黄芩苷对大鼠原代皮层神经元过氧化氢损伤的保护作用

目的:研究黄芩苷对大鼠原代皮层神经元过氧化氢损伤的保护作用。方法:采用皮层神经元过氧化氢损伤模型研究黄芩苷的抗氧化作用,取不同浓度的黄芩苷溶液,采用DPPH法测定黄芩苷自由基清除能力,用试剂盒测定黄芩苷抗超氧阴离子,通过检测尿酸生成来测定黄芩苷对黄嘌呤氧化酶活性的影响。结果:黄芩苷给药后,过氧化氢损伤后大鼠原代皮层神经元的MTT值升高,上清液中LDH下降、SOD升高,且其可有效清除氧自由基和超氧阴离子及抑制黄嘌呤氧化酶活性,且随着黄芩苷浓度升高,体系中尿酸生成逐渐减少。结论:黄芩苷对过氧化氢损伤的神经元有显著保护作用,该作用可能与上调SOD水平、清除氧自由基和超氧阴离子及抑制黄嘌呤氧化酶活性有关。     

丹参酮ⅡA对过氧化氢损伤人血管内皮细胞的保护作用

目的:研究丹参酮ⅡA对过氧化氢(H2O2)损伤人脐静脉血管内皮细胞株(CRL-1730)的保护作用。方法:H2O2诱导人血管内皮细胞损伤,用四甲基偶氮唑蓝比色法检测细胞存活数量,用比色法测细胞培养液中过氧化物丙二醛(MDA)含量及乳酸脱氢酶(LDH)的活性,并对细胞进行流式细胞仪测定,观察丹参酮ⅡA对细胞周期的影响。结果:丹参酮ⅡA对H2O2损伤的CRL-1730具有保护作用,它能抑制H2O2引起的血管内皮细胞减少,其作用主要是使S期和G2M期细胞比率剂量依赖性增加,G0/G1期细胞比率剂量依赖性减少,还能抑制过氧化氢损伤的CRL-1730释放MDA和LDH。结论:丹参酮ⅡA具有减轻H2O2损伤,保护血管内皮细胞的作用。     

HPLC同时测定复方血栓通片中丹参酮ⅡA、隐丹参酮、丹酚酸B、迷迭香酸、哈巴俄苷、三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re的含量

目的:建立高效液相色谱法同时测定复方血栓通片中丹参酮ⅡA、隐丹参酮、丹酚酸B、哈巴俄苷、迷迭香酸、三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re的含量。方法:采用HPLC,色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶(4.6 mm×250 mm,5μm),以0.05%磷酸溶液为流动相B,以乙腈为流动相A,梯度洗脱,柱温20℃,流速1 mL·min-1,检测波长203,270 nm。结果:丹参酮ⅡA、隐丹参酮、丹酚酸B、迷迭香酸、哈巴俄苷、三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re在测定范围内呈良好线性关系,回收率符合要求。结论:方法简便、准确、重复性好,可用于复方血栓通片中丹参酮ⅡA、隐丹参酮、丹酚酸B、迷迭香酸、哈巴俄苷、三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re的含量测定。     

三七皂苷和丹参酮ⅡA对炎症相关性结直肠癌小鼠的保护作用及对COX-2蛋白表达的抑制作用

目的 探讨三七总皂苷和丹参酮ⅡA对炎症相关性结直肠癌小鼠的预防作用及可能的作用机制.方法 将88只C57BL/6雄性小鼠,按随机数字表法分为11组,每组8只;分别为氧化偶氮甲烷+葡聚糖硫酸钠(AOM+DSS)模型对照组,三七总皂苷低、中、高剂量组,丹参酮ⅡA低、中、高剂量组,三七总皂苷+丹参酮ⅡA低、中、高剂量组,空白...     

黄芪甲苷和三七总皂苷配伍对脑缺血再灌注损伤大鼠海马NSCs的保护作用

目的探讨黄芪甲苷(AS)和三七总皂苷(PNS)配伍对脑缺血再灌注损伤大鼠海马神经干细胞(NSCs)的保护作用。方法无血清法培养新生大鼠海马NSCs,将NSCs分为对照组、缺糖缺氧-再灌注(OGD-R)组、AS和PNS配伍组。对照组常规培养,OGD-R组无糖缺氧处理后常规孵育,AS和PNS配伍组在OGD-R基础上用AS和PNS干预培养。比色法测定NSCs的乳酸脱氢酶(LDH),MTT法测定NSCs存活率,DAPI染色检测NSCs凋亡,Nestin/Brd U染色检测NSCs增殖。结果与对照组比较,OGD-R组NSCs的存活率及DAPI核染、Nestin/Brd U阳性反应显著降低,LDH漏出率显著升高(P0.01)。与OGD-R组比较,AS和PNS组NSCs的存活率、DAPI核染、Nestin/Brd U阳性光密度、面密度及细胞数显著增多,LDH漏出率显著降低(P0.01)。结论 AS和PNS可提高OGD-R新生大鼠海马NSCs的存活率,抑制NSCs凋亡,促进NSCs增殖。     

HPLC测定三七粉及三七片中人参皂苷Rg1、三七皂苷R1的含量

三七,又名田七、参七,属五加科人参属植物[1],被历代医学家誉为“止血之神药,补血之妙品”,是名贵的中药材。有散瘀止血,消肿定痛的功能。主要用于治疗冠心病、心绞痛等心脑血管系统疾病[2]。三七含有皂苷、黄酮、多糖等多种有效成分,其中皂苷含量最高。经药理证明,人参皂苷Rg1和三七皂苷R1为其活性成分。作为一种天然产物,受其产地、采收季节、炮制方法和实验条件等方面的差异的影响,再加上其本身成分复杂,提取制备方法和实验条件的不同,三七产品质量往往不稳定。而质量稳定是用药安全有效的关键。所以找出一种有效测定三七及其制剂中有效…     

高效液相色谱法测定三七中三七皂苷R1的含量

目的：制定三七中皂苷成分的含量测定方法。方法：反相高效液相色谱法,蒸发激光散射检测器测定,色谱柱C18,流动相乙腈-水（30∶70）。结果：回收率为101.57%,RSD为1.98%。结论：该方法可用做控制三七的质量。     

三七皂苷中R1、Rg1在正常和脑缺血再灌注大鼠的动力学变化

目的研究三七皂苷中R1、Rg1在正常和脑缺血再灌状态下大鼠体内的药代动力学变化.方法正常组大鼠股静脉注射三七皂苷(50mg/kg),缺血再灌组大鼠阻断双侧颈总动脉造成不完全脑缺血30min、复灌同时股静脉注射等量药物.采用反相HPLC法测定iv后不同时间点大鼠血浆中R1、Rg1浓度,计算其动力学参数.结果在正常和脑缺血再灌状态下,R1、Rg1动力学呈一室开放模型.正常状态下,R1和Rg1的t1/2、AUC0～∞、CL(s)、Vd分别为21.6±7.9和20.8±3.7min、418.7±85.9和1.20±0.18mg/kg;脑缺血再灌状态下,R1和Rg1的t1/2、AUC0～∞、CL(s)、Vd分别为19.2±5.0和20.0±5.2min、416.7±58.9和1368.0±186.3μg/ml·min、0.1390±0.0413和0.0380±0.0060mg/kg·min、3.31±0.54和1.04±0.15mg/kg.结论在正常和脑缺血再灌状态下,R1、Rg1各自的动力学参数没有明显差异.R1、Rg1的动力学过程相似.     

三七总皂苷对大鼠慢性高眼压视网膜损伤的保护作用

目的探讨三七总皂苷对实验性高眼压导致的大鼠视网膜神经节细胞层(RGCL)神经元损伤有无保护作用。方法健康SD大鼠42只,其中6只为正常对照组,6只为正常用药组(三七总皂苷200mg/kg),其余30只用Akira法,烙闭大鼠右眼上巩膜静脉,制作大鼠持续性高眼压模型后随机分为生理盐水组和量效关系组,分别予tPNS50mg/kg(A组),100mg/kg(B组),150mg/kg(C组)和200mg/kg(D组)治疗1个月。处死大鼠剥取视网膜做全层铺片,进行RGCL神经元计数分析。结果正常对照组大鼠双眼RGCL神经元计数比较差异无显著性意义(P>0.05),正常对照组与正常用药组比较差异无显著性(P>0.05),正常对照组与各浓度tPNS治疗组实验眼RGCL计数差异均有显著性(P<0.05),各浓度tPNS治疗组实验眼与其自身对照眼RGCL计数差异均有显著性(P<0.05),生理盐水组与C组实验眼RGCL计数差异有显著性(P<0.05)。结论单独使用tPNS对正常大鼠RGCL神经元计数无影响,tPNS对持续性高眼压大鼠RGCL神经元损伤有部分保护作用。RGCL中的大神经元对高眼压更敏感,与青光眼RGC丧失的模式相似。     

丹参酮ⅡA对脓毒症大鼠心肌损伤的保护作用

目的探讨丹参酮ⅡA对脓毒症大鼠心肌损伤的保护作用。方法采用盲肠结扎穿孔术制备脓毒症大鼠模型(CLP),给予丹参酮ⅡA磺酸钠注射液处理,治疗12 h后观察血流动力学情况,检测血清cTnI及BNP、心肌细胞TNF-α和IL-1β炎性因子水平,并通过制备心肌病理标本分析病理积分情况。结果与假手术+生理盐水组相比,其他各组大鼠的心功能降低,血清中的cTnI及BNP、心肌细胞炎性因子水平、心脏病理积分均升高;丹参酮ⅡA磺酸钠注射液治疗后可改善脓毒症的以上异常,且对假手术大鼠的指标没有影响。结论丹参酮ⅡA对脓毒症大鼠的心脏损伤具有较好的保护作用,不仅降低了心脏炎性水平,而且还降低病理损伤。     

三七超微粉与细粉中三七皂苷R1及人参皂苷Rg1、Rb1的含量比较研究

目的测定三七超微粉中三七皂苷R1及人参皂苷Rg1、Rb1的含量,为三七超微粉质量评价提供依据。方法采用高效液相法,Diamonsil C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-水二元梯度洗脱;流速:1 mL.min-1;检测波长:203 nm;柱温:25℃。结果三七超微粉中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1和人参皂苷Rb1的平均含量均高于三七细粉,两者间的含量有显著性差异。结论超微粉质量优于细粉。本实验的含量测定方法简便、准确,可为三七超微粉的质量控制提供一定的参考依据。     

RP-HPLC测定血塞通片中人参皂苷Rg1和三七皂苷R1的含量

目的应用反相高效液相色谱法测定血塞通片中人参皂苷Rg1和三七皂苷R1含量.方法色谱柱Shim-Pack VP-ODS(5μm,250mm×4.6mmI.D),柱温27℃,流动相为乙腈-0.05%磷酸溶液(2179),检测波长203nm,流速1.0mL/min.结果人参皂苷Rg1和三七皂苷R1分别在0.167～9.994 μg(r=0.9999)和0.485～9.704 μg(r=0.9999)范围内线性关系良好.平均回收率分别为98.68%和98.68%.RSD分别为0.58%和0.79%.结论本法操作简便、结果准确,重现性好,可用于血塞通片中人参皂苷Rg1和三七皂苷R1的含量测定.     

三七皂苷R_1、R_2和人参皂苷Rb_1药效学研究

目的:研究三七皂苷R1、R2和人参皂苷Rb1的生物活性。方法:观察组分对冠脉结扎导致的大鼠心肌缺血性模型的影响、催眠、镇静作用。结果:3个三七组分的均可减少大鼠心肌缺血模型心律失常的发生率,R1和R2作用明显。可不同程度的减少大鼠心肌缺血模型心肌梗塞面积,R2作用较明显。可不同程度的降低心肌缺血模型的大鼠CK、LDH、MDA含量,但是对于SOD水平均无明显影响。对戊巴比妥钠阈剂量均无明显的协同作用,对戊巴比妥阈下剂量无明显的催眠作用,对正常动物自主活动没有明显影响。R1和R2能够明显抑制咖啡因导致的自主活动增加。结论:R1和R2对冠脉结扎所致大鼠心肌缺血性损伤具有一定的保护作用,具有一定的镇静作用。     

高效液相色谱法测定三七中三七皂苷R1及人参皂苷Rg1,Rb1的含量

目的测定三七药材中三七皂苷的含量.方法采用高效液相色谱法C18色谱柱,乙腈∶水(15∶85-12 min30∶70-45 min15∶85 v/v)梯度洗脱,检测波长203 nm.结果三七R1在72.8～109 μg*ml-1的范围内(r＝0.999 1),人参Rg1在68.8～860 μg*ml-1的范围内(r＝0.999 2),Rb1在62.8～785 μg*ml-1的范围内(r＝0.999 8),线性关系良好.平均回收率大于98%,方法的变异系数小于3.0%.结论方法简便,快速,准确,重现性好,可用于三七药材中三七皂苷的含量测定.     

三七中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1含量的测量不确定度评定

目的：建立三七中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1含量的测量不确定度评定方法.方法：采用HPLC法测定三七中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1的含量,建立数学模型,分析不确定度来源,最后计算扩展不确定度.结果：按干燥品计算,三七中三七皂苷R1的含量为（0.815±0.020）％,k=2;人参皂苷Rg1的含量为（3.324±0.076）％,k=2;人参皂苷Rb1的含量为（2.931±0.008）％,k=2结论：本方法建立的数学模型合理、可靠,可用于三七中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1含量的不确定度评定.     

HPLC-ELSD测定心宁片中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1的含量

目的:建立心宁片(丹参、三七、红花、川芎等)中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、Rb1的含量测定方法。方法:采用HPLC梯度洗脱法,使用C18柱,流动相为乙腈-水梯度洗脱,(0～5min,20～25乙腈;5～20min,25～45乙腈);ELSD漂移管温度70℃;氮气流速2.0L/min;柱温35℃。结果:3种皂苷类成分得到很好分离,线性关系良好,平均加样回收率:三七皂苷R1,人参皂苷Rg1,人参皂苷Rb1分别为102.32,100.73和101.40。RSD分别为0.97,1.16和1.21。结论:本法结果准确,便于操作,可作为心宁片的质量控制方法之一。     

HPLC法测定三七及复方丹参片中三七皂苷R1和人参皂苷Rg1的含量

目的测定三七及复方丹参片中三七皂苷R1和人参皂苷Rg1的含量,为更好地控制两者的质量提供依据.方法采用高效液相色谱法,色谱条件:Zirchrom C18柱(4.6×200 mm,5 μm);流速:1 mL·min-1;检测波长:203 nm;柱温:20℃;流动相:水-乙腈(梯度洗脱).结果三七皂苷R1线性范围为0.25～10.05 μg(r=1.000),平均回收率为99.25%,RSD=2.57%(n=5);人参皂苷Rg1线性范围为0.60～23.89μg(r=0.999),平均回收率为100.19%,RSD=2.98%(n=5).结论该方法准确可靠,重现性好,可用于三七及复方丹参片的质控标准.     

HPLC-ELSD法测定三七止血胶囊中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1和人参皂苷Rb1的含量

目的:采用高效液相色谱法-蒸发光散射检测器(HPLC-ELSD)测定三七止血胶囊中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1和人参皂苷Rb1的含量.方法:以乙腈-水为流动相梯度洗脱(0～12 min,乙腈19%→36%),Hypersil ODS柱(4.0 mm × 200mm,5 μm)为固定相,流速为1.0 mL·min-1,ELSD参数:漂移管温度45℃,载气流量1.5 L·min-1.结果:三七皂苷R1、人参皂苷Rg1和人参皂苷Rb1的回收率分别为97.86%,96.24%和97.58%,RSD分别为1.36%,1.58%和1.13%(n=6).结论:该方法简便、快速、重现性好,可用于三七止血胶囊的质量控制.     

HPLC法测定明目颗粒中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1的含量

建立明目颗粒中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1含量测定方法。方法 采用高效液相色谱法,色谱柱为 Dikma Diamonsil（钻石）C18 色谱柱（4.6 mm ×150 mm,5 µm）;流动相以乙腈为A,水为B,进行梯度洗脱;流速：1 mL•min-1;检测波长：203 nm;柱温：25 ℃;进样量：10 µL。结果：三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1的线性范围分别为0.352～2.112 µg (r =0.9993),0.914 ～5.484 µg (r =0.9992),0.910 ～5.460 µg (r =0.9991);平均加样回收率(n=6)分别为99.4%,102.72%,101.89%,RSD分别为2.56%,2.16%,2.16%。结论：本方法操作简便,准确,重复性好,精密度高,可作为该制剂的质量控制方法。 关键词：明目颗粒;高效液相色谱法;三七皂苷R1;人参皂苷Rg1;人参皂苷Rb1