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相似文献
 共查询到14条相似文献,搜索用时 93 毫秒
1.
目的 建立19A型肺炎链球菌多糖(Streptococcus pneumoniae type 19A polysaccharide,19APS)结合物中游离PS含量的测定方法.方法 在一定条件下分别用1、3和5 g/L脱氧胆酸钠(sodium deoxycholate,DOC)溶液(pH7.3)沉淀不同浓度的破伤风类毒素(tetanus toxoid,TT),确定不同浓度DOC沉淀载体蛋白TT的浓度范围.以1 g/L DOC分离结合19 APS(19APS-TT)和游离19APS,测定上清液中的游离PS含量,并验证该DOC沉淀法的准确度和精密度.结果 分别以1和3 g/L DOC沉淀19APS-TT时,TT浓度最好分别控制在<150和<200μg/ml.该DOC沉淀法的准确度和精密度均良好,加标PS回收率为94.0%~107.2%,相对标准偏差均<4%.结论 成功建立了19APS-TT中游离PS含量的测定方法.  相似文献   

2.
目的 研制23价肺炎链球菌荚膜多糖疫苗.方法 大罐培养1、2、3、4、5、6B、7F、8、9N、9V、10A、11A、12F、14、15B、17F、18C、19A、19F、20、22F、23F、和33F型肺炎链球菌并进行各型荚膜多糖的纯化,制备23价肺炎链球菌荚膜多糖疫苗.结果 经检定各型精制多糖主要质量指标均符合<欧洲药典>(2005年版)要求.结论 已建立起成熟的细菌培养和多糖纯化工艺.  相似文献   

3.
目的 研制23价肺炎链球菌荚膜多糖疫苗.方法 大罐培养1、2、3、4、5、6B、7F、8、9N、9V、10A、11A、12F、14、15B、17F、18C、19A、19F、20、22F、23F、和33F型肺炎链球菌并进行各型荚膜多糖的纯化,制备23价肺炎链球菌荚膜多糖疫苗.结果 经检定各型精制多糖主要质量指标均符合<欧洲药典>(2005年版)要求.结论 已建立起成熟的细菌培养和多糖纯化工艺.  相似文献   

4.
 目的  建立检测19A型肺炎链球菌荚膜多糖的竞争ELISA方法,检测细菌发酵过程中多糖的表达量。方法   以19A型肺炎链球菌多糖为包被物,待测多糖为竞争物,建立间接竞争ELISA方法,并验证该方法的准确性和精密度。用建立的方法检测不同培养条件下发酵物中的多糖表达量。 结果   最佳多糖包被质量浓度为10 mg/L,多糖抗血清稀释度为1:4×104。当检测范围为39.06~5 000.00 μg/L时,决定系数为0.995。批内和批间相对标准差分别为5.08%~9.58%和5.28%~12.93%。培养物样品加标回收率为95.84%~110.07%。两种不同培养条件下培养物中的多糖表达量分别为312.17 mg/L和1 056.42 mg/L。 结论  新建的方法能用于19A型肺炎链球菌发酵物中多糖表达量的检测,对于优化培养条件及掌握培养物收获时间具有指导意义。  相似文献   

5.
目的  研制23价肺炎链球菌荚膜多糖疫苗。方法  大罐培养1、2、3、4、5、6B、7F、8、9N、9V、10A、11A、12F、14、15B、17F、18C、19A、19F、20、22F、23F、和33F型肺炎链球菌并进行各型荚膜多糖的纯化,制备23价肺炎链球菌荚膜多糖疫苗。 结果  经检定各型精制多糖主要质量指标均符合《欧洲药典》(2005年版)要求。 结论  已建立起成熟的细菌培养和多糖纯化工艺。  相似文献   

6.
目的 制备2型肺炎链球菌多糖(Streptococcus pneumoniae type 2 polysaccharide,SPNPS2)-破伤风类毒素(tetanus toxoid,TT)结合疫苗(SPNPS2-TT),并研究其免疫原性.方法 采用溴化氰活化SPNPS2,己二酰肼作连接剂,碳二亚胺为耦联剂,将活化的SPNPS2与TT耦联制成SPNPS2-TT.以SPNPS2-TT或单纯SPNPS2免疫Balb/c小鼠,用ELISA检测小鼠血清抗SPNPS2 IgG水平.结果 SPNPS2-TT的各项指标均达到质控标准.SPNPS2-TT免疫小鼠产生的特异件抗SPNPS2 IgG水平显著高于单纯SPNPS2免疫小鼠,且SPNPS2-TT诱生了免疫记忆应答.结论 采用此项技术制备SPNPS2-TT疫苗是可行的.  相似文献   

7.
 目的  用植物蛋白胨替代目前肺炎链球菌(pneumococcus,Pn)培养基中的动物蛋白胨,以保证生物制品的安全性。方法   比较大豆蛋白胨与胰蛋白胨的各种成分含量。分别以大豆蛋白胨和胰蛋白胨制备培养基进行9个型Pn大罐培养,比较两种培养基培养对Pn生长和粗制多糖含量的影响。 结果   大豆蛋白胨的总氮含量、氨氮含量和消化系数与胰蛋白胨相近,但大豆蛋白胨的总碳水化合物含量(336.20 μg/g)明显高于胰蛋白胨的总碳水化合物含量(10.56 μg/g)。植物源性培养基培养获得的各型Pn浓度(t=3.851,P<0.05)和粗制多糖含量(t=3.853,P<0.05)明显高于动物源性培养基培养。 结论   植物蛋白胨可替代动物蛋白胨来制备Pn培养基。  相似文献   

8.
自1965年美国波士顿首次报道青霉素耐药肺炎链球菌(PRSP)以来,世界各地不断有耐药肺炎链球菌的报道,耐药率也逐年上升,而且具有地区性。为了解佳木斯地区儿童鼻咽部肺炎链球菌带菌情况及耐药性,笔者对健康儿童和急性呼吸道感染患儿鼻咽部肺炎链球菌的带菌情况及耐药性进行了调查,报道如下。  相似文献   

9.
 目的  用无动物源性培养基筛选高产糖1型肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae serotype 1,PN1)。方法  配制无动物源性培养基,并用此培养基进行高产糖PN1单菌落筛选。比较筛选前后PN1在发酵培养中的产糖量。 结果   无动物源性培养基筛选前后PN1在发酵培养中的产糖量分别为420和960 mg/L,筛选后PN1的产糖量明显高于筛选前PN1。 结论   以无动物源性培养基筛选PN1可使PN1的产糖量明显提高。  相似文献   

10.
 目的  比较以1-氰基-4-二甲氨基吡啶四氟硼酸盐(1-cyano-4-dimethylamino pyridine tetrafluoroborate,CDAP)和溴化氰(cyanogen bromide,CNBr)为活化剂制备的4型肺炎球菌多糖(type 4 pneumococcal polysaccharide,PS4)-白喉类毒素(diphtheria toxoid,DT)结合物(PS4-DT)原液的免疫原性。方法  分别以CDAP或CNBr为活化剂,各制备1批PS4-DT原液,并对原液的相关质量指标进行检测。分别用2种PS4-DT原液,间隔2周皮下注射NIH小鼠3次,末次免疫1周后采集血清,用ELISA检测血清抗体水平,比较不同方法制备的2种PS4-DT原液的免疫原性。结果  2种PS4-DT原液的主要质量指标均符合相关规定的要求,结合PS4的含量分别为257.1和203.1 μg/ml。2种PS4-DT原液均可与PS4抗血清发生特异性反应。抑制ELISA检测显示,2种PS4-DT原液对PS4抗血清的抑制率均达到100%。2种PS4-DT原液免疫小鼠产生的抗PS4抗体水平相近,抗体几何平均滴度分别为970.06和844.49。 结论  不同种方法制备的2种PS4-DT原液在小鼠中的免疫原性相似,且均可诱导小鼠产生较高水平的抗体。  相似文献   

11.
 目的  考察能否用单克隆抗体(单抗)替代多克隆抗体(多抗)血清检测23价肺炎球菌多糖疫苗中各型多糖的含量。方法   使用8个血清型(2、3、4、6B、9N、17F、18C、23F)的小鼠抗肺炎球菌荚膜多糖单抗和丹麦国家血清研究所(Statens Serum Institut, SSI)的兔血清多抗,以速率散射免疫浊度法测定23价肺炎球菌多糖疫苗中相应血清型的多糖含量。通过重复性和专属性试验确定单抗的可用性。采用t 检验对单抗和多抗测定结果进行比较。结果   各型单抗与多糖标准品反应标准曲线的相关系数均>0.985 0。用单抗重复检测疫苗多糖3次,质量浓度为40.8~62.1 μg/ml,3次检测结果变异系数均<8.00%。各型多糖回收率为81.6%~124.2%。分别用8个血清型单抗检测其余各型多糖含量,结果均低于或接近于检测下限。单抗与SSI多抗血清的检测结果差异均无统计学意义,t 值为0.210 3~1.926 0,P 值均>0.05。结论   单抗检测重复性好、特异性高,与多抗血清检测结果相仿,因此,单抗可以替代SSI多抗血清用于测定23价肺炎球菌多糖疫苗中的多糖含量。  相似文献   

12.
目的  研究采用过氧化氢法和高压均质法降解对6A型肺炎球菌多糖(type 6A pneumococcal polysaccharide,PnPS6A)结构和抗原性的影响。方法  分别采用过氧化氢法〔将过氧化氢加入多糖(polysaccharide,PS)溶液中,50 ℃反应3 h〕和高压均质法(用高压均质机在5×107 Pa压力下处理PS溶液)降解PnPS6A,降解物经超滤浓缩和冻干后,获得降解的PnPS6A。分别用核磁共振氢谱(nuclear magnetic resonance hydrogen spectrum,1H-NMR)和双向免疫扩散法检测PnPS6A降解物的结构和抗原性,用抑制ELISA检测降解和未降解的PnPS6A的抗原一致性。结果  2种降解方法均能降低PnPS6A的相对分子质量。2种降解的PnPS6A对PnPS6A抗血清抑制的半数有效浓度与未处理的PnPS6A为同一个数量级,表明降解的PnPS6A的抗原性没有改变。1H-NMR分析显示,2种降解的PnPS6A的结构与未处理的PnPS6A一致。结论  2种降解方法都能降低PnPS6A的相对分子质量,而且对PnPS6A的结构和抗原性不会产生影响。  相似文献   

13.
目的  建立测定A、C、Y、W135群脑膜炎球菌(meningococcus,Men)多糖疫苗(groups A,C,Y,W135 menignococcal polysaccharide vaccine,MPV4)多糖含量的火箭免疫电泳(rocket immunoelectrophoresis,RIE)法。方法  分别用A、C、Y、W135群Men菌液、A、C、Y、W135群Men菌液加佐剂、A、C、Y、W135群Men多糖-牛白蛋白结合物免疫家兔,制备特异性抗血清。将制备的抗血清以一定的比例加入琼脂糖凝胶制成平板,并将纯化的多糖作为定量参考品加入抗原孔进行RIE。以多糖含量和对应的RIE峰高作标准曲线并建立直线回归方程。采用优化的RIE法测定MPV4多糖含量和分子大小。结果  菌液加佐剂制备的抗血清效价较理想。在确定的电泳条件下,建立的RIE法制备的标准曲线呈现良好的线性关系,相关系数值均大于0.98。该法特异性较好,未检出各多糖间的交叉反应。采用该法测定3批MPV4多糖含量、分子大小及回收率的结果均与先前的检定结果相符,均符合质控标准。结论  建立的RIE法可作为MPV4多糖抗原含量的测定方法。  相似文献   

14.
目的 建立测定A、C、Y、W135群脑膜炎球菌多糖疫苗(groups A,C,Y,W135 meningococcal polysaccharide vaccine,MPV4)C群多糖含量的双抗体夹心ELISA法.方法 制备抗C群多糖多克隆抗体,所得的多克隆抗体经辛酸-硫酸铵沉淀法纯化后,用过碘酸钠法对其标记辣根过氧化物酶.分别将抗C群多糖多克隆抗体作为包被抗体和酶标二抗,建立双抗体夹心ELISA法,优化反应条件,对C群多糖进行特异性定量测定.结果 建立的双抗体夹心ELISA法特异性较好,未检出与A、Y、W135群多糖的交叉反应.C群多糖在2.5~20.0 ng/ml质量浓度范围的剂量反应曲线线性最佳,相关系数大于0.99.该法的准确度和精密度均较好,试验内和试验间变异系数和多糖回收率分别为0.6% ~9.1%和87.5% ~ 100.0%,定量限度为4.0 ng/ml.采用该法测定3批MPV4显示,C群多糖含量及多糖分子大小KD值和回收率的测定结果均与先前的测定结果一致,均符合暂行质量标准.结论 建立的双抗体夹心ELISA法可用于MPV4 C群多糖的关键质量指标测定.  相似文献   

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