聚合酶链反应快速检测结核杆菌的临床应用

聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)又称体外 DNA 扩增技术或体外核酸克隆技术,自1985年初 Saiki 建立以来,在短短的几年内获得了很大发展。Hance 最先把 PCR 技术应用到结核杆菌的诊断后,国内外相继研究应用。参考国外文献,我们设计合成了一对引物。特异性地扩增结核菌 B 蛋白基     

数字聚合酶链反应(dPCR)技术在病原体基因检测应用中的研究进展

实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)的准确度和精密度容易受到很多因素的影响,数字聚合酶链反应(dPCR)作为一种新的分子定量技术,以其更高的敏感度、精密度、独立于标准曲线及更高的抗干扰能力等优点,近年来在病原体基因检测中逐渐兴起.该文将dPCR技术的特点、优势、不足及在病原体检测中的应用进行综述.     

聚合酶链反应检测结核杆菌DNA假性结果分析

附图说明了临床实验室聚合酶链反应检测结核杆菌ＤＮＡ常见假阳性及假阴性结果，并分析了出现这些结果的主要原因，为了减少监实验室ＰＣＲ检测结核杆菌ＤＮＡ假性结果的出现，检测每批标本必须同时带阴性及阳性对照，并且注意正确的加样顺序。     

铜绿假单胞菌可导致聚合酶链反应检测结核杆菌假阳性

铜绿假单胞菌可导致聚合酶链反应检测结核杆菌假阳性吕火祥，刘建栋，陈霞，许立，王爱萍（浙江省人民医院，杭州３１００１４）用ＰＣＲ技术对结核杆菌ＤＮＡ片段的扩增，可提高阳性检出率，已颇受临床和实验室关注，但此方法亦不同程度地存在假阳性问题。我们也发现铜绿...     

聚合酶链反应检测结核杆菌的临床应用价值

５８例结核病患者与２８例非结核病呼吸系统疾病患者的痰中胸水标本，分别进行聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测结核杆菌及直接涂片找抗酸杆菌，同时用酶联法（ＥＬＩＳＡ）查血清结核抗体。对照研究表达ＰＣＲ检测结核杆菌特异性好，敏感性强，临床应用前景好。     

聚合酶链反应检测结核杆菌DNA提取方法的比较

聚合酶链反应检测结核杆菌ＤＮＡ提取方法的比较王伟，陈爱萍（丽水市医院检验科，浙江丽水３２３０００）聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测临床标本中结核杆菌ＤＮＡ是诊断结核杆菌感染的一种快速敏感和特异的方法。如何从临床标本中提取ＤＮＡ则是技术的关键。目前实验室常用...     

应用套式聚合酶链反应检测孕妇外周血中胎儿DNA

确定孕妇外周血中是否存在胎儿细胞以及不同孕期对他的影响。采用套式聚事酶链反应技术，用人Ｙ染色体ＤＮＡ特异基因（ｓｅｘｄｅｔｅｒｍｉｎｉｎｇｒｅｇｉｏｎＹ，ＳＲＹ）作为研究孕妇外周血中胎儿ＤＮＡ的一个基因标本，结果在妊娠早期（８周＾＋３）开始到妊娠晚期（３８周）的孕妇血循环中均能发现源于胎儿的有核细胞，男性胎儿阳性结果的预测值在早、中、晚三个不同孕期分别为３／５，６／８，５／６，试验敏感度为：可在相     

聚合酶链反应与涂片法检测对诊断结核病的价值

结核病是当前对人类的健康具有严重威胁的重大传染性疾病之一,作为一种传染疾病,结核病已经成为全球性的社会问题和公共卫生问题.在我国,根据抽样调查结果,其感染率达到44.5％,而2004年WHO的一项统计显示,我国每年新发的结核病例占全球每年新发病例的15％,感染人数位居全球第二[1].     

聚合酶链反应在白血病诊疗中的应用

聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)是一种模拟天然DNA复制过程的体外基因扩增特异性DNA片段的新技术。它能高效扩增目的DNA片段,在数小时内完成20～50个循环,使目的DNA扩增数百万倍。该技术具有快速、敏感、特异性强等优点,目前已广泛用于传染病和遗传病的诊断,并在血液病的研究中取得了重大进展。本文就PCR在白血病诊疗中的应用概述如下。     

铜绿假单孢菌聚合酶链反应微孔膜杂交基因诊断在检测临床标本中的应用

[目的]研究痰液标本的铜绿假单孢菌(P．A)DNA提取，聚合酶链反应微孔膜杂交基因诊断方法，并与目前培养、氧化酶方法比较。[方法]使用4％NaOH液化，生理盐水稀释痰液，以及在痰液加tritoa-x100等核酸捏取方法作对比，获得最佳标本处理方法，再以此方法处理痰液及棉拭子标本，进行基因诊断方法与培养、氧化酶检验方法阳性检出率的对比。[结果]在检测的120例临床标本中，采用培养法检出阳性7例，阳性率6％；用PCR及PCR微孔膜杂交检测全部阳性。在检测敏感度上，培养法可检出150个细菌／ml，而PCR微孔膜杂交可检出3个细菌／ml。[结论]4％NaOH液化与生理盐水稀释，离心的标本核酸提取方法，不适应于P．A DNA聚合酶链反应微孔膜杂交，添加tritoa-x100处理标本可提高标本的阳性检出率，其阳性检出率明显高于目前培养和氧化酶方法，方法简便准确可靠，适用于临床。     

聚合酶链反应在白血病诊疗中的应用

聚合酶链反应（ＰＣＲ）是一种模拟天然ＤＮＡ复制过程的体外基因扩增特异性ＤＮＡ片段的新技术。它能高效扩增目的ＤＮＡ片段，在数小时内完成２０－５０个循环，使目的ＤＮＡ扩增数百万倍。该技术具有快速、敏感、特异性强等优点，目前已广泛用于传染病和遗传病的诊断，并在血液病的研究中取得了重大进展。本文在ＰＣＲ在白血病诊疗中的应用概述如下。     

聚合酶链反应检测技术在百日咳诊断中的应用研究

目的探讨聚合酶链反应（PCR）检测技术在百日咳早期诊断中的临床应用价值。方法2008年6月～2009年5月,在深圳市儿童医院呼吸科住院的年龄小于6个月免疫不完全或未进行免疫接种患儿中,选择74例反复咳嗽疑似百日咳的患儿作为研究对象,40例临床明确排除百日咳的肺炎患儿作为阴性对照,百日咳标准菌株作为阳性对照,负压吸取痰标本。从痰中提取细菌总DNA,应用PCR检测技术测定痰标本中百日咳杆菌的双目标基因（插入区域IS481以及百日咳毒素启动子区域PT）,评价PCR双目标基因检测技术在百日咳诊断中的临床实际应用价值。结果所有痰标本细菌总DNA提取效果良好,适用于PCR扩增检测。经百日咳PCR双目标基因检测74例患儿,其中20例（27％）结果为阳性,40例临床明确排除百日咳的肺炎患儿结果均为阴性,阳性对照标准茵株为阳性。结论PCR双目标基因检测技术用于诊断百日咳时,具有较好的敏感度和特异度,而且简单易行,适合百日咳杆菌感染的早期快速诊断,有良好的应用前景。     

巢式聚合酶链反应技术在流感嗜血杆菌b型检测中的应用

目的评价巢式聚合酶链反应（nested—PCR）技术在b型流感嗜血杆菌（Hib）检测中的应用价值，估计氨苄西林耐药Hi中b型的比率。方法对2000-2003年北京、上海、广州细菌监测项目中，呼吸道感染儿童鼻咽部分离培养的899株Hi，用E试验法检测氨苄西林耐药情况后，用nested-PCR与玻片凝集法对氨苄西林耐药菌株进行b型检测。结果检出74株氨苄西林耐药Hi。nested—PCR与玻片凝集法检测Hib的结果一致，74株氨苄西林耐药Hi中有2株为Hib，约占2．7％。结论nested—PCR b型荚膜检测方法可作为玻片凝集法的一个重要补充。3地4年内呼吸道感染的儿童鼻咽部携带的氨苄西林耐药Hi中，Hib的比率处于相对较低的水平。     

聚合酶链反应及其相关技术在临床微生物检测的应用前景

聚合酶链反应(ＰＣＲ)技术是一种以核酸生物化学为基础的分子生物学诊断技术,自1985年问世以来,已成为生物医学领域最有价值的研究手段之一[1],在临床医学诊断学、治疗学、考古学、农牧业等方面应用广泛。自ＰＣＲ成为分子生物学的核心技术以来,已解决了很多医学难题,如丙型肝炎病毒(ＨＣＶ)核苷酸序列的确定,以及临床检测试剂的研制和应用,并促进了反义病毒学技术的发展。特别是本世纪初由世界各国生物学家参加的破译人类全部染色体上基因组的计划中,在2003年将排出人类30亿核苷酸序列,使人类对自身从分子水平有一个里程碑认识的飞越,这一…     

聚合酶链反应在腺病毒角结膜炎诊断中的应用

设计合成多聚合酶链反应（PCR）通用引物，结合限制性片段长度多态性（RFFL）分析，建立了腺病毒性角结膜炎的检测方法，初步应用于急性角结膜患者眼拭子标本的检测。