咬合恢复对大鼠三叉神经节PPTA mRNA及其相应蛋白表达的影响

目的:研究咬合恢复对大鼠三叉神经节P物质(substance P,SP)及编码SP的前速激肽原A(PPTA)mRNA表达的影响.方法:Wistar雄性大鼠48只,随机分为3个实验组及相应的正常对照组,每组8只.实验组动物间断磨除右上、下颌磨牙牙冠至龈下,2组分别于第3、9周停止磨牙,任其自行萌出,恢复咬合关系.双侧三叉神经节(trigeminal ganglia,TG)切片行SP免疫组织化学反应(SABC法)和原位杂交反应.光镜观察摄片,并用Image Pro Plus 5.1图像分析软件进行测定.采用SPSS10.0软件包对数据进行统计学分析.结果:单侧咀嚼实验组咀嚼侧和非咀嚼侧TG内,SP阳性神经元百分比与对照组比较显著降低(P<0.01,P<0.05),其非咀嚼侧显著低于咀嚼侧(P<0.05);而PPTA mRNA阳性神经元百分比显著增高(P<0.01,P<0.05),其非咀嚼侧显著高于咀嚼侧(P<0.01).早期恢复咬合实验组TG内SP和PFTA mRNA阳性神经元百分比与对照组比较无显著差别(P>0.05),其咀嚼侧与非咀嚼侧比较无显著差别(P>0.05).晚期恢复咬合实验组TG内,SP和PPTA mRNA表达情况与单侧咀嚼实验组一致.结论:早期恢复咬合关系TG内SP和PPTA mRNA表达可恢复正常,晚期恢复咬合关系其表达不能恢复正常,SP和PPTA mRNA参与了单侧咀嚼引起的颞下颌关节病的病理变化过程.     

TrkA及PPTA mRNA在咬合创伤犬三叉神经节内的表达变化

目的：观察咬合创伤时犬三叉神经节（TG）中神经生长因子受体TrkA mRNA及前速激肽原－A（PPTA） mRNA的表达变化，探讨咬合创伤导致口面痛的可能机制。方法：将高出咬合面1.5mm的镍铬合金嵌体粘固于10只杂种犬右侧上颌第一，二磨牙咬合面的一类嵌体洞形内，造成对He牙的创伤。粘固嵌体后3，7，14，30，60天时取双侧TG。用反转录－聚合酶链式反应（RT＿PCR）检测 TG中Trk A及PPTA mRNA的表达变化并与无咬合创伤的对照组作比较。结果：（1）创伤后3－60天内创伤侧TG的Trk A和PPTA mRNA表达水平比对侧明显上调。（2）创伤侧TrkA mRNA的表达量在3－60天内均高于对照组，7－30天内维持较高水平。（3）3－30天内PPTA mRNA水平明显高地对照组，3－14天达到最高，60天组与对照无差异。结论：咬合创伤能导致TG内TrkA mRNA及PPTA mRNA表达水平的上调。Trk A和PPTA可能参与了咬合创伤所导致的口面痛。     

正畸牙齿移动过程中大鼠三叉神经节PPTA mRNA表达变化

目的：观察正畸牙齿移动不同时期大鼠三叉神经节PPTA mRNA表达变化。方法：采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测正畸加力和撤力后不同时期大鼠三叉神经节PPTA mRNA水平的变化情况。结果：加力后2h大鼠三叉神经节PPTA mRNA的表达量开始增加，加力8h至加力3d达到最高，至撤力后2～4周PPTA mRNA的表达量开始下降，但PPTA mRNA水平仍然明显高于对照组。结论：正畸牙齿移动过程中大鼠三叉神经节PPTA mRNA表达发生了明显的变化。提示P物质可能不仅参与早期正畸牙周组织的炎症损伤过程，而且可能参与了后期的组织修复重建过程。     

咬合重建对大鼠三叉神经节P物质表达影响的研究

目的：研究咬合重建对大鼠三叉神经节P物质（substance P,SP）表达的影响。方法：Wistar雄性大鼠30只,随机分为3个实验组及相应的正常对照组,每组5只。实验组动物间断磨除右上、下颌磨牙牙冠至龈下,有2组分别第3周、第9周停止磨牙,任其自行萌出,恢复咬合关系。双侧三叉神经节（trigeminal ganglia,TG）切片行SP免疫组织化学反应（SABC法）。光镜观察拍片,并用Image Pro Plus5.1图像分析软件进行测定。结果与对照组对照。SPSS10.0软件行统计分析。结果：单侧咀嚼实验组咀嚼侧和非咀嚼侧TG内SP免疫阳性神经元百分比与对照组比较显著降低（P〈0.01,P〈0.05）,其非咀嚼侧明显低于咀嚼侧（P〈0.01）。早期恢复咬合实验组TG内免疫阳性神经元百分比与对照组比较无差别（P〉0.05）,其咀嚼侧与非咀嚼侧比较无差别（P〉0.05）。晚期恢复咬合实验组TG内免疫阳性神经元百分比与对照组比较显著降低（P〈0.01,P〈0.05）,其非咀嚼侧明显低于咀嚼侧（P〈0.05）。结论：早期恢复咬合关系TG内SP表达可恢复正常,晚期恢复咬合关系SP表达不能恢复正常,SP参与了单侧咀嚼引起的颞颌关节病的病理变化过程。     

咬合创伤大鼠三叉神经节 PN3及NaN mRNA的表达

目的 观察PN3和NaN2种钠通道在咬合创伤致口面部慢性疼痛中的变化和作用。方法 应用RT-PCR方法，观察咬合创伤大鼠及空白对照大鼠双侧三叉神经节中PN3和NaN mRNA的表达。结果 空白对照组及实验组对照侧均有PN3、NaN mRNAs表达。空白对照组两侧亮度值水平接近。咬合创伤实验动物中：咬合创伤侧PN，亮度均数值为94，NaN亮度均数值为99；非咬合创伤侧PN3亮度均数值为120，NaN亮度均数值为114。咬合创伤侧三叉神经节中PN3、NaNmRNAs的凝胶电泳图像亮度值高于非咬合创伤侧。结论 咬合创伤刺激上调PN，、NaNmRNAs表达，表明咬合创伤致慢性疼痛的信号发生及传导与炎性痛具有相同的钠通道分子基础。     

咬合重建大鼠三叉神经节CGRPmRNA及其相应蛋白的表达研究

目的：研究咬合重建对大鼠三叉神经节降钙素基因相关肽（calcitonin gene-related peptide,CGRP）及CGRPmRNA表达的影响。方法：Wistar雄性大鼠48只,随机均分为3个实验组及正常对照组。实验组动物间断磨除右上、下颌磨牙牙冠至龈下,有2组分别第3周、第9周停止磨牙,任其自行萌出,恢复咬合关系。双侧三叉神经节（trigeminal ganglia,TG）切片行CGRP免疫组织化学反应（SABC法）和原位杂交反应。光镜观察拍片,并用I mage Pro Plus5.1图像分析软件进行测定。SPSS10.0软件行统计分析。结果：单侧咀嚼实验组咀嚼侧和非咀嚼侧TG内CGRP免疫阳性神经元百分比与对照组比较显著降低（P〈0.01）,其非咀嚼侧明显低于咀嚼侧（P〈0.01）,而CGRPmRNA阳性神经元百分比显著增高（P〈0.01）,非咀嚼侧明显高于咀嚼侧（P〈0.01）。晚期恢复咬合实验组TG内CGRP和CGRPmRNA表达情况与单侧咀嚼实验组一致。结论：早期恢复咬合关系TG内CGRP和CGRPmRNA表达可恢复正常,晚期恢复咬合关系其表达不能恢复正常,CGRP和CGRPmRNA参与了单侧咀嚼引起的颞颌关节病的病理变化过程。     

偏侧咀嚼对大鼠咀嚼肌超微结构的影响

目的观察大鼠偏侧咀嚼引起的咀嚼肌组织超微结构变化。方法 80只大白鼠随机分成实验组和对照组,实验组拔除右侧上颌后牙。分别于4、8周后将实验组和对照组各20只大白鼠处死,对其双侧颞肌、嚼肌的组织结构进行透射电镜观察。结果 4周后实验组双侧咀嚼肌肌原纤维均有不同程度的紊乱,Z线变形,部分线粒体有肿胀和局部溶解现象;8周后咀嚼肌上述细胞与组织损害加重。结论偏侧咀嚼可以造成咀嚼肌组织和细胞损伤,最终可能导致颞下颌关节紊乱病。     

偏侧咀嚼对大鼠咀嚼肌肌电图的影响

目的 利用动物模型，观察偏侧咀嚼对咀嚼肌肌电图的影响，从而探讨偏侧咀嚼在颞下颌关节紊乱病发病中的作用。方法 对40只大白鼠拔除右侧上颌后牙造成偏侧咀嚼模型，分成实验l组和实验2组，另外40只作为对照，分成对照l组和对照2组。l组和2组分另1于4周和8周后进行肌电图检查。结果 无论是实验l组还是实验2组，其松弛状态或紧咬时颞肌、咬肌的电位明显高于对照组，并又实验组紧咬时左右咬肌不对称性活动增加，对照组的咬肌肌电活动的对称性明显高于实验组。同时，实验组双侧颞肌和咬肌的肌电图静息期较对照组显著延长。结论 偏侧咀嚼可以对咀嚼肌肌电图造成影响，可能是颞下颌关节紊乱病的病因之一。     

偏侧咀嚼条件下SD大鼠翼外肌的组织学研究

目的观察偏侧咀嚼条件下SD大鼠的翼外肌组织学变化。方法30只SD大鼠随机分成实验组(24只)和对照组(6只),实验组分为拔牙组(12只)和分牙组(12只)。6周后将动物处死,对其双侧翼外肌、咬肌进行光镜和透射电镜观察。结果实验组双侧翼外肌和咬肌肌原纤维均有不同程度的细胞与组织损害及改建。翼外肌的损害程度重于咬肌。工作侧和非工作侧没有明显差异。结论偏侧咀嚼可以造成翼外肌的组织学损伤,这种损伤可能是颞下颌关节病的持续因素之一。     

右侧偏侧咀嚼患者单侧咀嚼运动的功能性磁共振成像研究

目的:探讨右侧偏侧咀嚼患者单侧交替咀嚼运动时大脑皮层的激活特点.方法:选取7例右侧偏侧咀嚼患者,采用时段设计方法,采集偏侧咀嚼患者单侧交替咀嚼运动时全脑血氧水平依赖对比的功能性磁共振成像(functional magnetic resonance imaging,fMRI)扫描数据,以SPM2软件包进行数据分析.结果:排除过度头动的干扰因素后,7例患者中仅有5例可以采用.个例分析结果显示:右侧偏侧咀嚼患者在右侧单侧咀嚼时不同脑区BOLD信号的激活比左侧单侧咀嚼时更加广泛.5例偏侧咀嚼患者中有4例在左、右侧单侧咀嚼运动时,右侧中央前回 ( primary motor cortex,M1) 的激活均强于左侧.结论:右侧偏侧咀嚼患者在左、右侧单侧咀嚼时大脑皮层的激活特点不同.右侧偏侧咀嚼患者M1对单侧咀嚼运动的调控可能具有同侧半球优势.     

咬合重建对大鼠三叉神经节降钙素基因相关肽表达影响的研究

目的：研究咬合重建对大鼠三叉神经节降钙素基因相关肽（calcitonin gene—related peptide,CGRP）表达的影响。方法：Wistar雄性大鼠30只,随机分为3个实验组及相应的正常对照组,每组5只。实验组动物间断磨除右侧上、下颌磨牙牙冠至龈下,有二组分别于第3周、第9周停止磨牙,任其自行萌出,恢复咬合关系。双侧三叉神经节（trigeminal ganglia,TG）切片行CGRP免疫组化染色（SABC法）。光镜观察,并用Image Pro Plus 5．1图像分析软件进行测定。结果与对照组比较。进行统计学分析。结果：单侧咀嚼实验组咀嚼侧和非咀嚼侧TG内CGRP免疫阳性神经元百分比与对照组比较显著降低（p〈0．01,p〈0．05）,非咀嚼侧明显低于咀嚼侧（p〈0．01）。早期恢复咬合实验组TG内免疫阳性神经元百分比与对照组比较无差异（p〉0．05）,咀嚼侧与非咀嚼侧比较无差异（P〉0．05）。晚期恢复咬合实验组TG内免疫阳性神经元百分比与对照组比较显著降低（p〈0．01,p〈0．05）,非咀嚼侧明显低于咀嚼侧（p〈0．05）。结论：早期恢复咬合关系,TG内CGRP表达可恢复正常,晚期恢复咬合关系,CGRP表达不能恢复正常,CGRP参与了单侧咀嚼引起的颞颌关节病的病理变化过程。     

偏侧咀嚼对大鼠颞下颌关节滑膜VEGF表达影响的研究

目的:研究偏侧咀嚼对大鼠颞下颌关节(TMJ)滑膜血管内皮细胞生长因子(VEGF)表达的影响。方法:30只大白鼠随机分为6组,实验组间断磨除右侧上、下颌磨牙牙冠至龈下,对照组未做处理,饲养条件相同。实验1组磨除牙冠后4周末、实验2、3组磨除牙冠后10、16周末处死动物,取其双侧TMJ切片免疫组化检测。结果:实验1、2、3组双侧颞下颌关节滑膜VEGF表达较对照组增强。结论:偏侧咀嚼可引起颞下颌关节滑膜损伤,VEGF参与了其病理过程。     

偏侧咀嚼对大鼠TMJ滑膜iNOS表达影响的研究

目的：研究偏侧咀嚼对大鼠颞下颌关节（TMJ）滑膜诱导型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase,iNOS）表达的影响。方法：30只大白鼠随机分为6组,实验1.2.3组,对照1.2.3组,每组5只。实验组间断磨除右侧上、下颌磨牙牙冠至龈下,对照组不做处理,饲养条件相同。分别于实验后4周、10周、16周末各处死实验组与对照组各1组动物,取其双侧TMJ切片免疫组化实验,与对照组比较。结果：实验1、2、3组双侧颞下颌关节滑膜iNOS表达增强。结论：偏侧咀嚼可引起颞下颌关节滑膜损伤,iNOS参与了其病理过程。     

外源性磷酸肌酸对偏侧咀嚼大鼠咬肌组织影响的研究

目的研究能量治疗对偏侧咀嚼大鼠咬肌组织中Ca2+、Ca2+-ATP酶活性的影响,探讨外源性能量物质磷酸肌酸（CP）对偏侧咀嚼大鼠咬肌组织的保护作用。方法将20只大鼠随机分为4组,分别记为A组：磷酸肌酸钠对照组;B组：磷酸肌酸钠实验组;C组：生理盐水对照组;D组：生理盐水实验组。采用原子吸收分光光度法测定Ca2+质量分数;运用Ca2+-ATP酶试剂盒测定Ca2+-ATP酶活性;透射电镜观察咬肌组织超微结构的变化。结果1）D组拔牙侧Ca2+质量分数较其非拔牙侧（P=0.007）、C组（P=0.009）、B组拔牙侧（P=0.01）均有明显升高;2）D组拔牙侧Ca2+-ATP酶活性较其非拔牙侧（P=0.001）、C组（P=0.003）、B组拔牙侧（P=0.001）均有明显降低;3）透射电镜下观察到B组拔牙侧咬肌组织超微结构与正常对照组相近,而D组拔牙侧咬肌组织超微结构与正常对照组相差较大,损伤表现拔牙侧重于非拔牙侧。结论外源性能量物质磷酸肌酸钠对偏侧咀嚼大鼠咬肌组织有一定的保护作用,有可能成为改善咀嚼肌损伤的一个新途径。     

咬合恢复对偏侧咀嚼大鼠咀嚼肌影响的实验研究

目的：研究咬合恢复对偏侧咀嚼大鼠咀嚼肌的影响.方法：40只Wister大鼠随机分为4组,所有动物间断磨除有上、下颌磨牙牙冠至龈下,实验1组第3周、实验2组第9周停止磨牙,任其自行萌出,恢复咬合关系.对照组不停止牙冠磨除,饲养条件相同.实验1组磨除牙冠后10周末、实验2组磨除牙冠后16周末处死动物,取其双侧颞肌、咬肌进行光镜、电镜切片检查,结果与对照组对照.采用SPSS10.0软件进行统计学分析.结果：实验1组与对照1组双侧咀嚼肌受损情况有显著性差异（χ2=40,P＜0.01）.实验2组与对照2组双侧咀嚼肌受损情况无显著性差异（χ2=3.66,P＞0.05）.结论：早期咬合恢复,可恢复偏侧咀嚼大鼠咀嚼肌的损害.     

神经生长因子在牙齿损伤后三叉神经节中的表达变化

目的：探讨神经生长因子（NGF）在牙齿损伤过程中的变化。方法：制备大鼠磨牙机械损伤的模型,对其三叉神经节中NGF进行免疫组化染色。结果：正常对照组NGF在三叉神经节中低水平表达;损伤1－3d时表达明显增强;损伤5d后表达开始减弱;损伤9d后表达恢复至正常水平。结论：NGF可能参与牙齿损伤后的反应并促进其修复。     

A novel technique of delivering viral vectors to trigeminal ganglia in rats

The objective of this study was to develop a viable and reliable technique of delivering viral vectors to rat trigeminal ganglia. Adult Sprague‐Dawley rats (200–300 g) were used, and lentiviral vectors containing enhanced green fluorescence protein and calcitonin gene‐related peptide short hairpin RNA (shRNA) were generated. Following general anesthesia, viral vectors were delivered to rat trigeminal ganglia using the technique described in this study. Both X‐ray and micro‐computed tomography (micro‐CT) were employed to verify the position of the needles when injecting the vectors. In vivo fluorescence imaging and immunostaining against enhanced green fluorescence protein were performed to determine the success of viral transduction.The levels of calcitonin gene‐related peptide in trigeminal ganglia were determined using real‐time PCR, and pain levels following injections were evaluated using the Rat Grimace Scale. Our results show that injection needles can be advanced precisely at the trigeminal fossa and that viral vectors can successfully transduce trigeminal ganglia. Moreover, the levels of calcitonin gene‐related peptide at trigeminal ganglia were down‐regulated on day 7 after viral transduction. Pain levels returned to baseline by day 7 following injection. Therefore, we suggest that our trigeminal ganglion‐targeting technique could be used for delivering genes or drugs to rat trigeminal ganglia.     

实验性牙移动过程中三叉神经节内神经生长因子受体TrkA的改变

目的观察实验性牙移动时,神经生长因子受体TrkA在三叉神经节内的改变。方法采用免疫荧光方法观察大鼠实验性牙移动后,三叉神经节内TrkA免疫阳性细胞的改变。结果实验性牙移动加力24 h组3、d组、1周组,实验侧三叉神经节内TrkA免疫阳性神经元较对侧增多;2周组实验侧三叉神经节TrkA免疫阳性神经元与对照组相比差异无显著性。结论实验性牙移动时,实验侧三叉神经节内TrkA免疫阳性神经元增多。     

Effects of capsaicin in temporomandibular joint arthritis in rats

Temporomandibular joint (TMJ) arthritis was induced in female Lewis rats by unilateral injection of a suspension of heat-killed Mycobacterium butyricum in paraffin oil into the TMJ. Control rats received paraffin oil by the same route. Arthritic and control rats were pretreated either with capsaicin or denervation of the mandibular branch of the trigeminal nerve. Tissues were collected for neuropeptide extraction and analysed by radioimmunoassay and reverse-phase high-performance liquid chromatography. In all groups, the levels of substance P- (SP), calcitonin gene-related peptide- (CGRP) and neuropeptide Y- (NPY) like immunoreactivity (LI) were higher in the trigeminal ganglia than in the TMJs. In control rats, capsaicin significantly lowered the levels of SP-LI in the trigeminal ganglia and TMJ, but not CGRP-LI and NPY-LI. In the arthritic rats, capsaicin pretreatment significantly lowered the SP-LI and CGRP-LI in the trigeminal ganglia and TMJ, but not the NPY-LI. In the trigeminal ganglia the unilateral denervation significantly lowered SP-LI in control rats, and in arthritic rats SP-LI and CGRP-LI. On the denervated side of the arthritic TMJ, NPY-LI, SP-LI and CGRP- LI were significantly lowered as compared to the arthritic control rats and to the contralateral side. In this rat model, pretreatment with capsaicin and surgical denervation decreased the neuropeptide content in the trigeminal ganglia and the TMJ. The results clearly demonstrate a close interaction between increased neuropeptide release from sensory and sympathetic neurones after induction of arthritis in the rat.