荧光定量PCR反应监测发热患者甲型H1N1流感病毒感染

目的通过荧光定量PCR反应监测发热患者甲型H1N1流感病毒感染情况,探讨该方法在流行性感冒检测诊断中的意义。方法采用WHO推荐的荧光定量PCR方法对3361例发热患者咽拭子标本进行病毒核酸检测,确定甲型H1N1流感感染患者。结果共检测有流感样症状患者2156例,甲型流感病毒核酸阳性1176例,阳性率35.0%,其中甲型H1N1流感病毒核酸阳性599例,阳性率17.8%。14岁以下儿童甲型H1N1流感病毒核酸阳性283例,占甲型H1N1流感病毒核酸阳性总数的47.2%。结论实时荧光定量PCR反应快速、准确,适用于H1N1流感病毒感染的早期诊断并可作为监测手段在临床广泛开展,为控制疫情的蔓延发挥了重要作用。     

山东省部分人群甲型H1N1流感血清抗体水平研究

目的 了解甲型H1N1流感大流行季节山东省甲型H1N1流感抗体水平,分析甲型H1N1流感病毒感染状况。 方法 2010年1月10日、25日、2月20日和3月20日随机选择山东省2家医院门诊就诊人群和血站献血人员分年龄组采集1617人份静脉血,采用血凝抑制试验检测甲型H1N1流感血清抗体水平进行分析。 结果 山东省4次甲型H1N1流感血清抗体阳性率和抗体几何平均滴度(GMT)分别为18.24%(GMT 13.86)、26.95%(GMT 16.65)、30.33%(GMT 17.74)和11.53%(GMT 12.72);0~5岁、6~17岁、18~55岁和56岁4个年龄组中甲型H1N1流感病毒血清抗体阳性率分别为26.88%、30.72%、19.03%和10.38%。 结论 山东省部分人群对甲型H1N1流感病毒抗体水平逐步升高,但仍未达到免疫保护水平。2月山东省甲型H1N1流感抗体阳性率和GMT最高,6~17岁年龄组人群抗体阳性率较其他年龄组高。     

烟台地区甲型H1N1流感住院患者临床特征分析

目的 了解甲型H1N1 流感的流行病学、临床表现、实验室检查等特点及重症甲型H1N1 流感病例的预测因子.方法 对2009 年6 月22 日至12 月31 日收治的226 例确诊病例的流行病学及临床资料进行回顾性分析.结果 患者中位年龄21 岁(4 ～72 岁),男128 例,女98 例.输入性病例3 例,本地病例223 例.常见症状为发热(100%)、咳嗽(84.5%)、咽痛(45.1 %)、头痛(34.1 %)、全身肌肉痛(21.2%)、有腹泻症状者少(2.2%).外周血白细胞大多正常或降低(94.25 %), 44.7%的病例有胸部影像学异常改变.多因素分析显示,高CRP 、低血钾及胸部影像学检查异常是重症甲型H1N1 流感病例的独立预测因子,相应的OR(95%CI )值分别为1.090(1.018 ～1.167 )、0.907(0.857 ～0.960 )和32.951(8.240 ～131.761 ).结论 烟台地区甲型H1N1 流感病例以本地人群为主,青少年为易感人群,大多数病情轻,预后良好,高CRP 、低血钾及胸部影像学检查异常是重症病例的独立预测因子.     

甲型H1N1流感病毒与非甲型H1N1流感病毒患者外周血象的对比分析

目的:对航天中心医院就诊的甲型H1N1流感病毒感染者与非甲型H1N1流感病毒感染者、正常对照者的外周血象进行对比分析,以期为临床的诊断、治疗以及病情监测提供有利的工具.方法:采用RT-PCR的方法对患者是否患甲型H1N1流感进行确认.采用流式细胞技术的方法,利用全血细胞计数仪对甲型H1N1组、非甲型H1N1组患者以及正常对照组外周血象进行对比分析.利用免疫比浊的方法对3组患者外周血中C反应蛋白(CRP)浓度进行比较分析.结果:甲型H1N1组患者中单核细胞百分数阳性百分率占77.1%,非甲型H1N1组患者单核细胞百分数阳性百分率占7.8%.正常对照组单核细胞百分数阳性百分率占6.7%.甲型H1N1组白细胞总数、淋巴细胞百分比以及嗜酸细胞百分比与非甲型H1N1组相比明显降低,但甲型H1N1组中性粒细胞百分比与正常对照组相比明显升高,而单核细胞百分比在甲型H1N1组中显著升高.甲型H1N1组血小板总数、血小板压积与非甲型H1N1组相比降低,而血小板分布宽度相比非甲型H1N1组数值升高,但与正常对照组相比,血小板总数以及3项参数未有明显差异.甲型H1N1组中CRP浓度与非甲型H1N1组相比差异无显著性,但与正常对照组相比明显升高.结论:甲型H1N1感染患者外周血象与一般流感存在相似之处,但它有其独特特点,在诊断过程中不应该以一般流感的外周血象以及CRP浓度特点来排除甲型H1N1流感病毒的感染.     

实时荧光RT-PCR检测不同标本中甲型H1N1流感病毒核酸的临床意义

目的通过检测甲型H1N1流感感染患者不同标本中甲型H1N1流感病毒核酸,了解其对甲型H1N1流感的快速诊断及病程进展的关系。方法 118例甲型H1N1流感患者,采用实时荧光逆转录聚合酶链反应法(RT-PCR)分别检测发病48 h后和(或)恢复期咽拭子、血浆及下呼吸道分泌物中甲型H1N1流感病毒核酸。结果 118例甲型H1N1流感患者发病48 h后咽拭子甲型H1N1流感病毒核酸阳性;23例(23/40)重症患者下呼吸道分泌物中甲型H1N1流感病毒核酸阳性;15例(15/40)重症患者血浆中检测到甲型H1N1流感病毒核酸。结论实时荧光RT-PCR方法可以快速检测甲型H1N1流感病毒感染,血浆中甲型H1N1流感病毒核酸阳性可能是重症患者的标志。     

甲型H1N1流感死亡病例三株病毒分离株血凝素基因测序分析

目的 对长沙市3株甲型H1N1流感死亡病例病毒分离株HA基因的来源和变异情况进行研究.方法 对长沙市的3例甲型H1N1流感死亡病例的鼻/咽拭子标本进行RT-PCR检测和流感病毒分离,利用WHO推荐的测序引物和CEQTM8000 Genetic Analysis System对3株甲型H1N1流感死亡病例病毒株[A/湖南开福/SWL4142/2009(H1N1),A/湖南长沙/SWL4346/2009(H1 N1),A/湖南芙蓉/SWL4224/2009(H1N1)]HA基因进行测序,测序方法为末端标记循环法(Dye Terminator Cycle sequencing),测序结果提交至GenBank,并用ClustalX和Mega4.1软件对测序结果进行氨基酸比对分析和构建进化树.结果 A/湖南开福/SWL4142/2009(H1N1),A/湖南长沙/SWL4346/2009(H1N1)和A/湖南芙蓉/SWL4224/2009(H1N1)3株病毒株HA基因序列分别与甲型H1 N1流感病毒A/NewYork/3502/2009(H1N1),A/Shanghai/71T/2009(H1N1)和A/Chita/01/2009(H1N1)分离株高度同源,同源性为99%,与国内甲型H1N1流感病毒株A/Sichuan/1/2009(H1N1)核苷酸同源性在99.5%以上;进化树分析显示包括3株病毒株在内的甲型H1N1流感病毒与A/Swine/Indiana/P12439/00亲缘关系近,但与人季节性A流感病毒(H1N1)、禽流感亲缘关系较远.与A/Swine/Indiana/P12439/00 HA基因比较发现:3株病毒株HA基因分别有28、30、27个氨基酸发生变异,但3株病毒株在21个重要抗原位点中只有一个R53K氨基酸替换;对全球364条甲型H1N1流感病毒HA基因序列进行多重比对发现有119个非保守氨基酸位点,其中5个位于重要抗原位点.结论 3株病毒株和其他甲型H1N1流感病毒HA基因可能由北美猪流感病毒变异而来;3株病毒株HA基因与国内外甲型H1N1流感病毒高度同源,同全球绝大多数甲型H1N1流感病毒一样处于稳定状态.     

甲型H1N1流感患者的分布特征

目的 了解甲型H1N1流感患者的人群分布特征,以便对易感人群采取积极有效的防控措施.方法 收集陕西省人民医院2009年10月24日～12月8日在发热门诊就诊,具有流感样症状的发热病人,采用RT-PCR法分别检潮呼吸道标本鼻咽拭子中甲型流感病毒的H1及N1核酸,H1及N1均阳性时判断为甲型H1N1流感病毒阳性.结果 2968例标本中甲型H1N1流感病毒阳性 1878例,阳性率63.3%;男性患者1 510例.阳性率60.9%(919/1 510),女性患者1 458例,阳性率65.8%(959/1 458),经统计学分析,男女性别差异无统计学显著性意义(P＞0.05);10岁以下、11～15岁、16～20岁的儿童及青少年是甲型H1N1流感病毒感染的主要人群,分别占总阳性的24.3%(457/1 878),33.7%(633/1 878)和19.8%(371/1 878),随年龄增长感染的比例逐渐下降,整个"甲流"人群明显呈偏态分布,峰值出现在11～15岁的年龄段,而且25岁以下各年龄组闯的差异有统计学意义(P≤0.01或P≤0.05).结论 甲型H1N1流毒病毒阳性的病人中,20岁以下的少年儿童占阳性病人的77.8%.随年龄增长逐渐下降.故青少年和儿童是甲型H1N1流感病毒防控的主要人群.     

新型甲型H1N1流感68例临床分析

目的:探讨上海地区甲型H1N1流感确诊病例的临床特点.方法:分析2009年5月24日至7月1日上海市(复旦大学附属)公共卫生临床中心收治的甲型H1N1流感68例确诊病例的流行病学及临床资料.结果:68例甲型H1N1流感确诊病例的临床特点:(1)不同性别和各年龄段均可感染和发病,但主要见于青少年,女性患者偏多.(2)首发症状多为发热.大多数为中低热,发热持续时间为1～4 d;主要症状包括发热(98.5%)、咳嗽(83.8%)、咽痛(52.9%);主要体征为咽部充血(95.6%)、扁桃体肿大(54.4%);少数患者可出现病毒性肺炎.(3)血清C反应蛋白升高和前白蛋白下降比较常见.(4)在奥司他韦治疗的前提下,患者病毒转阴时间1～7 d,中位时间4 d.结论:此次甲型H1N1流感病毒具有很强的传染性,能在人与人之间传播,并在不同国家扩散.该次流行期间的感染者大多表现出轻微的症状,患者很快痊愈.     

重症甲型H1N1流感38例临床分析

目的 总结重症甲型H1N1 流感患者的临床症状、实验室检查、影像学、治疗及转归,提高对该病的认识.方法 回顾性分析2009 年5 月至2010 年1 月南京第二医院经甲型H1N1 流感病毒核酸检测确诊的38 例患者的临床资料.结果 男26 例,女12 例,平均年龄31 岁.有基础疾病者25 例,包括高血压9 例,脂肪肝6 例,哮喘4 例,糖尿病3 例,剖宫产2 例,慢性支气管炎1 例.临床常见症状包括咳嗽、咳痰38 例(100%),发热36 例(94.7%),乏力肌肉酸痛8 例(21.0%),咽痛4 例(10.5%),咯血4 例(10.5%).实验室检查白细胞总数减低11 例(29.5%),淋巴细胞计数减低20例(52.6%),CD4 + T 细胞计数减低20 例(52.6%),CD8 + T 细胞计数减低17 例(44.7%),CD4/CD8 ＜1.4 20 例(52.6%),乳酸脱氢酶增高37 例(97.4%),白蛋白减低20 例(52.6%),ALT 和AST 升高3 例(7.9%).38 例患者肺部均有病变,双肺磨玻璃样改变4 例(10.5%),多发斑片状实变33 例(86.8%),双中下肺散在实变20 例(52.6%),条索状阴影1 例(2.6%).所有患者均给予达菲抗病毒及抗生素治疗,23 例给予糖皮质激素治疗,疗程≥3 d,从发病到开始治疗的平均时间为6.5 d,其中31 例治疗有效,总有效率为81.6%(31/38).治疗有效者平均症状缓解时间为3.3 d,胸部CT显示肺部病灶好转时间为5.5 d.结论 重症甲型H1N1 流感多发生于有基础疾病的患者,多伴有乳酸脱氢酶升高,胸部CT 表现以两肺多发性斑片状实变(中下肺)为主.     

中国大陆地区住院儿童重症及危重症甲型H1N1流感临床过程分析

目的 探讨中国大陆地区2009年住院儿童重症以及危重症甲型H1N1流感临床过程以及预后.方法 采用统一CRF表,收集中国大陆地区2009年9月1日至2009年12月31日收治的1137例住院儿童(年龄小于14岁)重症和危重症甲型H1N1流感患者的临床资料.确诊病例的定义为甲型 H1N1 流感病毒核酸检测阳性(实时荧光定量PCR方法).结果 中位年龄为4岁,22.6%的患儿年龄小于2岁.65.7%为男性.最常见的基础疾病为呼吸系统疾病(17.1%),主要症状为发热(1103例,97.3%)和咳嗽(1087例,95.7%).86.3%患儿合并肺炎.1053例(92.6%)患儿接受奥司他韦抗病毒治疗,484例接受糖皮质激素治疗,263例需要机械通气.426例患儿入住ICU.所有入选患者中,58例死亡,难以纠正的低氧血症为死亡的主要原因.多因素回归分析显示年龄小于2岁(OR 3.65,95% CI 1.72~7.74)、免疫抑制状态(OR 6.09,95% CI 2.04~18.15)、呼吸困难(OR 2.61,95% CI 1.44~4.69)、咯血(OR 3.65,95% CI 1.38~9.65)以及神经系统症状(OR 1.58,95% CI 1.58~5.84)为死亡的独立危险因素.结论 临床医师对于儿童甲型H1N1流感患者应高度重视,尤其是合并有免疫抑制状态的患者以及年龄小于2岁的儿童.难以纠正的低氧血症为死亡的主要原因.     

杭州地区2009甲型H1N1流感重症患儿中人类偏肺病毒感染状况研究

目的了解杭州地区2009甲型H1N1流感（以下简称甲流）重症患儿中人类偏肺病毒（hMPV）的感染状况。方法采集2009年11月至2010年1月确诊为甲流重症患儿的呼吸道样本79份,用传统逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）、荧光定量RT-PCR方法检测hMPV及其他呼吸道病毒。选择hMPV阳性样本PCR扩增产物进行核苷酸测序,将所测序列与GenBank比对分析,并绘制基因进化树。结果79份甲流病毒阳性样本中,hMPV及其它呼吸道病毒阳性率20．25％（16,79）,hMPV阳性PCR扩增产物4份,占甲流重症病例的5．06％（4,79）。其中3份hMPV阳性PCR扩增产物核苷酸序列相似性为99．1％～99．5％,与广东省流行株GD．165,泰国株155N及B1代表株高度相似,并且被GenBank收录。结论杭州地区确诊感染的2009甲型H1N1流感重症病例中存在与hMPV共同感染状况,且hMPV均为B1基因型。     

广东地区新甲型H1N1流感病毒对奥司他韦的耐药性分析

目的 调查广东省2009年新甲型H1N1流感病毒对奥司他韦的耐药情况,为临床用药提供指导,监测流感流行株的变异趋势.方法 2009年4-12月,对广东省流感监测哨点医院收集患者鼻咽拭子,用MDCK细胞或者鸡胚,分离得到流感毒株221株.利用神经氨酸酶化学荧光抑制实验检测毒株对奥司他韦的IC50,筛选出对神经氨酸酶抑制剂...     

浙江省德清县农村成人甲型流感各亚型病毒血清抗体检测及其关联探讨

目的 了解浙江省德清县农村社区成人禽流感病毒H7N9、H9、H5、甲型H1N1、季节性H1、H3的血清抗体水平,探索各亚型流感病毒之间的关联。方法 2013年4月德清县发现2例H7N9患者,分别在急性期和恢复期检测了患者及其家属的血清抗体;利用已有的生物样本库,检测病例发生之前收集的725份血清和病例发生之后收集的503份血清的H7N9、H9、H5的抗体水平,了解疫情前后人群血清抗体水平变化情况,在503份血清中抽取398份,检测甲型H1N1、季节性H1、H3的抗体情况,探索其与其他亚型流感病毒的关系;血清检测采用血凝抑制试验(HI),H7N9、H9、H5以HI抗体滴度1: 20为阳性,甲型H1N1和季节性H1、H3以1: 40为阳性,对于部分阳性和阴性样本进行复测;计算抗体阳性率和几何平均滴度,关联分析采用配对2检验并计算关联系数r。结果 H7N9的14名密切接触者中有2人抗体阳性,阳性率为14.3%;H7N9疫情出现之前,一般人群血清中未发现H7N9抗体(0/725),疫情出现之后发现1名隐性感染者,抗体阳性率为0.2%(1/503),H7N9疫情出现前后均未检出H5抗体,H9抗体阳性率没有明显变化,约为4.19%(22/503),标化率4.18%;甲型H1N1阳性率为4.77%(19/398),标化率5.73%;季节性H1为5.28%(21/398),标化率7.86%;季节性H3为11.31%(45/398),标化率6.28%;各个年龄组之间抗体阳性率差异无统计学意义;关联分析显示甲型H1N1血清抗体阳性者,H9血清抗体也趋于阳性(r=0.108, P 0.05);季节性流感病毒H1、H3抗体阳性者,甲型H1N1血清抗体也趋于阳性(r=0.504, P 0.05; r=0.111,P 0.05)。结论 德清县农村社区一般人群对H7N9和H5无免疫力,对H9、甲型H1N1和季节性H3、H1免疫保护水平有限,需要重点监测和保护。甲型H1N1和季节性流感病毒H9可能存在抗体交叉保护或共同暴露。     

危重症甲型H1N1流行性感冒病毒肺炎的临床特征——附17例报告

目的:探讨危重症甲型H1N1流行性感冒病毒(甲流)肺炎患者的主要临床特点,分析各临床检验指标与病情严重程度的关系。方法:收集入住呼吸重症监护病房(RICU)的17例危重症甲流肺炎患者的临床资料,归纳分析其临床特征。结果:17例患者以发热、咽痛、咳嗽、肌肉酸痛为主要症状。双肺多发实变影12例(71%)。入院后白细胞为(3.4～25.1)×109/L,中性粒细胞(2.72～21.84)×109/L,中性粒细胞比例58.6%～96.4%,淋巴细胞5.1%～21.6%。CRP 34.6～381.9 mg/L,乳酸脱氢酶(LDH)310～820 U/L,白蛋白<30 g/L10例(59%),ALT升高6例(35%),血清肌酐升高5例(29%),脑钠肽升高4例(24%)。氧合指数<300 mm Hg 13例(76%)。均予奥司他韦治疗,气管插管机械通气支持治疗3例(18%)。死亡2例(12%),均为男性,均为气管插管机械通气者。结论:LDH、CRP升高、炎性细胞增多提示危重症甲流肺炎患者肺部损害加重;机械通气支持治疗对于部分肺内广泛实变者效果不理想,且相关的并发症是部分患者病情加重或死亡的促发因素。     

2009年成都市甲型H1N1流感的流行特点分析

目的 分析成都市甲型H1N1流感的疫情现状及流行形势,为防治甲型H1N1流感提供科学依据.方法对2009年成都市传染病医院收治的甲型H1N1流感确诊病例进行流行病学特点分析.结果截止2009年12月底,我院累计收治甲型H1N1流感确诊病例276例,平均年龄(21.2±9.8)岁,发病以青少年为主(10～30岁,占78.3%),男女比例为1.14:1.发病季节以9月最多见(129例,占46.7%),职业以学生为主(207例,占75.0%),传播途径以本地爆发(121例,占43.8%)和本地散发(77例,27.9%)为主;输入病例多见于6～8月,二代病例多见于9～12月,本地散发多见于8～11月,本地爆发多见于9～12月.病情以轻症最多见(224例,占81.2%),重症(29例,10.5%)及危重症(23例,8.3%)较少.经积极治疗后,死亡4例,病死率为1.5%.所有住院患者均无二代病例及院内感染发生.结论成都市甲型H1N1流感发病有减弱趋势,且以轻症为主,病死率极低.严格消毒隔离制度可控制二代病例及院内感染发生.因此,甲型H1N1流感是可防可治的.     

48例儿童甲型H1N1流感病例临床分析

目的探讨儿童甲型H1N1流感患者的临床特征和治疗特点。方法回顾分析广东省人民医院2009年9月19日～12月30日收治的48例住院儿童甲型H1N1流感病例的临床资料,总结其临床特征及治疗经验。结果 14例为轻症患儿,30例为重症患儿,4例为危重症患儿。48例确诊病例均为本地发病者,其中10例有明确的甲型H1N1流感患者接触史。表现为发热（100%）,咳嗽（93.8%）,气促（35.4%）,喘息（25%）,呼吸困难（4.16%）,腹泻（12.5%）;50%患儿合并肺炎,2例并发心肌炎,5例患儿合并胸腔积液,其中2例出现呼吸衰竭;75%患儿白细胞正常或减低,45.8%患儿有肌酸激酶（CK）增高。按照卫生部《甲型H1N1流感诊疗方案（2009年第三版）》给予奥司他韦抗病毒、预防感染、吸氧、营养心肌及对症支持治疗,积极治疗基础疾病,必要时给予呼吸机支持、胸腔穿刺引流,所有患儿均痊愈。结论甲型H1N1流感患儿临床表现以呼吸系统症状为主,肺炎是常见并发症,少数患儿合并胸腔积液,甚至出现呼吸衰竭;接近半数患儿伴有不同程度心肌酶损害,少数并发心肌炎;尚未发现神经系统并发症;奥司他韦治疗敏感,采取综合治疗预后良好。     

对护士甲型H1N1流感健康教育的效果评价

目的评价健康教育对护士甲型H1N1流感知识、信念、行为（简称知、信、行）改善的效果。方法以抽样调查方式比较教育前、后的知、信、行各方面问题的总正确率差异,评价健康教育效果。结果教育前后知识总正确率分别为81．91％,97．89％;信念（态度）总正确率分别为80．32％：96．53％;行为总正确率分别为87．23％,97．68％。教育后知、信、行总正确率与教育前比较,差异均有统计学意义（P〈0.01）。结论以讲座、承诺、督促的模式开展医院护士甲型H1N1流感专题健康教育,可有效提高护士预防甲型H1N1流感的知识、信念、行为水平。     

胸部影像检查在甲型H1N1流感诊治中的应用及规范建议

目的探讨规范的胸部影像检查在甲型H1N1流感患者诊治中的应用价值.方法回顾性分析773例甲型H1N1流感患者的胸部X线、CT及高分辨率CT(HRCT)资料。结果 773例患者均接受胸部X线检查,78例接受CT检查,2例接受HRCT检查。胸部X线表现未见明显异常685例,占88.62%(685/773);双肺纹理增多、增粗、模糊等肺间质改变45例,占5.82%(45/773);肺间质改变伴肺门结构模糊28例,占3.62%(28/773);双肺间质改变合并多发斑片状渗出灶15例,占1.94%(15/773)。5例合并胸膜炎(5/773,0.65%)。结论甲型H1N1流感患者胸部影像学表现具有一定特征性,轻症患者X线检查多无明显异常,胸部X线及CT动态复查是了解病情进展的有效方法。