高压小鼠肺组织白细胞介素6的表达

目的: 通过观察慢性低氧(O₂)高二氧化碳(CO₂)小鼠肺组织白细胞介素6(interleukin 6, IL-6)的表达水平变化,探讨其在慢性低O₂高CO₂肺动脉高压形成过程中的作用。方法: 16只SPF级雄性C57BL/6小鼠按随机数字表法随机分为正常对照组和低氧高CO₂组,每组8只。低氧高CO₂组置于常压低O₂高CO₂舱内, O₂浓度9%~10%,CO₂浓度5%~6%,每天8h,每周6 d,共4周。4周后,分离右心室和左心室加室间隔,计算右心肥大指数,肺组织行苏木精-伊红(HE)染色,光学显微镜观测肺血管结构变化,Image-Pro Plus 6.0图像分析系统测量管壁厚度占血管外径的百分比(WT%)和管壁面积占血管总面积的百分比(WA%)。免疫组织化学方法观测肺动脉中IL-6蛋白的表达,ELISA测定肺组织匀浆中IL-6蛋白浓度;RT-PCR检测肺组织中IL-6 mRNA表达。结果: 低氧高CO₂组与对照组相比:(1)右心肥大指数、WT%和WA%显著提高(P<0.01);(2)肺组织中IL-6的蛋白表达水平显著提高(P<0.01);(3)肺组织中IL-6 mRNA表达水平明显提高(P<0.05)。结论: 在慢性低氧高二氧化碳环境中,小鼠的肺组织IL-6水平升高伴随肺血管壁肌层增厚和管腔狭窄,这可能与小鼠的肺动脉高压发生、发展有关。     

低O2高CO2对大鼠肺中小动脉可溶性鸟苷酸环化酶基因及其蛋白表达的影响

目的:探讨慢性低O₂高CO₂时大鼠肺动脉可溶性鸟苷酸环化酶(sGC)基因及其蛋白表达的变化。方法:复制大鼠低O₂高CO₂肺动脉高压模型, 免疫组织化学技术观察低O₂高CO₂肺动脉高压1、2、4周组及对照组肺中小动脉sGCα₁、β₁亚基蛋白的表达, 原位杂交技术观察肺中小动脉sGCα₁亚基mRNA的表达。结果:低O₂高CO₂1、2、4周组肺中小动脉sGCα₁、β₁亚基蛋白及α₁亚基mRNA表达弱于对照组(均P＜0.01)。结论:低O₂高CO₂抑制肺中小动脉sGCmRNA及其蛋白的表达, 参与肺动脉高压形成与发展。     

TGF-β2,p38MAPK在哮喘气道重塑模型中的表达

目的:建立哮喘气道重塑模型并检测IL-13、TGF-β₂在气道重塑中的表达。方法: 建立气道重塑模型,光镜、电镜下观察形态学改变;应用原位杂交技术检测IL-13、TGF-β₂ mRNA表达,Western blot 检测p38MAPK蛋白表达。结果: 气道重塑模型表现为明显的上皮增生,粘液产生增加,平滑肌细胞增生、上皮下大量胶原沉积,同时伴显著的炎症细胞浸润,显著表达IL-13,TGF-β₂ mRNA及p38MAPK蛋白。结论: 气道重塑肺组织显著表达IL-13、TGF-β₂ mRNA、p38MAPK,表明Th2细胞因子、TGF-β在气道重塑中可能起一定作用,提示p38MAPK可能与哮喘的发病过程并与气道重塑相关。     

内源性一氧化碳对低氧大鼠肺动脉转化生长因子-β3和Ⅰ型胶原表达的影响

目的:探讨内源性一氧化碳(CO)对低氧大鼠肺动脉胶原代谢的作用及其机制。方法:采用常压低氧大鼠肺动脉高压模型,观察血红素氧合酶(HO)抑制剂锌原卟啉-Ⅸ(ZnPP-Ⅸ)对肺动脉平均压(PAMP)和肺组织匀浆碳氧血红蛋白(HbCO)含量的影响,并用免疫组织化学和核酸原位杂交法分别观察ZnPP-Ⅸ对肺动脉转化生长因子-β₃(TGF-β₃)、Ⅰ型胶原蛋白的表达和肺动脉TGF-β₃mRNA、Ⅰ型前胶原mRNA和金属蛋白酶组织抑制因子(TIMP-1)mRNA表达的影响。结果:ZnPP-Ⅸ使低氧大鼠PAMP明显升高,肺组织匀浆CO含量明显降低;ZnPP-Ⅸ能促进TGF-β₃蛋白表达和TGF-β₃mRNA表达,显著促进低氧大鼠肺动脉Ⅰ型胶原蛋白表达和Ⅰ型前胶原mRNA表达,上调TIMP-1mRNA的表达。结论:内源性CO可能通过抑制TGF-β₃mRNA和TGF-β₃蛋白表达而抑制胶原蛋白的合成,促进胶原的降解,从而对低氧大鼠肺动脉胶原代谢发挥重要的调节作用。     

柚皮苷在促大鼠骨髓间充质干细胞骨向分化过程中对MAPK信号通路的影响

目的: 研究中药单体柚皮苷(NG)对体外培养的大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)向成骨细胞分化过程中MAPK信号通路的影响。方法: 观察在正常、加入p38、ERK和JNK通路抑制剂SB203580、PD98059、SP600125及3种抑制剂全部加入的情况下,各组碱性磷酸酶(ALP)、骨钙素(BGP)、I型胶原(Col I)等骨向分化指标的差异。用Western blotting技术检测各组p38、ERK1/2和JNK蛋白的磷酸化水平,用荧光定量PCR技术检测细胞因子转化生长因子β₁(TGF-β₁)、骨形成蛋白2(BMP-2)和核心结合因子α1(Cbfα1) mRNA的表达。结果: (1)10^-7mol/L为本实验中NG的最佳促骨向分化浓度。(2) NG最佳浓度组的ALP和BGP含量比其它各组都高(P<0.05),Col I含量无明显差异(P>0.05);与NG组相比,加入不同抑制剂组的ALP、BGP和ColⅠ表达量出现不同程度的降低。(3)与空白组相比,NG组JNK蛋白的磷酸化水平升高(P<0.05),p38蛋白的磷酸化水平降低(P<0.01),ERK1/2蛋白的磷酸化水平无明显差异(P>0.05)。与NG组相比,加入不同抑制剂组的p38、ERK1/2和JNK蛋白的磷酸化水平有升高也有降低。(4) NG组上调BMP-2的表达(P<0.05),下调Cbfα1的表达(P<0.05),而对TGF-β₁的表达无明显影响(P>0.05)。与NG组相比,加入不同抑制剂组的TGF-β₁、BMP-2和Cbfα1 mRNA表达量出现不同程度的降低。结论: NG主要通过激活MAPK信号通路中ERK通路、JNK通路以及上调BMP-2的表达,促进MSCs的骨向分化。NG上调BMP-2的表达受MAPK通路中p38通路的影响较大。     

尾加压素Ⅱ通过ERK1/2途径诱导大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖和上调Egr-1表达

 目的:研究不同浓度尾加压素Ⅱ（UⅡ）及其受体拮抗剂urantide对培养大鼠肺动脉平滑肌细胞（PASMC）增殖的影响,探讨丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）途径及早期生长反应因子1（Egr-1）在UⅡ诱导大鼠PASMCs增殖中的作用。 方法: 以组织贴块法原代培养大鼠PASMCs：(1) 采用BrdU掺入实验测定不同浓度（1 μmol/L、0.1 μmol/L和0.01 μmol/L）UⅡ及其受体拮抗剂对大鼠PASMCs 增殖的影响;(2) 采用real-time PCR检测UⅡ及其受体拮抗剂对细胞外信号调节激酶1/2 (ERK1/2)、应激活化蛋白激酶（SAPK）、p38 MAPK及Egr-1 mRNA 表达的影响;(3) 采用Western blotting检测UⅡ、urantide及ERK1/2抑制剂PD98059对PASMCs磷酸化ERK1/2（p-ERK1/2）、p-SAPK、p-p38 MAPK和Egr-1蛋白表达的影响。 结果: （1）UⅡ在一定浓度范围（1 μmol/L、0.1 μmol/L和0.01　μmol /L）呈浓度依赖性地促进肺动脉平滑肌细胞增殖(P＜0.01或P＜0.05),这种增殖作用可被urantide拮抗(P＜0.05);（2）UⅡ上调ERK1/2、SAPK及Egr-1 mRNA表达(P＜0.01或 P＜0.05),PD98059和(或)urantide可拮抗UⅡ诱导的ERK1/2、SAPK和Egr-1 mRNA的表达(P＜0.01或 P＜0.05),但对p-p38 MAPK无影响;（3）UⅡ可增加PASMCs p-ERK1/2、p-SAPK及Egr-1蛋白表达(P＜0.01或 P＜0.05),urantide及PD98059可拮抗UⅡ诱导的p-ERK1/2、p-SAPK和Egr-1蛋白表达(P＜0.01, P＜0.05)。 结论: UⅡ可能通过ERK1/2途径诱导PASMCs增殖和上调Egr-1表达,Egr-1可能通过激活ERK1/2途径参与了PASMCs的增殖。     

ERK通路和三七总皂苷干预在低氧高二氧化碳性肺动脉高压中的作用

目的: 研究 ERK 信号通路在大鼠低氧高二氧化碳性肺动脉高压发生发展中的动态变化;探讨三七总皂苷(PNS)防治低氧高二氧化碳性肺动脉高压的机制。方法: 复制慢性低氧高二氧化碳性肺动脉高压大鼠模型;分为正常(N)组,低氧高二氧化碳性肺动脉高压3 d(H_3d)、1周(H_1w)、2周(H_2w)、4周(H_4w)组及PNS治疗(H_p)组,H_p组腹腔注射三七总皂甙注射液,余组注射等量生理盐水;光镜下比较各组大鼠肺细小动脉结构;Western 印迹法和免疫组织化学技术检测各组肺组织及肺血管 p-ERK、ERK 蛋白的表达。结果: (1) H_1w、H_2w、H_4w和H_p组的肺细小动脉管壁面积/管总面积(WA/TA) 均高于N组(均P<0.05), 但 H_3d 组较N 组增加不明显(P>0.05),H_p组 WA/TA 明显低于 H_4w 组(P<0.05)。 (2) 肺组织 p-ERK蛋白在 N 组表达不明显,在 H_3d 组表达即开始上升,在 H_1w、H_2w、H_4w 组均高水平表达 ( P<0.05)。 (3) 肺小动脉壁 p-ERK 蛋白在N组表达呈弱阳性或阴性,H_3d 组表达上升,在 H_1w、H_2w、H_4w 组表达水平逐渐升高( P<0.05)。(4) H_p组肺组织 p-ERK 蛋白、肺小动脉壁 p-ERK 蛋白表达较低氧高二氧化碳组降低(P＜0.05)。结论: ERK 信号通路可能介导了大鼠低氧高二氧化碳性肺动脉高压的形成。PNS 可能通过抑制p-ERK表达减轻这一过程。     

p38信号通路对SETD4在细胞中的表达和定位的影响

目的: 观察SETD4(SET domain containing 4)蛋白在不同细胞中的表达和定位情况,以及亚砷酸钠(NaAsO₂)刺激对细胞SETD4表达和定位的影响,探讨NaAsO₂诱导SETD4的改变是否依赖于p38信号通路。方法: 用Western blotting检测SETD4在不同细胞中蛋白的表达情况,用细胞免疫荧光技术检测SETD4在细胞中的定位;用NaAsO₂刺激 p38 ^+/+和 p38 ^-/-细胞,分别收集细胞总蛋白检测SETD4蛋白的表达变化,同时观察SETD4的定位和移位改变。结果: SETD4蛋白无论在鼠源还是人源的细胞中均有表达;细胞免疫荧光结果显示SETD4在整个细胞中分布,以胞质较多; p38 ^+/+和 p38 ^-/-细胞受NaAsO₂刺激后其SETD4蛋白的表达趋势一致,即均在6 h时有明显减少; p38 ^+/+细胞受NaAsO₂刺激后SETD4蛋白从胞质向胞核移位,而 p38 ^-/-细胞SETD4的移位现象不明显。结论: SETD4蛋白在不同种属及组织来源的细胞中均有表达,表现为全细胞分布,以胞质为主;NaAsO₂刺激可影响细胞SETD4蛋白的表达水平及定位,NaAsO₂诱导的SETD4移位改变有赖于p38 MAPK介导的信号通路。     

SB203580在电压依赖性钾离子通道阻断剂4-氨基吡啶增强大鼠低氧高二氧化碳性肺血管收缩中的作用

 目的：探索电压依赖性钾离子通道（KV）和p38 丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路在低氧高二氧化碳性肺血管收缩（HHPV）中的作用。方法：制作正常SD大鼠离体二级肺动脉环,在常氧及低氧高二氧化碳条件下观察肺动脉环的张力变化;在急性低氧高二氧化碳条件下,分别用KV阻断剂4-氨基吡啶（4-AP）、p38 MAPK信号通路抑制剂SB203580和4-AP＋SB203580孵育二级肺动脉环,测定各组血管环的张力值。结果：在急性低氧高二氧化碳条件下,（1）肺动脉环呈现双相性的收缩(P＜0.05或P＜0.01）;（2）经4-AP孵育的二级肺动脉环,II 期收缩幅度增强（P＜005或P＜0.01）;（3）SB203580能使4-AP所致的二级肺动脉环II 期持续收缩幅度显著降低 (P＜0.05或P＜001)。结论：4-AP可增强大鼠HHPV的作用,而 SB203580能使4-AP所致的二级肺动脉环II 期持续收缩幅度显著降低,提示p38 MAPK信号通路的参与可能是KV调节大鼠HHPV作用的重要机制之一。     

MAPK通路抑制剂对三七皂苷单体R1减轻大鼠低氧高二氧化碳性肺血管收缩的影响

 目的：探讨三七皂苷单体R1对低氧高二氧化碳性肺血管收缩(HHPV)的影响及其与MAPK信号通路的关系。方法：采用大鼠离体肺动脉环灌流模型,随机将其分为：常氧组（N组）;低氧高二氧化碳组（H组）;低氧高二氧化碳+DMSO组（HD组）;低氧高二氧化碳+R1组,又分为低浓度组（RL组）、中浓度组（RM组）和高浓度组（RH组）;低氧高二氧化碳+SB203580组（S组）;低氧高二氧化碳+U0126组（U组）;低氧高二氧化碳+R1+SB203580组（RS组）;低氧高二氧化碳+R1+U0126组（RU组）。观察二级肺动脉环在常氧及急性低氧高二氧化碳条件下的张力变化。在急性低氧高二氧化碳条件下,观察不同浓度R1孵育及最佳浓度R1分别与SB203580、U0126联合孵育对HHPV三期变化的影响,按照低氧高二氧化碳反应性测定方法测定血管张力变化值。结果：在急性低氧高二氧化碳条件下：（1）二级肺动脉呈现双相性收缩变化,与N组相比显著差异（P＜005或P＜001）;(2)HD组和RL组能明显缓解HHPV的I期快速收缩,逆转II期持续收缩,RM组作用不明显,RH组增强HHPV的I期快速收缩和II期持续收缩。与HD组比较,RL和RH组有显著差异（P＜005或P＜001）;(3)RS组和RU组收缩峰值较HD组均明显下降,II期持续收缩逆转为舒张状态。与RL组相比,RS组和RU组HHPV显著缓解(P＜005或P＜001)。与S组和U组相比,RS组和RU组HHPV显著缓解(P＜005或P＜001)。结论：低浓度（8 mg/L）三七皂苷单体R1可减轻大鼠急性HHPV,其机制可能与MAPK（p38 MAPK和ERK1/2）信号通路的参与有关。     

阻断4-1BB/4-1BBL通路在系统性红斑狼疮患者T淋巴细胞活化中的作用

目的 探讨协同刺激分子4-1BB/4-1BBL在系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)T淋巴细胞活化中的作用机制.方法 应用RT-PCR和Western blot方法检测体外培养20例SLE患者和20例正常对照者T淋巴细胞活化前后及应用抗4-1BB单抗阻断后p38 MAPK和NF-kB表达的变化.结果 SLE患者T淋巴细胞NF-kB mRNA和p38 MAPK mRNA表达及其蛋白水平明显高于正常对照组(P均＜0.01),活化后的表达进一步升高(P均＜0.01).阻断4-1BB/4-1BBL通路后SLE患者T淋巴细胞p38 MAPK mRNA及蛋白水平的表达均明显下降(P均＜0.01),但是NF-kB mRNA及蛋白水平的表达无明显变化(P＞0.05).结论 协同刺激分子4-1BB可能通过p38MAPK信号转导通路促使SLE患者T淋巴细胞的活化与增殖.     

Kv1.5对大鼠低氧高二氧化碳性PASMCs增殖、凋亡的影响及与MAPK通路的关系

 目的：探讨电压依赖性钾离子通道Kv1.5对大鼠低氧高二氧化碳性肺动脉平滑肌细胞（PASMCs）增殖、凋亡的影响及其与丝裂原激活蛋白激酶（MAPK）信号通路的关系。方法：体外培养大鼠PASMCs,复制低氧高二氧化碳模型,随机分组如下：常氧组（N组）;低氧高二氧化碳组（HH组）;低氧高二氧化碳+溶剂DMSO对照组（HD组）;低氧高二氧化碳+ERK1/2通路抑制剂U0126组（HU组）;低氧高二氧化碳+p38 MAPK通路抑制剂SB203580组（HS组）;低氧高二氧化碳+MAPK通路激动剂茴香霉素（anisomycin）组（HA组）。采用CCK-8法检测细胞活性,蛋白免疫印迹法检测Kv1.5、增殖细胞核抗原（PCNA）及Bax蛋白的表达水平。结果：与N组相比,HH组和HD组细胞活性增加（P<0.01）,PCNA蛋白表达上调,Kv1.5及Bax蛋白表达均明显降低（P<0.01）,HH组和HD组间各指标变化均无显著差异（均P>0.05）;较之HD组,HU组、HS组及HA组细胞活性降低（P<0.05或P<0.01）,PCNA蛋白表达下调,Kv1.5及Bax蛋白表达均明显增加,差异均显著（P<0.01）,其中以HA组各指标变化最明显。结论：钾离子通道Kv1.5对低氧高二氧化碳性大鼠PASMCs增殖、凋亡的调节可能与MAPK通路的激活有关。     

p38MAPK介导高糖下调肾小管上皮细胞表达BMP-7

目的:观察高糖环境中培养的原代肾小管上皮细胞骨形态发生蛋白-7(BMP-7)表达及p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)信号通路的作用。方法:原代培养大鼠肾小管上皮细胞,随机分为正常对照组、高糖组、p38MAPK阻断剂SB202190+高糖组和高渗组,处理72h后收集贴壁细胞,免疫细胞化学检测BMP-7和纤维连接蛋白(FN)表达;Westernblotting检测p38MAPK和磷酸化p38MAPK(p-p38MAPK)的表达;RT-PCR法检测BMP-7和FNmRNA水平。结果:正常对照组肾小管上皮细胞BMP-7主要表达于细胞浆,有少量总p38MAPK与FN表达,未见p-p38MAPK;高糖状态激活了p38MAPK,p-p38MAPK蛋白表达明显增加,FN的表达也明显增多而BMP-7的表达显著减少;与SB202190共同培养72h后,p-p38MAPK的表达较高糖组减少约80%,BMP-7的表达却被显著上调,而FN的表达减少。高渗组与正常对照组比较无明显差异。结论:高糖状态下肾小管上皮细胞BMP-7蛋白和mRNA均减少,阻断p38MAPK信号通路可促进内源性BMP-7增多,提示p38MAPK可能参与高糖下调肾小管上皮细胞BMP-7的表达。     

BMP4 induces HO-1 via a Smad-independent, p38MAPK-dependent pathway in pulmonary artery myocytes

Bone morphogenetic proteins (BMPs) are multifunctional cytokines, which play a key role in vascular development and remodeling. Heme oxygenase-1 (HO-1), the rate-limiting enzyme in heme catabolism, has been shown to be protective against vascular and lung injury. In a microarray study, we identified HO-1 as a major target of BMP4 signaling in human pulmonary artery smooth muscle cells (PASMCs), and confirmed the induction of HO-1 mRNA and protein by RT-PCR and Western blotting, respectively. Immunoblotting demonstrated that incubation of PASMCs with BMP4 rapidly phosphorylated Smad1/5 and activated the mitogen-activated protein kinases, p38(MAPK) and ERK1/2, in PASMCs, but not JNK. Using pathway selective inhibitors, the induction of HO-1 mRNA and protein was shown to be dependent on activation of p38(MAPK). Induction was independent of Smad1/5 signaling, since HO-1 mRNA and protein induction was intact in PASMCs harboring mutations in the kinase domain of BMP type II receptor, with disrupted Smad signaling. In addition, adenoviral transfection of kinase-deficient BMPR-II also failed to inhibit BMP4-induced HO-1 expression. In functional studies, the HO-1 inhibitor, ZnPP-IX, partly reversed the growth-inhibitory effects of BMP4, and overexpression of HO-1 in PASMCs inhibited serum-stimulated [3H]-thymidine incorporation. Taken together, these findings show that HO-1 is an important Smad-independent target of BMP signaling in vascular smooth muscle. Inhibition of HO-1 function or expression will further increase the proproliferative capacity of BMPR-II-deficient PASMCs and may thus represent a potential "second hit" necessary for disease manifestation.     

p38MAPK信号通路在雨蛙素诱导的胰腺AR42J细胞炎症反应中的作用

目的: 探讨p38 MAPK信号通路在急性胰腺炎体外模型中的作用。方法: AR42J细胞随机分为3组:正常对照组、雨蛙素组(10^-8mol/L雨蛙素)和SB203580组(10 μmol/L SB203580+10^-8mol/L雨蛙素)。于3 h收集细胞,检测淀粉酶分泌率;免疫荧光染色观察p-p38 MAPK核移位;Western blotting印迹检测p-p38 MAPK和TNF-α蛋白表达;EMSA检测NF-κB活性。结果: 与正常对照组比较,雨蛙素组淀粉酶分泌率和TNF-α蛋白水平增高(P<0.01),p-p38 MAPK表达及NF-κB活性表达增加(P<0.01);免疫荧光示雨蛙素组p-p38 MAPK发生了核移位。而与雨蛙素组相比,SB203580组明显降低淀粉酶分泌率和TNF-α蛋白表达(P<0.01),p-p38 MAPK和NF-κB的活性表达也下降(P<0.05);SB203580还抑制了p-p38 MAPK核移位。结论: p38 MAPK通路参与了胰腺细胞内的炎症反应,其机制可能涉及NF-κB通路的活化。