食管鳞癌细胞系核苷酸还原酶亚单位M1的表达水平与细胞对吉西他滨敏感性的关系

Objective Ribanucleotide reduetase subunit M1(RRM1)is the intraeellular target of gemeitabine(GEM).The aim of this study is to explore the relationship between the level of RRMI expression and the sensitivity to GEM in the esophageal squamous cell carcinoma cell lines.Methods Four esophageal sqaamous cell carcinoma cell lines(Kyse-150,Kyse-450,9706 and Eca-109)were cultured in vitro.In the same period,RRM1 expression level was measured by RT-PCR and Western blot,and cell sensitivity to GEM was determined by CCK-8 assay.The relation between cell sensitivity and RRM1 expression was further analyzed.Kyse-450 cells were continuously cultured in the medium containing 50 nM GEM.RRM1 expression was measured at different time points to monitor the dynamic changes in the surviving cells.Inhibition of RRM1 expression by RNAi method was applied and the effect on GEMsensitivity was further examined.Results The IC50 of Eca-109,Kyse-150,Kyse-450 and 9706 cells were (0.92±0.17),(0.48±0.11),(0.29±0.06)and(0.02±0.01)mmol/L,respectively.The expressions of RRMI protein and mRNA of Eea-109 cell line were the highest detected by Western blot and RT-PCR,followed by Kyse-150 and Kyse-450,and the lowest one was 9706 cell line.When Kyse-450 cells were continuously treated with 50 nmol/L GEM,the level of RRM1 protein was increasing in the surviving cells.RRM1 siRNA could effeetively knock down the expression of RRM1 and significantly increase the cell sensitivity to GEM(P = 0.035).Conclusion The level of RRM1 expression corelates with the cell sensitivity to gemcitabine.The cells with a lower level of RRM1 expression are more sensitive to gemcitabine.     

晚期非小细胞肺癌RRM1表达与吉西他滨疗效的相关性分析

目的 探讨晚期非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)组织中核苷酸还原酶M1(RRM1)的表达水平与吉西他滨联合顺铂化疗疗效及预后的相关性.方法 通过免疫组织化学法检测60例晚期NSCLC患者肺组织中RRM1蛋白表达水平,并与患者的临床特征、吉西他滨联合顺铂化疗的疗效及预后的关系进行分析.结果 RRM1的表达在不同性别间差异有统计学意义(P＜0.05);在不同年龄、组织学类型及分期间差异无统计学意义(P＞0.05).RRM1低表达组的化疗有效率(57.7％)及疾病控制率(69.2％)均高于高表达组(29.4％,35.3％)(P＜0.05).在对生存期的分析中发现RRM1低表达组的生存期(18月)及无疾病进展期(6月)均明显长于高表达组(13月,4月)(P＜0.05),1年生存率(69.2％)及2年生存率(23.1％)均高于高表达组(58.8％,3％)(P＜0.05).结论 晚期非小细胞肺癌组织中RRM1低表达的患者对吉西他滨联合顺铂化疗反应的有效率更高,生存期更长,是独立的预后因素.这将有助于筛选适合接受吉西他滨联合顺铂进行一线化疗的患者.     

核苷酸还原酶亚单位M1和内切修复交叉补体1在非小细胞肺癌中的研究进展

核苷酸还原酶亚单位M1（RRM1）属抑癌基因，RRM1可以激发G2期检测点功能，使受损的DNA得以修复或者发生凋亡，并具有抑制细胞侵袭和转移的作用，另外RRM1还可以调节核苷酸还原酶的活性，是抗代谢药吉西他滨作用的靶分子，RRM1高表达的细胞对吉西他滨耐药。内切修复交叉补体1（ERCC1）是细胞内负责修复受损DNA的核苷酸内切修复通路中的限速酶，可以识别和去除铂-DNA附加物而导致细胞对铂类耐药。本文综述RRM1和ERCC1在非小细胞肺癌患者预后和化疗个体化方面的研究进展。     

晚期非小细胞肺癌组织中切除修复交叉互补基因1和核糖核苷酸还原酶亚单位1表达与吉西他滨联合顺铂治疗的相关性研究

目的探讨核苷酸切除修复交叉互补基因1(ERCC1)和核糖核苷酸还原酶(RR)亚单位M1(RRM1)在Ⅳ期非小细胞肺癌(NSCLC))组织中的表达水平,分析其与吉西他滨联合顺铂(GP)方案化疗疗效的关系。方法采用液相芯片技术检测148例经过4个周期以上GP方案化疗的Ⅳ期NSCLC组织中RRM1和ERCC1的表达情况。结果Ⅳ期NSCLC组织中ERCC1的阳性率为47.3%,RRM1的阳性率为35.1%,与患者的性别、年龄及是否吸烟无关。ERCC1和RRM1低表达者接受GP方案化疗的效果均优于高表达者,两者差异有统计学意义(P<0.05)。此外,RRM1低表达的患者生存时间明显长于高表达者(P=0.004)。结论晚期NSCLC患者组织中ERCC1和RRM1mRNA的表达与GP方案化疗疗效及预后密切相关。     

过表达CLPTM1L降低95-D肺癌细胞对吉西他滨的敏感性

目的 研究CLPTM1L基因与肺癌细胞对吉西他滨敏感性的关系,并探讨其潜在的作用机制。方法 构建针对CLPTM1L基因的过表达慢病毒,并感染肺癌95-D细胞,将细胞分为CLPTM1L过表达组和对照组;采用CCK-8法检测吉西他滨处理后过表达组和对照组细胞增殖的变化;采用荧光定量PCR、Western blot和免疫化学发光法检测CLPTM1L基因和蛋白变化;采用生物荧光法检测Caspase-3/7和Caspase-9活性的变化;采用Western blot检测p-4E-BP1蛋白变化。结果 CLPTM1L过表达慢病毒感染95-D细胞后,CLPTM1L过表达组的CLPTM1L基因水平(P=0.036)和蛋白表达(P＜0.01)均高于对照组;与对照组相比,吉西他滨处理后CLPTM1L过表达组细胞增殖显著上升(P＜0.01);Caspase活性检测显示,CLPTM1L过表达组Caspase-3/7和Caspase-9活性较对照组明显下降(P＜0.01);Western blot检测显示,CLPTM1L过表达组4E-BP1的磷酸化水平与对照组比较显著增高(P＜0.01)。结论 CLPTM1L过表达可降低肺癌细胞对吉西他滨的敏感性,其机制可能是增加了4E-BP1的磷酸化水平。     

RRM1基因表达水平预测肺癌对吉西他滨耐药性的研究进展

  吉西他滨是重要的嘧啶类抗代谢化疗药物，核苷酸还原酶是该药物的作用靶点之一。研究表明，在多种吉西他滨耐细胞系中RRM1表达水平较高，同时，肿瘤细胞RRM1高表达的NSCLC患者在吉西他滨治疗后生存期相对较短。但外周血中单个核细胞RRM1表达水平与吉西他滨是否相关还需要作进一步研究。     

丝裂霉素联合吉西他滨对原发性肝癌患者外周血淋巴细胞亚群及NK细胞水平的影响

目的 探讨丝裂霉素联合吉西他滨对原发性肝癌患者外周血淋巴细胞亚群及NK细胞水平的影响.方法 选择原发性肝癌患者96例,按照分层随机分组法分为对照组(n=48)和试验组(n=48),对照组予以吉西他滨治疗,试验组予以丝裂霉素联合吉西他滨治疗,比较治疗后两组的淋巴细胞亚群及NK细胞水平、临床疗效、不良反应.结果 治疗后,两组患者的淋巴细胞亚群(CD4+、CD4+/CD8+)及NK细胞水平均升高,试验组高于对照组(P﹤0.05);试验组治疗有效率高于对照组(P﹤0.05);两组总不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P﹥0.05).结论 对原发性肝癌患者行丝裂霉素联合吉西他滨治疗能够有效调节外周血淋巴细胞亚群及NK细胞水平,缓解免疫抑制状态.     

恶性胸腔/腹腔积液RRM1 mRNA表达水平和吉西他滨体外药敏的关系

目的:分析恶性胸腔/腹腔积液中肿瘤细胞核糖核苷酸还原酶M1亚基(ribonucleotide reductase M1,RRM1)基因的表达水平与吉西他滨体外药物敏感性的关系。方法:收集24例经病理确诊的Ⅳ期恶性肿瘤患者的恶性胸腔/腹腔积液,分离原代肿瘤细胞,采用CCK8(cell counting kit8)法体外药物敏感试验检测原代肿瘤细胞对吉西他滨药物敏感性;实时荧光定量PCR检测原代肿瘤细胞RRM1 mRNA的相对表达水平。结果:在恶性胸腔/腹腔积液中,肿瘤细胞的RRM1 mRNA的相对表达水平与恶性肿瘤患者的临床特征无明显相关性,但是与吉西他滨药物敏感性呈负相关(r=-0.497,P=0.013);既往曾使用化疗药物的恶性肿瘤患者恶性胸腔/腹腔积液原代肿瘤细胞对吉西他滨敏感性低于未化疗患者(42.94%vs67.88%,P=0.006)。结论:恶性胸腔/腹腔积液中肿瘤细胞RRM1 mRNA的相对表达水平与吉西他滨体外药物敏感性相关。     

恶性胸腔/腹腔积液RRM1 mRNA表达水平和吉西他滨体外药敏的关系

目的：分析恶性胸腔/腹腔积液中肿瘤细胞核糖核苷酸还原酶M1亚基（ribonucleotide reductase M1,RRM1）基因的表达水平与吉西他滨体外药物敏感性的关系。方法：收集24例经病理确诊的Ⅳ期恶性肿瘤患者的恶性胸腔/腹腔积液,分离原代肿瘤细胞,采用CCK8（cell counting kit8）法体外药物敏感试验检测原代肿瘤细胞对吉西他滨药物敏感性;实时荧光定量PCR检测原代肿瘤细胞RRM1 mRNA的相对表达水平。结果：在恶性胸腔/腹腔积液中,肿瘤细胞的RRM1 mRNA的相对表达水平与恶性肿瘤患者的临床特征无明显相关性,但是与吉西他滨药物敏感性呈负相关（r=-0.497,P=0.013）;既往曾使用化疗药物的恶性肿瘤患者恶性胸腔/腹腔积液原代肿瘤细胞对吉西他滨敏感性低于未化疗患者（42.94%vs67.88%,P=0.006）。结论：恶性胸腔/腹腔积液中肿瘤细胞RRM1 mRNA的相对表达水平与吉西他滨体外药物敏感性相关。     

吉西他滨与放疗联合治疗非小细胞肺癌

吉西他滨是一种嘧啶核苷类似物,具有抗瘤谱广、毒副反应轻等特点,被广泛地应用于非小细胞肺癌、乳腺癌、膀胱癌、胰腺癌等各种实体瘤治疗领域中。本文综述吉西他滨联合放疗治疗局部晚期非小细胞肺癌的研究进展。     

食管鳞状细胞癌的肿瘤血管生成机制

血管内皮生长因子、缺氧诱导因子、白细胞介素、血管生成素样蛋白、整合素和上皮间质转化在食管鳞状细胞癌血管生成中为癌细胞的生长、侵袭和转移提供了营养支持和有利环境.对食管鳞状细胞癌血管生成机制的研究将为其抗血管靶向治疗提供更多思路和潜在靶点.     

Notch1基因与食管鳞状细胞癌

研究证实 Notch1在食管鳞状细胞癌中呈低表达,起抑癌基因作用。研究 Notch1基因与淋巴结转移、生存率之间的关系可以为食管鳞状细胞癌的治疗及预后评估提供更多有价值的帮助。     

RRM1、ERCC1表达与吉西他滨联合顺铂治疗晚期非小细胞肺癌疗效的相关性研究

目的　探讨核苷酸还原酶亚单位Ｍ１（ＲＲＭ１）和核苷酸切除修复交叉互补基因１（ＥＲＣＣ１）蛋白在ⅢＢ和Ⅳ期非小细胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）中的表达,及其与吉西他滨联合顺铂（ＧＰ）方案化疗疗效的关系。方法　采用免疫组化ＳＰ法检测１３５例ⅢＢ和Ⅳ期、经过４周期以上ＧＰ方案化疗的ＮＳＣＬＣ组织ＲＲＭ１和ＥＲＣＣ１的表达情况。结果　ＲＲＭ１和ＥＲＣＣ１蛋白表达情况与性别、年龄、组织病理学类型、吸烟史、临床分期和ＥＣＯＧ评分均无关（Ｐ＞０.０５）。ＲＲＭ１与ＥＲＣＣ１蛋白表达显著正相关（ｒ＝０.５８６,Ｐ＜０.００１）。ＲＲＭ１和ＥＲＣＣ１表达均为阴性组的有效率为７１.４％,疾病进展时间为（１０.５９±４.４７）个月,中位生存时间为１４.５５个月;两者表达均为阳性组分别为２０.０％、（７.５０±４.５７）个月和１０.３２个月;两者表达任一阳性组分别为５８.１％、（９.４０±４.０８）个月和１２.８７个月,３组之间比较差异均有统计学意义（Ｐ＜０.０５）。结论　肺癌组织ＲＲＭ１和ＥＲＣＣ１蛋白表达情况能够预测晚期ＮＳＣＬＣ应用ＧＰ方案化疗的疗效。     

食管鳞状细胞癌中p16基因变异的临床意义及地域性差异

目的 进一步了解Ｐ１６基因的变异与食管癌发生发展和生物学行为的关系及地域性差异。方法 采用免疫组化和聚合酶链反应技术,对来自林县高发区和浙江省的食管癌存档组织标本中Ｐ１６蛋白的表达及其因变异进行了检测,并对食管癌组织中ｐ１６基因变异表达的临床意义及地域性差异进行了回顾性比较分析。结果 ９２例食管癌组织中,４４例存在ｐ１６蛋白表达,２２例检测到ｐ１６基因的丢失,只有５例出现ＰＣＲ－ＳＳＣＰ的异常电泳     

早幼粒细胞白血病蛋白在食管鳞状细胞癌及癌前病变中的表达与临床意义

目的探讨早幼粒细胞白血病蛋白(PML)和P53在食管鳞状细胞癌(ESCC)及癌前病变发生发展中的作用.方法应用组织芯片技术和免疫组织化学方法检测PML和P53在241例ESCC及癌前病变中的差异表达,分析蛋白不同表达模式与临床病理参数的相关性.结果在ESCC及癌前病变中,PML和P53呈阳性或强阳性表达,而在正常食管鳞...     

食管鳞癌中斯钙素-1的表达及其临床意义

目的 探讨斯钙素-1（STC-1）在食管鳞癌（ESCC）中的表达及其临床意义。方法 收集85 例ESCC患者的手术标本,免疫组化法检测癌组织及其癌旁组织中STC-1 蛋白的表达水平,并分析其与患者的临床病理特征及无进展生存期（PFS）的关系。结果 83.5％（71／85）的癌组织中STC-1蛋白表达评分高于对应的癌旁组织;癌组织中STC-1蛋白的高、中表达率为65.9%（56/85）,而癌旁组织中仅为7.1％（6／85）,差异有统计学意义（P＜0.001）。STC-1 蛋白表达与临床分期（P=0.015） 及淋巴结转移（P=0.022） 相关。STC-1蛋白高、中表达组平均PFS为17.5个月（95％CI： 15.669～19.259个月）,低于STC-1 蛋白低、未表达组的21.1个月（95％CI： 19.128～23.079个月）,差异具有统计学意义（P=0.006）。Cox 风险比例模型显示,STC-1蛋白表达是影响PFS 的独立预后因素。结论 STC-1 蛋白表达在ESCC发生发展中起重要作用,有可能成为ESCC 预后的分子标记物。     

CD24在食管鳞状细胞癌中的表达及其与预后的关系

 目的　检测CD24在食管鳞状细胞癌组织中表达的情况,探讨其与临床病理参数的关系及对食管鳞状细胞癌预后的临床意义。方法　应用免疫组织化学Envision法检测90例食管鳞状细胞癌组织中CD24的表达情况,分析CD24与食管鳞状细胞癌临床病理特征及预后的关系。结果　CD24在食管鳞状细胞癌组织中的阳性表达率明显高于癌旁组织（χ2＝0.832,P＜005）。CD24在食管鳞状细胞癌的阳性表达与患者的年龄、性别、有无脉管浸润、组织学分级无关（χ2分别为0.741、0.361、0.930、8.858,均P＞0.05）,而与淋巴结转移（χ2＝12.349,P＝0.000）、TNM分期（χ2＝10.804,P＝0.005）和浸润深度（χ2＝13.94,P＝0.007）呈正相关;不同CD24表达组之间（+、++、++）的生存率差异有统计学意义,OR（95 % CI）分别为2.105（61.022～69.273）,2.313（55.108～64.176）,1.286（32.388～37.429）,CD24表达强阳性食管鳞状细胞癌患者生存率明显低于CD24表达强度较低组。CD24、浸润深度、淋巴结转移是影响食管鳞状细胞癌预后的独立预后因素。结论　CD24可能提示食管鳞状细胞癌发展的恶性进程,其高表达提示食管鳞状细胞癌患者预后不良,有望成为一个新的相对独立的食管鳞状细胞癌预后预测指标。