柱前衍生化HPLC法测定复方布洛芬缓释胶囊中精氨酸的含量

目的建立柱前衍生化HPLC法测定复方布洛芬缓释胶囊中精氨酸的含量。方法采用Waters Symmetry-C18（4.6 mm×250 mm,5μm）色谱柱,以磷酸盐缓冲液（取磷酸二氢钾2.0 g,加水1 000 ml溶解后,加磷酸0.45 ml,三乙胺3.0 ml,摇匀,经0.45μm滤膜过滤）-四氢呋喃（995∶5）-乙腈-甲醇=747.5∶2.5∶75∶175为流动相,流速为1.0 ml/min,检测波长为330 nm。结果精氨酸浓度在50~200μg/ml范围内,色谱线性响应良好（r=0.9998）,缓释胶囊中精氨酸含量测定的平均回收率为100.61%,精密度良好（RSD=2.01）。结论柱前衍生化HPLC法测定复方布洛芬缓释胶囊中的精氨酸含量结果准确、可靠、重现性好。     

气相色谱-三重四级杆串联质谱法测定塑料供水管材中11种邻苯二甲酸酯

目的建立塑料供水管材中11种邻苯二甲酸酯的气相色谱-三重四级杆串联质谱检测方法。方法取250 ml塑料管材浸泡水,经10 ml正己烷萃取3次,萃取液氮气浓缩,用DB-5MS色谱柱(30 m×0.25 mm,0.25μm)分离,由三重四级杆质谱多反应监测(MRM)模式进行定量。结果 11种邻苯二甲酸酯在0.05~1.0 mg/L线性范围内均呈较好的线性关系,r0.998。检出限为0.008~0.021μg/L,平均回收率为77.5%~92.3%,RSD为3.9%~11.0%。结论该方法快速简便,准确度和精密度均较高,适用于管材中11种邻苯二甲酸酯含量的同时测定。     

高效液相色谱法测定珍菊降压片中盐酸可乐定的含量

目的：建立以高效液相色谱法（HPLC）测定珍菊降压片中盐酸可乐定含量的方法。方法：采用Diamonsil C18（4.6 mm×250 mm,5μm）色谱柱,流动相为0.22%辛烷磺酸钠-甲醇-磷酸（560∶440∶1,用1 mo/L氢氧化钠溶液调节pH至3.0）,检测波长为220 nm,流速为1.0 ml/min,进样量为20μl,柱温为室温。结果：盐酸可乐定在1.0～10.0μg/ml范围内成良好的线性关系（r=0.999 9,n=6）,平均回收率为99.4%,RSD为0.93%。结论：本方法精密、准确,可用于珍菊降压片中盐酸可乐定的质量控制。     

替米沙坦固体分散体的含量测定及表征

目的建立替米沙坦-羟丙甲纤维素（HPMC）固体分散体中替米沙坦含量测定的反相高效液相色谱（RP-HPLC）法,并对其进行理化性质表征。方法以HPMC为载体,采用冷冻干燥法,制备替米坦固体分散体。色谱分析方法为Phenomenex C_（18）（4.6 mm×250 mm,5μm）色谱柱,流动相0.01 moL/L KH_2PO_4（磷酸调pH至3.7）-乙腈（40：60）,流速1.0 ml/min,检测波长298 nm,柱温35℃,进样量20μl。以X-射线衍射法（XRD）和差示扫描量热法（DSC）分析药物在载体中的存在状态。结果在本色谱条件下替米沙坦与辅料及溶剂峰分离良好,替米沙坦在1.0～100.0μg/ml质量浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系（r=0.9999,n=8）,日内精密度试验的相对标准偏差（RSD）为0.52%～0.72%（n=5）,日间精密度试验的RSD为0.67%～1.79%（n=5）,回收率为98.79%～100.20%（n=3）。主药在固体分散体中是以无定型或分子状态存在。结论以HPMC为载体可以成功制备出替米沙坦固体分散体。RP-HPLC色谱分析简便、易行,可用于替米沙坦-HPMC固体分散体中替米沙坦的含量测定。     

反相高效液相色谱法同时测定肝癌相关酪氨酸、缬氨酸对映体

目的：建立柱前衍生反向高效液相色谱荧光检测法同时对肝癌相关L-酪氨酸（L-tyrosine,L-Tyr）、D-酪氨酸（D-tyro－sine,D-Tyr）、L-缬氨酸（L-valine,L-Val）、D-缬氨酸（D-valine,D-Val）进行拆分测定。比较正常人与原发性肝细胞癌（hepato－cellular carcinoma,HCC）（以下简称原发性肝癌）患者血浆中酪氨酸与缬氨酸对映体含量的变化,考察它们与原发性肝癌的关系。方法：柱前衍生化试剂：邻苯二甲醛（O-phthaldialdehyde,OPA）和N-乙酰-L-半胱氨酸（N-acetyl-L-cysteine,NAC）;色谱柱：菲罗门Gemini C18柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）;流动相：20.0 mmol/L 磷酸二氢钠（pH 6.8）-乙腈为流动相的梯度洗脱;荧光检测波长设定：激发波长（λex）为350 nm,发射波长（λem）为450 nm;流速1 ml/min;柱温30 ℃;进样量10 μl。结果：４种物质的回收率在90.74%~106.80%之间,线性关系良好,检出限分别为6.79 pg/ml（L-Tyr）,7.81 pg/ml（D-Tyr）,1.86 pg/ml（L-Val）,1.95 pg/ml（D-Val）。利用该方法,对20名健康志愿者和23名HCC患者的血浆进行测定,统计分析结果表明,L-Tyr明显升高（P=0.011）,L-Val（P=0.019）、D-Val（P=0.006）显著性降低,D-Tyr（P=0.973）无明显变化。结论：该方法准确、灵敏、重复性好,适用于实验室研究与临床检测。     

高效液相色谱法测定咖啡因咀嚼片含量及有关物质

目的：建立咖啡因咀嚼片（caffeine chewable tablets）的含量及有关物质分析方法。方法采用 Agilent TC - C18柱（250 mm×4.6 mm,5μm）;流动相：甲醇-磷酸二氢钠缓冲溶液（10 mmol/L,pH3.0）=（75∶25,V/V）;流速：1.0 ml/min;检测波长：273 nm;柱温：30℃;进样量：20μl。结果该方法专属性较好,平均回收率为100.04%（RSD 为0.12%,n=9）;溶液在24 h 保持稳定（RSD=1.07%,n=8）;在1～400μg/ml 范围内线性关系良好,其回归方程为：Y=56.722X+0.7826,（r=1,n=7）。结论方法简便、快捷、准确、灵敏、专属性强,为该制剂含量测定、半成品测定及制剂稳定性研究提供了方法学依据。     

柱后衍生化HPLC法测定前列地尔乳剂的有关物质

目的：建立测定前列地尔乳剂中有关物质前列腺素A1含量的方法。方法：采用C18色谱柱,磷酸盐缓冲液-乙腈（2∶1,V∶V）为流动相,β-萘酚为内标,氢氧化钾溶液为柱后衍生液,流速：1.0 ml/min,检测波长：278 nm。结果：前列腺素A1在0.5～10.0μg/ml浓度范围内线性关系良好（r=0.999 7）,精密度试验的RSD为1.0%,重复性试验的RSD为1.2%,平均回收率为100.1%,RSD为1.1%（n=9）。结论：该法适用于前列地尔乳剂中前列腺素A1的检测。     

酚氨咖敏颗粒含量测定方法的改进

目的：建立HPLC法同时测定氨酚咖敏颗粒中对乙酰氨基酚、咖啡因、氨基比林的含量。方法：采用HPLC法,色谱柱：Kromasil C18（4.6 mm×250 mm,5μm）;流动相：1%醋酸溶液（用三乙胺调pH为3.5）-甲醇-乙腈（65∶10∶25）;流速：1.0 ml/min;检测波长：273 nm;柱温：30℃。结果：对乙酰氨基酚检测浓度的线性范围为12.3～123.2μg/ml（r=0.999 6）,平均回收率为98.65%,RSD=0.31%（n=3）;咖啡因检测浓度的线性范围为2.44～24.42μg/ml（r=0.999 8）,平均回收率为99.15%,RSD=0.15%（n=3）;氨基比林检测浓度的线性范围为8.23～82.34μg/ml（r=0.999 9）,平均回收率为98.40%,RSD=0.39%（n=3）。结论：本法灵敏,可靠,简单可行,可用于氨酚咖敏颗粒中对乙酰氨基酚、咖啡因、氨基比林的含量测定。     

固体分散体中缬沙坦的含量测定

目的建立缬沙坦聚乙二醇6000（PEG 6000）固体分散体中缬沙坦含量测定的反相高效液相法（RP-HPLC）。方法以PEG6000为水溶性载体,泊洛沙姆188（F68）为表面活性剂,采用冷冻干燥法制备缬沙坦固体分散体。以乙腈水醋酸（60∶40∶0.1）为流动相,采用RP-HPLC法测定固体分散体中缬纱坦的含量。结果缬沙坦与辅料及溶剂峰分离良好,缬沙坦在1.0～50.0μg/ml质量浓度范围内与峰面积成良好的线性关系（r=0.999 9,n=6）,日内精密度试验的相对标准偏差（RSD）为0.55%～1.36%（n=5）,日间精密度试验的RSD为0.54%～1.50%（n=5）,回收率为99.68%～101.00%（n=5）。结论该方法简便、易行,可用于缬沙坦-PEG6000固体分散体中缬沙坦的含量测定。     

HPLC法测定羚翘解毒片中绿原酸的含量

目的：建立高效液相色谱法测定羚翘解毒片中绿原酸含量的方法。方法：采用Kromasil-C18（4.6mm×200mm;5μm）色谱柱,流动相：甲醇-水-冰醋酸-三乙胺（18∶85∶1∶0.3）;流速：1.0ml/min;检测波长：324nm。结果：绿原酸在17.22～172.20μg/ml（r=0.9998）范围内线性关系良好,平均回收率为98.23%,RSD=0.71%（n=6）。结论：本方法操作简便,准确度高,重现性好,可作为该产品质量控制的方法。     

UPLC-MS/MS法测定红景天提取物中6种活性成分的含量

目的：建立并验证同时测定红景天（Rhodiola）提取物中红景天苷、红景天素、草质素苷、草质素、山柰酚和槲皮素6种活性成分含量的UPLC-MS/MS方法。方法色谱条件：采用Zorbax Eclipse plus C18色谱柱（100 mm×2.1 mm,3.5μm）;0.2%甲酸水-乙腈为流动相,洗脱方式为梯度洗脱;流速为0.4 ml/min;柱温为25℃。质谱条件：采用电喷雾离子源（ESI）,负离子检测,扫描方式为多反应监测模式（MRM）。结果6种活性成分分别在10～20000,10～4000、10～4000、5～2000、10～2000和5～2000 ng/ml之间线性关系良好。仪器精密度RSD＜3.31%,6种活性成分的稳定性RSD＜5.07%,重复性RSD＜4.05%,平均回收率在99.27%～108.91%,RSD均＜4.92%。结论本法可同时测定红景天提取物中6种活性成分含量,具有快速、灵敏度高、专属性好,重复性好的特点。     

测定人血浆中利奈唑胺浓度的HPLC-MS/MS法建立

目的：建立高效液相色谱串联质谱法（HPLC-MS/MS）测定人血浆中利奈唑胺的血药浓度,为临床合理用药提供参考。方法以替米沙坦为内标,血浆样品经乙腈沉淀蛋白进行提取分离,以含0.1%甲酸的1 mmol/L乙酸铵溶液和乙腈为流动相,梯度洗脱,采用m/z 338.1→m/z 296.3（利奈唑胺）和m/z 515.3→m/z 276.3（替米沙坦,内标）离子对进行扫描。结果利奈唑胺在0.23~46μg/ml线性范围内关系良好,r=0.9993,最低定量限为46 ng/ml,提取回收率为87%~109%,日内、日间精密度的相对标准偏差均在2.5%~8.6%范围内。结论建立的LC-MS/MS方法专属性强,灵敏度高,操作简单,适于临床利奈唑胺血药浓度监测。     

HPLC/MS/MS同时测定血浆肾上腺素、去甲肾上腺素、可的松和氢化可的松的方法建立

目的 建立高效液相色谱-质谱-质谱联用 （HPLC/MS/MS）同时测定血浆中的肾上腺素、去甲肾上腺素、可的松和氢化可的松的方法。方法 样品经乙腈沉淀蛋白和萃取后,15 000 r/min 离心5 min,取上清液进样分析。电喷雾离子源 (ESI), 正离子检测, 多反应监测 (MRM) 方式定量分析。 结果 肾上腺素、去甲肾上腺素、可的松和氢化可的松在0.02～200.00 ng/mL浓度范围内线性良好 （相关系数均≥0.999）,检出限分别为4.13 pg/mL、4.64 pg/mL、4.29 pg/mL和4.52 pg/mL,日内和日间精密度分别为1.19%~5.42%和2.16%~6.04%;将所建立的方法用于空白人血浆样品分析,加标回收率为80.0%~109.0%,样品测定精密度为3.93%~7.57%。结论 本研究所建立的方法快速灵敏,适合血浆样品的批量分析。     

LC-MS/MS测定大鼠血浆中的野漆树苷及其药代动力学研究

目的：建立大鼠血浆中野漆树苷的LC-MS/MS测定方法,并研究静脉注射后野漆树苷在大鼠体内的药代动力学特征。方法大鼠血浆样品经乙酸乙酯萃取处理,用色谱柱Phenomenex C8（30 mm×2.00 mm,3μm）进行分离,以甲醇-水为流动相梯度洗脱,采用电喷雾离子源（ESI）,负离子模式,多反应监测（MRM）,选择离子分别为野漆树苷（m/z 577.6→269.1）,内标柚皮素（m/z 271.0→151.0）,将建立的方法应用于测定大鼠静脉注射野漆树苷后血浆的药物浓度,并采用DAS 2.0计算得主要药代动力学参数。结果大鼠血浆中野漆树苷在1～2000μg/L浓度范围内线性关系良好,日内、日间精密度（RSD）均＜10%,准确度（RE）在±7%之间,低、中、高3个浓度下提取回收率为86.8%～91.0%,无明显基质效应且稳定性良好。大鼠静注该药（5 mg/kg）后AUC0-t为（72627.8±18067.9）μg·min/L,t1/2为（52.1±14.3）min,CLz为（0.07±0.02）L/（min·kg）。结论该检测方法简单、快速、灵敏、准确,适用于野漆树苷血药浓度监测及其药动学研究。药代动力学参数表明大鼠静注该药后体内消除较快。     

LC-MS/MS法测定大鼠血浆中芍药内酯苷的浓度及其在毒代动力学研究中的应用

目的 建立测定大鼠血浆中芍药内酯苷的液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)法.方法 血浆样品经乙酸乙酯-异丙醇(95:5,V/V)提取后,以Poroshell 120 EC-C18柱(50 mm×2.1 mm,2.7μm)为分析柱,乙腈-水为流动相梯度洗脱,采用ESI源在多反应监测(MRM)方式下进行正离子检测.用于定量分析的离子反应为m/z 498.5→m/z 197.1(芍药内酯苷)和m/z 251.3→m/z 108.2(拉科酰胺,内标).结果 芍药内酯苷血浆浓度测定方法的线性范围为20~2000 ng/ml,日内、日间精密度RSD%均<15%,准确度(RE)在±8.06%之间.结论 该法适用于芍药内酯苷在大鼠体内的毒代动力学研究.     

高效液相-串联质谱方法测定法罗培南的血浆药物浓度

目的采用高效液相-串联质谱方法测定血浆中法罗培南的药物浓度。方法色谱柱为ZORBAX Eclipse Plus（100mm×2.1mm,3.5μm）,流动相：乙腈与5mmol/L醋酸铵缓冲液（含0.1%甲酸）体积比为35：65,流速为0.3ml/min,文拉法新为内标。结果法罗培南的血浆浓度在0.1～20μg/ml范围内线性良好,标准曲线方程为Y=0.2700c＋0.00242（r=0.9955,n=8）,定量下限为0.1μg/ml,日内精密度〈5.4%,日间精密度〈7.9%,回收率为99.0%～113%。结论该方法处理操作简单,结果准确,专属性强,灵敏度高,适用于法罗培南人体药动学研究及生物等效性研究。     

Ultra-sensitive bioanalysis of the therapeutic peptide exenatide for accurate pharmacokinetic analyses at effective plasma concentrations utilizing UPLC-MS/MS

Exenatide is the first approved glucagon-like peptide 1 receptor agonist subcutaneously or intramuscularly injected for the treatment of type 2 diabetes mellitus. Typical therapeutic plasma concentrations are in the low pg/mL range, therefore requiring ultra-sensitive quantification. To enable the accurate evaluation of pharmacokinetic studies, we established a UPLC-MS/MS assay with a lower limit of quantification (LLOQ) of 5 pg/mL (1.2 pM) using 200 μL of plasma, validated according to FDA’s and EMA’s pertinent guidelines. Exenatide was isolated from plasma with solid phase extraction utilizing anion-exchange sorbent. Quantification was performed with positive electrospray ionization tandem mass spectrometry in the selected reaction monitoring mode. The calibrated concentration range of 5–10,000 pg/mL was linear showing correlation coefficients >0.99. Interday and intraday accuracy ranged from 97.5% to 105.4% with corresponding precision of <10.9%. Accuracy at the LLOQ ranged from 93.0% to 102.5% with corresponding precision of <15.9%. Because of the validity of a 10-fold dilution QC (accuracy 111.2%), the assay is suitable for exenatide quantification up to 100,000 pg/mL. The ultra-sensitive assay’s applicability was demonstrated by the quantification of exenatide plasma concentrations and pharmacokinetics after intravenous and nasal administration to beagle dogs.     

表浅胃食管交界腺癌内镜分型与浸润深度相关性分析

目的 探讨表浅胃食管交界腺癌（AEG）的临床病理特征与术后浸润深度之间的关系,评估表浅AEG的内镜分型对预测浸润深度的意义。方法 分析2008年11月至2015年5月期间四川大学华西医院行内镜治疗或外科手术并经病理确诊的57例表浅AEG患者的临床病理资料,对其与浸润深度的关系进行分析。结果 患者年龄48~76岁,平均（63.0±6.8）岁;男49例,女8例。肿瘤直径为3.0~40.0 mm,平均（16.6±10.1） mm。黏膜内癌28例,黏膜下癌29例。两组年龄、性别、组织学分型、Siewert分型差异无统计学意义,肿瘤直径（ P=0.02）和内镜分型（ P=0.02）差异有统计学意义。进一步行多因素logistic回归分析显示,内镜分型为黏膜下层浸润的独立危险因素( P=0.041),凹陷型表浅AEG发生黏膜下层浸润的风险是隆起型或平坦型的3.244倍(95%可信区间1.050～10.023)。结论 表浅AEG的内镜分型对浸润深度的判断有一定意义。对于内镜分型以凹陷为主型的表浅AEG,特别是0-Ⅲ型,多有黏膜下层的浸润,其发生淋巴结转移风险高,不建议行内镜下治疗。     

液质联用法测定金樱子中熊果酸和齐墩果酸的含量

目的：建立金樱子中熊果酸和齐墩果酸含量测定方法。方法：采用液质联用（LC-MS/MS）法,色谱柱Diamonsil C18（2）（250 mm×2.1 mm,3μm）,流动相甲醇-甲酸水（87∶13）,流速0.25 ml.min-1。柱温30℃,质谱采用大气压电喷雾离子源,选择性离子流模式（负离子）。结果：熊果酸和齐墩果酸的平均样回收率分别为为98.1%和97.6%,RSD分别为2.7%和2.9%。结论：该方法快速简便,灵敏度高,重现性好。可用于金樱子的质量控制。     

HPLC-MS/MS测定人血浆中伏立康唑质量浓度及其生物等效性研究

目的 建立高效液相色谱-串联质谱（HPLC-MS/MS）法测定人血浆中伏立康唑的方法,并进行伏立康唑片生物等效性研究。方法 采用双周期随机交叉自身对照试验设计,48例健康男性受试者分别单次空腹口服两种伏立康唑片200 mg,采用HPLC-MS/MS法测定人血浆中伏立康唑质量浓度,以WinNonlin?6.1软件计算主要药动学参数,并评价两种伏立康唑片的生物等效性。结果 伏立康唑标准曲线范围均为1~5 000 ng/mL,日内及日间精密度〔相对标准偏差（RSD）〕均小于11%,准确度在100.00%~109.73%之间,以内标基质效应校准后的伏立康唑基质效应RSD小于15%,萃取回收率大于50%,各项稳定性考察结果合格。伏立康唑峰浓度(Cmax)和药-时曲线下面积(AUC0-t、AUC0-∞)的90%置信区间在80.00%~125.00%等效区间之内,受试制剂与参比制剂间达峰时间(Tmax)差异无统计学意义(P>0.05)。结论 所建立的HPLC-MS/MS方法可用于人血浆中伏立康唑质量浓度的测定,伏立康唑片受试制剂与参比制剂生物等效。