环氧合酶-2抑制剂调控Stat5信号转导通路抑制结肠癌细胞增殖的分子机制

目的观察选择性环氧合酶-2（COX-2）抑制剂NS-398对结肠癌细胞系SW480中Stats与PPAR8信号转导通路的影响,以期初步阐明选择性COX-2抑制剂抗结直肠癌非COX-2依赖性的作用机制。方法应用RT—PCR检测结肠癌细胞系SW480中COX-2 mRNA表达水平,用选择性COX-2抑制剂NS-398处理结肠癌细胞系SW480,Western印迹检测Stats与PPAR8信号转导通路成员表达,四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测细胞增殖状态,流式细胞技术检测细胞周期与凋亡情况。结果结肠癌细胞系SW480中未检测到COX-2 mRNA表达,NS-398（75μmol／L）作用于SW480细胞72h后,G1期细胞比率由31．2％上升至40．6％,S期细胞比率由52．8％下降至41．2％,细胞增殖受抑制。Stats、PPAR8、细胞周期蛋白D1与Bcl—x1表达水平随NS-398作用时间延长而下降。结论选择性COX-2抑制剂NS-398可能通过非COX-2依赖途径影响结肠癌细胞的增殖。     

姜黄素和环氧合酶-2抑制剂NS-398对肝星状细胞时效的双向调节体外实验研究

【目的】观察抗氧化剂姜黄素（Cur）与选择性环氧合酶-2（COX-2）抑制剂NS-398两种药物同时联用或分时联用对大鼠肝星状细胞（HSC）生长的影响。【方法】体外培养大鼠肝星状细胞株HSC-T6，接种96孔板，分为5组。I：单独姜黄素系列浓度组（0、20、30、40μmol／L）；单独NS-398系列浓度组（0，20,40，80μmol／L）；Ⅱ：单独NS-398系列浓度组（ABS1）和NS-398系列浓度组＋姜黄素20μmol／L（,4BS2）对大鼠HSC增殖的影响。Ⅲ：两种药物同时加药组；Ⅳ：两种药物先后6h加药组：先加姜黄素20μmol／L作用HSC6h后加NS-398系列浓度组（0、20、40、80wmol／L）；先加NS-398系碉浓度（0、20、40、80Vunol／L）作用HSC6h后加姜黄素20μmol／L组，V：析因分析组。各组设不加药物的细胞对照组，与HSC共同培养，以MTT法检测姜黄素、NS-398单用或同时、分时联用对HSC生长的影响。LDH法检测各组对HSC的细胞毒性舴用。[结果]单独NS-398系列浓度组和单独姜黄素系列浓度组有抑制HSC的作用，但姜黄素的作用比NS-398强；同时加两药组比分时加药组有明显不同，先加NS-398作用HSC6h组比先加姜黄素作用HSC6h组的抑制率明显降低。【结论】时间因素导致两药联用是双向调节，同时加药或先加姜黄素作用HSC6h组后加NS一-98时呈正调节作用，抑制率升高，而先加黼98作用ItSC6h后加姜黄素呈负调节作用，抑制率降低。NS-398对HSC作用一定时间后有抑制姜黄素对HSC起生物效应的作用。     

选择性环氧合酶-2抑制剂NS-398对食管癌细胞株EC9706的生长抑制作用

目的:探讨NS-398对人食管癌细胞株EC9706的生长抑制作用。方法:采用3H-TdR掺入法检测不同浓度(0、10、20、50、100μmol/L)和作用24、48、72、96h的NS-398对细胞的增殖抑制效应;采用流式细胞术(FCM)及DNA片段分析法检测NS-398诱导的细胞凋亡情况。结果:EC9706经不同浓度的NS-398处理后,实验组3H-TdR掺入量明显减少,具有时间和剂量依赖关系,与对照组比较差异显著(P<0.05或P<0.001)。FCM检测发现实验组在G1期前出现亚倍体凋亡峰,细胞凋亡率达(45.23±1.08)%,并出现典型的细胞凋亡梯带;而对照组无凋亡峰出现,细胞凋亡率为(2.14±0.28)%,两组比较有显著性差异(P<0.001)。结论:NS398对食管癌细胞株EC9706细胞具有增殖抑制作用和诱导细胞凋亡作用。     

姜黄素和环氧合酶-2抑制剂NS-398对肝星状细胞时效的双向调节体外实验研究

[目的]观察抗氧化剂姜黄素(Cur)与选择性环氧合酶-2(COX-2)抑制剂NS-398两种药物同时联用或分时联用对大鼠肝星状细胞(HSC)生长的影响。[方法]体外培养大鼠肝星状细胞株HSC-T6,接种96孔板,分为5组。Ⅰ:单独姜黄素系列浓度组(0、20、30、40μmol/L);单独NS-398系列浓度组(0,20,40,80μmol/L);Ⅱ:单独NS-398系列浓度组(ABSI)和NS- 398系列浓度组 姜黄素20μmol/L(ABS2)对大鼠HSC增殖的影响,Ⅲ:两种药物同时加药组;Ⅳ:两种药物先后6 h加药组:先加姜黄素20μmol/L作用HSC6h后加NS-398系列浓度组(0、20、40、80μmol/L);先加NS-398系列浓度(0、20、40、80μmol/L)作用HSC6h后加姜黄素20μmol/L组,Ⅴ:析因分析组。各组设不加药物的细胞对照组,与HSC共同培养,以MTT法检测姜黄素、NS-398单用或同时、分时联用对HSC生长的影响。LDH法检测各组对HSC的细胞毒性作用。[结果]单独NS-398系列浓度组和单独姜黄素系列浓度组有抑制HSC的作用,但姜黄素的作用比NS-398强:同时加两药组比分时加药组有明显不同,先加NS-398作用HSC6h组比先加姜黄素作用HSC6h组的抑制率明显降低。[结论]时间因素导致两药联用是双向调节,同时加药或先加姜黄素作用HSC6h组后加NS-398时呈正调节作用,抑制率升高,而先加NS-398作用HSC6h后加姜黄素呈负调节作用,抑制率降低。NS-398对HSC作用一定时间后有抑制姜黄素对HSC起生物效应的作用。     

选择性环氧合酶-2抑制剂的疗效和不良反应

环氧合酶-2(COX-2)是环氧合酶-1(COX-1)的同工酶,共同参与前列腺素的生物合成。针对COX非选择性抑制剂的缺点,COX-2选择性抑制剂的发现是非甾体类抗炎药（NSAID）研究史上的一个里程碑,为开发疗效高、不良反应少的NSAID开拓了新的前景。在10多年的应用中,选择性COX-2抑制剂的疗效已被广大患者和医务工作者肯定,但越来越多的资料表明,选择性COX-2抑制剂并非是理想中高效低毒的NSAID,本文就其疗效和不良反应进行简要综述。     

环氧合酶-2及其特异性抑制剂NS-398对膀胱癌细胞体外生长与侵袭能力的影响

目的 研究环氧合酶-2(Cyclooxygenase-2,COX-2)及其特异性抑制剂NS-398在膀胱癌细胞生长和侵袭转移中的作用。方法 利用转基因技术将COX-2 cDNA基因导入低表达COX-2的膀胱癌细胞株EJ,获得高表达COX-2的永久转染细胞EJ-COX2。观察转染前后细胞生长速度的变化;在NS-398作用下,Boyden小室检测细胞的侵袭能力的改变,用RT-PCR和Western blotting检测uPA的表达变化。结果 转染COX-2的EJ-COX2细胞体外增殖能力增强;穿过人工基底膜的体外侵袭能力增强;尿激酶型纤溶酶原激活因子(Urokinase plasminogen activatoi,uPA)的表达上升;NS-398能呈剂量依赖地抑制COX-2、uPA的表达和EJ-COX2细胞的侵袭能力。结论 COX-2能促进膀胱癌细胞生长,并通过促进uPA的表达从而促进其侵袭转移的能力,NS-398能呈剂量依赖地抑制COX-2、uPA的表达和EJ-COX1细胞的侵袭能力。     

环氧合酶2抑制剂NS-398对人肝癌细胞SMMC-7721增殖与凋亡的影响

目的：分析环氧合酶2(COX-2)抑制剂NS-398对人肝癌细胞SMMC-7721形态、细胞周期、增殖和凋亡等的影响,探讨NS-398影响肿瘤细胞生长的机制。方法：应用不同浓度NS-398（25、50、75、100和150 μmol/L）分别作用于SMMC-7721细胞（24、48和72 h）,并设正常对照组,观察各组SMMC-7721细胞形态学,流式细胞术分析各组细胞周期变化和细胞凋亡率,MTT方法分析各组肝癌细胞生长抑制率。结果：随着NS-398浓度和作用时间的增加,细胞逐渐不能贴壁生长,部分漂浮于培养液中,培养液浑浊。与正常对照组比较,不同浓度NS-398组SMMC-7721细胞G0/G1期比例降低、G2/M期比例增高。正常对照组SMMC-7721细胞无凋亡峰,50 μmol/L NS-398组SMMC-7721细胞作用24 h后可见凋亡峰出现,作用72 h后细胞凋亡水平增高明显。NS-398各组细胞生长抑制率呈浓度和时间依赖性升高。结论：COX-2抑制剂NS-398能够抑制肝癌细胞SMMC-7721的增殖,并诱导细胞凋亡,该过程具有明显的时间和剂量依赖性。     

环氧合酶-2特异性抑制剂非甾体抗炎药的研究进展

传统的非甾体抗炎药(NSAID)都有损害胃肠道、肾脏和影响血小板功能等副作用.近年的研究已经阐明,其抗炎、镇痛和解热等药效来自对环氧合酶-2(COX-2)的抑制作用,而其不良反应则由药物对环氧合酶-1(COX-1)的抑制作用所致.特异性COX-2抑制剂已成为当前NSAID的新药开发方向.本文对COX-2特异性抑制剂的开发经过、作用机制及已上市新药塞来克西、罗非克西等作了概括的介绍.     

环氧合酶-2抑制剂对人结肠癌细胞增殖及侵袭力影响的研究

目的 研究环氧合酶-2(COX-2)抑制剂SC236对人结肠癌细胞株增殖及侵袭能力的影响,探讨COX-2抑制剂用于结肠癌转移治疗的可能性.方法 人结肠癌细胞株LS-174T经环氧合酶-2抑制剂SC236处理后,用MTT法检测其增殖能力的变化,用黏附基质分析法和Transwell法检测其侵袭能力的变化,并通过免疫组化方法检测细胞中COX-2、VEGF及基质金属蛋白酶-2(MMP-2)蛋白的表达.结果 经SC236处理后,LS-174T细胞的增殖受到抑制,侵袭能力和黏附率下降,运动能力减低,细胞中COX-2、VEGF及MMP-2蛋白的表达减低.结论 SC236能通过COX-2途径抑制结肠癌细胞的生长和侵袭,其机制可能与其抑制肿瘤的血管生成、减低MMP-2的表达有关.     

环氧合酶-2和基质金属蛋白酶-2的表达与胃癌浸润转移的关系

目的 :探讨环氧合酶 2 (COX 2 )和基质金属蛋白酶 2 (MMP 2 )在胃癌组织中的表达以及与胃癌浸润转移的相关性。方法 :应用SP免疫组织化学方法检测 4 6例胃癌组织及 1 5例正常胃组织中COX 2、MMP 2的表达情况。结果 :COX 2、MMP 2在正常胃组织中为阴性 ,在胃癌组织中的阳性率分别为 6 0 .87% ,71 .7% ,COX 2表达与胃癌淋巴结转移、临床分期相关 (P <0 .0 5 ) ,MMP 2表达与胃癌淋巴结转移、临床分期、浸润深度相关 (P <0 .0 5 ) ,COX 2与MMP 2表达密切相关 (P <0 .0 5 )。结论 :COX 2和MMP 2在胃癌组织中的表达有相关性 ,胃癌组织中COX 2和MMP 2的高表达与胃癌的浸润和转移相关 ,提示COX 2和MMP 2可作为判断预后的指标和化学治疗的靶点     

环氧合酶-2抑制剂对人胃癌细胞增殖及侵袭力影响的研究

目的 研究环氧合酶-2抑制剂SC236对人胃癌细胞株增殖及侵袭能力的影响,探讨环氧合酶-2抑制剂用于胃癌转移治疗的可能性。方法 人胃癌细胞株SGC7901经环氧合酶-2抑制剂SC236处理后,用MTT法检测其增殖能力的变化。用黏附基质分析法和Transwell法检测其侵袭能力的变化。结果 经SC236处理后,SGC7901的增殖受到抑制,细胞侵袭能力下降,黏附率下降。运动能力减低。结论 SC236能有效抑制胃癌细胞的生长。明显减低其侵袭能力。环氧合酶-2抑制剂有望成为治疗胃癌转移的有效药物。     

塞来昔布对人肝癌细胞增殖的抑制作用

目的 观察塞来昔布对肝癌增殖的抑制作用.方法 以人肝癌细胞株SMMC-7721为研究对象,四唑氮蓝还原法(MTT)观察不同浓度和作用时间的塞来昔布对细胞增殖的抑制作用,流式细胞技术检测细胞周期,并用小鼠肝癌细胞株H22建立昆明鼠移植瘤模型,观察塞来昔布对移植瘤生长的抑制效果.结果 MTT显示塞来昔布对人肝癌细胞SMMC-7721生长有显著的抑制作用,且呈现出时间和剂量依赖性;塞来昔布(40 μmol/L)作用于SMMC-7721细胞36h后,G1期细胞比率由44.7%上升至49.9%,S G2/M期细胞比率由55.4%下降至50.1%,细胞增殖受抑制.在体动物实验表明,塞来昔布对移植瘤的生长和局部转移有显著的抑制效果.结论 环氧合酶-2抑制剂塞来昔布对不同来源的肝癌细胞株均有增殖抑制作用,可能是预防和治疗肝癌的重要候选药物之一.     

CK2抑制剂对骨肉瘤细胞增殖和侵袭力的作用研究

目的 探讨CK2抑制剂Emodin对人骨肉瘤细胞Saos-2增殖及侵袭力的影响.方法 分别用CK2抑制剂Emodin、顺铂及联合两种药物处理Saos-2细胞,通过Westem blot检测凋亡、CCK-8法检测细胞增殖;Transwell小室侵袭实验法检测细胞侵袭能力.结果 Emodin抑制CK2后可提高TAp73蛋白表达,激活其活性,促进Saos-2细胞凋亡;CCK-8法表明Emodin可以抑制Saos-2细胞增殖,且联合用药作用更明显;Transwell小室侵袭实验结果表明实验组均可抑制Saos-2细胞侵袭,穿膜细胞数分别为(57.23±3.52)、(52.06±4.54)和(32.83±3.79)个,且联合用药协同作用明显(P＜0.05).结论 CK2抑制剂Emodin能够抑制骨肉瘤Saos-2细胞的增殖和侵袭,为进一步探索采用小分子蛋白激酶抑制荆辅助治疗骨肉瘤细胞的新途径提供研究基础.     

miRNA-29c抑制前列腺癌细胞系LNCaP的增殖和侵袭

目的观察miRNA-29c(miR-29c)对前列腺癌细胞系LNCaP增殖和侵袭能力的影响,探讨其潜在的应用价值。方法采用qRT-PCR观察雄激素依赖性(LNCaP)与雄激素非依赖性(LNCaP-AI)前列腺癌细胞中miR-29c的表达差异;采用miR-29c抑制物(anti-miR-29c)下调LNCaP细胞中miR-29c的表达量,绘制LNCaP细胞生长曲线,利用流式细胞仪测定细胞周期;Transwell侵袭实验分析miR-29c抑制前后LNCaP细胞的体外侵袭能力。结果 qRT-PCR显示LNCaP-AI细胞中miR-29c水平明显低于LNCaP细胞(P<0.05);下调LNCaP细胞中miR-29c的表达量,可明显促进LNCaP细胞体外增殖及侵袭能力(P<0.05)。结论 miR-29c的正常表达有利于抑制LNCaP细胞的体外增殖和侵袭,有望成为前列腺癌生物治疗的潜在靶点。     

选择性COX-2抑制剂NS-398对宫颈癌细胞增殖和凋亡的影响

目的研究选择性COX-2抑制剂NS-398对宫颈癌细胞增殖和凋亡的影响。方法不同浓度NS-398处理体外培养的人宫颈癌细胞系Hela细胞后，采用噻唑蓝（MTT）法检测处理48h、72h后hela细胞的增殖活性，流式细胞仪测定细胞周期和细胞凋亡。结果50、100、200umol／LNS-398处理hela细胞48h，72h后，细胞增殖明显受到抑制，呈时间和剂量依赖性特点。200umol／LNS-398处理hela细胞48h后，流式细胞仪细胞周期分析表明，NS-398处理组G1期细胞明显增加，S期细胞明显减少。而细胞凋亡指数无明显变化。结论体外实验表明，NS-398能有效抑制宫颈癌细胞生长，其机制可能与其阻滞细胞周期有关。     

TIMP-3对前列腺癌PC-3M细胞株增殖和侵袭能力的影响

目的：观察TIMP-3对前列腺癌细胞PC-3M增殖和侵袭能力的影响。 方法：实验分为前列腺癌细胞PC-3M组、转染空质粒PCDNA3.1的PCDNA-PC-3M组和转染 TIMP-3的PCDNA-TIMP-3-PC-3M组。采用黏附实验、MTT比色法对比观察稳定转染的PCDN A-TIMP-3-PC-3M与PCDNA-PC-3M的黏附能力和增殖活力。采用单层细胞侵袭和Boyden 小室侵袭实验,对比观察TIMP-3对PC-3M细胞体外侵袭能力的影响。 结果：稳定转染TIMP-3的PC-3M细胞的黏附率和细胞增殖速度明显低于空质粒组和未 转染 组(P<0.05),稳定转染TIMP-3的PC-3M细胞的侵袭指数明显低于空质粒组和未转染 组（P<0.05）,空质粒组和未转染组间细胞增殖速度和细胞侵袭指数比较差异无显著 性（P>0.05）。 结论：TIMP-3对前列腺癌PC-3M细胞增殖和侵袭能力具有抑制作用。     

选择性COX-2抑制剂NS-398对宫颈癌细胞的作用及其作用机制

目的:研究选择性COX-2抑制剂NS-398对宫颈癌细胞的作用及其作用机制,探讨NS-398与卡铂在宫颈癌治疗中的协同作用.方法:用NS-398、卡铂及两者联合作用人宫颈癌Hela细胞,四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测NS-398、卡铂及两者联合对宫颈癌细胞增殖的影响,流式细胞仪PI染色法分析NS-398、卡铂处理后宫颈癌细胞凋亡率和细胞周期的改变.结果:NS-398、卡铂对人宫颈癌hela细胞的增殖具有抑制作用.卡铂联合NS-398对人宫颈癌hela细胞的增殖抑制作用显著增加,其联合抑制率近似于NS-398和卡铂单药抑制率之和,也近似于2倍卡铂剂量时的增殖抑制率.流式细胞仪检测发现,与对照组比较,NS-398处理组G1期细胞明显增加,而S期细胞明显减少,两组比较差异有统计学意义(P＜0.05);而卡铂处理组G1期细胞明显减少,S期细胞明显增加,两组比较有统计学意义(P＜0.05).NS-398(200 μmol/L)作用Hela细胞48 h后,流式细胞仪检测发现,NS-398处理组凋亡率为3.43%±0.02%,对照组凋亡率为1.48%±0.03%,两组比较差异无统计学意义(P＞0.05).而卡铂(80 mg/L)处理组凋亡率为9.32%±0.02%,与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论:选择性COX-2抑制剂NS-398对宫颈癌细胞的增殖具有抑制作用.NS-398对宫颈癌细胞的作用可能与凋亡无关.NS-398与卡铂在宫颈癌化疗中具有叠加作用.     

阿司匹林对结肠癌细胞株SW480转移侵润潜能影响的初步研究

目的观察阿司匹林对人结肠癌细胞株SW480生长增殖及转移侵润潜能的影响。方法以不同浓度(2.5、5.0、10.0mmol/L)的阿司匹林干预体外培养人结肠癌细胞株SW480,应用生长曲线法和MTT比色法观察其生长增殖,体外侵润法观察细胞转移能力,免疫细胞化学染色法检测细胞表面粘附因子CD44v6及抑癌基因nm-23表达的变化。结果阿司匹林对结肠癌细胞株SW480生长增殖具有抑制作用,在观察的药物浓度和时间范围内,抑制率可达14.5%~91.8%,其效应呈浓度和时间依赖关系。阿司匹林可抑制CD44v6但促进nm-23蛋白的表达,明显降低肿瘤细胞穿透matrigel膜的能力。结论阿司匹林具有拮抗结肠癌细胞株的生长增殖作用,并降低其转移侵润潜能;抑制CD44v6蛋白,促进nm-23蛋白表达可能是阿司匹林降低细胞侵润能力的分子机理之一。     

NS398对白血病细胞K562凋亡的时间和剂量效应机制

目的 探讨非甾体药物选择性环氧合酶-2(COX-2)抑制剂NS398对白血病细胞株K562细胞增殖及凋亡的效应关系和机制.方法 采用噻唑蓝还原法(MTT法)检测NS398对K562细胞增殖抑制作用,流式细胞仪(FCM)和单细胞凝胶电泳技术(comet assay)测定K562细胞的凋亡,免疫印迹实验检测相关蛋白的表达.结果 NS398抑制K562细胞增殖存在时间和剂量效应关系,各浓度间差异有显著性(P<0.05).NS398激活caspase-3和caspase-9,促进P53蛋白的积聚、Bax蛋白表达的上调和Bcl-xL蛋白表达的下调,进而导致细胞色素C的释放,致使K562细胞凋亡.结论 NS398可抑制K562细胞增殖,其诱导细胞凋亡的途径可能经过P53介导Bax的Caspase-3、Caspase-9的激活,揭示COX-2抑制剂可能存在着一个影响细胞翻译的新机制.