棉酚对男性精子影响的电子显微镜观察

本研究报道育龄男子服醋酸棉酚后不同时期精液中精子超微结构改变的观察结果。育龄男性志愿者每日服药剂量为20毫克,连服50天后,改服每周40毫克的维持量,共观察了服药前5例作为自身对照,他们于服药后30天和50天分别再予检查;另对服维持量第84天的7例进行了观察。精液离心之沉渣用戊二醛-锇酸固定,丙酮脱水,Epon 812包埋,电镜观察。观察结果表明,螺旋鞘膜线粒体和顶体-核帽系统是对棉酚最敏感的细胞器,出现损伤最早、最严重,轴丝体和细胞核亦有不同程度的改变。严重的可见整个精子崩溃解体,精液中出现细胞残体和大量脱落细胞。根据上述结果,对棉酚造成精子损伤的性质及其意义予以分析和讨论。     

棉酚对大鼠毒性的电子显微镜观察

棉酚对雄性大鼠有明显的抗生育作用。用电镜和同位素放射自显术对服药后大鼠睾丸变化动态的观察表明棉酚主要破坏生精上皮的精子发生过程,其中变态期精子细胞和中、后期初级精母细胞对棉酚的毒性最为敏感。4000多名志愿服药者的临床试验进一步证明了棉酚的抗生育效果肯定可靠。精液脱落细胞的分析亦以精子细胞和精母细胞的脱落为主。棉酚对生精细胞的这种毒性作用,为当前寻找男用避孕药提供了前景。棉酚对其他脏器组织的毒性作用亦已有报道。猪服棉酚后可引起心肌损伤,肝、脾、肾     

棉酚对雄猴心肌及心肌乳酸脱氢酶和琥珀酸脱氢酶影响的电子显微镜观察

本文报道了口服醋酸棉酚(4毫克/公斤/日)两年的成年雄性恒河猴3只及对照猴2只的心肌超微结构、心肌 LDH 和 SDH 的电镜组化的观察,初步结果如下:1.猴心肌肌原纤维Ⅰ带 Z 线两侧各出现一条由电子密度较大的颗粒组成的细线,称 N线。服棉酚后 N 线的电子密度较对照组为低,同时Ⅰ带的宽度相应加大,提示棉酚有加深心肌纤维松弛状态的可能性。其它超微结构的改变如溶酶体数量增多,内质网扩张,局部地区的线粒体异常堆集、排列紊乱、数量明显增多,部分线粒体呈现轻度肿胀。2.组化方面,定位于心肌细胞线粒体和内质网中与心肌无氧糖酵解有关的 LDH 以及定位于线粒体的 SDH 活性均于服棉酚后增强。我们初步分析和讨论了以上结果与心肌纤维的松弛和收缩可能有关。     

棉酚对大白鼠精子发生影响的银染观察

大白鼠喂服棉酚后,对其附睾精子活动力、精子形态学及睾丸减数分裂制片进行银染观察。对大白鼠一次性喂服大剂量棉酚(400 mg/kg体重),喂后2～5周,精子活动力明显降低,不正常精子频率增加,附睾精子银染显示精子尾部有损伤,包括精子头尾分离、尾部成圈、精子尾部中段部分区域损伤,但精子头部形态正常。服药6周后,附睾精子全部恢复正常。短期体外孵育实验,显似类似结果,但较轻微。喂服棉酚2～4周期间,不同发育阶段精子细胞的嗜银结构消失。实验组睾丸组织切片及睾丸减数分裂制备片,并无异常发现。     

棉酚对大鼠下丘脑超微结构影响的观察

本文观察了棉酚对雄性成年大鼠下丘脑弓状核、视上核和室旁核细胞超微结构的影响。棉酚以每日30mg/kg体重给大鼠灌服,连续5周。结果表明服棉酚后,视上核和室旁核变化不明显;而弓状核中,部分细胞呈现一系列神经分泌功能增强的变化,高尔基复合体和粗面内质网轻度扩张,内充均质低电子密度物质;神经分泌颗粒、溶酶体、核仁样体和微管数量增多。本文并对以上超微结构改变的性质、意义和可能原因进行了讨论。     

棉酚对大鼠及豚鼠肾钠、钾三磷酸腺苷酶(Na-K-ATPase)影响的电子显微镜观察

棉酚对雄性大鼠及在临床试用均有明显的抗生育作用。但少数人服药后出现低血钾肌无力症,其直接原因为肾性失钾。大鼠~(42)K代谢实验也证明,服棉酚的动物肾排钾量增高。根据肾钾转运的机理,体内钾在肾小管中的转运与近曲小管及远曲小管的重吸收、分泌和收集管的重吸收作用有关。Schmidt和Dubach对大鼠肾单位单细胞进行微化     

棉酚对人类精子直接作用的观察

取15例正常成年男性的新鲜精液,分对照管及实验管。对照管加PBS,实验管加醋酸棉酚(浓度25μg╱ml),培养一小时以后,作两组透射电镜、扫描电镜及精子膜麦芽凝集素(WGA)受体测定。结果表明,棉酚可使人精子发生严重的超微结构损伤,主要表现为质膜、顶体膜、核膜及线粒体膜的损伤。精子膜表面的WGA受体也明显减少。     

醋酸棉酚对大鼠肾上腺皮质超微结构的影响

本文用电子显微镜比较了灌饲不同剂量棉酚对大鼠肾上腺皮质各带微细结构的影响,并对球状带细胞作了立体计量分析。研究表明10毫克剂量组大鼠球状带腺细胞未发现有超微结构的改变,然而25毫克剂量组则可见线粒体略有增多,嵴突减少,光面内质网略见扩张,高尔基体增大,扁平囊扩张,脂滴也略有增多。立体计量分析表明线粒体和高尔基体在服药组有增加的趋势,但无统计学差别。 25毫克剂量组束状带出现了对照组未曾见过的“异常细胞”。该细胞体积缩小,细胞质浓缩核膜皱缩,光面内质网减少,线粒体基质变性,但在另一些细胞中出现表示代偿性增强的光面内质网,糖原增多,膜轮体也略有增多,并有胆固醇结晶的出现。网状带未发现明显改变。最后讨论了这些变化的意义。     

棉酚对大鼠生精上皮支持细胞影响的电镜观察

本实验用电子显微镜观察了大鼠口饲棉酚后睾丸生精上皮中支持细胞的超微结构的改变。棉酚每日剂量30毫克/公斤体重,连服4～6周后分别杀死取材,制成超薄切片观察。结果表明服棉酚后支持细胞呈现一系列细胞功能活跃与吞噬功能有关的胞器超微结构改变:溶酶体及脂滴增多,线粒体增生和多形性变化,服药6周后,内质网扩张明显,脂滴堆积,细胞开始处于不活跃状态。结合上述结果,本文对服棉酚后支持细胞超微结构变化的性质及其意义进行了讨论。     

动物Na-K-ATP酶活性变化与棉酚相关的研究

本文报道用光镜组织化学、电镜细胞化学定位和生化测定的方法分析棉酚对动物肾小管及腓肠肌Na-K-ATP酶活性的影响。实验结果表明: 1.细胞化学反应显示了Na-K-ATP酶定位于腓肠肌肌膜,肾远曲小管的基底膜和细胞反褶膜以及髓袢升支的细胞膜上。肾集合管与近曲小管的基底膜及细胞反褶膜上亦有轻微的阳性反应。 2.抗生育剂量棉酚(10毫克/公斤,20毫克/公斤,30毫克/公斤)对大鼠和豚鼠的Na-K-ATP酶组化反应未见有明显的影响,雄猴实验亦得到类似结果。但当棉酚剂量加大到60毫克/公斤时,大鼠和豚鼠的肾小管及腓肠肌的Na-K-ATP酶反应均明显减弱。豚鼠肾细胞膜酶活性的生化定量测定结果亦表明棉酚对肾的Na-K-ATP酶活性有明显的抑制作用。这一结果表明棉酚可引起Na-K-ATP酶活性的降减,而且与剂量成正相关,为棉酚引起肾性失钾的可能性提供了实验依据。本文对细胞膜Na-K-ATP酶细胞化学定位、酶活性以及棉酚对该酶抑制作用的可能机理进行了讨论。     

微波照射对兔精子形成影响的电子显微镜观察

本研究用微波(2450 MHz)照射兔阴囊及睾丸,使阴囊皮肤温度升至41～42℃,维持20分钟。用电镜观察照射后30分钟至4个月之间不同时间阶段对精子形成的影响。30～60分钟,高尔基期、头帽期、顶体期及成熟期的精子细胞已出现形态学的改变。30～60天后退变的成熟期精子细胞增多。3～4个月后精子细胞一般恢复正常。各期精子细胞对微波都很敏感。损伤改变主要见于顶体、顶体下间隙、核、尾部线粒体鞘、纤维鞘、外致密纤维及顶体后致密膜。早期精子细胞的平滑型内质网和核膜间隙扩大及空泡化也经常见到。本文所见微波致精子细胞的超微结构改变,在许多方面与超声及实验性隐睾所致的改变相似。     

服棉酚后久未恢复者睾丸微细结构观察——对棉酚抗生育可逆性的探讨

本研究观察服用棉酚1560～5280毫克,停药2.5～6年多尚未恢复的志愿者睾丸活检6例,正常2例。光镜下睾丸结构损伤分:精原细胞减少(1例),仅见支持细胞(3例),混合性(2例)等三型,均属严重损伤。电镜下除生精细胞受损外,值得注意是支持细胞滑面内质网明显扩张,线粒体空化;基膜及血管壁增厚。结果表明这些服药者生精功能恢复困难。对其原因作了讨论。     

停服棉酚后人精子的超微结构观察

20例口服棉酚节育者,服药总剂量分别为2—13.95克,停药已2-8年,精子常规计数均曾回升至400万个/ml以上。采其精液作精子电镜观察,以探讨服棉酚停药后精子的超微结构改变。结果:精液中畸形精子数颇多,扫描电镜多见精子的颈、中段有异常膨隆;在透射电镜下,该膨隆区内包含有不规则形或成层板状的膜性小体,它们主要由核后环尾侧的核膜过度增生,向颈、中段胞质延伸而成,亦有反褶入胞核内,成为核内膜性包含体。     

醋酸棉酚对雌性大鼠抗着床作用的形态学观察

成年wistar雌鼠17只。随机分为对照和实验组。实验组喂服醋酸棉酚(100mg/kg/d)一月后交配。受精后第10天剖腹,观察妊娠动物数与着床胎数,并分别对卵巢组织化学(△~5-3β-羟甾脱氢酶)观察以及和心、肝、子宫等作组织学方法观察。发现醋酸棉酚对大鼠具有明显抗着床作用,抗着床率为100%。此时,阴道涂片显示动情周期紊乱;黄体细胞的△~5-3β-羟甾脱氢酶活性明显下降,子宫内膜相当于间期时的内膜。以上结果提示△~5-3β羟甾脱氢酶活性下降,孕酮合成受阻,可能是醋酸棉酚抗着床作用的机理之一。     

醋酸棉酚对大鼠胚胎内膜及黄体的影响

本文为进一步研究醋酸棉酚对雌性大鼠抗生育机理。配后大鼠于D_1-D_4连续灌服醋酸棉酚90mg/kg,D_5回收胚胎并取子宫内膜及黄体,进行形态学观察。结果显示:D_5胚胎发育受影响,摄取~3H-TdR活性减低,偶见子宫内膜局部受损伤,内膜微血管数量明显减少;一半动物卵巢黄体细胞形态发生改变。这些因素可能是酯酸棉酚对雌性抗生育的主要环节。     

醋酸棉酚对HeLa细胞作用的透射电镜和扫描电镜观察

本文报道人体子宫颈癌HeLa细胞系细胞的超微结构,及其在培养液中加入10,20μg/ml醋酸棉酚,作用24,48h后的变化状态。HeLa细胞在常态生长情况下,具有一般癌细胞的超微结构特点。在醋酸棉酚的作用下,这些细胞间的紧密连接未见发生改变。而在细胞内,线粒体首先发生变化,由肿胀、嵴断裂、空泡化,直至溶解成颗粒状物。棉酚对HeLa细胞的损害作用,具有剂量相关性和作用时间相关性。在棉酚浓度加大和作用时间增长时,可见除线粒体以外的其他细胞器的改变,包括溶酶体大量增多、核膜受损及核内异染色质改变等。扫描电镜下,可见微绒毛断落,细胞表面出现极不正常的泡状突起。本文还对棉酚损伤HeLa细胞的性质及其意义进行了讨论。     

棉酚对大鼠垂体远部细胞超微结构的影响

本文对服棉酚30mg/kg体重/d共5周的成年雄性大鼠垂体远部细胞的超微结构进行了观察。结果表明,促性腺激素细胞的分泌活性显著增强,表现为功能不太活跃的Ⅰ、Ⅱ型细胞比对照组减少;而高尔基复合体发达,粗面内质网扩张为小泡的Ⅲ、Ⅳ型细胞增多,并出现类阉割细胞(Ⅴ型)和脱颗粒细胞(Ⅵ型)。垂体远部其他类型促激素细胞未见明显变化。本文还讨论了垂体促性腺激素细胞的分型、棉酚引起促性腺激素细胞变化的可能机制。     

醋酸棉酚对大鼠垂体促性腺细胞及睾丸间质细胞超微结构影响的观察

本文对服棉酚后的大鼠垂体促性腺细胞和睾丸间质细胞进行了电镜观察。比较了短期和长期服药的效应。实验表明,在电镜下,垂体前叶促性腺细胞有四种类型。对照组动物以Ⅰ、Ⅱ型细胞为主。尤其以Ⅱ型细胞数量最多,占65％。服药组Ⅱ型细胞随着服药时间的加长而有递减趋势。Ⅲ型细胞在对照组动物为数极少,只有6％,而服药组则为主要类型。服药一个月的大鼠Ⅲ型细胞占促性腺细胞总数的56％。服药二个月的占44％,服药一年的占58％。Ⅳ型细胞胞浆内粗面内质网高度膨胀,形成大泡,几乎占据整个胞浆,形态上类似切除性腺后出现机能亢进的“阉割细胞”。这种细胞未见于对照组和服药一个月的动物,而于服药二个月后才开始出现,占促性腺细胞的13％。睾丸间质细胞的形态与对照组比较没有明显差异。最后讨论了这些变化的意义以及棉酚作用促于性腺细胞的可能机制。     

棉酚对组织形态研究的进展

前言男性节育药的研究已有二十多年的历史,但迄今国内外尚无一种安全有效的药物可供实际应用,以现有资料看来,棉酚及其衍生物、类似物的研究似乎可望提供一种男用节育药。形态学的观察是研究棉酚作用的活跃领域,除了常规光镜外,学者们更利用放射自显影术,电镜术,亚细胞结构分离术及细胞光度法等新手段,对棉酚的分布,影响和抗生育作用部位,进行了定性和定量分析,对其作用机理也提出了一些颇有根据的推测。本文就棉