同一胎鼠肠和脑神经干细胞神经递质的表达

目的：观察同一胎鼠肠神经干细胞和脑神经干细胞的神经递质表达情况,探索神经干细胞移植治疗相关疾病的合适干细胞源。方法：从孕20 d的同一SD胚鼠中分别提取肠神经干细胞和脑神经干细胞,采用改良的神经干细胞培养液反复传代,取传代培养6~10 d后得到的2种不同来源的神经细胞球,通过琼脂糖预包埋免疫细胞化学检测法及流式细胞仪检测法测定神经干细胞4种神经递质的表达。结果：2种不同来源的神经干细胞的琼脂糖预包埋免疫细胞化学检测显示：肠神经干细胞神经元型一氧化氮合酶（n NOS）、胆碱乙酰转移酶（Ch AT）与相应的对照组比较差异有统计学意义（P〈0.05）;脑神经干细胞n NOS、Ch AT、多巴胺β羟化酶（DβH）与相应的对照组比较差异有统计学意义（P〈0.05）;2种不同来源神经干细胞间n NOS、Ch AT比较差异有统计学意义（P〈0.05）。流式细胞仪检测提示：肠神经干细胞γ-氨基丁酸（GABA）、n NOS、Ch AT、DβH阳性细胞合计率分别为1.59%、14.97%、5.43%、1.36%,其中n NOS、Ch AT与相应的同型对照组比较差异有统计学意义（P〈0.05）;而脑神经干细胞GABA、n NOS、Ch AT、DβH阳性细胞合计率分别为1.68%、6.14%、25.42%、9.30%,其中n NOS、Ch AT、DβH与相应的同型对照组比较差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：肠神经干细胞表达的神经递质主要为一氧化氮（NO）和乙酰胆碱（Ach）,以NO为主;脑神经干细胞表达的神经递质为NO、Ach和去甲肾上腺素（NA）,以Ach为主;2种神经干细胞均无明显表达GABA。     

lncRNA/microRNA调控中枢神经系统损伤后神经干细胞增殖的研究进展

非编码RNA(non-coding RNA,ncRNA)作为影响神经干细胞增殖的潜在靶点,近年来已成为研究改善中枢神经系统损伤的关键影响因素。虽然神经干细胞在成体神经组织中不易增殖,但由于ncRNA具有调控细胞更新的作用,且微小RNA(microRNA,miRNA)与长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)之间作用方式具有复杂性与多样性,因此近年来二者成为调控神经干细胞增殖的研究热点。本文总结近年来miRNA、lncRNA及miRNA与lncRNA共同作用如何影响神经干细胞的增殖,并就目前研究的局限性进行深入分析,并阐述康复医学领域通过物理因子介导神经干细胞增殖的研究,为将来相关领域的研究提供方向。     

向神经细胞分化的骨髓间充质干细胞在中枢神经系统疾病治疗中的应用

近年来发现 ,骨髓间充质干细胞 ( MSCs)不但能分化成骨、软骨、脂肪等中胚层起源的细胞 ,而且能分化成神经元和神经胶质细胞等外胚层起源的细胞。许多学者将 MSCs移植进一些中枢神经系统疾病动物模型中 ,如 :遗传性脱髓鞘性神经病、脑卒中、脑外伤等 ,获得一些疗效 ,为中枢神经系统 ( CNS)疾病的治疗探索一条新途径。这些研究表明 MSCs是细胞治疗和基因治疗 CNS疾病的种子细胞之一 ,将为中枢神经系统疾病的治疗提供新的途径     

神经干细胞治疗神经系统疾病的研究进展

传统观点认为中枢神经系统神经元的产生只发生于胚胎期及出生后的一段时问,成熟的神经元很难或不能分裂,因而数目恒定。各种原因造成神经元的变性坏死,其缺失将是永久性的,不能通过神经元的分裂增殖以替换死亡的神经元,只能由胶质细胞来替换。神经干细胞(neural stem cell,NSC)的发现和相关研究改变了传统神经修复的观念,     

神经干细胞与中枢神经修复

就胚胎发生来讲，干细胞(stem cell，SC)这一名词人们并不陌生。但是将SC真正意义的与组织修复联系起来，并进行了大规模的基础和应用研究只有十余年。尤其是1998年Thomson和Sham—blott实验室分别成功地建立了人体胚胎干细胞系，成为继人类基因组计划之后又一次生物学革命，2001年被列入世界六大热门科技研究领域之一。特别是神经干细胞(neural stem cell，NSCs)研究的进展为中枢神经系统疾病的治疗展现了全新的广阔。     

海马区神经干细胞分化增殖及其对中枢系统疾病的治疗

1．1存在、来源 1992年，Reynolds等从成年鼠脑纹状体中首次分离出能在体外持续增殖且具有向神经元及星形胶质细胞分化潜能的细胞群；表明在成年鼠脑内存在着具有干细胞特性的细胞群。1998年，Eriksson等证实成年人脑同样存在神经干细胞，使人们对神经系统再生的机制和神经系统疾病的治疗均有了新的认识。     

体外诱导人胚胎干细胞定向分化为神经干细胞

目的:探讨体外定向诱导人胚胎干细胞(human embryonic stem cells,hESCs)生成高纯度神经干细胞(neural stem cells,NSCs)的方法.方法:模拟体内神经细胞分化发育的不同阶段及微环境,分三阶段诱导hESCs定向生成NSCs.形态学观察结合免疫荧光细胞化学、流式细胞术和RT-PCR检测胚胎干细胞标志和神经干细胞标志;NSCs分化实验对所诱导的NSCs的分化潜能进行检测.结果:体外培养的hESCs在胚胎成纤维细胞饲养层上连续传代培养50代,仍保持SSEA-4,TRA-1-81阳性,表达Nanog基因,流式细胞术检测SSEA-4阳性表达率为83.44%;经三步法最终可诱导形成纯度高达90%以上的nestin阳性细胞,表达nestin基因,流式细胞术检测nestin阳性表达率为89.38%;诱导生成的细胞反复传代,仍表现为nestin阳性,并可进一步分化为神经元、星形神经胶质细胞和少突胶质细胞.结论:模拟体内神经分化过程的三步诱导法,可诱导hESCs生成较高纯度的NSCs,并能较好维持其干细胞特性和具有进一步分化的能力.     

Reprogramming of adult human neural stem cells into induced pluripotent stem cells

Background Since an effective method for generating induced pluripotent stem cells (iPSCs) from human neural stem cells (hNSCs) can offer us a promising tool for studying brain diseases,here we reporte...     

神经生长因子对神经干细胞增殖的影响

目的:观察不同剂量神经生长因子(NGF)对体外培养的神经干细胞(NSCs)增殖的影响.方法:取人胚胎组织脑室区/脑室下区(VZ/SVZ)组织分离神经干细胞,培养于DMEM/F12 B27细胞基础培养液中,加入碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)作为阳性对照组;实验组培养液中分别加入NGF至终浓度的50μg/L、20μg/L、10μg/L、5μg/L、2μg/L;培养液无添加成分作为阴性对照组.用MTT比色分析法测定细胞增殖能力,倒置显微镜下观察细胞增殖情况.结果:3 d MTT比色显示,50μg/L NGF组细胞增殖较其他各组低(P＜0.05);培养10 d时细胞活力测定表明各组细胞均有一定程度的增殖,10μg/L NGF组与阳性对照组比较差异无统计学意义,与阴性对照组比较差异有统计学意义.结论:在一定浓度范围内NGF能明显促进神经干细胞的增殖.     

人羊膜上皮细胞治疗中枢神经系统疾病

人羊膜上皮细胞(human amniotic epithelial cells,h AECs)是从胎盘内膜内壁分离纯化的一种可表达干细胞表面标记物的细胞。受精后第8天h AECs开始形成,这些细胞具有干细胞多向分化潜能。h AECs具有促进小鼠脑内神经递质水平增加、减少炎症反应、分泌神经营养因子等营养、支持神经元存活的作用。应用实验动物模型研究对阿尔兹海默病、帕金森氏病、脊髓损伤、脑卒中等疾病都具有治疗效果。本文根据近年发表的研究报告,总结h AECs移植对中枢神经系统疾病的治疗作用,以探讨h AECs移植对中枢神经损伤保护机制的理论基础。     

Tuberculosis of the central nervous system

Tuberculous involvement of the brain and spinal cord are common neurological disorders in developing countries and have recently shown a resurgence in developed ones. Tuberculous meningitis is an important manifestation and is associated with high morbidity and mortality. Diagnosis is based on clinical features, cerebrospinal fluid changes, and imaging characteristics. Bacteriological confirmation is not possible in all cases as serological tests do not have sufficient sensitivity and specificity. The polymerase chain reaction shows promise for the future. Appropriate chemotherapeutic agents should be administered as early as possible, although there is no unanimity concerning chemotherapeutic regimens or optimal duration of treatment. The patient''s clinical stage at presentation is the most important prognostic factor. The role of corticosteroids is controversial but they should be administered to all patients presenting in stage III. Surgical procedures are directed at management of the hydrocephalus. Focal lesions, intracranial tuberculomas, and tuberculous abscesses, are usually located in cerebral or cerebellar hemispheres, uncommonly in brainstem and very rarely in spinal cord. They do not usually require surgical intervention and respond well to antituberculous treatment, along with corticosteroids.


     

人胚神经干细胞的冻存与复苏

目的：研究神经干细胞浆存复苏后的成活率及再培养生长情况。方法：利用无血清培养基短期体外培养胚胎来源的神经干细胞后，以冻存液（体积分数为70％DMEM／F12，体积分数为20％胎牛血清，10％DMSO）进行冻存，于1周，4周，8周，12周，16周，20周，24周分别复苏，计活细胞比例并进行再培养。结果：复苏后神经干细胞的成活比例分别为68％、65％、65％、62％、61％、60％、60％，再培养生长良好。结论：本实验对神经干细胞成功地进行了冻存，复苏和再培养，对临床择期进行神经干细胞移植手术和建立“神经干细胞库”具有重要的意义。     

体外直接诱导人胚胎干细胞向神经细胞分化的研究

目的探讨体外直接诱导HSF6人胚胎干细胞(humanem bryonic stem cells,hESCs)分化为神经细胞的方法。方法采用直接的方法,在1%血清培养条件下,顺序添加bFGF、RA和Forskolin,诱导HSF6人ESCs分化为神经细胞。结果细胞发生神经样形态学改变,免疫荧光细胞化学分析结果显示,分化细胞表达神经干细胞特异性标志分子——巢蛋白(nestin),以及神经元标志分子——β微管蛋白Ⅲ(neuron-specific class Ⅲ beta-tubulin,TuJ1)。实验组nestin阳性细胞数占(95.2±3.03)%,明显高于未添加诱导因子组的(31.6±4.93)%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论本研究直接诱导hESCs分化为神经细胞,减少了常规经胚胎体(embryoid body,EB)的诱导方法而产生其它胚层细胞的机会,为进一步探索hESCs源性神经细胞的功能,以及为细胞替代治疗提供高纯度的hESCs源性神经细胞奠定了基础。     

Management of hemangiopericytomas in the central nervous system

目的　血管外皮细胞瘤是少见的中枢神经系统肿瘤 ,由于其易复发和转移而预后不良。本文介绍 2 6例血管外皮细胞瘤的处理经验并结合文献复习其诊治要点。方法　回顾性分析 1993年 1月至 1999年 6月华山医院收治的 2 6例血管外皮细胞瘤 ,其中 5例为复发肿瘤 ,1例为术后残留。结果　 2 6例中 2 4例病灶全切除 ,2例次全切除。术后 2 1例症状好转或不变 ,4例加重 ,1例手术后死于并发症。18例术后放疗。 18例获随访 ,随访期 1- 5 8个月 ,其中 15例恢复良好 ,2例发现转移肿瘤 ,1例复发再次手术后死亡。结论　手术全切是主要治疗方法 ,术后放疗可延缓肿瘤复发。